董 闊，崔麥芹，劉 穎

（北京市大興區(qū)人民醫(yī)院口腔科，北京 102600）

在牙齒修復(fù)中，由于粘接技術(shù)有助于提高牙齒美學(xué)修復(fù)效果，受到越來越多年輕患者的關(guān)注，并因其優(yōu)異的應(yīng)用價值逐漸取代了傳統(tǒng)的機(jī)械固位技術(shù)。隨著人類對粘接技術(shù)的認(rèn)識加深，使之得到了快速發(fā)展。但是在牙本質(zhì)修復(fù)中液體污染會導(dǎo)致牙齒修復(fù)臨床效果出現(xiàn)各種問題，尤其是唾液污染屬于牙本質(zhì)修復(fù)中常見的一種污染，唾液污染會造成牙本質(zhì)粘接強度下降，繼而影響到牙齒的修復(fù)效果，國內(nèi)外學(xué)者也進(jìn)行了唾液污染相關(guān)的研究，但是對于乳牙牙本質(zhì)的粘接報道不是很多，大部分是研究恒牙牙本質(zhì)。為了降低唾液污染對牙本質(zhì)粘接強度的影響，比較常用的一種方式為橡皮障隔離技術(shù)，但是該技術(shù)對于兒童來講，由于齲齒缺損比較大，容易出現(xiàn)齲病，而且兒童自控能力差，容易哭鬧，用口進(jìn)行呼吸，造成橡皮障隔離技術(shù)很難在兒童中進(jìn)行施展，只有通過使用其他的處理方式，比如完全吹干、水沖洗等方式降低唾液對乳牙牙本質(zhì)的污染。具體使用何種方式處理乳牙牙本質(zhì)表面能夠獲得不錯的應(yīng)用效果、能夠具有較高的粘接強度還需要進(jìn)行臨床實驗。本文主要分析處理方式和通用粘結(jié)劑光固化后唾液污染乳牙牙本質(zhì)粘接強度關(guān)系。

由于酸蝕對牙本質(zhì)粘接強度存在影響，有研究表明當(dāng)酸蝕時間為15 s和酸蝕時間為30 s時，牙本質(zhì)粘接強度最大，并且兩者之間粘接強度差異無統(tǒng)計學(xué)意義，而且酸蝕時間過短或者過長，都會降低牙本質(zhì)粘接強度。所以在本文的臨床實驗中為了保證乳牙牙本質(zhì)粘接強度，會使用到酸蝕的方式，并將其酸蝕時間設(shè)置為15 s和30 s。為了分析乳牙牙本質(zhì)粘接強度，其中使用比較普遍的測試方式有抗剪切強度測試和微拉伸強度測試，由于其中微拉伸強度測試的精度更高，所以為了準(zhǔn)確分析處理方式的不同，牙本質(zhì)粘接強度的大小，臨床實驗中將會使用微拉伸強度進(jìn)行測試。僅僅進(jìn)行微拉伸強度測試并不能從微觀形態(tài)上分析乳牙牙本質(zhì)粘接強度，通過微觀形態(tài)觀察，能夠了解到粘接界面的具體形態(tài)，牙本質(zhì)粘接界面的微觀形態(tài)分析常常使用的方式有掃描電鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡和透射電鏡這3種方式，其中第二種方式能夠觀察無損傷光學(xué)切片混合層的厚度和形態(tài)等，而且還可以觀察到通用粘結(jié)劑的滲漏情況，使用這種微觀形態(tài)分析方式能夠客觀發(fā)現(xiàn)乳牙牙本質(zhì)粘接強度和微觀形態(tài)之間的關(guān)系，從而有助于分析不同處理方式和和通用粘結(jié)劑光固化后唾液污染乳牙牙本質(zhì)粘接強度關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

在醫(yī)院中收集3～8歲兒童符合要求的離體牙，這些離體牙的納入標(biāo)準(zhǔn)有：牙冠完整、無齲且無填充物的乳磨牙，一共收集到80顆符合要求的離體牙。然后將這些收集的牙齒去除殘余牙周組織及牙結(jié)石，再將其保存到4 ℃生理鹽水中備用，保存時間不能超過3個月。

1.2 實驗材料和儀器

1.2.1 實驗材料

實驗需要的主要材料有生理鹽水、復(fù)合樹脂、通用粘結(jié)劑、唾液、熒光素、水溶性透明膠囊等，其中唾液需要在制備粘接模型的當(dāng)天進(jìn)行收集，選擇一名口腔健康的兒童，飯后2 h再收集其非刺激混合唾液，需要將其放到4 ℃的環(huán)境中進(jìn)行保存?zhèn)溆?，而且為了保證唾液的有效性，需要將其在30 min內(nèi)用于污染組的粘接樣本。

1.2.2 實驗儀器

實驗需要的主要儀器有低速切割機(jī)、電子萬能試驗機(jī)、激光掃描共聚顯微鏡、光固化燈、600目碳化硅水砂紙等。

1.3 方法

取出備用的離體牙，用低速金剛砂圓鉆在離體牙的頰面做一個平坦牙本質(zhì)粘接平面，然后將離體牙固定，使用砂紙打磨60 s，打磨過程需要處于濕潤的條件下，打磨完成之后用清水沖洗上面的灰層，沖洗時間為20 s，最后使用氣槍吹干即可得到牙本質(zhì)粘接面，然后將這些處理好的離體牙平均分為5組，每組16顆離體牙，每組中使用不同的處理方式，然后分析唾液污染乳牙牙本質(zhì)粘接強度關(guān)系。表1即為每組的處理方式內(nèi)容，其中A組為對照組，即為一般的處理方式，沒有經(jīng)過唾液污染的乳牙。

表1 離體牙的不同處理方式Tab.1 Different treatment methods of isolated teeth

完成上述的牙本質(zhì)粘接之后，需要將所有的樣本放到常溫水中進(jìn)行保存，保存24 h之后再進(jìn)行微拉伸強度測試和激光掃描共聚焦顯微鏡觀察。

1.4 測試指標(biāo)

為了分析處理方式和通用粘結(jié)劑光固化后唾液污染乳牙牙本質(zhì)粘接強度關(guān)系，實驗中需要微拉伸強度測試，另外為了觀察牙本質(zhì)粘接界面的實際狀況，還需要進(jìn)行激光掃描共聚焦顯微鏡觀察。這2個測試指標(biāo)的方式如下：

（1）微拉伸強度測試。對不同組的試樣使用電子萬能試驗機(jī)進(jìn)行微拉伸強度測試，將試驗機(jī)的拉伸速度設(shè)置為1.0 mm/min，當(dāng)試樣開始斷裂時記錄此時的最大荷載力，然后根據(jù)公式拉伸強度等于樣本最大荷載力除以粘接面積即可獲得每個樣本的拉伸強度值；

（2）激光掃描共聚焦顯微鏡觀察。進(jìn)行激光掃描共聚焦顯微鏡觀察不能直接上述的試樣，需要使用帶有熒光素的粘結(jié)劑，從而有利于實驗的觀察效果。按照說明和要求制作完成樣本中會后使用不同砂紙進(jìn)行打磨，直至試樣透光為止，然后將其置于常溫的生理鹽水中進(jìn)行保存?zhèn)溆谩Ｔ賹⑦@樣處理好的試樣使用激光掃描共聚焦顯微鏡在完全相對濕度下進(jìn)行觀察，即可看到粘接界面的實際狀況。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

試樣過程中獲得數(shù)據(jù)信息使用APSS20.0軟件進(jìn)行處理，牙本質(zhì)微拉伸強度使用進(jìn)行表示。然后當(dāng)＜0.05時表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 實驗結(jié)果

2.1 微拉伸強度測試結(jié)果

經(jīng)過上述實驗方法之后，獲得每組試樣的微拉伸強度結(jié)果如表2所示。

表2 每組的微拉伸強度結(jié)果Tab.2 Micro-tensile strength results of each group

由表2可知，微拉伸強度從大到小的排序為A組＞D組＞E組＞C組＞B組，其中B組的處理方式會導(dǎo)致微拉伸強度最小。經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)分析之后，B組和另外4組之間微拉伸強度差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（＜0.05），而D組和E組之間無統(tǒng)計學(xué)差異（＞0.05），A組與C組之間也無統(tǒng)計學(xué)差異（＞0.05）。另外相比于A組，C組、D組、E組在微拉伸強度值上的差別沒有很明顯。所以能夠了解到使用完全吹干的處理方式將會降低唾液污染的牙本質(zhì)粘接強度；而使用水沖洗的方式能夠降低唾液對牙本質(zhì)粘接強度的影響。

2.2 激光掃描共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果

通過激光掃描共聚焦顯微鏡觀察之后得到如圖1所示的結(jié)果。

圖1 5組的顯微鏡觀察結(jié)果Fig.1 Microscope observation results of five group

由圖1可知，由于A組中乳牙牙本質(zhì)沒有經(jīng)過唾液污染，粘結(jié)劑能夠具有較好的滲透效果，有助于形成樹脂突，從圖中就可觀察到A組中有較長的樹脂突起。而另外4組中乳牙牙本質(zhì)受到唾液污染，雖然都經(jīng)過相應(yīng)的處理方式，但是其樹脂突起沒有A組的明顯，尤其是B組，唾液污染之后只進(jìn)行了完全吹干處理，然后得到的顯微鏡觀察結(jié)果就是樹脂突比較短而且少。C組、D組、E組受到唾液污染之后都經(jīng)過水沖洗，其中D組和C組還經(jīng)過了酸蝕處理，從圖中可以看出樹脂突比較長，且比較密集，從而能夠說明相比于B組的處理方式，這3種的處理方式更有助于乳牙牙本質(zhì)的修復(fù)效果。

3 討論

與恒牙牙本質(zhì)相比，乳牙牙本質(zhì)的礦化程度比較低，牙本質(zhì)小管比較粗大而且密度大，其中有機(jī)物含量相對較高，由于這些特性導(dǎo)致兒童乳牙牙本質(zhì)更容易受到唾液污染的影響，在進(jìn)行牙本質(zhì)修復(fù)時，唾液就會嚴(yán)重影響到粘接強度。所以乳牙更需要進(jìn)行唾液污染的處理，降低其對牙本質(zhì)粘接強度的影響。在此之前需要了解唾液如何影響到牙本質(zhì)粘接強度。

唾液中的主要成分就是水，占據(jù)99.4%，而其它成分為高分子化合物，比如糖蛋白、酶等，在唾液的所有成分中，有研究表明水和糖蛋白是影響牙本質(zhì)粘接強度的主要影響因素。其實在使用粘接技術(shù)過程中，牙齒存在一定的水分有利于粘接強度，水分還有助于樹脂的滲透，屬于粘接系統(tǒng)中重要的組成物質(zhì)。但是當(dāng)牙齒表面水分過多或者過于干燥時就會影響到粘接強度。唾液中的大部分成為為水，當(dāng)乳牙牙本質(zhì)受到唾液污染時，就會造成牙齒表面水分過多，從而影響到粘結(jié)劑的稀釋度，影響粘結(jié)劑的聚合，繼而影響到粘接強度。所以使用合適的處理方式處理唾液污染乳牙牙本質(zhì)表面，使其表面不至于太干燥或者也不至于太濕潤，才有利于降低唾液污染牙本質(zhì)的程度。另外唾液中含有糖蛋白能夠沉積在牙齒粘接面上，在乳液牙本質(zhì)表面形成一層蛋白質(zhì)薄膜，會阻礙粘結(jié)劑深入到小管中，就會影響到樹突的形成，繼而影響到乳牙牙本質(zhì)粘接強度。所以為了提高乳牙牙本質(zhì)粘接強度，需要使用合適的處理方式對唾液進(jìn)行處理，其處理的主要目的就是降低乳牙牙本質(zhì)表面的唾液，但是又不能使其表面過于干燥。另外本實驗中選擇的一個健康人的唾液作為材料，并沒有使用人工唾液，因為有研究表明健康人的唾液可以作為污染介質(zhì)，而且人工唾液畢竟和天然唾液存在成分的區(qū)別，為了使實驗更加準(zhǔn)確，選擇天然唾液更為合適。

不同的處理方式會造成乳牙牙本質(zhì)粘接強度的不同，相比于水沖洗的方式，使用完全吹干的方式，其乳牙牙本質(zhì)粘接強度最小，可見這種唾液處理方式影響到牙本質(zhì)的粘接強度最大，與另外4組相比，其微拉伸強度差異均具有統(tǒng)計學(xué)差異。而且根據(jù)顯微鏡觀察，使用完全吹干的方式，其樹突短小而稀少，所以牙本質(zhì)粘接強度最低。出現(xiàn)這種現(xiàn)象可能是因為完全吹干的處理方式會導(dǎo)致膠原纖維網(wǎng)塌陷，牙本質(zhì)表面會存在干燥的蛋白質(zhì)薄膜，從而影響到粘結(jié)劑深入到牙本質(zhì)小管中，就會造成乳牙牙本質(zhì)粘接界面的樹突短小且稀少，就會出現(xiàn)微拉伸強度值比較低的現(xiàn)象。所以在乳牙牙本質(zhì)修復(fù)過程中，盡量避免使用完全吹干的方式對唾液進(jìn)行處理。實驗中C組、D組、E組的處理方式會降低唾液污染對牙本質(zhì)粘接強度的影響，相比于A組，其粘接強度下降的趨勢并不明顯，均能夠獲得比較大的粘接強度，而通過顯微鏡觀察之后，這3種處理方式的牙本質(zhì)粘接界面均可獲得比較長且密的樹突，可見普通粘結(jié)劑在牙本質(zhì)的滲入效果比較好，能夠明顯降低唾液對乳牙牙本質(zhì)修復(fù)效果的影響。D組和E組的粘接強度相差不大，兩者之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義，所以酸蝕15 s和酸蝕30 s并不會存在比較大的區(qū)別。所以使用水沖洗或者水沖洗加上再酸蝕的處理方式能夠降低通用粘結(jié)劑光固化后唾液對乳牙牙本質(zhì)粘接強度的影響。

4 結(jié)語

通用粘結(jié)劑光固化后乳牙牙本質(zhì)受到唾液污染會降低其粘接強度，通過相應(yīng)的處理方式能夠降低唾液對牙本質(zhì)的影響，本文主要分析了4種不同處理方式，通過微拉伸強度測試和顯微鏡觀察可知，不管使用何種處理方式，唾液污染都會降低乳牙牙本質(zhì)粘接強度，通過使用合適的處理方式，能夠降低唾液污染對乳牙牙本質(zhì)粘接強度的影響。這4種處理方式中直接用完全吹干的方式中其粘接強度最小，并且顯微鏡觀察到的樹突比較短、少，所以相比于另外3種處理方式，在臨床中不建議使用完全吹干的處理方式。而使用水沖洗或者水沖洗加再酸化的處理方式更能夠降低唾液對牙本質(zhì)粘接強度的影響。