許晏維，袁建敏*，周洪彬，許玲玲

（1.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193；2.大連成三畜牧業(yè)有限公司，遼寧大連 116308；3.北京大發(fā)正大有限公司，北京 102211）

抗性淀粉又稱(chēng)抗酶解淀粉或難消化淀粉，是指在健康動(dòng)物小腸中不能被-胰淀粉酶水解吸收的淀粉及淀粉降解產(chǎn)物的總稱(chēng)?？剐缘矸塾捎谠趧?dòng)物小腸中難以消化，被視作飼料原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子?？剐缘矸鄄粌H會(huì)降低飼料的能值，還會(huì)干擾動(dòng)物對(duì)淀粉、脂肪等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝，進(jìn)而降低動(dòng)物生產(chǎn)性能。

飼料中抗性淀粉含量受加工的影響，精細(xì)加工（如研磨、微粉碎或加熱糊化）可降低天然谷物、豆類(lèi)等作物籽實(shí)中抗性淀粉（RS）含量。此外，常規(guī)淀粉經(jīng)高溫糊化后在冷卻或儲(chǔ)存過(guò)程中結(jié)晶也會(huì)形成RS，但其生成量會(huì)受加工條件制約?？剐缘矸酆颗c谷物種類(lèi)、儲(chǔ)存時(shí)間、溫度等因素有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，新玉米中RS 含量較高，但會(huì)隨儲(chǔ)存時(shí)間增加而降低。生產(chǎn)實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，飼料中使用新玉米會(huì)導(dǎo)致畜禽腹瀉、生產(chǎn)性能降低、耗料增重比和死淘率增加，可能與新玉米抗性淀粉含量高有關(guān)。飼料加工時(shí)使用新玉米導(dǎo)致的RS 含量變化，是否是導(dǎo)致畜禽腹瀉的主要原因等問(wèn)題目前尚不清楚。因此，本試驗(yàn)旨在通過(guò)測(cè)定新玉米、陳玉米以及用不同比例新玉米加工的配合飼料制粒前后RS 含量的變化，探究添加新玉米與飼料成品RS 含量的關(guān)系，為解釋新玉米是否導(dǎo)致畜禽腹瀉提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)樣品分別來(lái)自北京、河北、山東和遼寧地區(qū)的5 家飼料廠(chǎng)。累計(jì)收集新玉米樣20 個(gè)（當(dāng)年10 月中旬之前入庫(kù)）、陳玉米樣30 個(gè)（上一年10月中旬之前入庫(kù)的玉米）、使用不同比例新陳玉米的制粒前和制粒后肉雞飼料樣品各79 個(gè)，所有飼料樣品的制粒方式均為蒸汽制粒（調(diào)制溫度：77～82℃，調(diào)制時(shí)長(zhǎng)：30～60 s，制粒后風(fēng)冷18～25 min）。飼料為當(dāng)年9月中旬至11 月中旬不同批次生產(chǎn)（新玉米添加比例為0%～50%）。

1.2 采樣方法 飼料廠(chǎng)收購(gòu)新玉米后，根據(jù)原料的采樣流程對(duì)入庫(kù)的新玉以及陳玉米進(jìn)行采樣，并將玉米樣品快速送達(dá)本實(shí)驗(yàn)室（當(dāng)天或2 d 內(nèi)抵達(dá)）。取每一批混合后但未經(jīng)調(diào)制的肉雞料作為制粒前的飼料樣品，當(dāng)同批飼料制粒后經(jīng)冷卻后再次進(jìn)行取樣，作為制粒后的飼料樣品。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法 將收集的玉米和配合飼料樣品經(jīng)萬(wàn)能粉碎機(jī)粉碎，過(guò)40 目篩，測(cè)定所有樣品的水分、RS 含量。

1.3.1 水分測(cè)定 根據(jù)《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》方法測(cè)定所有樣品水分，計(jì)算樣品干物質(zhì)含量。

1.3.2 RS 測(cè)定 根據(jù)試劑盒（K-RSTAR，Megazyme公司）所提供的方法測(cè)定樣品中的RS 含量。測(cè)定原理：樣品加入-淀粉酶和淀粉葡萄糖苷酶后在37℃震蕩水浴恒溫孵育16 h；之后加入等量無(wú)水乙醇停止反應(yīng)，經(jīng)過(guò)離心后RS 形成白色絮狀物；然后用酒精（50%，v/v）洗滌沉淀2 次。傾倒上層流動(dòng)液，將沉淀溶解于2 mol/L KOH，在冰水浴上用磁力攪拌器攪拌。用醋酸緩沖液中和，RS 在淀粉葡萄糖苷酶作用下轉(zhuǎn)化為葡萄糖，葡萄糖用葡萄糖氧化酶測(cè)定。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 每個(gè)樣品的RS 含量測(cè)定2 次，以均值表示該樣品的RS 含量。測(cè)定最終結(jié)果以干物質(zhì)基礎(chǔ)表示，數(shù)據(jù)處理與分析采用Excel 2017 和SPSS 20.0 軟件進(jìn)行檢驗(yàn)和雙因素方差分析，以<0.05 表示差異顯著，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

2.1 玉米和飼料成品中RS 含量變化 如表1 所示，不同飼料廠(chǎng)玉米中RS 含量為1%～4%，陳玉米中平均RS含量為2.28%，新玉米中RS 含量相對(duì)較高，平均為2.33%。由不同新玉米和陳玉米配制的飼料成品RS 含量也不同，制粒前飼料中RS 平均含量為1.07%，而制粒后RS 平均含量為0.78%，不同批次飼料加工前后飼料中RS 含量變化程度不同。

表1 不同飼料廠(chǎng)玉米和飼料中RS 含量 %

2.2 新玉米添加比例和制粒對(duì)飼料中RS 含量的影響飼料廠(chǎng)1 和飼料廠(chǎng)3 送檢的飼料樣品中RS 含量如表2所示。在飼料廠(chǎng)1 中新玉米的添加比例、制粒以及2 種因素互作效應(yīng)均未對(duì)飼料成品中RS 含量產(chǎn)生顯著影響，但制粒后飼料成品中RS 含量具有降低趨勢(shì)（<0.10）。飼料廠(chǎng)3 的數(shù)據(jù)結(jié)果相似，使用50% 的新玉米后飼料中RS 含量無(wú)顯著變化，制粒后飼料中RS 含量降低了50.3%（<0.001），制粒和新玉米的互作效應(yīng)對(duì)飼料中RS 含量無(wú)顯著影響。

表2 新玉米添加和制粒對(duì)飼料中RS 含量的影響 %

3 討論

玉米是飼料中常見(jiàn)的淀粉來(lái)源，在生產(chǎn)中添加比例通常為50%～60%。本研究結(jié)果顯示，配合飼料在制粒前RS 含量為玉米R(shí)S 含量的50%～53%，與飼料配方中玉米的添加比例基本對(duì)應(yīng)，可見(jiàn)配合飼料中RS 主要來(lái)源于玉米。因此，使用新陳玉米后對(duì)配合飼料中RS 含量無(wú)顯著影響，可能是因?yàn)樾玛愑衩字蠷S 含量無(wú)顯著差異。

尹達(dá)菲研究發(fā)現(xiàn)，剛從地里收獲的新玉米中RS含量一般為4%～5%；收獲存放0～2 周，玉米中RS 快速下降至1.0%～1.5%；存放2～8 周，玉米中RS 含量穩(wěn)定于1.0%左右。RS 快速下降可能與新玉米在收獲后2周內(nèi)玉米內(nèi)源淀粉酶和總淀粉酶活性達(dá)到峰值有關(guān)。在本研究中，來(lái)自不同地區(qū)的5 家飼料廠(chǎng)的新玉米樣品中RS 含量均與陳玉米接近，可能與實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中新玉米從收獲到被飼料廠(chǎng)收購(gòu)需要一定時(shí)間有關(guān)，新玉米中RS 含量在此過(guò)程中可能已經(jīng)發(fā)生變化，與陳玉米無(wú)異，說(shuō)明新玉米可能不是導(dǎo)致飼料中RS 高的因素。

加工時(shí)的濕熱處理也會(huì)引起RS 含量變化。飼料經(jīng)調(diào)制時(shí)高溫處理會(huì)導(dǎo)致淀粉糊化，糊化會(huì)造成谷物淀粉中物理包埋淀粉（RS1）和天然抗性淀粉（RS2）結(jié)構(gòu)改變而降低。但糊化后的淀粉在冷卻過(guò)程中會(huì)重新結(jié)晶形成回生淀粉（RS3）。本研究發(fā)現(xiàn)，制粒后飼料中RS 含量低于制粒前，可能是調(diào)制和制粒過(guò)程中淀粉糊化導(dǎo)致RS 含量下降。盡管谷物淀粉在制粒后冷卻過(guò)程中可能會(huì)重結(jié)晶生成回生淀粉，但RS3 的生成量與加工條件密切相關(guān)。飼料的調(diào)制和制粒條件與工業(yè)制備RS3 所需要的溫度（85℃）、處理時(shí)長(zhǎng)（30 min）以及冷卻溫度（4℃）和時(shí)長(zhǎng)（24 h）相差很大，因此制粒過(guò)程中RS3 生成量很小，導(dǎo)致飼料在加工過(guò)程中以RS1 和RS2 的減少為主。

很多研究認(rèn)為，新玉米對(duì)畜禽的不利影響與新玉中RS 含量高有關(guān)，但日糧中RS 的適宜含量卻鮮有報(bào)道。Liu 等研究發(fā)現(xiàn)，肉雞日糧中RS 絕對(duì)含量超過(guò)4.18%會(huì)導(dǎo)致肉雞生產(chǎn)性能降低，胴體品質(zhì)下降。胡杰等研究發(fā)現(xiàn)，小鼠飼喂5%、10%、15% RS 后其生長(zhǎng)受到抑制，且具有劑量效應(yīng)。但也有研究發(fā)現(xiàn)，在肉鴨日糧中添加不同水平的土豆RS（6%、12%、18%、24%）對(duì)肉鴨的生產(chǎn)性能均無(wú)顯著影響，更多的研究則認(rèn)為在動(dòng)物日糧中添加適量的外源RS 可以影響腸道微生態(tài)環(huán)境，改善腸道健康。RS 對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)性能的影響目前沒(méi)有明確定論，還需要更多的研究來(lái)評(píng)估其在日糧中的適宜含量。本試驗(yàn)測(cè)得新玉米R(shí)S 含量為1.10%～3.03%。使用不同比例新玉米加工的飼料中RS含量在0.50%～1.21%?？梢?jiàn)，飼料內(nèi)源性RS 含量很低，或許不會(huì)對(duì)畜禽動(dòng)物的生長(zhǎng)造成不利影響。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，使用新玉米并不會(huì)導(dǎo)致飼料中RS 含量升高，而且制粒過(guò)程會(huì)降低飼料中RS 含量。因此，使用新玉米導(dǎo)致畜禽腹瀉可能與新玉米中RS 無(wú)關(guān)，新玉米引起腹瀉的因素還需要進(jìn)一步探討。