陳玉婷　傅曼琴　吳繼軍　余元善　溫靖　徐玉娟

摘要：【目的】研究不同生長時(shí)期玫瑰柑果實(shí)理化性質(zhì)及其有機(jī)酸、總黃酮、總酚等活性成分含量的變化規(guī)律，分析其不同組織部位的活性成分，為玫瑰柑的品質(zhì)評價(jià)及其副產(chǎn)物綜合利用提供科學(xué)依據(jù)?！痉椒ā坎捎幂焱蛩岱y定不同生長時(shí)期（2020年9月20日—2021年1月20日）玫瑰柑果汁中總糖含量，總酸含量采用氫氧化鈉中和滴定法測定，采用高效液相色譜法分析不同生長時(shí)期果皮、果渣和果汁中主要黃酮化合物以及果汁中有機(jī)酸和可溶性糖含量，采用Folin-Ciocalteu法測定其總酚含量，并采用DPPH、FRAP和ABTS 3種方法測定其抗氧化能力?！窘Y(jié)果】9月—次年1月，隨著果實(shí)的發(fā)育，玫瑰柑果實(shí)的單果重、果汁pH、糖酸比及可溶性固形物含量均逐漸增加;果汁中檸檬酸和乙酸含量顯著降低（P<0.05，下同），蘋果酸含量顯著上升;果糖和葡萄糖含量逐漸降低，蔗糖含量則上升了4.03倍;果皮、果渣和果汁中總黃酮、總酚含量及其總抗氧化能力均呈下降趨勢，玫瑰柑果實(shí)的總酚含量依次為果皮>果渣>果汁，果皮中總酚含量從1.84 mg GAE/g降至0.89 mg GAE/g，橙皮苷、香蜂草苷、桔皮素、甜橙黃酮和川陳皮素5種黃酮類化合物含量顯著下降，在果汁和果渣中未檢測到甜橙黃酮、川陳皮素和桔皮素，橙皮苷和香蜂草苷含量依次為果渣>果皮>果汁;果皮的總抗氧化能力是果渣的1.34倍，果汁的2.16倍?！窘Y(jié)論】隨著玫瑰柑果實(shí)的成熟，蔗糖含量顯著增加，果糖、葡萄糖、總黃酮、總酚含量及抗氧化活性降低。不同生長時(shí)期玫瑰柑果實(shí)理化性質(zhì)、主要營養(yǎng)成分及活性成分的變化規(guī)律，可為玫瑰柑果實(shí)品質(zhì)調(diào)控及不同部位的綜合開發(fā)利用提供參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞： 玫瑰柑;黃酮;有機(jī)酸;抗氧化活性

中圖分類號： S666.1? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：2095-1191（2022）03-0869-10

Analysis of rose orange fruit quality during different growth periods

CHEN Yu-ting FU Man-qin WU Ji-jun YU Yuan-shan WEN Jing XU Yu-juan

（1College of Food Science & Technology， Guangdong Ocean University， Zhanjiang， Guangdong? 524088， China; 2Sericultural & Agri-Food Research Institute Guangdong Academy of Agricultural Sciences/Key

Laboratory of Functional Foods，Ministry of Agriculture and Rural Affairs/Guangdong Key Laboratory

of Agricultural Products Processing， Guangzhou， Guangdong? 510610， China）

Abstract：【Objective】The physical and chemical properties and the changes of organic acids，total flavonoids，total phenolics contents and other active components of rose oranges at different growth stages were studied for analyzing the active components in different fruit issues to provide scientific basis for rose oranges quality identification and the utilization of their by-products. 【Method】The total sugar content in fruit juice at different growth periods（2020.9.20-2021.1.20） was determined by the anthrone-sulfuric acid method，and the total acid content was determined by the sodium hydroxide neutralization titration method. The contents of main flavonoid compounds in fruit peel， pomace， juice and organic acids and soluble sugars in juice during different growth periods were analyzed by HPLC. The contents of total phenolics contents in fruit peel， pomace and juice was determined by Folin-Ciocalten method. The antioxidant capacity was determined by DPPH，F(xiàn)RAP and ABTS methods. 【Result】From September， 2020 to January， 2021，as the fruits grew and developed，the weight of single fruit，pH，sugar acid ratio and soluble solids of rose oranges increased gradually. The content of citric acid and acetic acid decreased significantly（P<0.05，the same below），while the content of malic acid increased. The content of fructose and glucose decreased gradually，while the content of sucrose increased by 4.03 times. The content of total flavonoids and total phenolics contents and antioxidant capacity in peel， pomace and juice decreased gradually. The total phenolic content of rose orange fruits was in the order of peel>pomace>juice. The content of total phenolics contents in peel decreased from 1.84 mg GAE/g to 0.89 mg GAE/g. The content of tangeretin，didymin，hesperidin，sinensetin and nobiletin significantly decreased. No tangeretin，sinensetin and nobiletin were detected in fruit juice and pomace，and the contents of hesperidin and didymin were in the order of pomace>peel>juice. The total antioxidant capacity of peel was 1.34 times that of pomace and 2.16 times that of juice. 【Conclusion】With the ripening of rose orange fruits，sucrose content increases significantly，while the contents of fructose，glucose，total phenolics contents，total flavonoids and antioxidant activity significantly decrease. The changes of physical and chemical properties，main nutrients and active components of rose orange fruits in different growth periods can provide a reference for the quality control of rose orange fruits and the comprehensive development and utilization of different parts.

Key words： rose oranges; flavonoids; organic acid; antioxidant activity

Foundation items： National Key Research and Development Program of China（2021YFD1600100）; National Natural Science Foundation of China（31901713）; Guangdong Natural Science Foundation （2021A1515011049）; Talent Pro-ject of Guangdong Academy of Agricultural Sciences（R2020PY-JX011）

0 引言

【研究意義】柑橘（Citrus reticulata Blanco）屬蕓香科，是世界上第一大水果。沃柑是一種晚熟雜交柑橘品種（朱攀攀，2020），清甜可口，具有很高的營養(yǎng)價(jià)值。目前玫瑰柑種植面積100 ha，采用生草栽培，并施用獨(dú)創(chuàng)的玫瑰有機(jī)肥，嚴(yán)格控制柑樹枝條數(shù)量，形成從化特色玫瑰柑。玫瑰柑因獨(dú)特的風(fēng)味和較高的營養(yǎng)價(jià)值深受人們喜愛（張海朋等，2021），其果實(shí)營養(yǎng)豐富，富含有機(jī)酸、多糖、維生素等營養(yǎng)成分和黃酮、多酚等功能性化合物（Zhou et al.，2021），具有抗腫瘤、降血糖、抗氧化等生物活性（Zaidun et al.，2018）;果皮的降血糖效果較好（季詩譽(yù)，2019），其中黃酮類化合物對自由基具有一定的清除作用（Wang et al.，2021），且隨著果實(shí)成熟，抗氧化能力處于不斷變化中。玫瑰柑成熟期是12月底—次年3月，果實(shí)的口感風(fēng)味和營養(yǎng)價(jià)值因采收期不同而具有明顯變化?？扇苄怨绦挝锖吞撬岷渴氰b定玫瑰柑果實(shí)品質(zhì)優(yōu)良的標(biāo)準(zhǔn)，不同生長期的有機(jī)酸與糖組分含量有所不同，果實(shí)風(fēng)味亦隨之變化，最終形成獨(dú)特的風(fēng)味。柑橘果實(shí)除鮮食外，還用于加工生產(chǎn)橘瓣罐頭和柑橘濃縮汁等，柑橘果渣是生產(chǎn)柑橘汁或罐頭時(shí)的副產(chǎn)物，占果實(shí)的30%～40%，營養(yǎng)成分豐富（隋文杰等，2018）。目前，柑橘果渣主要開發(fā)為飼料，其次用于果膠、精油和膳食纖維等成分的提取，還可將其轉(zhuǎn)化為生物乙醇（孫金輝等，2011）。對果實(shí)的不同組織進(jìn)行研究，不僅能更好地開發(fā)玫瑰柑相關(guān)產(chǎn)品，還可提高加工副產(chǎn)物的利用價(jià)值。因此，對不同生長時(shí)期的玫瑰柑果實(shí)進(jìn)行黃酮類活性成分分析及其抗氧化活性評價(jià)，對于其綜合開發(fā)利用具有參考價(jià)值和指導(dǎo)意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】目前對于柑橘的研究主要集中在果實(shí)品質(zhì)及其活性評價(jià)。關(guān)于柑橘果實(shí)成熟過程中糖和酸的研究，劉靈智（2011）報(bào)道冰糖橙和大紅橙果實(shí)成熟過程中果糖、葡萄糖和蔗糖含量均呈上升趨勢，檸檬酸含量逐漸降低;周亮等（2016）發(fā)現(xiàn)11月下旬—12月上旬紐荷爾臍橙果實(shí)的可滴定酸和維生素C含量降低;馬倩（2019）以南豐蜜桔為試驗(yàn)材料，發(fā)現(xiàn)糖酸比和可溶性固形物含量隨采摘期的延長呈上升趨勢，檸檬酸含量則呈下降趨勢;馬有軍（2019）發(fā)現(xiàn)蜜柚果實(shí)蔗糖積累最多，果糖和葡萄糖含量次之，檸檬酸含量最高，其含量變化主要與檸檬酸合成酶有關(guān)。林媚等（2021）研究發(fā)現(xiàn)柑橘類果實(shí)隨著果實(shí)的成熟，蔗糖含量上升而檸檬酸含量呈下降趨勢，果實(shí)品質(zhì)也越好。關(guān)于柑橘果實(shí)總酚和黃酮的研究，施學(xué)驕（2012）對酸橙果實(shí)從掛果到果實(shí)成熟的理化性質(zhì)進(jìn)行研究，隨著成熟度的增加，總黃酮含量逐漸降低，其中橙皮苷和新橙皮苷含量降低，而蕓香柚皮苷和柚皮苷含量呈先升高后降低的變化趨勢;吳文明（2017）研究發(fā)現(xiàn)椪柑不同采摘期果實(shí)的總酚含量無顯著差異，總黃酮含量在貯藏期間均呈逐漸上升趨勢。荊佳伊等（2021）以7個(gè)不同采收期的W.默科特果實(shí)為試驗(yàn)材料，發(fā)現(xiàn)2月7日采收的柑橘果實(shí)抗壞血酸含量、可溶性固形物含量及固酸比均最高;李俊等（2021）研究不同生長時(shí)期融安金桔的果實(shí)品質(zhì)，發(fā)現(xiàn)隨著生長期的延長，金桔的單果重、pH、出汁率、可溶性固形物含量和糖酸比等理化指標(biāo)均上升;奚昕琰等（2021）發(fā)現(xiàn)紅美人柑橘11月下旬及之后采收的果實(shí)著色好，有較好的品質(zhì)。從上述研究結(jié)果可知，不同品種和不同生長時(shí)期的柑橘品質(zhì)具有較大差異，不同柑橘果實(shí)的糖酸比和可溶性固形物含量等指標(biāo)趨勢也不一致?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】玫瑰柑是采用玫瑰殘?jiān)l(fā)酵有機(jī)肥種植出的沃柑，目前對于不同生長時(shí)期玫瑰柑果實(shí)的品質(zhì)及活性成分變化規(guī)律未見相關(guān)報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問題】以產(chǎn)自廣州從化地區(qū)的不同生長發(fā)育時(shí)期玫瑰柑果實(shí)為試驗(yàn)材料，比較其理化性質(zhì)和營養(yǎng)成分，探明其活性成分的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，為后續(xù)玫瑰柑果實(shí)的開發(fā)和加工利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

材料采摘自廣州市從化區(qū)鰲頭鎮(zhèn)鹿田村的玫瑰柑生產(chǎn)基地（廣州市啟迪農(nóng)業(yè)科技有限公司，東經(jīng)113°30′，北緯23°36′，無季節(jié)性積水及水淹可能性，植物種類豐富，無病蟲害，無頻繁人為活動(dòng)干擾），在生產(chǎn)基地的東、南、西、北、中5個(gè)采樣點(diǎn)各選取5株果樹，2020年9月—2021年1月每月20日選取果形均勻、大小適中、表面光滑無蟲蛀的鮮果，共25 kg，平均每棵樹1 kg。取10個(gè)不同采收時(shí)間新鮮玫瑰柑果實(shí)剝皮榨汁，過濾，得果皮、果渣和果汁，將玫瑰柑果皮和果渣烘干至恒重后，用破壁機(jī)打成細(xì)粉，過100目篩網(wǎng)，重復(fù)3次，置4 °C備用。

無水乙醇（分析純）、色譜級甲醇和無水甲醇（分析純）購自天津大茂化學(xué)試劑公司;蒽酮和三氯化鐵購自天津市福晨化學(xué)試劑廠;氫氧化鈉、無水碳酸鈉、亞硝酸鈉和硝酸鋁購自上海麥克林生化科技有限公司;過硫酸鉀、二硫代蘇糖醇（TPTZ）、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和2，2-聯(lián)氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽（ABTS）購自上海麥克林生化科技有限公司;6-羥基-2，5，7，8-四甲基色烷-2-羧酸（Trolox）購自日本東京化成工業(yè);果糖、葡萄糖、蔗糖、抗壞血酸、檸檬酸、蘋果酸、橙皮苷、香蜂草苷、甜橙黃酮、川陳皮素、桔皮素、沒食子酸和蘆丁購自上海源葉生物科技有限公司;乙酸購自北京中科儀友化工技術(shù)研究院。

主要儀器設(shè)備：全自動(dòng)折光儀[桂寧（上海）實(shí)驗(yàn)器材有限公司];電子分析天平ME204、pH計(jì)[梅特勒—托利多儀器（上海）有限公司];UV1800型紫外分光光度計(jì)、LC-20AT高效液相色譜儀（日本島津公司）;HWS-26型電熱恒溫水浴鍋（上海一恒科學(xué)儀器公司）;DL-800B超聲波清洗器（上海之信儀器有限公司）。

1. 2 試驗(yàn)方法

1. 2. 1 果實(shí)理化性質(zhì)測定 玫瑰柑單果重采用電子分析天平測定;果汁pH采用pH計(jì)測定;可溶性固形物含量采用折光儀測定;總酸含量采用氫氧化鈉中和滴定法測定?？偺菧y定參考陳英等（2017）的方法，采用蒽酮—硫酸法，稍加修改，取0.2 g蒽酮溶于100 mL濃HSO中（蒽酮試劑），現(xiàn)配現(xiàn)用;取0.5 mL果汁滴入100 mL容量瓶中，加入20.0 mL水和10.0 mL鹽酸，在沸水中煮沸20 min，定容至100 mL，得到提取液，用蒸餾水將提取液稀釋10倍，取稀釋液1.0 mL于試管中，浸入冰水中，加入4.0 mL蒽酮試劑，于沸水浴中加熱10 min，冷卻，在620 nm波長比色。按上述方法和條件，以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/mL）為橫坐標(biāo)、620 nm處吸光值為縱坐標(biāo)，繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0098x+0.062（R=0.9962）。

1. 2. 2 果汁中主要有機(jī)酸含量測定 有機(jī)酸（蘋果酸、檸檬酸、乙酸和抗壞血酸）含量采用高效液相色譜法進(jìn)行測定（Yu et al.，2015）。色譜條件：C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），柱溫30 ℃;二極管陣列檢測器（PDA），檢測波長210 nm;流動(dòng)相為0.1% （NH4）HPO，調(diào)節(jié)pH為2.7;流速1 mL/min;進(jìn)樣量10 μL。4種有機(jī)酸化合物標(biāo)準(zhǔn)曲線見表1。

1. 2. 3 果汁中主要糖分含量測定 糖分（果糖、葡萄糖和蔗糖）含量采用高效液相色譜法測定（Fu et al.，2018）。色譜條件：Shodex? Asahipak? NH2P-50 4E（4.6 mm×250 mm），檢測器為蒸發(fā)光（ELSD）檢測器，柱溫40 ℃，漂移管溫度50 ℃，流動(dòng)相為70%乙腈，流速1 mL/min，進(jìn)樣量10 μL。3種糖類化合物標(biāo)準(zhǔn)曲線見表2。

1. 2. 4 果皮、果渣和果汁中總黃酮含量測定 總黃酮含量采用比色法進(jìn)行測定（Fu et al.，2017）：分別取果皮、果渣和果汁樣液2.0 mL，加入0.3 mL 5%亞硝酸鈉溶液，反應(yīng)6 min，再加入0.3 mL 10%硝酸鋁溶液，反應(yīng)6 min，最后加入2.0 mL 4%氫氧化鈉溶液，靜置15 min。以無水甲醇為空白對照，取上清液在510 nm處測吸光值。以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y=5.7233x-0.0243（R=0.9901）?？傸S酮含量以蘆丁毫克當(dāng)量（mg RE/g）表示，其中果皮和果渣以干重計(jì)，下同。

1. 2. 5 果皮、果渣和果汁中主要黃酮類物質(zhì)含量測定 通過高效液相色譜對玫瑰柑果實(shí)中的主要黃酮類化合物含量進(jìn)行分析（Fu et al.，2018），包括桔皮素、橙皮苷、香蜂草苷、甜橙黃酮和川陳皮素5種黃酮類化合物。色譜條件：C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），柱溫 30 ℃;二極管陣列檢測器（PDA），流動(dòng)相：1%甲酸（A），色譜級甲醇（B）;0～10 min，10% A，90% B;10～14 min，30% A，70% B;14～15 min，50% A，50% B;15～20 min，90% A，10% B;檢測波長280 nm;流速0.8 mL/min;進(jìn)樣量10 μL。5種化合物標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線如表3所示。

1. 2. 6 果皮、果渣和果汁中總酚含量測定 參考Kwaw等（2018）的方法，并稍作改動(dòng)。采用Folin-Ciocalteu法對玫瑰柑果皮、果渣和果汁總酚含量進(jìn)行測定，分別取果皮、果渣和果汁樣液0.4 mL，加入2.0 mL福林—酚試劑，混勻，加入3.0 mL 10%碳酸鈉溶液，混合避光反應(yīng)2 h，以無水甲醇為空白對照，于765 nm處測吸光值。以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y=28.84x+0.0907（R=0.9999）。玫瑰柑果實(shí)總酚含量以每克玫瑰柑果實(shí)中沒食子酸毫克當(dāng)量（mg GAE/g）表示。

1. 2. 7 果皮、果渣和果汁總抗氧化能力測定 采用FRAP、ABTS和DPPH法測定玫瑰柑果皮、果渣和果汁的抗氧化能力，3種測定方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線見表4。

DPPH自由基清除法：參考Barreca等（2013）的方法，并略作修改，分別取1.0 mL玫瑰柑果皮、果渣和果汁待測樣液加入5.0 mL 130 μmol/L DPPH甲醇溶液，避光反應(yīng)30 min。采用分光光度計(jì)在517 nm處測定其吸光值。以Trolox為標(biāo)準(zhǔn)品，測定不同濃度Trolox對DPPH自由基的清除率，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，玫瑰柑果實(shí)的DPPH清除能力用Trolox當(dāng)量（mg TE/g）表示。

FRAP鐵離子還原能力法：參考Hamrouni-Sellami等（2013）的方法，并略作修改，分別取玫瑰柑果皮、果渣和果汁待測樣液100 μL于試管中，加入4.0 mL FRAP反應(yīng)液（由pH 3.6的0.3 mol/L醋酸緩沖液、10 mmol/L TPTZ溶液和20 mmol/L FeCl3溶液按照10∶1∶1的比例混合而成），混勻后室溫反應(yīng)10 min，在593 nm處測定其吸光值，以Trolox為標(biāo)準(zhǔn)品，測定不同濃度Trolox對鐵離子的還原力，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果用Trolox當(dāng)量（mg TE/g）表示。

ABTS自由基清除法：參考Jiménez-Zamora等（2016）的方法，并略作修改，將7 mmol/L ABTS溶液和2.45 mmol/L過硫酸鉀溶液按1∶1比例混合，室溫下避光靜置12 h，得ABTS儲備液。分別取玫瑰柑果皮、果渣和果汁待測樣液0.4 mL，加入3.6 mL ABTS溶液，室溫下避光反應(yīng)1 h，在734 nm處測定其吸光值。以Trolox為標(biāo)準(zhǔn)品，通過其濃度與清除率繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，玫瑰柑果實(shí)清除能力用Trolox當(dāng)量（mg TE/g）表示。

1. 3 統(tǒng)計(jì)分析

每個(gè)試驗(yàn)進(jìn)行3次測定，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用Origin 9.0繪圖，SPSS 26.0進(jìn)行顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2. 1 不同生長時(shí)期玫瑰柑果實(shí)理化性質(zhì)分析結(jié)果

不同生長期玫瑰柑果實(shí)的單果重、pH、可溶性固形物含量及糖酸比測定結(jié)果如圖1所示。9月—次年1月，玫瑰柑果實(shí)的單果重隨著生長期的延長顯著增加（P<0.05，下同）;果汁pH從2.54顯著增至4.34;可溶性固形物含量顯著上升，變化范圍在9.8%～18.0%，可能是果實(shí)中可溶性糖類的進(jìn)一步累積所致;酸度呈下降趨勢，果汁中的糖酸比也顯著增大，在成熟期（1月）達(dá)47.87，說明此時(shí)玫瑰柑果實(shí)口感品質(zhì)最佳，可食性更高。

2. 2 不同生長時(shí)期玫瑰柑果汁中主要有機(jī)酸含量的比較

采用高效液相色譜法從玫瑰柑果汁中檢測到抗壞血酸、檸檬酸、蘋果酸和乙酸4種有機(jī)酸。從圖2可看出，9月—次年1月，檸檬酸含量顯著下降，從20.08 mg/mL降至6.21 mg/mL;乙酸含量從2.52 mg/mL降至0.75 mg/mL，9月檸檬酸含量為乙酸含量的7.97倍，1月檸檬酸含量為乙酸含量的8.28倍;蘋果酸含量伴隨果實(shí)的發(fā)育而顯著增加，1月較9月增加3.69倍;抗壞血酸含量變化有波動(dòng)，總體呈下降趨勢，從9月的174.71 μg/mL下降至1月的124.20 μg/mL。

2. 3 不同生長時(shí)期玫瑰柑果汁中可溶性糖含量的比較

采用外標(biāo)法對玫瑰柑果汁中可溶性糖組分進(jìn)行定量分析，從圖3可看出，蔗糖隨生長期延長而積累，蔗糖含量增加了4.03倍（36.79～185.19 mg/mL）;9—12月果糖含量處于35.82～43.81 mg/mL，葡萄糖含量處于40.01～46.41 mg/mL 。

2. 4 不同生長時(shí)期玫瑰柑果皮、果渣和果汁中黃酮含量的比較

采用比色法檢測玫瑰柑果皮、果渣和果汁中總黃酮含量，結(jié)果如圖4所示。9月—次年1月，果皮、果渣和果汁中總黃酮含量均隨果實(shí)的生長發(fā)育顯著下降，果皮中總黃酮含量從1.84 mg RE/g降至0.77 mg RE/g，果渣中含量從1.53 mg RE/g降至0.56 mg RE/g，果汁中含量從0.71 mg RE/g降至0.29 mg RE/g。9月果皮的總黃酮含量是果渣的1.20倍，果汁的2.59倍。

進(jìn)一步通過高效液相色譜法在玫瑰柑果皮、果渣和果汁中檢測出5種主要黃酮類化合物，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)品對照并結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道（李勛蘭等，2020），分別為橙皮苷、香蜂草苷、甜橙黃酮、川陳皮素和桔皮素，且在玫瑰柑果實(shí)不同部位的含量也有差異（表5）。在果皮中5種化合物均檢測到，而在果汁和果渣中，僅檢測到橙皮苷和香蜂草苷，未檢測到甜橙黃酮、川陳皮素和桔皮素。9月—次年1月，5種化合物含量均顯著下降，其中果皮中橙皮苷含量下降66.18%，果渣中橙皮苷含量下降71.93%，果汁中橙皮苷的含量較低，處于304.75～643.01 μg/g，降幅為52.61%。

2. 5 不同生長時(shí)期玫瑰柑總酚含量和總抗氧化能力的比較

采用Folin-Ciocalteu比色法檢測玫瑰柑果皮、果渣和果汁總酚含量，結(jié)果如圖5-A所示。9月—次年1月，果皮、果渣和果汁總酚含量均顯著下降，果皮中總酚含量從1.84 mg GAE/g降至0.89 mg GAE/g，果渣中含量從1.47 mg GAE/g降至0.59 mg GAE/g，果汁中含量從1.08 mg GAE/g降至0.39 mg GAE/g。在同一生長時(shí)期，果皮總酚含量始終高于果汁和果渣，9月果皮總酚含量為果渣的1.25倍，果汁的1.70倍。

采用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法和FRAP鐵離子還原能力法3種方法評估玫瑰柑果皮、果渣和果汁的抗氧化能力，結(jié)果（圖5-B～圖5-D）表明，9月—次年1月，ABTS、DPPH和FRAP值均呈下降規(guī)律，且差異性顯著，其中FRAP值最大，其次是DPPH值，ABTS值最小。9月果皮、果渣和果汁的FRAP值分別為4.21、3.38和1.97 mg TE/g ，ABTS值分別為2.51、1.89和1.13 mg TE/g，DPPH值分別為3.13、2.08和1.46 mg TE/g，果皮的總抗氧化能力是果渣的1.34倍，果汁的2.16倍。

3 討論

玫瑰柑果實(shí)生長期較長，每年2月底—3月初開花，4月開始掛果，7—8月疏果，成熟期為12月—次年3月。果實(shí)生長發(fā)育時(shí)期即9月—次年1月，因此對該時(shí)期的玫瑰柑進(jìn)行品質(zhì)分析，有利于掌握玫瑰柑的生長發(fā)育狀況，并對其品質(zhì)調(diào)控做出指導(dǎo)。本研究結(jié)果表明，隨著玫瑰柑果實(shí)生長時(shí)期的延長，單果重、pH、可溶性固形物含量和糖酸比均顯著增加。糖酸比是評價(jià)果實(shí)風(fēng)味的重要指標(biāo)，在不同的生長時(shí)期存在差異，有研究表明，比值越高果實(shí)越甜，越低則果實(shí)越酸，當(dāng)糖酸比低于14.9時(shí)，果實(shí)較酸且有澀味（鄭麗靜等，2015）。玫瑰柑果實(shí)中主要的有機(jī)酸有檸檬酸、蘋果酸、抗壞血酸和乙酸，其中檸檬酸含量最高，隨著果實(shí)成熟，檸檬酸和乙酸含量顯著下降，蘋果酸含量顯著上升，與劉靈智（2011）研究冰糖橙和大紅橙糖酸含量變化的結(jié)果一致。果實(shí)口感風(fēng)味的變化，可能主要與果實(shí)中檸檬酸和蘋果酸含量的變化有關(guān)，有機(jī)酸代謝的主要場所是線粒體，包括線粒體中三羧酸循環(huán)和液泡中蘋果酸、檸檬酸和異檸檬酸的運(yùn)輸（童盼盼，2021）。在生長發(fā)育過程中，果實(shí)中的有機(jī)酸作為代謝底物用于酯類、醇類等物質(zhì)的形成，也是三羧酸循環(huán)過程的重要中間產(chǎn)物，因此，有機(jī)酸在果實(shí)成熟過程中發(fā)揮著重要作用。玫瑰柑果實(shí)成熟期檸檬酸含量最高并逐漸下降，表明檸檬酸是引起其果實(shí)酸味的主要因子（Shangguan et al.，2015），也是口感從酸澀到酸甜可口的主要原因。

玫瑰柑果實(shí)中主要有果糖、葡萄糖和蔗糖3種糖組分，9月—次年1月，果糖和葡萄糖含量變化較小，而蔗糖迅速積累。多數(shù)柑橘品種果實(shí)在發(fā)育早期糖積累很少，進(jìn)入成熟期后，伴隨著有機(jī)酸含量的減少，糖含量迅速增加（Etienne et al.，2013），果實(shí)成熟時(shí)糖含量為10%左右（梁芳菲等，2018）。蔗糖也是許多其他果實(shí)積累的主要可溶性糖，是影響果實(shí)品質(zhì)的一個(gè)重要因子（Sadka et al.，2019），蔗糖代謝是果實(shí)可溶性糖積累的關(guān)鍵，參與蔗糖代謝的酶主要有轉(zhuǎn)化酶、蔗糖合成酶等。趙智中（2001）研究表明，溫州蜜柑果實(shí)發(fā)育前期，蔗糖分解酶類的活性大于蔗糖合成酶類，果實(shí)新陳代謝旺盛，糖的積累較慢，隨著果實(shí)的發(fā)育成熟，糖代謝合成酶類活性增加，且高于分解酶類，蔗糖的合成量大于分解量，糖含量增加。本研究結(jié)果表明玫瑰柑為蔗糖積累型果實(shí)，隨著果實(shí)的成熟，蔗糖含量增加，檸檬酸含量下降，成熟期（1月）果實(shí)口感較好。

玫瑰柑果實(shí)不同部位總黃酮含量大小排序?yàn)楣?gt;果渣>果汁，采用高效液相色譜法檢測到主要黃酮組分為橙皮苷、香蜂草苷、甜橙黃酮、川陳皮素和桔皮素，其中橙皮苷含量最高，遠(yuǎn)高于其他4種化合物，橙皮苷和香蜂草苷均存在于果皮、果渣和果汁中，但在果汁和果渣中未檢測到甜橙黃酮、川陳皮素和桔皮素。9月—次年1月，隨著玫瑰柑果實(shí)生長期的延長，總黃酮及5種單體黃酮類化合物含量均顯著下降。李俊等（2021）也報(bào)道融安金桔果實(shí)生長期間黃酮含量下降，可能是由于黃酮類化合物在果實(shí)成熟過程中發(fā)生轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化機(jī)制有待研究。柑橘果實(shí)富含多酚類化合物，且具有較強(qiáng)的抗氧化活性（劉蕊和李曉丹，2019），玫瑰柑果實(shí)的總酚含量依次為果皮>果渣>果汁，在成熟過程中均顯著下降。測定黃酮類化合物抗氧化活性的方法有DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、FRAP鐵離子還原能力法和氧化自由基吸收能力（ORAC）分析法等，由于黃酮化合物結(jié)構(gòu)和氧化過程比較復(fù)雜，抗氧化活性可能是不同機(jī)制作用的結(jié)果，如抑制過氧化物的分解，阻止清除自由基或結(jié)合過渡金屬離子催化劑（Lou et al.，2015），因此通過3種方法測定玫瑰柑果實(shí)抗氧化活性，結(jié)果表明果皮的抗氧化活性高于果渣和果汁，且與總酚、總黃酮含量的變化趨勢一致。Jang等（2010）采用DPPH法測定南豐蜜桔果實(shí)的抗氧化能力，結(jié)果表明南豐蜜桔果皮的DPPH抗氧化活性明顯高于果肉。酚類化合物是果實(shí)具有抗氧化能力的主要因素（Rao，2020），隨著采收期的延長，玫瑰柑果實(shí)總酚和總黃酮含量逐漸下降，推測其抗氧化能力下降與黃酮類和酚類物質(zhì)含量的下降有關(guān)。

4 結(jié)論

隨著玫瑰柑果實(shí)的成熟，蔗糖含量顯著增加，果糖、葡萄糖、總黃酮、總酚含量及抗氧化活性降低。不同生長時(shí)期玫瑰柑果實(shí)理化性質(zhì)、主要營養(yǎng)成分及活性成分的變化規(guī)律，可為其品質(zhì)調(diào)控及不同部位的綜合開發(fā)利用提供參考依據(jù)。

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（責(zé)任編輯 羅 麗）