劉小瓊，錢利武,薛正蓮

(1.安徽省藥品審評(píng)查驗(yàn)中心，安徽 合肥230051；2.安徽工程大學(xué)，安徽 蕪湖 241000)

在后新冠疫情時(shí)代，如何阻遏病毒的傳播，成了全世界的難題?！叭祟愖罱K戰(zhàn)勝新冠病毒，只能靠疫苗”[1]，說(shuō)明疫苗對(duì)于遏制疫情至關(guān)重要。目前我國(guó)已上市批準(zhǔn)使用的新冠疫苗，無(wú)論是滅活疫苗還是腺病毒載體疫苗都需要通過(guò)微生物獲取。微生物藥物是發(fā)酵來(lái)源的藥物，獲得藥物產(chǎn)品過(guò)程不同于一般的“化學(xué)反應(yīng)”過(guò)程，微生物是具有生命的，所以微生物藥物的質(zhì)量一般難以把控。本文結(jié)合微生物藥物的特殊性，分析總結(jié)安徽省微生物藥物生產(chǎn)企業(yè)在檢查中存在的共性問(wèn)題，剖析缺陷產(chǎn)生的原因，便于生產(chǎn)企業(yè)改進(jìn)管理提升藥品質(zhì)量[2]。

1 微生物藥物概述

1.1 微生物藥物的定義、分類及生產(chǎn)工藝 微生物藥物是一種用微生物制作的藥物，是一類結(jié)構(gòu)復(fù)雜多樣，生物活性顯著的小分子化合物[3]。微生物藥物的來(lái)源大體分為三類：微生物的整體或部分實(shí)體、微生物的初級(jí)代謝產(chǎn)物、微生物的次級(jí)代謝產(chǎn)物。微生物藥物的工藝過(guò)程大體相同，一般的工藝流程為：菌株→種子制備(搖瓶、發(fā)酵罐)→發(fā)酵→發(fā)酵液預(yù)處理、過(guò)濾→提取、精制→藥品。抗生素為微生物的次級(jí)代謝產(chǎn)物，是一種具有代表性的微生物藥物。

1.2 微生物藥物的歷史背景、發(fā)展現(xiàn)狀及趨勢(shì) 自17世紀(jì)荷蘭科學(xué)家虎克發(fā)現(xiàn)細(xì)菌后，人類就開(kāi)啟了認(rèn)識(shí)微生物世界的大門。1929年英國(guó)微生物學(xué)家費(fèi)來(lái)明無(wú)意中發(fā)現(xiàn)的青霉素，拉開(kāi)了人類探究微生物藥物的序幕。以抗生素為例，微生物藥物經(jīng)歷了從被發(fā)現(xiàn)到發(fā)現(xiàn)的黃金時(shí)期、衰退期、瓶頸期以及現(xiàn)在的新時(shí)期[4]。21世紀(jì)以來(lái)，細(xì)菌的耐藥性不斷顯現(xiàn)，如何獲取新型抗生素成了人們的關(guān)注焦點(diǎn)。據(jù)信，人們已經(jīng)著手通過(guò)研究新型發(fā)酵工藝提升微生物藥物產(chǎn)能、利用基因工程及組學(xué)技術(shù)系統(tǒng)性改造微生物、運(yùn)用生物信息學(xué)對(duì)生物反應(yīng)進(jìn)行預(yù)測(cè)發(fā)掘新結(jié)構(gòu)代謝產(chǎn)物、運(yùn)用合成生物學(xué)助力復(fù)雜化合物微生物合成、采用基因編輯推動(dòng)微生物代謝途徑的精準(zhǔn)改造等方法獲取微生物藥物[5]。

2 安徽省微生物藥物生產(chǎn)企業(yè)存在的問(wèn)題

2.1 生產(chǎn)企業(yè)情況 安徽省現(xiàn)有8家生產(chǎn)微生物藥物生產(chǎn)企業(yè)，分布地點(diǎn)分別為合肥4家，蕪湖、阜陽(yáng)、宿州、亳州各1家，涉及的產(chǎn)品劑型有疫苗、注射劑、中藥制劑、原料藥和中藥飲片等。

2.2 缺陷項(xiàng)匯總 通過(guò)對(duì)8家企業(yè)近年來(lái)接受監(jiān)管部門、客戶審計(jì)和企業(yè)內(nèi)審報(bào)告進(jìn)行收集、匯總審核，共發(fā)現(xiàn)227項(xiàng)缺陷。依照風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)劃分：嚴(yán)重缺陷0項(xiàng)；主要缺陷14項(xiàng)，占比6.17%；一般缺陷213項(xiàng)，占比93.83%，具體情況見(jiàn)表1。

表1 缺陷等級(jí)分類

從表1可以看出，自新版《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(2010年修訂)》(簡(jiǎn)稱GMP)實(shí)施以來(lái)，微生物藥物生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)質(zhì)量管理有所提高，在檢查中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重偏離藥品GMP的行為，但是檢查中發(fā)現(xiàn)多項(xiàng)主要缺陷，也表明企業(yè)的生產(chǎn)質(zhì)量管理體系尚不健全，亟須完善和改進(jìn)。

依據(jù)GMP及其附錄，將企業(yè)在各類檢查中發(fā)現(xiàn)的缺陷歸屬到GMP相關(guān)章節(jié)，缺陷在每個(gè)章節(jié)的占比情況如表2。

表2 缺陷分布情況

從表2中可以看出，質(zhì)量控制與質(zhì)量保證、文件管理、設(shè)備和生產(chǎn)管理方面占比較大，分別為22.91%、22.47%、12.33%和8.81%，占缺陷項(xiàng)目總數(shù)的66.52%。

2.3 缺陷分析

2.3.1 主要缺陷存在的問(wèn)題 主要缺陷存在的問(wèn)題：①確認(rèn)與驗(yàn)證方面：凈化空調(diào)系統(tǒng)再驗(yàn)證方案中未明確各監(jiān)測(cè)房間面積，未明確沉降菌、塵埃粒子監(jiān)測(cè)位置；產(chǎn)品工藝驗(yàn)證方案中未將成品含量、微生物限度內(nèi)容納入分析；滅菌柜驗(yàn)證未進(jìn)行滿載驗(yàn)證；生產(chǎn)中配制的胰蛋白酶溶液規(guī)定有效期為一年，但無(wú)穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)支持等。②廠房設(shè)施方面：物料稱量、配料、混合同在一室，無(wú)專用稱量設(shè)施；制粒間產(chǎn)塵量較大，不能有效捕塵，致使直排管道有白色積塵；吹掃藥液的壓縮空氣未安裝過(guò)濾器；更衣室互鎖設(shè)置位置不對(duì)；洗瓶間對(duì)普通區(qū)缺一個(gè)壓差指示計(jì)等。③質(zhì)量保證措施方面：持續(xù)穩(wěn)定性考察檢測(cè)項(xiàng)目未包含生物活性檢測(cè)；灌裝過(guò)程中，人員身體依靠著RABS門上；灌裝操作人員裝配工作完成后未對(duì)隔離門內(nèi)側(cè)和手套進(jìn)行消毒等。

2.3.2 一般缺陷存在的問(wèn)題 一般缺陷主要表現(xiàn)為：①質(zhì)量控制與質(zhì)量保證方面：批檢驗(yàn)記錄不規(guī)范，不能有效追溯；易制毒試劑未按要求雙人雙鎖；用于檢驗(yàn)工作的枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌等陽(yáng)性菌種傳代后未進(jìn)行活性、純度等的確認(rèn)；水系統(tǒng)趨勢(shì)分析中未設(shè)置不良趨勢(shì)的標(biāo)準(zhǔn)；偏差處理記錄中，缺少偏差原因調(diào)查的過(guò)程記錄；丙酮?dú)埩魴z驗(yàn)超標(biāo)，企業(yè)進(jìn)行了偏差調(diào)查，但沒(méi)有查出超標(biāo)的真正原因且偏差處理未結(jié)束就對(duì)成品放行等。②文件管理方面：新版批生產(chǎn)記錄已生效，但已失效文件仍在使用；僅規(guī)定灌裝操作人員“雙手勤消毒”，未對(duì)消毒部位、步驟和方法等進(jìn)行具體規(guī)定；清潔過(guò)程的描述不夠詳細(xì)，缺少注射用水水量、水壓等；工藝規(guī)程中凍干工序描述不具體等。③設(shè)備管理方面：生產(chǎn)過(guò)程中離心機(jī)溫度轉(zhuǎn)速數(shù)字顯示器出現(xiàn)故障；精制結(jié)晶間抽濾袋未清洗干凈；熔點(diǎn)儀溫度示值只用磺胺熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)166 ℃，不能有效覆蓋所測(cè)樣品十八醇(熔點(diǎn):57～60 ℃)和山梨酸(熔點(diǎn):132～136 ℃)的溫度值，且相關(guān)樣品檢測(cè)結(jié)果均未對(duì)溫度值進(jìn)行校正；細(xì)胞規(guī)模化培養(yǎng)室內(nèi)部分物料管道無(wú)內(nèi)容物和流向標(biāo)識(shí)等。④生產(chǎn)管理方面：未制定動(dòng)態(tài)沉降菌詳細(xì)監(jiān)測(cè)計(jì)劃；液體灌裝軋蓋間、片劑壓片間有毛刷；擦拭設(shè)備用絲光毛巾易產(chǎn)生脫落物；容器具存放間部分已清潔容器無(wú)清潔標(biāo)識(shí)等。

2.3.3 微生物藥物生產(chǎn)特性問(wèn)題 微生物生產(chǎn)企業(yè)有別于其他藥品生產(chǎn)企業(yè)之處，在于其生產(chǎn)過(guò)程中會(huì)一直和活性物質(zhì)打交道。檢查發(fā)現(xiàn)的缺陷中發(fā)現(xiàn)除了常規(guī)缺陷項(xiàng)外，還有其特有的缺陷。如企業(yè)未制定主細(xì)胞、工作細(xì)胞的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；未制定細(xì)胞培養(yǎng)用的外購(gòu)氧氣、二氧化碳質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；發(fā)酵緩沖液所用容器未經(jīng)處理進(jìn)入潔凈區(qū)；工作種子搖瓶培養(yǎng)批生產(chǎn)記錄中抗生素用量未標(biāo)注；未對(duì)主代種子的變更對(duì)產(chǎn)品的影響進(jìn)行評(píng)估；未規(guī)定發(fā)酵所得菌體的儲(chǔ)存時(shí)限；未對(duì)菌體從儲(chǔ)存到純化間的轉(zhuǎn)運(yùn)方式的污染風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行充分評(píng)估；補(bǔ)料罐只記錄需滅菌，未體現(xiàn)滅菌溫度和時(shí)間；低溫冷庫(kù)開(kāi)門時(shí)間限制、斷電后應(yīng)急措施等不明確；接種間生物安全柜內(nèi)存在試劑無(wú)標(biāo)識(shí)，放置在顯微鏡操作臺(tái)上個(gè)別容器無(wú)接種間專用標(biāo)識(shí)；玻璃容器密封膠塞無(wú)專用標(biāo)識(shí)等。

3 原因分析

3.1 質(zhì)量管理意識(shí)有待加強(qiáng) 微生物藥物的源頭是微生物，企業(yè)需要用合適的培養(yǎng)基對(duì)菌種進(jìn)行培養(yǎng)使其復(fù)壯才能引導(dǎo)其生成所需產(chǎn)物，其在培養(yǎng)過(guò)程也容易滋生其他微生物。企業(yè)應(yīng)完善自己的質(zhì)量管理體系，規(guī)范質(zhì)量實(shí)驗(yàn)室管理，尤其是菌種管理，如菌種的鑒定、保存及傳代等，保證菌種的安全性。同時(shí)提升相關(guān)操作人員質(zhì)量管理意識(shí)、強(qiáng)化衛(wèi)生安全知識(shí)及無(wú)菌操作規(guī)范培訓(xùn)，防止生產(chǎn)過(guò)程中受雜菌污染。

3.2 文件管理體系不完善 文件是質(zhì)量保證系統(tǒng)的基本要素，任何與生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范有關(guān)的活動(dòng)均應(yīng)當(dāng)有記錄[6]。未制定主細(xì)胞、工作細(xì)胞的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，中間產(chǎn)品控制就缺少依據(jù)；工藝規(guī)程中關(guān)鍵工序不細(xì)化就不能有效指導(dǎo)生產(chǎn)；批生產(chǎn)記錄設(shè)計(jì)不合理就不能還原整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程，可追溯性較差；低溫冷庫(kù)開(kāi)門時(shí)間限制、斷電后應(yīng)急措施等不明確，一旦出現(xiàn)斷電，人員不知如何處理，斷電時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)影響菌種的活性。企業(yè)應(yīng)該加強(qiáng)文件管理，定期修訂審核文件，確保所有活動(dòng)都有據(jù)可依，有跡可循。

3.3 設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)不到位 部分微生物藥物生產(chǎn)企業(yè)重視硬件投入，弱化日常維護(hù)保養(yǎng)。設(shè)備未按照要求進(jìn)行清潔或者清潔后未按照要求存放，不能確保直接接觸物料的設(shè)備不會(huì)帶來(lái)污染的風(fēng)險(xiǎn)。隨著人們對(duì)GMP認(rèn)識(shí)程度不斷加深，過(guò)去能被認(rèn)可的確認(rèn)或驗(yàn)證方法，現(xiàn)在可能就是問(wèn)題。確認(rèn)和驗(yàn)證不是一次性行為，企業(yè)應(yīng)該持續(xù)進(jìn)行。

3.4 生產(chǎn)管理不規(guī)范 藥品質(zhì)量源于設(shè)計(jì)，但實(shí)現(xiàn)于制造過(guò)程，企業(yè)能否達(dá)到期望，就要看生產(chǎn)管理是否規(guī)范。人員是否按照工藝參數(shù)組織生產(chǎn)，是否按照要求對(duì)中間產(chǎn)品進(jìn)行控制、對(duì)環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測(cè)，能否在生產(chǎn)過(guò)程中降低污染、交叉污染以及差錯(cuò)、混淆的可能。企業(yè)應(yīng)加強(qiáng)生產(chǎn)管理，規(guī)范人員操作行為、規(guī)范生產(chǎn)過(guò)程中物料狀態(tài)標(biāo)識(shí)、規(guī)范記錄的填寫等。

4 建議和意見(jiàn)

4.1 樹(shù)立質(zhì)量意識(shí)，提升管理水平 藥品不同于一般商品，是被用來(lái)診斷、治療、預(yù)防疾病的，藥品質(zhì)量一旦出了問(wèn)題，不僅不能保證其療效還有可能引發(fā)其他健康問(wèn)題的產(chǎn)生。企業(yè)是上市藥品安全性、有效性和質(zhì)量可控性的責(zé)任主體，應(yīng)確保能夠持續(xù)穩(wěn)定地生產(chǎn)出符合注冊(cè)要求的產(chǎn)品。人員是藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理的關(guān)鍵要素，企業(yè)應(yīng)著力提升人員素質(zhì)，建立完善的培訓(xùn)和考核制度，結(jié)合人員的資歷和微生物藥物的特點(diǎn)有針對(duì)性地制定法律法規(guī)、專業(yè)知識(shí)、崗位要求、生物安全等培訓(xùn)方案并組織實(shí)施[7]，樹(shù)立全員質(zhì)量管理意識(shí)，提升生產(chǎn)質(zhì)量管理水平，降低微生物藥物生產(chǎn)質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。

4.2 采取有效措施，確保持續(xù)改進(jìn) 企業(yè)在開(kāi)展缺陷項(xiàng)目的整改時(shí)，往往存在整改思路不明確、原因分析不深入、糾正與預(yù)防措施不到位、跟蹤驗(yàn)證不及時(shí)等問(wèn)題，導(dǎo)致相同或類似的問(wèn)題重復(fù)出現(xiàn)。對(duì)于缺陷產(chǎn)生的原因，企業(yè)大多歸咎于人員意識(shí)不強(qiáng)、人員理解不夠、人員培訓(xùn)不到位等，整改措施基本上是采取人員培訓(xùn)，整改浮于表面，未能從根本上解決問(wèn)題。企業(yè)應(yīng)將監(jiān)管部門開(kāi)展的各類檢查、供應(yīng)商的外部審核及內(nèi)部的自檢和管理評(píng)審等，提出的問(wèn)題、意見(jiàn)及建議，作為質(zhì)量管理體系持續(xù)改進(jìn)的重要因素。

4.3 開(kāi)展上市后研究，實(shí)施全生命周期管理 眾所周知，野生菌株如果不在人為干預(yù)下很難在實(shí)驗(yàn)室條件下生存，而且其合成水平低，造成活性物質(zhì)分離和鑒定難。人們利用傳統(tǒng)的誘變育種的方式去改變菌株活性，雖然取得了一定的成就，但也到了瓶頸期?！拔ㄓ懈母镎哌M(jìn)，唯有創(chuàng)新者強(qiáng)”，企業(yè)應(yīng)主動(dòng)開(kāi)展藥品上市后研究，積極運(yùn)用現(xiàn)代技術(shù)和手段對(duì)菌種選育、培養(yǎng)方式及生產(chǎn)過(guò)程進(jìn)行改造創(chuàng)新，以提高目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)量[8]，充分發(fā)揮國(guó)內(nèi)外先進(jìn)生產(chǎn)技術(shù)和技術(shù)成果，對(duì)微生物藥物產(chǎn)業(yè)的促進(jìn)作用，保障人民群眾的用藥安全。

5 結(jié)語(yǔ)

盡管我國(guó)在微生物藥物的開(kāi)發(fā)和利用上取得了可喜的成績(jī)，但隨著病原菌的耐藥性日益加重，同時(shí)新型疾病也在不斷涌現(xiàn)，人類的健康依然面臨著威脅。微生物藥物生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)充分認(rèn)識(shí)生產(chǎn)過(guò)程中存在的各種風(fēng)險(xiǎn)，確保生產(chǎn)質(zhì)量管理持續(xù)合規(guī)。我國(guó)地大物博，微生物資源豐富，深入挖掘微生物來(lái)源的藥物，對(duì)于保障人民群眾生命安全和身體健康將具有重大而深遠(yuǎn)的意義。