劉旭樂，蘇瑩瑩，趙淑敏，雒愛玲，焦喜蘭,2，景亞岐,2，王成章,2，李振田,2*

（1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河南鄭州 450046；2.河南省草地資源創(chuàng)新與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南鄭州 450046）

世界范圍內(nèi)對雞肉需求的不斷增長使得肉雞養(yǎng)殖壓力不斷上升，這需要通過提高肉雞的生長速度、飼料轉(zhuǎn)化率來提高養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益，但也可能因此使雞肉品質(zhì)降低，營養(yǎng)物質(zhì)流失。肉仔雞生長周期短，免疫器官等發(fā)育不完全，可能會(huì)因大規(guī)模養(yǎng)殖密度過高或傳染性疾病造成應(yīng)激或死亡。許多研究表明，中草藥提取物可用于改善畜禽生長性能、肉品質(zhì)以及免疫機(jī)能等。

大黃素，學(xué)名1,3,8-三羥基-6-甲基蒽醌，以游離和苷的形式存在于蓼科植物掌葉大黃、大黃、唐古特大黃的根莖及根中，屬于蒽醌類衍生物。近幾年來，隨著研究不斷深入，人們發(fā)現(xiàn)蒽醌類衍生物在抑菌、抗炎、抗氧化應(yīng)激等方面有顯著功效。目前，大黃素在醫(yī)學(xué)和水產(chǎn)動(dòng)物的應(yīng)用中較為廣泛。曹麗萍等研究表明，在建鯉的飼料中添加3～5 g/kg 大黃素可以提高其生長性能，清除自由基、提高超氧化物歧化酶（SOD）活性，并抑制丙二醛（MDA）的生成。楊維維等研究發(fā)現(xiàn)，大黃素也能顯著提高克氏螯蝦的免疫機(jī)能。此外，大黃素可以提高大鼠的抗氧化能力。但關(guān)于大黃素在畜禽應(yīng)用上的研究較少，而大黃素在肉仔雞方面的研究還未見報(bào)道。因此，本試驗(yàn)旨在研究日糧中添加不同水平的大黃素對肉仔雞生長性能、肉品質(zhì)、抗氧化性能和免疫機(jī)能的影響，以期為大黃素在肉仔雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及日糧 采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選擇320只健康狀況良好、體重（42±2 ）g、1 日齡商品代艾拔益加（AA）肉仔雞，公母各半，隨機(jī)分為4 組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)16 只雞，試驗(yàn)期為49 d。0～21 日齡，大黃素組在飼喂基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上均添加50 mg/kg 大黃素；21～49 日齡，各組飼糧大黃素水平分別為0（對照組）、100、200、400 mg/kg。參 照NRC（1994）配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 肉仔雞基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)成分（飼喂基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)管理嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。進(jìn)雛前清理雞舍，打掃雞舍周圍環(huán)境。進(jìn)雛后，1～4 d 充分做好飲水、開食、溫度、光照等因素的調(diào)控。進(jìn)雛時(shí)，將舍內(nèi)溫度設(shè)置為33℃左右，之后隨著雛雞的生長，每周降低2℃左右，5 周之后將舍內(nèi)溫度穩(wěn)定在21℃左右。初始舍內(nèi)光照時(shí)長設(shè)置為23 h，黑暗1 h；從4 d 起每天光照18 h，黑暗6 h。之后將光照時(shí)長穩(wěn)定為自然光照時(shí)長。此外，檢查舍內(nèi)風(fēng)機(jī)濕簾的正常運(yùn)轉(zhuǎn)從而保持舍內(nèi)良好的通風(fēng)條件，防止廢氣積累。所有肉仔雞在試驗(yàn)期間均可自由進(jìn)行飲食。

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長性能 試驗(yàn)期間共進(jìn)行4 次稱重。進(jìn)雛時(shí)對所有肉仔雞進(jìn)行稱重，記錄其平均體重；在21、35 d時(shí)以重復(fù)為單位，隨機(jī)挑選8 只雞測定其平均體重，此為第2、3 次稱重；第49 天出欄時(shí)記錄每個(gè)處理組平均末體重。每次稱重時(shí)同時(shí)記錄其采食量。試驗(yàn)結(jié)束后，計(jì)算日均采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）及耗料增重比（F/G）。

1.4.2 肉品質(zhì) 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每重復(fù)選擇體重接近分組肉仔雞體重平均值的2 只雞進(jìn)行屠宰。取其左側(cè)的胸肌和腿肌，取完后立即放置于自封袋內(nèi)-30℃保存，取一部分樣品懸掛放在4℃冰箱中保存24 h 后，擦干表面水分計(jì)算滴水損失；采用高溫干燥法，計(jì)算肌肉水分和失水率；用C-LM3 型數(shù)顯式嫩度儀測定肌肉剪切力；采用凱氏定氮儀（杭州綠博儀器有限公司產(chǎn)KDN）測定肌肉粗蛋白質(zhì)含量；采用乙醚浸提法測定胸肌和腿肌內(nèi)脂肪含量；按照國家標(biāo)準(zhǔn)《肉與肉制品 膽固醇含量測定》（GB/T 9695.24-2008）測定肌肉膽固醇。

1.4.3 肌肉抗氧化指標(biāo) 肌肉抗氧化指標(biāo)的肉樣處理同肉品質(zhì)測定。SOD（黃嘌呤氧化酶法）和MDA（硫代巴比妥酸法）的測定方法嚴(yán)格按照南京建成生物工程研究所的試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.4.4 免疫器官指數(shù) 屠宰時(shí)取肉仔雞的脾臟、胸腺和法氏囊并稱重，計(jì)算各臟器指數(shù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2010 記錄整理，采用SAS 8.12 統(tǒng)計(jì)軟件，對各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA），Duncan's 法進(jìn)行多重比較，并按照添加劑量進(jìn)行一次線性、二次曲線性分析，顯著水平定為<0.05，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差來表示。

2 結(jié)果

2.1 不同水平大黃素對肉仔雞生長性能的影響 在整個(gè)飼喂期間，添加大黃素對肉仔雞的ADFI、ADG 及F/G 的改善作用不明顯（表2），但所有大黃素飼喂組的ADFI和ADG 均高于對照組，且400 mg/kg 大黃素組各階段的ADFI、ADG 均為4 組最高，F(xiàn)/G 則相反。在21～35 d時(shí)肉仔雞的ADFI 和ADG 隨著大黃素添加水平的提高呈線性升高（<0.05），其ADFI 呈二次升高，F(xiàn)/G 呈二次降低（<0.05）。在35～49 d 時(shí)，200 mg/kg 大黃素組和400 mg/kg 大黃素組ADG 高于對照組（<0.05）。1～49 d，肉仔雞的ADFI 隨大黃素添加水平的提高呈線性提高（<0.05），ADG 隨大黃素添加水平的提高呈二次提高（<0.05）。

國內(nèi)對于新聞漫畫的多模態(tài)隱喻研究已經(jīng)取得的成果有： 俞燕明基于認(rèn)知語言學(xué)隱喻映射理論，對政治漫畫中隱喻表征方式展開研究，將漫畫模態(tài)實(shí)現(xiàn)和配置進(jìn)行了分類。[8] 趙秀鳳、朱嫣然以認(rèn)知語言學(xué)中的概念整合理論為基礎(chǔ)，分別探討了政治漫畫多模態(tài)隱喻的動(dòng)態(tài)建構(gòu)過程[9，10]； 趙秀鳳、馮德正通過以《經(jīng)濟(jì)學(xué)人》中94篇涉華政治漫畫語篇為例，系統(tǒng)分析了多模態(tài)語篇中隱轉(zhuǎn)喻的互動(dòng)與融合對于中國形象構(gòu)建產(chǎn)生的影響。[11]

表2 不同水平大黃素對肉仔雞生長性能的影響

2.2 不同水平大黃素對肉仔雞肉品質(zhì)的影響 如表3 所示，大黃素組胸肌的各項(xiàng)物理學(xué)特性指標(biāo)均低于對照組，且當(dāng)大黃素添加量為400 mg/kg 時(shí)，4 組所有指標(biāo)均最低（>0.05）。100、200、400 mg/kg 大黃素組腿肌的滴水損失和失水率均低于對照組（>0.05），以400 mg/kg 大黃素組的各項(xiàng)指標(biāo)為最低（>0.05）。200、400 mg/kg 大黃素組腿肌的剪切力低于對照組（<0.05），100 mg/kg 大黃素組與對照組間差異不顯著。其中，胸肌的滴水損失隨著大黃素添加水平的提高呈線性升高（<0.05），其剪切力和失水率則呈線性降低（<0.05）。胸肌和腿肌的滴水損失均隨著大黃素添加水平的提高呈二次降低（<0.05）。

表3 不同水平大黃素對肉仔雞肌肉物理學(xué)特性的影響

如表4 所示，大黃素組胸肌和腿肌的水分、粗脂肪以及粗蛋白質(zhì)均高于對照組。200、400 mg/kg 大黃素組胸肌含水量、粗蛋白質(zhì)含量高于對照組（<0.01），400 mg/kg 大黃素組腿肌粗蛋白質(zhì)含量也高于對照組（<0.01）。胸肌的粗脂肪以及腿肌的水分和粗蛋白質(zhì)均隨大黃素添加水平的提高呈線性提高（<0.05），腿肌的水分隨大黃素添加水平的提高呈二次提高（<0.05）。此外，200、400 mg/kg 大黃素組膽固醇含量低于對照組（<0.05），100 mg/kg 大黃素組則與對照組差異不顯著。胸肌粗脂肪、腿肌的水分和粗脂肪組間差異不顯著。

表4 不同水平大黃素對肉仔雞肌肉化學(xué)成分的影響

2.3 不同水平大黃素對肉仔雞肌肉抗氧化功能的影響由表5 可見，400 mg/kg 大黃素組腿肌SOD 活性高于其他3 組（<0.05），其他組胸肌和腿肌的SOD 活性高于對照組、MDA 含量低于對照組（>0.05）。胸肌中MDA 含量隨著大黃素添加水平的提高呈線性降低（<0.05），腿肌中SOD 活性隨著大黃素添加水平的提高呈線性提高（<0.05），腿肌中MDA 含量隨大黃素添加水平的提高呈二次降低（<0.05）。

表5 不同水平大黃素對肉仔雞肌肉抗氧化功能的影響

2.4 不同水平大黃素對肉仔雞免疫功能的影響 由表6可見，200、400 mg/kg 大黃素組肉仔雞的脾臟指數(shù)高于對照組和100 mg/kg 大黃素組（<0.05）。4 個(gè)處理組胸腺指數(shù)差異不顯著。400 mg/kg 大黃素組法氏囊指數(shù)高于其他3 組（<0.05）。

表6 不同水平大黃素對肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響 g/kg

3 討論

3.1 大黃素對肉仔雞生長性能的影響 肉仔雞在育雛期時(shí)由于自身體溫調(diào)節(jié)機(jī)制、免疫系統(tǒng)、消化系統(tǒng)等不完善，容易因應(yīng)激或疾病造成死亡率升高。研究表明，低劑量的大黃素具有良好的保肝作用，而高劑量大黃素則能導(dǎo)致肝毒性、腎毒性。臨床中大黃總蒽醌人用治療劑量為420 mg/d，當(dāng)換算成大鼠用量時(shí)為44.1 mg/kg。由于中藥具有作用緩慢、作用時(shí)間持久的特點(diǎn)。因此，本試驗(yàn)中1～21 d 時(shí)試驗(yàn)組均添加50 mg/kg 的大黃素，以提高肉仔雞的適應(yīng)性；當(dāng)肉仔雞轉(zhuǎn)入快速生長期后，將大黃素組的大黃素水平分別提高到100、200、400 mg/kg。以往研究顯示，大黃素僅在水產(chǎn)動(dòng)物方面表現(xiàn)出良好的促生長作用。如大黃素可以提高羅氏沼蝦的生長性能，也可以顯著提高被氧化魚油刺激的武昌魴的最終體重和增重率。本試驗(yàn)中，添加大黃素對肉仔雞的生長性能影響與對照組無顯著差異，但大黃素組肉仔雞的ADG 和ADFI 較對照組有所提高，F(xiàn)/G有所降低，采食量增加可能是由于大黃可促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)，加快了食糜的排空速度，且大黃素可以提高小腸內(nèi)胃動(dòng)素并降低生長抑素含量；這可能促進(jìn)了肉仔雞的生長。在35～49 d 時(shí)，200 mg/kg 大黃素組和400 mg/kg大黃素組ADG 顯著高于對照組，表明添加大黃素對肉仔雞育肥期的生長有一定影響。而Straub 等試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)仔豬飼喂添加0.25% 大黃的飼糧時(shí)31 d 時(shí)，其ADG 和ADFI 均較對照組顯著增加，但當(dāng)大黃含量提高至0.5%～1%時(shí)，會(huì)導(dǎo)致其ADG 和ADFI 逐漸降低，并提高其F/G。因此，大黃素對動(dòng)物的促生長作用可能與其大黃素含量有關(guān)。

3.2 大黃素對肉仔雞肉品質(zhì)的影響 肉品質(zhì)對于確保消費(fèi)者滿意至關(guān)重要。剪切力可反映肌肉嫩度，剪切力越小，則雞肉的嫩度越好。滴水損失和失水率是肌肉保水能力的重要指標(biāo)之一，反映了肉的多汁性。明建華研究表明，大黃素對團(tuán)頭魴的魚體肥滿度并無顯著影響。在本試驗(yàn)中，不同大黃素組肉仔雞的胸肌剪切力、滴水損失和失水率均低于對照組，且200、400 mg/kg 大黃素組腿肌的剪切力顯著低于對照組。肌纖維直徑與肉的柔嫩度呈負(fù)相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，中草藥添加劑可以降低生長育肥豬的肌纖維直徑，提高其肌纖維密度，從而提高肌肉的保水性能。因此，大黃素可能是通過改變?nèi)庾须u肌纖維直徑來改變其肌肉剪切力。

雞肉中粗蛋白質(zhì)和粗脂肪是反映雞肉常規(guī)營養(yǎng)的基礎(chǔ)指標(biāo)。研究表明，大黃素可以顯著降低肝臟中粗脂肪的積累，也能促進(jìn)小鼠腹股溝白色脂肪棕色化并減少白色脂肪的積累。張磊等研究表明，不同大黃素、大黃酸和蘆薈大黃素配比可抑制大鼠體內(nèi)膽固醇的生成。本試驗(yàn)中，200、400 mg/kg 大黃素組顯著提高了肉仔雞的胸肌水分以及胸肌和腿肌中粗蛋白質(zhì)含量，并顯著降低了肌肉中膽固醇含量；從整體上看，處理組肌肉的水分、粗脂肪和粗蛋白質(zhì)含量均高于對照組。研究發(fā)現(xiàn)，大黃素一方面可以通過抑制甾醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-2（SREBP-2）轉(zhuǎn)錄活性，從而抑制膽固醇的生物合成；另一方面，大黃素可以通過促進(jìn)膽固醇7-羥化酶的活性，加速膽固醇向膽鹽的轉(zhuǎn)化，從而降低機(jī)體內(nèi)膽固醇含量。

3.3 大黃素對肉仔雞抗氧化機(jī)能和免疫機(jī)能的影響 氧化應(yīng)激是一種細(xì)胞狀態(tài)或疾病，其發(fā)生是由于抗氧化劑和氧化劑（自由基或反應(yīng)性物質(zhì)）水平與之間的生理失衡。一些健康疾?。ㄈ缣悄虿?、腦損傷、神經(jīng)退行性疾病等）的發(fā)生和發(fā)展與通過氧化應(yīng)激產(chǎn)生的自由基或反應(yīng)性物質(zhì)有關(guān)。而氧化應(yīng)激的第一道防線即為SOD、CAT、谷胱甘肽過氧化氫酶（GPX）等。以往研究證明，低劑量的制首烏游離蒽醌可以顯著上調(diào)大鼠體內(nèi)SOD mRNA 的相關(guān)表達(dá)。Nemmar 等則發(fā)現(xiàn)，大黃素對大鼠肺部的氧化應(yīng)激有較好的改善作用。本試驗(yàn)中，添加大黃素一定程度上提高了肉仔雞肌肉中SOD 活性，降低了肌肉中MDA 含量。有研究表明，大黃素可以提高血清SOD 活性，通過抑制核因子（NF）-B 的結(jié)合活性，抑制血清炎癥因子的表達(dá)從而起到抗氧化作用。此外，大黃素也能通過Nrf2/TLR4/NF-B 產(chǎn)生抗氧化作用。

在健康動(dòng)物中，免疫器官的重量也是反映機(jī)體免疫機(jī)能狀態(tài)的重要參考。家禽免疫器官的快速發(fā)育提高了其免疫功能和抗病能力。脾臟中含有大量的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，可以產(chǎn)生免疫球蛋白等物質(zhì)參與機(jī)體的免疫過程。法氏囊是禽類動(dòng)物獨(dú)有的免疫器官，與胸腺共同構(gòu)成了機(jī)體免疫的中樞器官，隨著胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)的增大，機(jī)體的免疫力也會(huì)有一定程度增強(qiáng)。王珅等發(fā)現(xiàn)，1.0%的虎杖蒽醌提取物可使小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)分別提高23.66%和46.73%。本試驗(yàn)結(jié)果也表明，與對照組相比，添加大黃素后肉仔雞的免疫器官指數(shù)均有所升高，其中400 mg/kg 大黃素組和對照組脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)顯著提高。蒽醌衍生物被證明可以通過促進(jìn)小鼠脾臟T、B 淋巴細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的能力，提高自然殺傷細(xì)胞活性及分泌腫瘤壞死因子的活性，從而提高機(jī)體的免疫能力。此外，大黃素也可以通過抑制TLR2 介導(dǎo)的NF-B 信號通路來促進(jìn)脂多糖誘導(dǎo)的急性腎損傷大鼠的免疫炎癥調(diào)節(jié)作用。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，在肉仔雞飼糧中添加大黃素可提高肉仔雞育肥期的平均日增重，提高肉仔雞的生長性能；可降低雞肉剪切力，改善雞肉口感；提高雞肉水分和粗蛋白質(zhì)含量，降低膽固醇含量，提高雞肉營養(yǎng)價(jià)值；可以改善肉仔雞的抗氧化功能，顯著提高了其肌肉中SOD 活性，并降低MDA 含量；顯著提高了肉仔雞的免疫器官指數(shù)，提高了肉仔雞的免疫功能。