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        柳茶提取物對大鼠血壓影響的研究

        2022-05-24 09:44:54趙小芳徐明麗馮翠娟段博文
        衛(wèi)生職業(yè)教育 2022年10期
        關(guān)鍵詞:羅布麻浸膏藥量

        趙小芳,徐明麗 ,馮翠娟 ,段博文 ,李 運

        (1.甘肅衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院,甘肅 蘭州 730000;2.甘肅省人民醫(yī)院,甘肅 蘭州 730000;3.蘭州市食品藥品檢驗檢測研究院,甘肅 蘭州 730000)

        柳茶為薔薇科鮮卑花屬植物鮮卑花和窄葉鮮卑花的葉及嫩枝,甘肅省有豐富的野生資源,主要產(chǎn)于甘南藏族自治州,生長在海拔3 000~3 600 m的草地或灌木叢中[1]。藥理研究表明,柳茶具有調(diào)節(jié)脂代謝、提高機體免疫力、抗氧化、抗腫瘤、保護肝損傷[2-4]等作用。為進一步摸清柳茶的其他藥理作用,合理開發(fā)利用我省的藥材資源,課題組開展了柳茶在調(diào)節(jié)血糖、抗疲勞、抗缺氧、對血壓的影響等方面的實驗研究,本項目主要承擔(dān)柳茶提取物對血壓影響的實驗研究。

        肥胖是血壓升高的危險因素,控制體重有助于降低血壓[5]。另外,大量流行病學(xué)研究顯示,高脂血癥是高血壓的可調(diào)性間接危險因素之一,調(diào)節(jié)血脂有利于控制血壓[6]。鑒于柳茶有降低血脂、減肥的功效,課題組根據(jù)以往研究推測:柳茶是否也能降壓?如果有降壓作用,那么是由于降血脂而導(dǎo)致的間接作用還是有直接降壓作用?降壓作用是否顯著?高密度脂蛋白(HDL)能刺激動脈內(nèi)膜細(xì)胞前列環(huán)素的形成,降低內(nèi)皮損傷導(dǎo)致的血管收縮反應(yīng)。而柳茶提取物可明顯降低大鼠血中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)含量,增加 HDL含量[7],說明其可以增強HDL對動脈內(nèi)膜的保護作用。以上研究為本課題的推測提供了理論依據(jù)。

        1 實驗對象與方法

        1.1 實驗材料

        柳茶采自甘肅省甘南藏族自治州,經(jīng)蘭州大學(xué)藥學(xué)院楊永建教授鑒定為薔薇科鮮卑花屬植物窄葉鮮卑花的葉。羅布麻購于蘭州惠仁堂藥店,由蘭州旭康藥業(yè)有限公司生產(chǎn)(批號20181023),經(jīng)楊永建教授鑒定為夾竹桃科羅布麻屬植物羅布麻的葉。實驗動物為 Wistar大鼠,雄性,6 周齡,體重(200±10)g,由蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供。

        1.2 實驗方法

        1.2.1 制備供試品 柳茶浸膏的制法:稱取窄葉鮮卑花葉300 g,粉碎后用95%乙醇1 600 W超聲提取3次,每次20 min。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮乙醇提取液,得102 g浸膏備用。按參考文獻給藥[8]。羅布麻浸膏的制法:稱取羅布麻300 g,粉碎后用60%乙醇回流2 h。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮乙醇提取液,得80.7 g浸膏備用。按臨床等效劑量給藥。

        1.2.2 實驗動物分組 雄性Wistar大鼠30只,購入后飼養(yǎng)觀察3天,隨機分為5組,每組6只,分別編號(見表1)。

        表1 實驗動物分組及處理方法

        1.2.3 高血壓大鼠模型的建立 用動物無創(chuàng)測壓儀連續(xù)測定血壓3天后,對B、C、D、E組大鼠每日皮下注射丙酸睪丸素2 mg/100 g[9],同時給予5%鹽水,常規(guī)飼料喂養(yǎng),14天后,測得大鼠血壓明顯升高(與造模前比較,收縮壓P<0.001,舒張壓P<0.01),此時進行實驗治療。

        丙酸睪丸素溶液的配制方法:將花生油于165℃干熱空氣滅菌2 h,作為溶劑。將460 mg丙酸睪丸素加入34.5 mL滅菌花生油中,超聲振蕩40 min,完全溶解。每只大鼠的給藥量為2 mg/100 g ,即 0.15 mL/100 g。

        1.2.4 實驗性治療方法 治療開始后,大鼠給藥量為2 g生藥/200 g·d,給藥方法為灌胃。連續(xù)14天,每7天測一次血壓??瞻讓φ战M和模型對照組給蒸餾水。

        柳茶治療組給藥量:每只大鼠給藥量為2 g生藥/200 g·d,即0.68 g浸膏。將浸膏配成0.34 g/mL的水溶液,則每只大鼠的給藥量是 2 mL/200 g·d。

        羅布麻治療組給藥量:每只大鼠給藥量為2 g生藥/200 g·d,即0.538 g浸膏。將浸膏配成0.269 g/mL的水溶液,則每只大鼠的給藥量是2 mL/200 g·d。

        復(fù)方治療組給藥量:柳茶和羅布麻按1︰1的比例混合,每只大鼠給予柳茶1 g/200 g·d、羅布麻1 g/200 g·d,即將配好的柳茶水溶液和羅布麻水溶液各1 mL/200 g·d混合后給予。

        1.3 檢測指標(biāo)

        1.3.1 血壓 用多通道動物無創(chuàng)測壓儀測大鼠的尾動脈壓,比較治療后大鼠血壓的變化。

        1.3.2 血清中生化指標(biāo)NO、NOS 治療結(jié)束后,將大鼠4.5 mL/kg腹腔注射10%水合氯醛,待進入麻醉狀態(tài)后,心臟采血,離心 10 min(3 000轉(zhuǎn)/min),分出血清,于-20 ℃保存。

        用試劑盒法測定血清中NO含量和NOS活力,操作步驟按試劑盒說明書進行。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

        大鼠的血壓、NO含量和NOS活力采用SPSS 16.0軟件進行統(tǒng)計分析,計量資料采用(±s)表示,組間比較采用t檢驗。

        2 結(jié)果

        2.1 治療結(jié)束后各組大鼠的血壓

        各組大鼠血壓變化顯示:造模成功后至治療結(jié)束,模型對照組大鼠的血壓維持在較高水平;柳茶治療組大鼠的血壓明顯下降(P<0.001),說明柳茶對實驗性高血壓大鼠具有降壓作用,且與羅布麻療效相當(dāng)。

        復(fù)方治療組大鼠血壓下降顯著(P<0.001),但與單方比較,療效并無差異,初步提示治療高血壓時,柳茶與羅布麻還是單用為好(見表2)。

        表2 柳茶對實驗性高血壓大鼠血壓的影響(±s,mmHg)

        表2 柳茶對實驗性高血壓大鼠血壓的影響(±s,mmHg)

        注:與空白對照組比較,***P<0.001,**P<0.01;與模型對照組比較,▲▲▲P<0.001

        組別治療結(jié)束后的血壓SBP DBP空白對照組(2 mL/200 g·d)模型對照組(2 mL/200 g·d)柳茶治療組(2 mL/200 g·d)羅布麻治療組(2 mL/200 g·d)復(fù)方治療組(2 mL/200 g·d)110.67±8.17 133.32±5.912***113.57±5.66▲▲▲116.27±8.83▲▲▲111.95±9.06▲▲▲85.0172±10.70 99.43±4.29**89.33±3.12▲▲▲89.20±1.99▲▲▲88.37±2.94▲▲▲

        2.2 NO試劑盒測試結(jié)果

        紫外分光光度計用蒸餾水調(diào)零,于550 nm處,0.5 cm光徑,測各管吸光度,計算各樣品中NO含量,見表3。

        表3 柳茶對高血壓大鼠血清中NO含量的影響(±s,μ mol/L)

        表3 柳茶對高血壓大鼠血清中NO含量的影響(±s,μ mol/L)

        注:大鼠血清中的 NO含量參考值為(38.0±23.4)μmol/L。與空白對照組比較,**P<0.01;與模型對照組比較,▲P<0.05,▲▲P<0.01,▲▲▲P<0.001;與復(fù)方治療組比較,★★P<0.01,★P<0.05

        組別NO含量空白對照組(2 mL/200 g·d)模型對照組(2 mL/200 g·d)柳茶治療組(2 mL/200 g·d)羅布麻治療組(2 mL/200 g·d)復(fù)方治療組(2 mL/200 g·d)48.15±12.15 33.70±11.94**45.74±11.01▲★★56.11±9.05▲▲★65.18±19.19▲▲▲

        2.3 NOS試劑盒測試結(jié)果

        紫外分光光度計用蒸餾水調(diào)零,于530 nm處,1 cm光徑,測各管吸光度,每毫升血清每分鐘生成1 nmol NO為一個酶活力單位。

        計算TNOS(總一氧化氮合酶)空白管吸光度為0.083,iNOS(誘導(dǎo)型一氧化氮合酶)空白管吸光度為0.046。各組大鼠血清中TNOS活力和iNOS活力見表4。

        表4 各組大鼠血清中TNOS活力和iNOS活力(±s,U/mL)

        表4 各組大鼠血清中TNOS活力和iNOS活力(±s,U/mL)

        注:與模型對照組比較,▲P<0.05

        組別TNOS iNOS空白對照組(2 mL/d)模型對照組(2 mL/d)柳茶治療組(2 mL/d)羅布麻治療組(2 mL/d)復(fù)方治療組(2 mL/d)22.205±1.454 28.640±4.476 29.652±2.294 30.713±4.303 29.328±1.689 8.843±1.737▲12.822±3.664▲16.798±2.449▲15.427±3.894▲17.064±2.639▲

        3 討論

        3.1 柳茶提取物對高血壓大鼠有降壓作用

        通過實驗觀察,發(fā)現(xiàn)柳茶提取物對實驗性高血壓大鼠的血壓有顯著降低作用(P<0.001),療效與羅布麻相當(dāng)。

        與羅布麻合用后,與單方相比,降壓效果并無增強,提示治療高血壓時,柳茶與羅布麻還是單用為好。

        3.2 柳茶提取物能改善高血壓大鼠的生化指標(biāo)

        柳茶提取物能升高高血壓大鼠血清中擴血管物質(zhì)NO的含量,并提高iNOS活力(P<0.05),使其催化NO合成的能力增強,說明對動脈內(nèi)皮有保護作用。

        3.3 展望

        本實驗研究證明柳茶提取物對高血壓大鼠有降壓作用,并對考察的生化指標(biāo)(NO、NOS)有所改善。在今后的研究中,將觀察柳茶治療高血壓的長期療效以及內(nèi)皮素(ET)、硫化氫(H2S)等與高血壓有關(guān)的其他生化指標(biāo)的變化,論證將其進一步開發(fā)為有降壓功效的保健茶飲,作為高血壓治療的輔助產(chǎn)品的可行性。

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