王勇偉 陳劍 闕曉華

宮頸癌在臨床中比較常見。該疾病的好發(fā)年齡段為50～55 歲女性群體。應用行之有效的癌前篩查方式,能夠盡早發(fā)現宮頸癌前病變以及宮頸癌疾病。其針對于宮頸癌疾病的二級預防來講,具有相當重要的現實意義。雖然說宮頸細胞學檢查為診斷宮頸癌以及癌前病變的首選方法,但不容忽視的是,這種檢查手段會受到基層醫(yī)院病理質量等諸多條件的限制,因而有著比較高的誤診、漏診率。宮頸細胞學陽性人乳頭瘤病毒(HPV)分流能夠在一定程度上降低疾病的漏診率。但這種檢查所花費用比較高,難以作為疾病普查手段。另外值得說明的是,這種檢查方法針對于雖HPV 結果為陰性、但存在宮頸病變患者的漏診風險幾率上升。有研究表明：可以把 DNA 倍體分析用于診斷宮頸癌疾病。這種方法也能夠有效判別宮頸癌惡性程度水平和具體疾病發(fā)展狀態(tài)。但具體而言,迄今為止針對于宮頸癌篩查的有關研究還比較少。另外相關研究也沒有把細胞DNA 倍體分析視為宮頸癌篩查的首選方式。相關研究證實［1］,DNA 倍體異常細胞數目改變情況和宮頸病變程度水平有著極大的關聯性。實施細胞DNA 倍體分析能夠以全面節(jié)約經費的基礎之上,彌補既往手段篩查宮頸癌前病變漏診率高的不足之處。結合實際情況,本文全面探討細胞DNA 倍體分析聯合 TCT 檢查針對于提升宮頸癌篩查準確率的臨床效果,現作出如下匯報。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年1月12 日～2021年6月30 日松陽縣人民醫(yī)院內7000 例進行宮頸癌篩查的女性為研究對象,年齡16～90 歲,平均年齡(44.28±1.24)歲。所有受試者均接受TCT 檢查以及motic 宮頸細胞DNA 倍體分析檢查。本實驗經本院醫(yī)學倫理委員會批準,同意實施。相關精神符合《赫爾辛基宣言》中的有關內容。納入標準：自愿參加相關檢查項目者；知情同意者；臨床資料完整者。排除標準：拒絕參加實驗調查者；妊娠哺乳期婦女；精神疾患；臨床資料缺失者。

1.2 方法

1.2.1 宮頸DNA 倍體分析和結果判定標準 所有受試者取膀胱截石位接受檢查。工作人員應用無菌棉簽插入到患者陰道內,收集宮頸分泌物。并應用宮頸拭子在受試者的宮頸位置以順時針方向旋轉共計5 圈,用于收集宮頸脫落細胞。開展 TCT 檢查以及 DNA 倍體分析。

收集完畢宮頸脫落細胞樣本之后,將其放入到離心機內,以2000 r/min 的速度離心處理5 min,后去掉上清液以及黏液。再次懸浮下層細胞。完成上述工作以后,制備好細胞薄片。應用福爾根染色法完成分片以及染色工作。使用DNA 倍體定量分析系統,針對于細胞薄片開展掃描。具體參照物為細胞薄片中正常細胞。系統會依照所收集到的細胞染色體分布情況、形態(tài)、局部特定特征等諸多參數,自動的對于受檢細胞進行計數以及分類。應用DNA 指數代表細胞內的DNA 含量水平。如果 DNA 指數在0.75～1.25,則判定為正常細胞；若DNA 指數在1.25～2.50,則判定為增生細胞或者疑似病變；如果DNA 指數＞2.50,則判定其為病變細胞。

開展宮頸DNA 倍體分析確定宮頸癌的具體標準：①正常者：樣本細胞薄片之內主要為正常細胞、未發(fā)現病變細胞,并且增生細胞以及疑似病變細胞比例＜5%；②可疑者：樣本內共計觀察到2 個以下病變細胞,或者受試者的增生細胞以及疑似病變細胞比例達到5%～10%；③陽性案例。

樣本內觀察到3 個以上病變細胞,或者正常細胞以及疑似病變細胞比例＞10%。本實驗中將可疑受試者以及正常者判定為 DNA 倍體結果陰性；針對于所有DNA 指數＞2.50 的病變細胞樣本,均指派工作年限高的病理科醫(yī)生反復性確認,如果最終認定其確實存在病變,將該結果視為陽性。

1.2.2 TCT 檢查和結果判定標準 針對于宮頸脫落細胞的TCT 結果具體判定標準為：依照最新出版的《國際標準巴氏分級系統》完成相關判定工作。

1.3 觀察指標 觀察宮頸DNA 倍體分析及TCT 結果,比較宮頸 DNA 倍體分析、TCT 單獨診斷與聯合診斷的敏感度與特異度。

1.4 統計學方法 采用SPSS21.0 統計學軟件處理數據。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 宮頸DNA 倍體分析及TCT 結果 在7000 例受試者中,經活檢操作顯示：陽性84 例,陰性6916 例；陽性中CINⅠ42 例,CINⅡ20 例,CINⅢ22 例。DNA 倍體分析顯示：陽性609 例,陰性6391 例。TCT 檢查顯示：陽性543 例,陰性6457 例。陽性中LSIL 137 例、HSIL 43 例、ASC-US 304 例、ASC-H 59 例。

2.2 宮頸 DNA 倍體分析、TCT 單獨診斷與聯合診斷的效果比較 聯合診斷的敏感度與特異度均高于DNA倍體分析、TCT 單獨診斷,差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 宮頸 DNA 倍體分析、TCT 單獨診斷與聯合診斷的效果比較(%)

3 討論

在正常情況下,人體細胞會經過有絲分裂過程維持相對恒定的DNA 倍體含量水平,共計23 對染色體。當細胞受到某些致癌因素影響以后,染色體的基因將會發(fā)生突變。就此引發(fā)染色體數目以及結構異常,出現 DNA 異倍體細胞［2］。從本質上來看,癌變指的是癌細胞自身的增長機制異常,擁有無限增殖能力。而染色體復制為細胞增殖本質,經過合成核酸的方式,用以滿足細胞自身生長需求,具體會表現為DNA 的合成速率增快,含量激增,引發(fā)DNA 大批量堆積,繼而出現了非整倍體細胞以及異倍體。由此能夠看出,細胞核DNA 變化能夠被視為反映腫瘤細胞增殖能力的重要生物學指標。當前國外已有很多應用DNA 定量分析系統開展宮頸癌和癌前病變的診斷案例。早在2005年,美國學者于權威醫(yī)學期刊中所發(fā)表的文章就明確指出：腫瘤發(fā)生的重要原因為非整倍體出現,而腫瘤的出現則為非整倍體自我催化所產生的后果。當前諸多腫瘤病理研究工作證實：腫瘤的惡性程度和細胞異位體之間存在極大關聯性。應用細胞DNA 定量分析技術能夠有效檢測細胞內的DNA 含量水平,用以分析其內部染色體倍體改變情況［3］,可幫助醫(yī)生有效了解細胞的惡變程度。

從細胞DNA 定量分析技術的基本原理來看,這種技術能夠對人體細胞核內的DNA 水平或者染色體倍數進行預測。通過此法全面判定細胞是否發(fā)生了病理改變。其為一類病理學經由既往形態(tài)描述朝向定量分析發(fā)展而來的產物［4］。在癌細胞和正常細胞增殖生長過程中,細胞核中的DNA 結構和含量都會發(fā)生一定改變［5］。在正常情況下,人類組織內細胞染色體共計23 對,其也被稱之為二倍體。將正常細胞含量視為參照物后,把需要測定的每個目標細胞DNA 含量和正常DNA 含量加以對比,能夠取得DNA 值。倘若該值為1,則代表其屬于正常細胞；如果 DNA 值為2,則代表該細胞處于分裂期；如果 DNA 值在1～2,則代表細胞正處于染色體復制期內。DNA 的含量水平異常上升,則代表機體存在異變可能。由此能夠看出：積極測定細胞核的DNA 含量水平,能夠被視為判斷機體細胞正常與否和癌細胞的重要指標［6］。

隨著當前我國醫(yī)學技術的進展,TCT 于制片以及取材方面有了很大進步。這也在一定程度上提升了對于宮頸癌前病變以及宮頸癌的診斷有效率［7］。但不容忽視的是,因為從事閱片工作的人員工作年限存在差異,進而引發(fā)TCT 檢查結果可重復性不佳。通過該項檢查所出具的結果仍具有一定的假陰性和假陽性率。對樣本實施細胞DNA 倍體定量分析測定 DNA 含量水平,能夠在極大程度上彌補單純TCT 檢查的不足。使用以上兩種方法完成篩查工作,能夠在極大程度上提升宮頸癌和癌前病變的診斷有效率［8,9］。

相關文獻指出［5］,在沒有發(fā)生病變的情況下,人體的宮頸細胞會停滯在靜止期內。而在病理條件影響下,宮頸細胞會表現出異常增殖的現象［10］。其能夠在細胞核中合成,導致大批量核酸染色體片段丟失或者增多,出現基因重組的情況,就此引發(fā)細胞核中的DNA 含量改變。以此為基礎,進一步引起 DNA 數量改變,生成非整倍體的腫瘤細胞株。另有文獻表明［11,12］,宮頸DNA 倍體非正常細胞數目和CIN、宮頸癌發(fā)生發(fā)展存在極大關聯性。開展此項檢查對于盡早診斷宮頸癌疾病來講意義重大。

TCT 檢查能夠令宮頸涂片的平整度更高,同時也能夠有效規(guī)避炎性碎片、宮頸黏液以及血細胞的影響,就此減少 TCT 結果的假陰性率,當前已然被廣泛應用于篩查宮頸病變。本實驗內,將宮頸活組織病理學檢查結果視為診斷疾病的金標準,全面分析TCT、宮頸DNA 倍體分析和兩類方法聯合檢查宮頸病變的價值,結果表明：聯合診斷的敏感度與特異度均高于DNA 倍體分析、TCT 單獨診斷,差異有統計學意義(P＜0.05)。結果表明兩類方式聯合檢查能夠在極大程度上降低疾病誤診、漏診率。

總之,應用TCT 聯合宮頸DNA 倍體分析聯合篩查宮頸癌有著良好的價值,該法值得進一步在臨床內推廣以及應用。