唐元春,招淑文,卓創(chuàng)近（佛山市中心血站機(jī)采科，廣東 佛山 528000）

隨著臨床輸血技術(shù)的不斷發(fā)展，臨床在進(jìn)行輸血治療過(guò)程中需確?；颊哐号c輸注血液的相容性，避免引起患者的輸血反應(yīng)。臨床認(rèn)為在輸血前進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，可有效預(yù)防患者在輸血后或輸血過(guò)程中發(fā)生輸血反應(yīng)。不規(guī)則抗體是人體在妊娠或者異體輸血等免疫刺激作用下生成的抗-A、抗-B 及抗-AB 之外的紅細(xì)胞血型抗體，主要包括免疫球蛋白G（IgG）及免疫球蛋白M（IgM）。不規(guī)則抗體的存在會(huì)增加交叉配血或者血型鑒定的難度，也會(huì)誘發(fā)自身免疫性溶血性疾病、免疫溶血性輸血反應(yīng)、新生兒溶血病及紅細(xì)胞輸注無(wú)效等不良反應(yīng)，嚴(yán)重影響臨床輸血安全及有效性［1-3］。因此，對(duì)獻(xiàn)血者實(shí)施不規(guī)則抗體篩查以明確有臨床意義的抗體對(duì)于保證輸血效果及安全有重要意義［4-6］。本次研究選取2018年1月至2021年5月佛山地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體的篩查結(jié)果。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月至2021年5月我中心血站無(wú)償獻(xiàn)血者的血液標(biāo)本共計(jì)90 000份。所有獻(xiàn)血者均符合《獻(xiàn)血者健康檢查要求》且自愿獻(xiàn)血。其中男47342例、女42658例；年齡18～60（35.45±3.23）歲。

1.2 方法 所用儀器及試劑如下：恒溫孵育器（FYQ型）、血型卡離心機(jī)（TD-3 型）、全自動(dòng)血型儀（PK7300），產(chǎn)自上海血液生物公司的抗體篩選細(xì)胞、抗體鑒定譜細(xì)胞、ABO反定型紅細(xì)胞、抗A/抗B單克隆標(biāo)準(zhǔn)血清及巰基試劑，產(chǎn)自長(zhǎng)春博訊的微柱凝膠抗人球蛋白卡。于全自動(dòng)血型分析儀96孔U型微板上實(shí)施ABO 正反定血型檢查，通過(guò)反定型“O”細(xì)胞對(duì)獻(xiàn)血者標(biāo)本不規(guī)則抗體進(jìn)行初步篩選，若篩選結(jié)果呈陽(yáng)性則應(yīng)用抗人球蛋白卡及抗體篩選細(xì)胞對(duì)不規(guī)則抗體進(jìn)行檢測(cè)，具體方式如下：對(duì)抗人球蛋白卡進(jìn)行標(biāo)記后分別加入50 μl濃度為0.5%的Ⅰ～Ⅲ篩查紅細(xì)胞，然后將50 μl獻(xiàn)血者血漿加入至各孔并于恒溫器中持續(xù)孵育（溫度：37℃，時(shí)間：15 min），然后對(duì)血漿進(jìn)行離心處理，離心速度：900 r/min、離心時(shí)間：2 min，離心速度：1 500 r/min、離心時(shí)間：3 min，對(duì)離心結(jié)果進(jìn)行觀察。通過(guò)譜細(xì)胞對(duì)抗體檢查陽(yáng)性獻(xiàn)血者標(biāo)本不規(guī)則抗體進(jìn)行鑒定，應(yīng)用巰基試劑對(duì)抗體IgG及IgM類(lèi)別進(jìn)行鑒定。

1.3 臨床觀察指標(biāo) （1）分析獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體檢出情況及分布情況；（2）分析不同性別及不同年度的獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體分布情況；（3）分析不同獻(xiàn)血次數(shù)及不同妊娠情況獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體分布情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)數(shù)資料通過(guò)例（百分率）表示，行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體檢出情況及分布情況分析 90 000份血液標(biāo)本中共計(jì)57 份血液標(biāo)本不規(guī)則抗體檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，構(gòu)成比為0.06%，其中，特異性抗體共計(jì)41份，構(gòu)成比為71.93%，其他16份為非特異性抗體，構(gòu)成比為28.07%，特異性抗體檢出率明顯高于非特異性抗體檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 不規(guī)則抗體檢出情況及分布情況[n（%）]

2.2 不同性別及不同年度獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體分布情況分析 女性獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率明顯高于男性獻(xiàn)血者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；不同年份獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同年度獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體分布情況分析（n）

2.3 不同獻(xiàn)血次數(shù)及不同妊娠情況獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體分布情況分析 初次獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率明顯高于多次獻(xiàn)血者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。有妊娠史獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率明顯高于無(wú)妊娠史獻(xiàn)血者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 不同妊娠情況及不同獻(xiàn)血次數(shù)獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體分布情況分析（n）

3 討論

紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體是指具有ABO血型系統(tǒng)以外的所有紅細(xì)胞血型系統(tǒng)所產(chǎn)生的抗體，抗體主要包括了紅細(xì)胞同種抗體以及自身抗體。不規(guī)則抗體是引起輸血反應(yīng)、新生兒溶血病、血型鑒定困難及疑難配血等主要原因［7］。在歐美地區(qū)等多個(gè)發(fā)達(dá)國(guó)家中，普遍采用紅細(xì)胞對(duì)獻(xiàn)血者體內(nèi)的不規(guī)則抗體進(jìn)行篩選，中國(guó)香港、臺(tái)灣等地區(qū)的采供血機(jī)構(gòu)將不規(guī)則抗體作為常規(guī)血液篩查項(xiàng)目［8］。在我國(guó)未要求對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行常規(guī)不規(guī)則抗體篩查，且對(duì)于抗體篩查操作未形成統(tǒng)一規(guī)范，國(guó)內(nèi)有學(xué)者認(rèn)為有條件的血液中心，應(yīng)開(kāi)展獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體篩查檢測(cè)，以減少或避免不規(guī)則抗體所致的輸血不良反應(yīng)［9］。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，臨床上出現(xiàn)因獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽(yáng)性而引起的交叉配血不合現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生，因此，對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查在輸血安全性方面具有積極重要的意義。

輸血是臨床搶救患者的重要手段之一，輸注冰凍血漿、單采血小板、去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞等血液制品是臨床救治急危重癥患者的重要手段，隨著臨床輸血技術(shù)的不斷發(fā)展，部分患者在接受同種異體血液后或者在輸血的過(guò)程中可能出現(xiàn)不同程度的輸血不良反應(yīng)，如發(fā)熱、寒戰(zhàn)、皮疹、皮膚瘙癢等，反應(yīng)強(qiáng)烈者還可產(chǎn)生遲發(fā)性或者急發(fā)性溶血性輸血不良反應(yīng)，輕則影響治療效果導(dǎo)致患者輸注無(wú)效，重則危及患者生命［10］。輸血治療以安全為前提，目前我國(guó)對(duì)采供血機(jī)構(gòu)提供的血液制品中不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)還沒(méi)有相關(guān)的規(guī)范和要求，輸注洗滌紅細(xì)胞可以避免或減少不規(guī)則抗體所致的輸血不良反應(yīng)，可將不規(guī)則抗體篩查陽(yáng)性的懸浮紅細(xì)胞制備為洗滌紅細(xì)胞應(yīng)用，以節(jié)約有限的血液資源［9］。由于血型檢測(cè)試劑的質(zhì)量和檢測(cè)水平的提高，醫(yī)療機(jī)構(gòu)及采供血機(jī)構(gòu)因?yàn)镽h血型、ABO血型鑒定誤差等造成的輸血反應(yīng)發(fā)生率極低，但是因不規(guī)則抗體引發(fā)的血型鑒定困難、交叉配血困難、正反定血型不一致及新生兒溶血病等現(xiàn)象仍然存在［11］。

不規(guī)則抗體分為兩種類(lèi)型，分別是IgM 型和IgG型。IgM 型不規(guī)則抗體可以通過(guò)生理鹽水與對(duì)應(yīng)的紅細(xì)胞直接連接產(chǎn)生凝集現(xiàn)象，這種凝集現(xiàn)象比較明顯，肉眼可見(jiàn)；而IgG 型不規(guī)則抗體以生理鹽水為介質(zhì)與對(duì)應(yīng)的紅細(xì)胞反應(yīng)是不會(huì)出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，只有致敏相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞，采用酶法、聚凝胺法、抗人球蛋白法、凝膠法等技術(shù)才會(huì)出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。多數(shù)不規(guī)則抗體是IgG型抗體，抗體效價(jià)較弱［12］。在輸血治療中，要把檢測(cè)的重點(diǎn)關(guān)注在對(duì)臨床有直接意義的血型抗體篩查中，不論該血型抗體是特異性的還是非特異性的，均有很大可能引起輸血的不良反應(yīng)［13］。在此次研究中，獻(xiàn)血人群中的不規(guī)則抗體檢測(cè)陽(yáng)性率為0.06%，特異性抗體及非特異性抗體的檢出率分別為71.93%、28.07%，特異性抗體檢出率明顯高于非特異性抗體檢出率。徐兆云等研究［14］中，不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率為0.07%，與本研究結(jié)果一致。非特異性抗體檢出率為28.07%且均為冷自身抗體，37℃環(huán)境下冷自身抗體引發(fā)免疫性輸血反應(yīng)的幾率較低，但是麻醉狀態(tài)或者低溫狀態(tài)下可通過(guò)激活補(bǔ)體誘發(fā)輸血反應(yīng)。紅細(xì)胞與其他血型紅細(xì)胞均可與冷自身抗體產(chǎn)生非特異性凝集反應(yīng)，不但會(huì)對(duì)患者輸血前的血型鑒定結(jié)果造成影響，還會(huì)對(duì)交叉配血試驗(yàn)造成干擾，故而在應(yīng)用于臨床治療前必須將血漿去除并制備成洗滌紅細(xì)胞。

在正常情況下，人體血液中是不會(huì)有不規(guī)則抗體，體內(nèi)的不規(guī)則抗體通常是通過(guò)輸血或妊娠期接觸抗原紅細(xì)胞后產(chǎn)生的。雖然不規(guī)則抗體的發(fā)生率不高，但在臨床輸血治療中是導(dǎo)致輸血配型不合、輸血不良反應(yīng)或無(wú)效輸血的主要原因。此次研究中，女性獻(xiàn)血者占獻(xiàn)血人群的47.4%，而女性獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體的陽(yáng)性檢出率明顯高于男性獻(xiàn)血者，有妊娠史獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率明顯高于無(wú)妊娠史的獻(xiàn)血者，原因是女性人群受到妊娠、分娩或者流產(chǎn)等免疫刺激明顯增加，并且隨著妊娠次數(shù)的增加，女性不規(guī)則抗體產(chǎn)生幾率也隨之升高，隨著二孩政策的放開(kāi)，這類(lèi)人群的數(shù)量也會(huì)漸漸增加。這也說(shuō)明了不規(guī)則抗體的產(chǎn)生主要跟免疫刺激有關(guān)。

此次研究中，不同年份獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與郭偉潔等［15］研究結(jié)果一致。初次獻(xiàn)血的獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率明顯高于多次獻(xiàn)血者，這與血站的管理手段密切相關(guān)，由于血站采用的血站管理信息系統(tǒng)能夠自動(dòng)屏蔽那些檢測(cè)出不規(guī)則抗體的獻(xiàn)血者，使其無(wú)法再次獻(xiàn)血，從而導(dǎo)致多次獻(xiàn)血的獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體的檢出率相對(duì)較低，但也有研究認(rèn)為，中國(guó)獻(xiàn)血人群意外抗體陽(yáng)性率低于一般隨機(jī)人群中的同種抗體檢出率，可能原因是臨床患者意外抗體陽(yáng)性率高于獻(xiàn)血者意外抗體陽(yáng)性率導(dǎo)致一般隨機(jī)人群平均意外抗體陽(yáng)性率高于獻(xiàn)血人群的意外抗體陽(yáng)性率［15］。

綜上所述，輸血在臨床救治危重患者的過(guò)程中發(fā)揮著極為關(guān)鍵的作用，為了保證血液質(zhì)量并為患者輸血安全提供保障，血站應(yīng)該保證所提供血液制品的安全性和有效性。不規(guī)則抗體屬于引發(fā)交叉配血及血型鑒定困難的重要誘發(fā)原因，為了充分保證輸血的有效性和安全性，推廣獻(xiàn)血者全面實(shí)施不規(guī)則抗體篩查具有重要意義。