王美菊　馬萍

摘? 要：為了解甘肅省天水市雞場(chǎng)禽白血病的流行情況，筆者采用實(shí)時(shí)熒光PCR方法對(duì)2020—2021年采集的24家規(guī)?；u場(chǎng)的480份雞泄殖腔拭子進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)。結(jié)果顯示，在24家規(guī)?；u場(chǎng)中，18家雞場(chǎng)呈陽(yáng)性，陽(yáng)性率占73.33%;在480份樣品中，203份樣品呈陽(yáng)性，陽(yáng)性率達(dá)42.29%。不同用途的雞對(duì)禽白血病具有不同的感染率，在360份蛋雞樣品中，138份為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為38.33%;在120份肉雞樣品中，65份為陽(yáng)性，陽(yáng)性率達(dá)54.17%。結(jié)果表明，天水市規(guī)?；u場(chǎng)普遍流行禽白血病病毒，同時(shí)肉雞的感染率高于蛋雞的。

關(guān)鍵詞：雞;禽白血病;熒光PCR

中圖分類號(hào)：S851.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1001-0769（2022）04-0077-03

禽白血?。╝vian leucosis，AL）是由禽白血病病毒（Avian Leucosis Virus，ALV）引起的家禽傳染性腫瘤性疾病的統(tǒng)稱，在國(guó)外已有一百多年的流行歷史，自20多年前傳入我國(guó)，目前各地地方品系的雞和進(jìn)口的雞幾乎都受到禽白血病病毒不同程度的感染。該病毒可通過(guò)垂直和水平兩種途徑傳播，傳染性強(qiáng)。雞感染該病毒后，可造成多組織、多器官發(fā)生腫瘤，甚至引起死亡。患病雞還表現(xiàn)為形體消瘦、發(fā)育遲緩，蛋雞發(fā)病后會(huì)出現(xiàn)生產(chǎn)性能下降，如產(chǎn)蛋率下降，蛋品質(zhì)變差，另外產(chǎn)蛋初期和高峰期的蛋雞具有較高的陽(yáng)性率[1]。肉雞感染該病后，由于發(fā)生白血病腫瘤，導(dǎo)致死亡率明顯升高[2]。禽白血病屬于免疫抑制性疾病，雞感染后會(huì)出現(xiàn)免疫力下降，對(duì)其他疾病的抵抗力降低;另外，患病雞對(duì)疫苗的應(yīng)答能力減弱，從而引發(fā)免疫失敗[3]。近年來(lái)，由禽白血病造成的經(jīng)濟(jì)損失逐年增加，成為危害養(yǎng)雞業(yè)的主要疾病之一。為了解該病毒在甘肅省天水市的流行情況，本研究對(duì)近2年來(lái)天水市養(yǎng)殖密集區(qū)的雞場(chǎng)進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，為該病的凈化和有效防控提供參考。

1? 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 檢測(cè)樣品

2020年10月至2021年5月選取天水市秦州區(qū)、麥積區(qū)、武山縣、甘谷縣和秦安縣? 5個(gè)主要養(yǎng)雞縣區(qū)，從每個(gè)縣區(qū)中隨機(jī)抽取存欄5 000羽以上的規(guī)模化雞場(chǎng)4～6家，合計(jì)24家，每家雞場(chǎng)隨機(jī)采集雞泄殖腔拭子20份，共計(jì)480份。

1.1.2 主要儀器試劑

熒光PCR儀為ABI公司生產(chǎn)的Thermofisher 7500 Real-Time定量PCR儀，AⅡ級(jí)生物安全柜選用上海力康醫(yī)療設(shè)備有限公司生產(chǎn)的HFsafe-1200LC;禽白血病病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒、柱式DNA核酸提取試劑盒均購(gòu)自哈爾濱世紀(jì)元亨生物藥業(yè)有限? ?公司。

1.2 方法

利用吸附柱法提取禽白血病病毒DNA，? 以提取的DNA為模板配制PCR反應(yīng)體系。反應(yīng)體系為20 μL：無(wú)菌無(wú)核酸酶水5.9 μL，PCR反應(yīng)液10 μL，熒光探針2.1 μL，模板DNA 2 μL。反應(yīng)條件為：95 ℃ 2 min;循環(huán)95 ℃ 5 s，60 ℃ 35 s，共40次，每次循環(huán)的第二步（60 ℃ 35 s）收集熒光信號(hào)。

2? 結(jié)果與分析

2.1 天水市規(guī)?；u場(chǎng)雞禽白血病熒光PCR? 檢測(cè)

天水市規(guī)?；u場(chǎng)雞禽白血病熒光PCR檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。在本次抽檢的24個(gè)場(chǎng)中，陽(yáng)性雞場(chǎng)為18家，雞場(chǎng)陽(yáng)性率為73.33%;在采集的480份樣品中，陽(yáng)性樣品共203份，樣品陽(yáng)性率為42.29%。其中秦州區(qū)、武山縣和甘谷縣的陽(yáng)性雞場(chǎng)比例最高，達(dá)80%，樣品陽(yáng)性率也較高，分別為57.5%、47.5%和42.5%;秦安縣陽(yáng)性雞場(chǎng)比例為66.67%，陽(yáng)性率也較高，但樣品陽(yáng)性率最低，為25.83%。結(jié)果表明，天水市規(guī)?；u場(chǎng)禽白血病的流行相當(dāng)普遍，抽檢的5個(gè)縣區(qū)都有禽白血病流行，且5個(gè)縣區(qū)的雞場(chǎng)陽(yáng)性率和樣品陽(yáng)性率都存在顯著差異。

2.2 不同種類雞禽白血病感染情況

不同種類雞禽白血病感染見(jiàn)表2。由表2可知，在禽白血病的感染率上，24家規(guī)模化雞場(chǎng)不同用途雞存在差異，蛋雞的感染率為38.33%，肉雞的感染率為54.17%，蛋雞的感染率明顯低于肉雞的。

3? 討論

本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，天水市規(guī)?；u場(chǎng)普遍存在禽白血病流行現(xiàn)象，73.33%的規(guī)?；u場(chǎng)存在禽白血病病毒污染，且天水市主要養(yǎng)雞區(qū)的5個(gè)縣區(qū)的規(guī)?；u場(chǎng)都具有較高的禽白血病的感染率，且集中在60%～80%之間。天水市肉雞飼養(yǎng)規(guī)模小，約占全市養(yǎng)雞規(guī)模的四分之一，但從調(diào)查數(shù)據(jù)可以看出，肉雞的禽白血病感染率明顯高于蛋雞的，與文獻(xiàn)報(bào)道的其他地區(qū)的感染情況相似[4-6]。

目前，針對(duì)禽白血病的預(yù)防和治療尚無(wú)商品化的疫苗和有效藥物，各國(guó)主要通過(guò)檢測(cè)禽白血病病毒以及淘汰帶毒種雞控制該病[7]。天水市的養(yǎng)雞方式主要以中小規(guī)模雞場(chǎng)為主，存在資金短缺、經(jīng)營(yíng)管理水平不高以及防疫體系不健全的缺點(diǎn)[8]。結(jié)合禽白血病的流行特點(diǎn)，建議規(guī)?；u場(chǎng)從以下幾個(gè)方面著手，防止禽白血病的侵入、傳播和流行，實(shí)現(xiàn)該病的防控：一是加強(qiáng)引種，阻斷病毒的傳染源。研究表明，種雞感染ALV后能顯著影響商品代蛋雞的生產(chǎn)性能[9]。二是加強(qiáng)生物安全，健全防疫制度，提高雞場(chǎng)、雞舍及周邊地區(qū)的衛(wèi)生條件，完善消毒體系，合理改造雞舍的設(shè)施設(shè)備，以減少雞群與禽白血病病毒的接觸，避免病毒污染飲水、飼料和用具等，從而切斷傳播途徑。三是合理飼喂，減少雞的應(yīng)激反應(yīng)，增強(qiáng)它們的體質(zhì)，提高雞自身免疫力，減少易感動(dòng)物。研究表明，采用免疫增強(qiáng)劑——黃芪多糖能促進(jìn)雞的免疫器官發(fā)育，增強(qiáng)免疫功能[10-11]。

天水市規(guī)?；u場(chǎng)禽白血病感染范圍廣，幾乎遍布大多數(shù)規(guī)?；u場(chǎng)，且感染率高。大部分規(guī)?；u場(chǎng)對(duì)禽白血病的特點(diǎn)和危害性認(rèn)識(shí)不足，飼養(yǎng)期的前期表現(xiàn)出的亞臨床癥狀沒(méi)有引起規(guī)模化雞場(chǎng)獸醫(yī)的重視，飼養(yǎng)期的中后期一旦發(fā)病，所產(chǎn)生的經(jīng)濟(jì)損失不可挽回，因此畜牧獸醫(yī)主管部門應(yīng)加強(qiáng)對(duì)禽白血病流行特點(diǎn)和防控知識(shí)的宣傳，同時(shí)對(duì)禽白血病的凈化迫在眉睫。

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