張 瑞，周維強，馬 越，吳建平，雷趙民

（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，蘭州 730070；2.西北師范大學(xué)新農(nóng)村發(fā)展研究院，蘭州 730070）

機會豬是指出生時體重<1.20 kg的乳豬，一般占出生仔豬數(shù)的20%～30%，如果對這類仔豬不給予特殊的免疫增強、能量補給及飼養(yǎng)管理，其死亡率可達80%以上[1-2]。中國是生豬生產(chǎn)大國，飼養(yǎng)量和豬肉消費量均占世界總量的50%以上。但根據(jù)中國目前的飼養(yǎng)標準，一般養(yǎng)殖戶的仔豬成活率在70%左右，因此要想獲得更高的經(jīng)濟效益，就要在提高機會豬成活率上尋找利潤。

機會豬因體質(zhì)較弱、器官發(fā)育不完全等先天因素，攝入的初乳及常乳量都較少，在后期生長過程中會影響自身免疫系統(tǒng)的發(fā)育；但這種缺陷可通過早期營養(yǎng)管理促進生長獲得代償[3]。研究發(fā)現(xiàn)，胃腸道微生態(tài)環(huán)境的建立與仔豬后期健康密切相關(guān)。牛至精油因含較高的百里香酚和香芹芥酚而具有抗菌、抗氧化、促生長和緩解應(yīng)激的作用。研究發(fā)現(xiàn)，牛至精油可通過增加動物胃腸道有益菌（雙歧桿菌和乳酸等）的數(shù)量，抑制有害菌（大腸桿菌和金黃色葡萄球菌等）的繁殖促進飼料的消化吸收，進而提高動物的生長[4-6]。近年來，牛至精油在豬生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用。在繁育母豬飼糧中添加牛至精油可促進其生長，增加后代初生重和斷奶仔豬數(shù)[7]；在育肥豬飼糧中添加牛至精油可顯著提高肌肉的抗氧化能力[8]；在斷奶仔豬飼糧中添加牛至精油可降低斷奶應(yīng)激和腹瀉率[9]。然而有大量研究指出，雖然精油具有廣譜的抑菌和抗氧化活性，但在實際應(yīng)用中，精油的最低抑菌濃度與最佳飼喂量和飼喂成本間很難達到統(tǒng)一，因此建議將精油與其他成分相結(jié)合來提高飼喂效率[10]。初乳富含多種抗菌肽和免疫調(diào)節(jié)、生長因子，可為機體提供必要的營養(yǎng)成分，平衡腸道菌群，加強自然防御系統(tǒng)，促進生長[11-12]。多項研究表明，初乳有益于哺乳動物健康：牛初乳可以促進早產(chǎn)仔豬腸道結(jié)構(gòu)的完整性及對壞死性結(jié)腸炎的抵抗[13]；可以通過增加仔豬胃腸道中乳酸菌的數(shù)量調(diào)節(jié)腸道內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)[14]；可以通過增加食糜在仔豬腸道的停留時間來促進營養(yǎng)吸收，促進生長[15]。

目前，牛至精油作為單一飼料添加劑的研究甚多，且很多學(xué)者將研究重點放在如何減小仔豬的斷奶應(yīng)激及促生長方面，而對機會豬的關(guān)注較少。鑒于此，本試驗給出生后的機會豬灌服不同劑量的牛至精油和初乳復(fù)合物，探討其對機會豬生長性能、血清生化指標、抗氧化及免疫指標的影響，以期為機會豬的健康發(fā)展提供參考和試驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗所用牛至精油和初乳復(fù)合物由美國瑞科營養(yǎng)公司提供，主要成分為牛至精油及牛初乳提取物。該產(chǎn)品為棕黃色液體，主要營養(yǎng)成分含量為：粗蛋白質(zhì)2%，粗脂肪9%，粗纖維5%。

1.2 試驗設(shè)計與動物管理

試驗在甘肅省定西市西泰養(yǎng)殖有限公司進行，選擇128頭體況相近、胎次相近（2/3胎）且產(chǎn)仔數(shù)接近的大長二元雜交母豬，采用杜洛克公豬精液進行人工授精，確保配種成功后隨機分為4組，每組32頭母豬，所有母豬飼喂和管理水平相同，飼糧配方參照NRC（2012）妊娠和哺乳母豬營養(yǎng)需要進行配制。將初生體重<1.20 kg的仔豬定義為機會豬，對每組母豬所產(chǎn)仔豬中的機會豬根據(jù)試驗設(shè)計做不同處理。EC2組：共104頭機會豬，出生后灌服2 mL EC，共灌服1次；EC4組：共119頭機會豬，出生后灌服2 mL EC，24 h后再灌服1次，連續(xù)灌服2 d；EC6組：共119頭機會豬，出生后灌服2 mL EC，每隔24 h灌服1次，連續(xù)灌服3 d；對照組（CON）：共125頭機會豬，出生后不灌服EC。試驗期從出生到斷奶共21 d。灌服EC時，選擇2 mL按壓式定量出液泵，將泵頭放入機會豬口腔深處，每次灌服按壓1次。每窩仔豬中，除機會豬灌服EC處理外，其他管理均與正常仔豬相同，自由哺乳，自由飲水。

分娩母豬在預(yù)產(chǎn)期前第3天洗澡消毒后趕入產(chǎn)房等待生產(chǎn)，在此期間適當減料，提供充足飲水。生產(chǎn)后清理干凈仔豬身上黏液，稱重后打上耳標并記錄，協(xié)助所有仔豬吃母豬初乳，將機會豬固定于母豬的前側(cè)乳區(qū)，并不斷固定這種哺乳順序，確保機會豬補充足夠的母乳。

1.3 測定指標及方法

1.3.1 生長性能 分娩后對所有仔豬稱重，確定機會豬數(shù)量并計算其平均初生重，隨后對機會豬按照試驗設(shè)計做不同處理。試驗結(jié)束后記錄機會豬體重，用于計算斷奶重。

試驗期間，每天08:00觀察機會豬排便情況，記錄腹瀉頭數(shù)，進行腹瀉評分，計算腹瀉率、腹瀉頻率及腹瀉指數(shù)，仔豬腹瀉評分標準見表1[16]；隨時觀察機會豬的健康、治療和死亡情況。腹瀉率、腹瀉頻率和腹瀉指數(shù)計算方法如下：

表1 仔豬腹瀉評分標準Table 1 Scoring criteria for piglet diarrhea

腹瀉率（%）=腹瀉頭數(shù)/試驗豬總頭數(shù)×100%

腹瀉頻率（%）=Σ（腹瀉仔豬頭數(shù)×腹瀉天數(shù)）/（試驗豬總頭數(shù)×試驗天數(shù)）×100%

腹瀉指數(shù)=腹瀉評分之和/試驗豬總頭數(shù)

1.3.2 血清生化、抗氧化及免疫指標 試驗結(jié)束當天早晨,每窩選擇1頭接近平均體重的斷奶機會豬，前腔靜脈采血5 mL，室溫靜置1 h后，以3 000 r/min離心10 min，分離血清，-20 ℃保存待測以下指標。

血清生化指標：總蛋白（TP）采用雙縮脲法測定；白蛋白（ALB）采用溴甲酚綠法測定；球蛋白（GLB）和白球比（A/G）采用換算法；尿素氮（BUN）采用兩點動力法測定；谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活性采用連續(xù)監(jiān)測法測定。

血清抗氧化指標：超氧化物歧化酶（SOD）活性采用黃嘌呤氧化酶法測定；谷胱甘肽過氧化酶（GSH-Px）活性采用二硫代二硝基苯甲酸法測定。

血清免疫指標：免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）均采用酶聯(lián)免疫吸附法測定；結(jié)合珠蛋白（Hp）采用免疫比濁法測定。

以上各指標測定所用試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，測定方法按照試劑盒說明進行操作。

1.4 數(shù)據(jù)處理及分析

采用SPSS 21.0軟件單因素方差分析（One-Way ANOVA）不同處理對仔豬各項指標的影響，差異顯著時采用Duncan氏法進行多重比較，結(jié)果以平均值±標準差表示，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 EC處理對機會豬生長性能的影響

由表2可知，各組母豬所產(chǎn)機會豬的平均窩產(chǎn)仔頭數(shù)和平均初生重均無顯著差異（P>0.05）。而灌服牛至精油后，EC2、EC4及EC6組平均斷奶重和平均日增重均顯著高于對照組（P<0.05），且分別提高了7.16%和9.69%、9.76%和12.56%、11.06%和14.29%。機會豬平均斷奶重和平均日增重在3個試驗組之間無顯著差異（P>0.05）。

表2 各組機會豬生長性能Table 2 Growth performance of opportunity piglets in different groups

2.2 EC處理對機會豬腹瀉和死亡率的影響

由表3可知，與對照組相比，EC2、EC4及EC6組各腹瀉指標和EC4、EC6組死亡率均顯著低于對照組（P<0.05）。其中，EC4組腹瀉率比對照組降低68.25%，且EC4組腹瀉率和腹瀉頻率顯著低于EC2組（P<0.05）；EC4和EC6組的腹瀉指數(shù)和死亡率均顯著低于EC2組（P<0.05）。

表3 各組機會豬腹瀉指標和死亡率Table 3 Diarrhea indexes and mortality of opportunity piglets in different groups

2.3 EC處理對機會豬血清生化指標的影響

由表4可知，初生機會豬連續(xù)灌服3 d EC，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均顯著低于對照組（P<0.05），而EC2、EC4組與對照組間無顯著差異（P>0.05）；EC6組白蛋白含量顯著高于對照組，球蛋白含量顯著高于CON和EC2組（P<0.05）；EC6組總蛋白水平顯著高于對照組（P<0.05），并與EC2和EC4組間無顯著差異（P>0.05）。此外，尿素氮和白球比在各組間均無顯著差異（P>0.05）。

表4 各組機會豬血清生化指標測定結(jié)果Table 4 Determination results of serum biochemical indicators of opportunity piglets in different groups

2.4 EC處理對機會豬血清抗氧化性能的影響

由表5可知，EC4和EC6組超氧化物歧化酶活性顯著高于CON和EC2組（P<0.05），且比對照組分別提高了31.31%和45.54%；同時，EC6組谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著高于CON和EC2組，EC4組顯著高于對照組（P<0.05），EC4和EC6組較對照組分別提高了15.90%和20.46%。

表5 各組機會豬血清抗氧化酶活性Table 5 Serum antioxidant enzyme activities of opportunity piglets in different groups U/mL

2.5 EC處理對機會豬血清免疫性能的影響

由表6可知，E6組機會豬血清IgM和IgG水平均顯著高于CON和EC2組（P<0.05），且較對照組分別提高了18.43%和22.88%；IgA水平顯著高于CON、EC2和EC4組（P<0.05），且分別提高了3.46%、2.44%和14.94%。灌服EC對機會豬血清Hp含量無顯著影響（P>0.05），但隨著EC灌服量的增加，Hp含量呈一定降低趨勢。

表6 各組機會豬血清免疫免疫球蛋白含量Table 6 Serum immunoglobulin contents of opportunity piglets in different groups μg/mL

3 討 論

要想保證仔豬斷奶后的成活率及維持后期的生長發(fā)育，就必須確保斷奶前的仔豬體格健壯、消化功能和免疫系統(tǒng)正常、快速發(fā)育。因此需要盡早對機會豬進行營養(yǎng)干預(yù)，幫助其建立免疫消化系統(tǒng)，加強生長發(fā)育追趕能力。有研究報道，精油作為綠色安全型的天然飼料添加劑，因其自身獨特的芳香和揮發(fā)性氣味，通過刺激動物消化道，增加采食量；同時可增加動物腸道絨毛長度，擴大與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積進而促進消化吸收[17]。初乳中富含胰島素樣生長因子、表皮細胞生長因子，這些因子與腸道組織形態(tài)、上皮細胞分化等顯著相關(guān)，對幼齡仔豬的生長發(fā)育起重要作用[11]。此外，仔豬出生后第1天腸道黏膜細胞增加50%，第3天可增加1倍，在這一階段進行營養(yǎng)干預(yù)顯得尤為重要[18]。因此，本研究選擇在機會豬出生后3 d內(nèi)進行營養(yǎng)干預(yù)，盡可能幫助其建立消化免疫系統(tǒng)，結(jié)果表明，出生后3 d 內(nèi)灌服EC可增加機會豬的斷奶重和平均日增重。

腹瀉是造成仔豬生長緩慢和高死亡率的主要原因，給養(yǎng)豬生產(chǎn)造成了嚴重損失。一般情況下，突然補飼、環(huán)境改變、腸道菌群失衡以及先天免疫系統(tǒng)發(fā)育不全容易造成仔豬腹瀉，而機會豬因體重小、免疫系統(tǒng)不健全等因素更容易受到腹瀉威脅。研究表明，牛至精油對新生犢牛具有良好的抗腹瀉作用[6]，這是因為牛至精油可以增加腸道有益菌的數(shù)量，維持腸道菌群環(huán)境穩(wěn)定，進而促進機體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收、抵抗致病微生物的入侵、刺激免疫系統(tǒng)成熟、降低腹瀉的發(fā)生[19]；此外，牛至精油還可以提高腸道中精胺的濃度，發(fā)揮調(diào)控腸道吸收和消化功能的作用[20]。本研究中，用腹瀉率表示試驗期間發(fā)生腹瀉的機會豬頭數(shù)，用腹瀉頻率表示腹瀉發(fā)生的時間長短，用腹瀉指數(shù)表示腹瀉的嚴重程度，結(jié)果表明，灌服EC顯著降低了初生機會豬的各項腹瀉指標和死亡率，且連續(xù)灌服2 d的抗腹瀉效果優(yōu)于灌服1和3 d的。

血清生化指標反映機體的營養(yǎng)健康水平和生長發(fā)育狀態(tài)，是檢測機體健康水平和環(huán)境適應(yīng)能力的重要手段。谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是肝細胞內(nèi)酶，在氨基酸合成與分解代謝中發(fā)揮著重要作用，也是判斷肝臟受損程度最基本的指標[21]。血清總蛋白可分為白蛋白和球蛋白兩類，主要功能是維持血液滲透壓、運輸營養(yǎng)物質(zhì)，可反映機體健康及免疫水平[22]。尿素氮主要通過鳥氨酸循環(huán)合成，是蛋白質(zhì)、氨基酸代謝的終產(chǎn)物，可以準確反映動物機體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀況[23]。研究發(fā)現(xiàn)，精油有抑制肝損傷小鼠血液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性升高的作用，具有保護肝臟的功能[21]；精油還可提高斷奶仔豬血清總蛋白水平、降低尿素氮含量[23]，這可能與其提高食欲，使采食量增加、蛋白質(zhì)攝入增加有關(guān)。此外，精油能通過刺激消化道及胃腸道消化酶活性而促進營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。本研究中，連續(xù)灌服3 d EC，機會豬血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著低于對照組，而且白蛋白和球蛋白含量極顯著高于對照組，說明灌服EC促進了機會豬對蛋白質(zhì)的利用效率。

氧化應(yīng)激是導(dǎo)致動物組織和器官損傷的重要原因之一，組織損傷反過來又會影響其生長性能及健康水平。機會豬較正常體重的仔豬而言，更易受到疾病和生存環(huán)境等方面的挑戰(zhàn)，這些應(yīng)激會增加體內(nèi)活性氧的產(chǎn)生，進而出現(xiàn)氧化應(yīng)激反應(yīng)。精油的抗氧化作用主要體現(xiàn)在：①精油中的酚類物質(zhì)與自由基反應(yīng)生成相對穩(wěn)定的物質(zhì)；②精油中的酚類物質(zhì)可與金屬離子螯合，防止由金屬離子誘導(dǎo)的自由基產(chǎn)生；③精油中的酚類物質(zhì)可以阻斷脂質(zhì)過氧化鏈式反應(yīng)；④精油的抗氧化活性物質(zhì)通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)刺激抗氧化酶的分泌[24-25]。研究表明，牛至精油可以通過激活Nrf2-ARE信號通路增強仔豬小腸上皮細胞中SOD和GSH基因的表達，降低H2O2誘導(dǎo)的細胞損傷[26]；薰衣草精油可通過Nrf2/HO-1通路提高機體的抗氧化能力[27]。本研究中，給初生機會豬連續(xù)灌服3 d EC，其血清中SOD和GSH-Px活性顯著高于對照組，說明連續(xù)灌服牛至精油可以提高機會豬血清中抗氧化酶水平。

機體的免疫系統(tǒng)包括免疫器官、免疫細胞和免疫分子，免疫球蛋白是免疫分子的一類，主要作用是活化補體，并結(jié)合細胞表面的Fc受體發(fā)揮一定的生物學(xué)作用。其中，IgG是唯一能夠通過胎盤，由母體轉(zhuǎn)移給胎兒的自然被動免疫類型；IgM在機體發(fā)育過程中最早出現(xiàn)，最先發(fā)揮作用；IgA可以通過母體初乳傳遞給胎兒，增強自然被動免疫能力[28-29]。研究發(fā)現(xiàn)，精油主要通過緩解炎癥反應(yīng)和提高抗氧化能力來增強動物的免疫能力[30]；同時，初乳中富含免疫球蛋白，可以為新生兒提供充足的被動免疫力，保護其免受感染[11]。Zeng等[31]在斷奶仔豬飼糧中添加精油發(fā)現(xiàn)，該處理可以提高仔豬血液中IgA和IgG水平。 本研究中，初生機會豬連續(xù)灌服3 d EC可提高血清中IgG、IgM、IgA含量，增強了自身免疫力。

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果顯示，給初生機會豬灌服EC可顯著提高其生長性能、免疫性能和抗氧化能力：出生后連續(xù)灌服2 d EC可顯著降低機會豬各腹瀉指標和死亡率；而連續(xù)灌服3 d可提高機會豬的免疫性能和抗氧化性能。牛至精油和初乳復(fù)合物的應(yīng)用可以提高機會豬的生長追趕能力，在豬生產(chǎn)中的應(yīng)用前景廣闊。