何 策，王 超，陳 純，王婷婷

（浙江農(nóng)林大學農(nóng)業(yè)與食品科學學院，浙江省農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)改良技術(shù)研究重點實驗室，浙江杭州 311300）

桑黃是一種珍貴的食藥用菌，這一名稱最早在唐朝的《藥性論》中出現(xiàn)，但這些時期的“桑黃”與現(xiàn)在所稱的有所不同，學者現(xiàn)今將桑黃歸類為一個新屬，且證實正宗的桑樹桑黃生長在桑屬的樹干上，是一種多年生、木栓質(zhì)的纖孔菌，名為桑黃纖孔菌（Inonotus sanghuang）[1-2]。早期對桑黃的研究主要集中在火木針層孔菌（P.igniarius）、裂蹄針層孔菌（P.linteus）和鮑氏針層孔菌（P.baumii）上[3]。這些研究表明桑黃具有降血脂、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫和保肝護肝[4]等多種重要生理功能。桑黃含有多種活性成分，熟知的有多糖、黃酮、三萜類、吡喃酮和多酚類等物質(zhì)，除此之外還有多種酶類[5]。其中三萜類物質(zhì)的研究是目前非常熱門的研究方向[6]，其具有抗腫瘤[7]、抗病毒[8]、抗菌[9]以及消炎鎮(zhèn)痛[10]等生物學特性，可以用于多種疾病的研究和臨床治療。

目前三萜類化合物的提取工藝有超聲提取、高剪切提取、微波提取和雙水相提取等。梁佳等[11]研究了微波法提取桑黃（P.igniarius）總?cè)频墓に?，得到了微波提取總?cè)频淖罴褩l件，但提取率較低，僅有1.48 mg/g。謝江寧等[12]采用正交試驗設(shè)計優(yōu)化超聲提取桑黃（P.igniarius）總?cè)频墓に?，得到了一種用時少、提取率高的方法，最終獲得了9.40 mg/g的提取率，但由于正交試驗的局限性不能很好地反映整個區(qū)域上因素的最佳組合。而于小鳳等[13]的研究雖然完善了這一點，但是用到的桑黃同為火木針層孔菌（P.igniarius），并非桑黃纖孔菌。研究表明桑樹桑黃中總?cè)频暮勘绕渌N的桑黃要高出許多[14]，可見其相較其他種的桑黃具有更好的研究價值，但目前對桑樹桑黃提取總?cè)频墓に嚰捌潴w外活性的研究還少有報道。

本研究選用超聲波法提取桑樹桑黃子實體中的三萜類化合物，并在單因素實驗的基礎(chǔ)上采用響應(yīng)面法優(yōu)選最佳方案，并對總?cè)七M行體外降血脂和抗氧化實驗，以期為開發(fā)天然有效的降血脂和抗氧化產(chǎn)品提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

桑樹桑黃子實體 由浙江省農(nóng)業(yè)科學研究院提供；甘氨膽酸鈉（批號：Y28F10C81486）、?；悄懰徕c（批號：L1715127）、膽酸鈉（批號：L24F11F108900）、胃蛋白酶（批號：Y27M10J84202）、胰蛋白酶（批號：R11J10D92532）、齊墩果酸（批號：H04J9Z62784）、維生素C（批號：W12J11S115700） 上海源葉生物科技有限公司；考來烯胺散（20141108） 南京厚生藥業(yè)有限公司；1,1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）（D9132）、2,2-聯(lián)氮-雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）（ABTS）（SLBF4684V）、TPTZ（K1319026）Sigma公司；其余試劑 均為分析純。

UV-5500紫外可見分光光度計 上海元析儀器有限公司；RE-52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海亞榮生化儀器公司；SC-04離心機 安徽中科中佳科學儀器有限公司；HH-4數(shù)顯恒溫振蕩器 常州恒德儀器制造有限公司；DS-7510DTH超聲清洗機 小美超聲儀器有限公司；Nicolet6700傅立葉紅外光譜儀 美國ThermoElectron公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 桑樹桑黃總?cè)频奶崛」に?先將桑樹桑黃子實體置于鼓風干燥箱中烘干至恒重，取出后將其粉碎，過40目篩，密封保存于玻璃罐中。稱取適量桑黃于錐形瓶中，加入75%的乙醇溶解，振蕩均勻后于55 ℃的溫度下進行超聲輔助提取，固定提取功率為300 W，頻率為40 kHz。45 min后取出，在4000 r/min的條件下離心18 min，收集上層清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中揮去溶劑[15]，最后得到桑樹桑黃總?cè)铺崛∥铩?/p>

1.2.2 單因素實驗

1.2.2.1 料液比對總?cè)频寐实挠绊?按照提取溫度55 ℃，提取時間45 min，乙醇濃度為75%，分別考察料液比為1:5、1:10、1:15、1:20、1:25（g/mL）時對總?cè)频寐实挠绊憽?/p>

1.2.2.2 提取溫度對總?cè)频寐实挠绊?按照料液比為1:20 （g/mL），提取時間45 min，乙醇濃度為75%，分別考察提取溫度為25、35、45、55、65 ℃時對總?cè)频寐实挠绊憽?/p>

1.2.2.3 提取時間對總?cè)频寐实挠绊?按照料液比為1:20 （g/mL），提取溫度55 ℃，乙醇濃度為75%，分別考察提取時間為25、35、45、55、65 min時對總?cè)频寐实挠绊憽?/p>

1.2.2.4 乙醇濃度對總?cè)频寐实挠绊?按照料液比為1:20 （g/mL），提取時間45 min，提取溫度55 ℃，分別考察乙醇濃度為55%、65%、75%、85%、95%時對總?cè)频寐实挠绊憽?/p>

1.2.3 響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝 基于單因素實驗的結(jié)果，分別選擇提取時間（A）、乙醇濃度（B）、提取溫度（C）和料液比（D）為自變量，以總?cè)频牡寐首鳛轫憫?yīng)值，優(yōu)化總?cè)频奶崛」に?，試驗設(shè)計見表1。

表1 響應(yīng)面試驗因素水平表Table 1 Factors and levels table of the response surface experiment

1.2.4 總?cè)坪康臏y定

1.2.4.1 齊墩果酸標準曲線的建立 準確稱取20 mg的齊墩果酸樣品溶解于乙醇中，定容至刻度線得到0.2 mg/mL的標準溶液。吸取標準液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL于7支試管中，水浴蒸干溶劑。向其中加入0.2 mL 5%的香草醛-冰醋酸溶液（需新鮮配制），再加入0.8 mL高氯酸，振蕩均勻，在75 ℃恒溫水浴加熱18 min后取出快速冷卻，加入乙酸乙酯定容至5 mL，在552 nm處測定吸光值[16]。以吸光值為縱坐標，齊墩果酸的含量為橫坐標，繪制標準曲線，得到回歸方程為：y=10.161x+0.061，R2=0.9986。

1.2.4.2 總?cè)坪康臏y定 選取20 mg的總?cè)铺崛∥镉谠嚬苤校凑?.2.4.1的方法（香草醛-冰醋酸-高氯酸）測定出吸光值，再根據(jù)標準曲線法計算出總?cè)频暮俊？側(cè)频牡寐拾聪率接嬎恪?/p>

式中：W表示總?cè)频寐剩?；c表示根據(jù)吸光值計算出的溶液質(zhì)量濃度，mg/mL；D表示溶液稀釋倍數(shù)；V表示定容的體積，mL；m表示桑黃的質(zhì)量，mg。

1.2.5 桑樹桑黃總?cè)企w外降血脂活性試驗

1.2.5.1 膽酸鹽標準曲線的建立 分別選取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 μmol/mL的甘氨膽酸鈉2 mL于試管中，加入5 mL質(zhì)量分數(shù)為60%的濃硫酸溶液，在70 ℃的恒溫水浴鍋下反應(yīng)20 min，取出后用冰水冷卻5 min，在387 nm處測定吸光值[17]。以甘氨膽酸鈉含量為橫坐標，吸光值為縱坐標建立標準曲線，求得標準曲線線性方程為：y=1.312x+0.1244，R2=0.9969。

?；悄懰徕c和膽酸鈉建立標準曲線的方法同上，求得?；悄懰徕c的標準曲線線性方程為：y=2.677x-0.0702，R2=0.9954。膽酸鈉的標準曲線線性方程為：y=4.013x+0.1287，R2=0.9984。

1.2.5.2 總?cè)平Y(jié)合膽酸鹽能力的測定 向錐形瓶中分別加入20、40、60、80、100 mg/mL的桑樹桑黃總?cè)? mL，接著依次加入10 mg/mL的胃蛋白酶1 mL和10 μmol/mL的鹽酸溶液3 mL，在37 ℃的條件下恒溫振蕩培養(yǎng)1 h。再用10 μmol/mL的氫氧化鈉溶液將pH調(diào)節(jié)至6.4，然后加入配制好的10 mg/mL胰蛋白酶4 mL，在37 ℃的條件下恒溫振蕩培養(yǎng)1 h。加入1 μmol/mL的膽酸鹽4 mL，在37 ℃的條件下恒溫振蕩培養(yǎng)1 h，將消化物轉(zhuǎn)入離心管，4000 r/min離心18 min，取上清液測定吸光度，根據(jù)標準曲線法計算膽酸鹽結(jié)合量[18]。以80 mg/mL考來烯胺作為陽性對照，評價總?cè)茖δ懰猁}的結(jié)合能力。

1.2.6 桑樹桑黃總?cè)企w外抗氧化活性試驗

1.2.6.1 對DPPH自由基清除能力的測定 參考Heleno等[19]的方法，首先制備0.02 mmol/L的DPPH乙醇溶液，分別吸取2 mL于不同的試管中，向其中加入0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、1、1.5 mg/mL的總?cè)铺荻热芤? mL，混勻，在暗室內(nèi)常溫反應(yīng)0.5 h，然后在517 nm處測定其吸光值。以總?cè)频囊掖既芤鹤鳛榭瞻捉M，DPPH的乙醇溶液作為對照組，以VC作為陽性對照品，根據(jù)下式計算DPPH自由基清除率：

式中：Ao表示對照組的吸光值；As表示總?cè)婆cDPPH溶液的吸光值；A1表示空白組的吸光值。

1.2.6.2 對ABTS自由基清除能力的測定 參考Singh等[20]的方法制備ABTS工作液：取7 mmol/L的ABTS水溶液0.5 mL和2.45 mmol/L的過硫酸鉀溶液0.5 mL，混勻，在暗室內(nèi)反應(yīng)15 h，得到ABTS母液。將ABTS母液用磷酸緩沖液稀釋至其在734 nm處的吸光值為0.7±0.1，即得ABTS工作液。

配制0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、1、1.5 mg/mL的總?cè)铺荻热芤杭尤氲紸BTS工作液中，混勻后在734 nm處測定吸光值。以磷酸緩沖液與總?cè)频奈庵底鳛榭瞻捉M吸光值，蒸餾水與ABTS的吸光值作為對照組吸光值。以VC作為陽性對照品，根據(jù)下式計算ABTS自由基清除率：

式中：Ao表示對照組的吸光值；As表示總?cè)婆cABTS溶液的吸光值；A1表示空白組的吸光值。

1.2.6.3 鐵離子還原法測定 參考Benzie等[21]的方法用10 mmol/L的TPTZ、0.3 mol/L的乙酸和20 mmol/L的三氯化鐵溶液以1:10:1的體積比制備FRAP溶液。

建立硫酸亞鐵標準曲線[22]：分別選取0.5、1.5、2.5、3.5、4.5 mmol/L的硫酸亞鐵標準溶液0.08 mL于試管中，加入4 mL的FRAP溶液，混合均勻后置于37 ℃的恒溫水浴中反應(yīng)10 min，在593 nm處測定其吸光值，以硫酸亞鐵的濃度為橫坐標，吸光值為縱坐標，得到的標準曲線方程為：y=0.267x-0.0266，R2=0.9919。

精確吸取0.5、1、2、3、4 mg/mL的總?cè)迫芤河谠嚬苤?，加?.5 mL的FRAP溶液，振蕩均勻后在37 ℃的水浴鍋中反應(yīng)10 min，于593 nm處測定吸光度值。分別以0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL的VC作為陽性對照品，各物質(zhì)的抗氧化值以FRAP值表示：以標準曲線法計算出硫酸亞鐵的濃度即為FRAP值[23]。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)使用SPSS 21.0軟件進行統(tǒng)計學分析，試驗圖表均采用Origin 2017軟件進行繪制，響應(yīng)面試驗使用Design-Expert 8.0.6進行實驗設(shè)計和數(shù)據(jù)分析，每組試驗均重復3次，試驗結(jié)果以平均值±標準差來表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素實驗

2.1.1 料液比對總?cè)频寐实挠绊?由圖1可知，在料液比為1:5～1:20（g/mL）時，總?cè)频牡寐孰S著料液比的增大而增大，這是因為適當高濃度的料液比加快了傳質(zhì)過程[24]。但當料液比超過1:20 （g/mL）時，總?cè)频牡寐史炊陆?，由于乙醇的體積過少使得與溶劑的接觸面積減小，受到的超聲波作用也減少，使得總?cè)频寐氏陆担赃x擇料液比為1:20（g/mL）。

圖1 料液比對總?cè)频寐实挠绊慒ig.1 Effect of solvent-to-solid ratio on extraction of total triterpenoids

2.1.2 提取時間對總?cè)频寐实挠绊?如圖2所示，總?cè)频牡寐孰S超聲時間的延長呈現(xiàn)先升高再降低的趨勢，當時間為45 min時達到最大值。分析其原因，超聲波形成大量空化氣泡，增加了溶劑與溶質(zhì)之間的傳質(zhì)和相互作用[15]。但當超聲時間逐漸延長時，長時間的加熱會使三萜物質(zhì)的結(jié)構(gòu)遭到破壞，影響了提取效率[25]。因此45 min的提取時間為最佳選擇。

圖2 提取時間對總?cè)频寐实挠绊慒ig.2 Effect of reaction time on extraction of total triterpenoids

2.1.3 提取溫度對總?cè)频寐实挠绊?圖3表明，溫度為25～55 ℃時總?cè)频牡寐试谥饾u遞增，但溫度在55～65 ℃區(qū)間時，總?cè)频寐史炊陆?。其原因是當溫度適當升高時，可以加快物質(zhì)分子之間的運動速度，使總?cè)苹衔镏g傳導性增加，溶質(zhì)可以充分溶解在其中。但當溫度過高時可能會使桑黃總?cè)频慕Y(jié)構(gòu)遭到破壞、氧化、分解[26-27]，因此選擇55 ℃為最佳提取溫度。

2.1.4 乙醇濃度對總?cè)频寐实挠绊?乙醇濃度為55%～75%時，總?cè)频牡寐孰m然沒有大幅度的增加，但當濃度超過75%時，總?cè)频牡寐书_始下降?？赡苁且驗楫斠掖紳舛冗^大時，其他醇溶性雜質(zhì)溶出，導致三萜類組分的溶出量相對減少[28]，因此選擇乙醇濃度75%為最佳提取濃度。

圖3 提取溫度對總?cè)频寐实挠绊慒ig.3 Effect of reaction temperature on extraction of total triterpenoids

圖4 乙醇濃度對總?cè)频寐实挠绊慒ig.4 Effect of reaction ethanol concentration on extraction of total triterpenoids

2.2 響應(yīng)面法優(yōu)化

2.2.1 響應(yīng)面模型建立與結(jié)果 應(yīng)用Design-Expert軟件對實驗結(jié)果進行多元回歸擬合分析，試驗結(jié)果見表2，得到桑樹桑黃總?cè)频寐逝c超聲提取各因素變量間的二次方程模型為 Y=11.94+0.45A+0.28B+0.5C+0.37D+0.24AB+0.18AC+0.28AD+0.38BC-0.13BD+0.33CD-0.94A2-0.6B2-0.74C2-0.68D2。

由表3可知，此模型P＜0.0001，說明該回歸模型的差異性極顯著，配合失擬項的值0.1771＞0.05，這表明在上述區(qū)間內(nèi)整個模型擬合度佳；該模型的R2=0.9686，表面該模型的線性關(guān)系顯著，調(diào)整后的Radj2=0.9372，表明模型可以解釋93.72%的響應(yīng)變異性。

從試驗的方差分析中得出方程中的A、B、C、D項對總?cè)频牡寐视绊懢鶚O顯著（P＜0.01），其中C項F值最大，說明對總?cè)频寐视绊戄^大的因素是提取溫度，即各因素對試驗結(jié)果的影響程度分別是：提取溫度＞提取時間＞料液比＞乙醇濃度，因此在試驗中應(yīng)嚴格控制提取溫度。在交互項中，AC與BD的交互作用不顯著（P＞0.05），AB與AD的交互作用顯著（P＜0.05），BC與CD的交互作用極顯著（P＜0.01）。由此可得，乙醇濃度與提取溫度、提取溫度與料液比兩兩因素之間的交互作用對總?cè)频寐实挠绊戄^大。二次項A2、B2、C2、D2影響均極顯著（P＜0.01）。

響應(yīng)面圖能較為直觀地反映出各因素間交互作用對響應(yīng)值的影響，曲面越陡峭、傾斜程度越高說明影響越大[29]。由圖5可知，AB、AD、BC、CD的曲面較為陡峭，說明這些因素之間的交互作用顯著，而AC與BD的曲面彎曲程度較小，表明交互作用不顯著，這與方差分析的結(jié)果基本一致。

表2 響應(yīng)面設(shè)計與試驗結(jié)果Table 2 Design and results of response surface experiment

2.2.2 最優(yōu)提取條件 對模型進行最優(yōu)工藝的分析，得到最佳提取條件為：提取時間49.35 min、乙醇濃度79.66%、提取溫度61.22 ℃，料液比為1:22.35（g/mL），預測桑樹桑黃總?cè)频淖罡叩寐士蛇_到12.35%。為了便于操作，將此四因素的水平分別調(diào)整為提取時間49 min、乙醇濃度為80%、提取溫度為61 ℃，料液比為1:22 （g/mL）。調(diào)整后的驗證試驗表明，總?cè)频寐士蛇_12.32%±0.17%，非常接近預測值，表明此模型可以用于分析桑樹桑黃總?cè)铺崛」に嚨膬?yōu)化。

表3 方差分析Table 3 Analysis of variances

2.3 桑樹桑黃總?cè)企w外結(jié)合膽酸鹽研究結(jié)果

2.3.1 桑樹桑黃總?cè)茖δ懰猁}的結(jié)合量 桑樹桑黃總?cè)婆c膽酸鹽的結(jié)合能力如圖6所示，在特定范圍內(nèi)，總?cè)频馁|(zhì)量濃度與膽酸鹽的結(jié)合量呈正相關(guān)，當質(zhì)量濃度為20～60 mg/mL時，總?cè)茖Ω拾蹦懰徕c、?；悄懰徕c和膽酸鈉的結(jié)合量均顯著性升高（P＜0.05），在質(zhì)量濃度為80～100 mg/mL時，總?cè)婆c膽酸鹽的結(jié)合接近飽和狀態(tài)，其與?；悄懰徕c、膽酸鈉的結(jié)合量無顯著性變化（P＞0.05），對甘氨膽酸鈉的結(jié)合量顯著下降（P＜0.05）。在質(zhì)量濃度為80 mg/mL時對膽酸鹽的結(jié)合量最大。

2.3.2 桑樹桑黃總?cè)频捏w外降血脂活性 考來烯胺（Colestyramine）是一種常見的降血脂藥物，主要作用于體內(nèi)的膽酸或膽固醇，能有效改善高血脂癥患者的血脂水平，具有較好的臨床療效[30]。實驗以80 mg/mL考來烯胺結(jié)合膽酸鹽的能力作為對照[31]，測定同質(zhì)量濃度下桑樹桑黃總?cè)婆c膽酸鹽的結(jié)合量，并將結(jié)果作為數(shù)值比率進行比較。結(jié)果如表4所示，總?cè)茖Ω拾蹦懰徕c、?；悄懰徕c和膽酸鈉的結(jié)合能力相當于同劑量考來烯胺的50.93%、52.14%和43.06%，說明桑樹桑黃總?cè)凭哂休^好的結(jié)合膽酸鹽的能力。膽酸鹽被結(jié)合后含量減少，會促使肝臟中的膽固醇降解生成膽酸鹽以維持動態(tài)平衡，從而使膽固醇降低達到降血脂的目的[17]。因此可以表明桑樹桑黃總?cè)凭哂辛己玫捏w外降血脂活性。

圖5 各因素交互作用的響應(yīng)面圖和等高線圖Fig.5 Response surface and contour plots of the interaction of various factors

圖6 桑樹桑黃總?cè)茖δ懰猁}的結(jié)合量Fig.6 The binding amount of total triterpenoids to cholic acid salt in Inonotue sanghuang

2.4 桑樹桑黃總?cè)企w外抗氧化結(jié)果

2.4.1 清除DPPH自由基的能力 VC和桑樹桑黃總?cè)茖PPH自由基的清除能力如圖7所示，在試驗范圍內(nèi)，兩種物質(zhì)的質(zhì)量濃度越大，清除率越高。當VC的質(zhì)量濃度達到1.0 mg/mL時，其清除作用逐漸平穩(wěn)，但總體的清除能力均大于桑樹桑黃總?cè)?。在質(zhì)量濃度為0.1～1.5 mg/mL范圍內(nèi)，桑樹桑黃總?cè)魄宄鼶PPH自由基的IC50為0.304 mg/mL，VC的IC50為0.060 mg/mL。當質(zhì)量濃度達到1.5 mg/mL時，總?cè)频那宄饔眠_到了86.45%±2.16%，相當于同質(zhì)量濃度VC的93%，證明桑樹桑黃總?cè)凭哂辛己玫那宄鼶PPH自由基的能力。

2.4.2 清除ABTS自由基的能力 VC和桑樹桑黃總?cè)茖BTS自由基的清除能力如圖8所示，在試驗范圍內(nèi)，兩種物質(zhì)呈現(xiàn)出良好的劑量-效應(yīng)關(guān)系，但VC的清除能力總體大于總?cè)啤８鶕?jù)線性回歸方程分析，總?cè)魄宄鼳BTS的自由基的IC50值為0.520 mg/mL，VC的IC50為0.197 mg/mL。當質(zhì)量濃度為1.5 mg/mL時，總?cè)频那宄饔眠_到了80.34%±2.21%，相當于同質(zhì)量濃度VC的87%，證明桑樹桑黃總?cè)凭哂辛己玫那宄鼳BTS自由基的能力。

表4 桑樹桑黃總?cè)茖δ懰猁}的結(jié)合能力Table 4 The binding capacity of total triterpenoids from Inonotus sanghuang to bile salts in vitro

圖7 桑樹桑黃總?cè)频腄PPH自由基清除能力Fig.7 DPPH free radical scavenging ability of total triterpenoids from Inonotus sanghuang

圖8 桑樹桑黃總?cè)频腁BTS自由基清除能力Fig.8 ABTS free radical scavenging ability of total triterpenoids from Inonotus sanghuang

2.4.3 鐵離子的還原能力 Fe3+-TPTZ在抗氧化物質(zhì)的作用下時會轉(zhuǎn)變成Fe2+-TPTZ，溶液的顏色也會由黃綠色變成藍色，在597 nm處有最大吸光值[32]。當質(zhì)量濃度為0.5 mg/mL時，VC和總?cè)频牡腇RAP值分別為8.01和2.49 mmol/L，VC的還原能力大于總?cè)?。但當總?cè)频馁|(zhì)量濃度為4.0 mg/mL時，其FRAP值可達7.54 mmol/L。由此可見桑樹桑黃總?cè)频倪€原能力雖小于VC，但當達到足夠大的質(zhì)量濃度時，其還原能力也會提高。

3 結(jié)論

選用超聲波法提取桑樹桑黃子實體中的三萜類化合物，在單因素試實驗的基礎(chǔ)上采用響應(yīng)面法優(yōu)化了提取桑樹桑黃總?cè)频墓に?，結(jié)果表明，提取時間49 min、乙醇濃度為80%、提取溫度為61 ℃，料液比為1:22 （g/mL），總?cè)频寐士蛇_12.32%±0.17%，與模型預測值非常接近，說明此工藝參數(shù)可行，且總?cè)频牡寐矢哂谥暗难芯拷Y(jié)果[11-13]。

桑樹桑黃總?cè)凭哂休^好的體外降血脂活性，且在一定范圍內(nèi)，總?cè)频馁|(zhì)量濃度越大結(jié)合膽酸鹽的能力越強，在質(zhì)量濃度為80 mg/mL時結(jié)合量最大。其體外結(jié)合甘氨膽酸鈉、?；悄懰徕c、膽酸鈉的能力為同等劑量考來烯胺的50.93%、52.14%和43.06%。桑樹桑黃總?cè)七€具有較好的還原能力和抗氧化活性，其清除DPPH和ABTS自由基的IC50值分別為0.304和0.520 mg/mL，其FRAP值可達7.54 mmol/L，雖然低于陽性對照品VC，但具有一定的參考價值。

圖9 VC和桑樹桑黃總?cè)频倪€原能力Fig.9 The reduction capacity of VC and total triterpenoids from Inonotus sanghuang

本文對桑樹桑黃的降血脂和抗氧化活性進行了初步的探索，為開發(fā)桑樹桑黃提供了一定的理論參考。但桑樹桑黃生長周期長，數(shù)量少，對其有效組分的分離純化亟待進一步探討，以提高利用率；且桑樹桑黃總?cè)瞥煞謴碗s，對其構(gòu)效關(guān)系及體內(nèi)降血脂抗氧化活性也需要進行深入研究。