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        雜萘聯(lián)苯聚芳醚酮的表面化學(xué)改性及成骨活性

        2022-05-20 05:59:18柳承德張楊陽(yáng)程習(xí)彤蹇錫高
        工程塑料應(yīng)用 2022年5期
        關(guān)鍵詞:成骨成骨細(xì)胞改性

        柳承德,張楊陽(yáng),程習(xí)彤,蹇錫高

        (1.大連理工大學(xué)化工學(xué)院高分子材料系,遼寧大連 116024; 2.大連理工大學(xué)遼寧省高性能樹(shù)脂工程技術(shù)研究中心,遼寧大連 116024)

        骨植入材料作為生物醫(yī)用材料的一個(gè)重要分支,在骨修復(fù)、填充骨缺損和其他骨科手術(shù)中發(fā)揮著重要作用。聚醚醚酮(PEEK)是一種高性能工程塑料,由于其具有與人骨匹配的力學(xué)性能和化學(xué)穩(wěn)定性等優(yōu)點(diǎn),已經(jīng)廣泛應(yīng)用在骨植入材料領(lǐng)域[1–4]。然而PEEK作為一種結(jié)晶性聚合物,溶解性很差,因此在成型加工方面受到一定的限制。本課題組開(kāi)發(fā)的雜萘聯(lián)苯聚芳醚酮(PPEK)是一種新型聚芳醚酮熱塑性樹(shù)脂,通過(guò)引入扭曲非共平面的分子結(jié)構(gòu),賦予了聚合物良好的溶解性和更高的耐熱性能。與PEEK相比,PPEK不僅加工性能更加優(yōu)異,并且其成本僅為PEEK的一半,因此其在生物材料領(lǐng)域的應(yīng)用具有相當(dāng)?shù)臐摿?。然而PPEK的表面為生物惰性,如何得到具有更好生物活性的PPEK仍是需要攻克的問(wèn)題[5]。

        植入體與體內(nèi)環(huán)境接觸后,細(xì)胞并不會(huì)與植入體材料表面發(fā)生直接相互作用。存在于生物體血液或其它體液中的蛋白質(zhì)將率先到達(dá)植入體材料表面并與之發(fā)生相互作用。植入物材料的表面理化性質(zhì)與其表面的蛋白吸附行為直接相關(guān),而吸附在材料表面的蛋白又會(huì)進(jìn)一步引發(fā)各種各樣的細(xì)胞行為和生物化學(xué)反應(yīng)[6]。通過(guò)改變材料表面的性質(zhì),改善材料表面對(duì)蛋白質(zhì)的相互作用,從而解決PPEK的表面惰性問(wèn)題具有重大的研究意義。有研究表明,羥基(—OH)[7]、磺酸基(—SO3H)[8–9]等化學(xué)基團(tuán)的引入能增加材料表面蛋白質(zhì)的吸附,并且能促進(jìn)成骨細(xì)胞的分化,改善骨再生性能[10]。筆者采用強(qiáng)還原劑將PPEK分子鏈中的羰基還原成為羥基,使用硫酸(H2SO4)和氯磺酸(HClO3S)在PPEK分子鏈上引入磺酸基團(tuán),并通過(guò)溶液涂覆的方法將含有羥基、磺酸基的PPEK涂覆于可溶性的PPEK表面,形成牢固結(jié)合的表面層,期望改善PPEK材料的表面惰性以及材料與蛋白質(zhì)的相互作用,進(jìn)而改善其表面的成骨活性。

        1 實(shí)驗(yàn)部分

        1.1 主要原料

        PPEK:0539,大連寶力摩新材料有限公司;

        二甲基亞砜(DMSO) (99%)、硼氫化鈉(NaBH4)(98%)及HClO3S (99%):阿拉丁試劑(上海)有限公司;

        α-最低必需培養(yǎng)基(α-MEM)、胎牛血清(FBS)、鏈霉素-青霉素:美國(guó)Hyclone公司;

        人體纖連蛋白(Fn)、磷酸鹽緩沖溶液(PBS)、96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(無(wú)菌)、6孔細(xì)胞培養(yǎng)板(無(wú)菌):索萊寶生物科技有限公司;

        TRIZOL試劑、DAPI染色液、TRITC染色液:北京酷萊博科技有限公司;

        細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(CCK-8)、全蛋白提取試劑盒、反轉(zhuǎn)錄試劑盒、熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)試劑盒、聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)、改良的聚氰基丙烯酸正丁酯(BCA)蛋白檢測(cè)試劑盒、堿性磷酸酶(ALP)蛋白檢測(cè)試劑盒:生工生物工程(上海)股份有限公司。

        1.2 主要設(shè)備及儀器

        傅里葉變換紅外光譜(FTIR)儀:IS50型,美國(guó)Thermo Nicolet公司;

        X射線光電子能譜(XPS)儀:ESCALAB 250Xi型,英國(guó)Thermo Fisher Scientific公司;

        接觸角測(cè)量?jī)x:DSA30S型,德國(guó)KRUSS公司;

        耗散型石英晶體微天平(QCM-D)分析儀:Q-SENSE ANALYZER型,瑞典Biolin Scientific AB公司;

        單光子激光共聚焦顯微鏡:FV1000型,日本Olympus公司;

        酶標(biāo)儀:Epoch2T型,美國(guó)Bio Tek 公司;

        熒光定量PCR儀:LightCycler480II-96well型,瑞士Roche公司。

        1.3 PPEK表面改性

        將PPEK粉料通過(guò)高溫模壓得到厚度為1 mm的PPEK薄板,并裁剪成1 cm×1 cm小片,打磨拋光后用丙酮、乙醇、去離子水依次超聲清洗10 min,在真空烘箱中烘干備用。

        表面羥基化PPEK樣品(PPEK-OH)的制備:根據(jù)文獻(xiàn)[11]報(bào)道的方法將PPEK主鏈的羰基還原為羥基。在帶有回流冷凝裝置的三口燒瓶中加入200 mL DMSO和0.45 g NaBH4,加熱至120℃,待NaBH4完全溶解,將5 g PPEK粉料浸入反應(yīng)溶液中。在氮?dú)獗Wo(hù)條件下120℃反應(yīng)24 h,把反應(yīng)溶液沉降在冰水混合物中,析出絮狀的產(chǎn)物。用去離子水洗滌數(shù)次后在80℃鼓風(fēng)烘箱中烘干備用。用上述烘干的產(chǎn)物配置成10 mg/mL的氯仿溶液,旋涂在1 cm×1 cm PPEK片的表面(1 000 r/min),每個(gè)樣品重復(fù)旋涂5次,最后置于60℃鼓風(fēng)烘箱中放置6 h烘干溶劑,標(biāo)記為PPEK-OH。

        表面磺化PPEK樣品(PPEK-SO3H)的制備:根據(jù)文獻(xiàn)[12]報(bào)道的方法對(duì)PPEK材料進(jìn)行磺化改性。在帶有冷凝回流裝置的三口燒瓶中加入5.0 g的PPEK和70 mL的H2SO4,劇烈攪拌至聚合物完全溶解。用恒壓滴液漏斗緩慢滴加10 mL的HClO3S,在90℃條件下反應(yīng)8 h后,將反應(yīng)溶液沉降在冰水混合物中,析出絮狀的產(chǎn)物。用去離子水洗滌數(shù)次后在80℃鼓風(fēng)烘箱中烘干備用。用上述烘干的產(chǎn)物配置成10 mg/mL的氯仿溶液,旋涂在1 cm×1 cm PPEK片的表面(1 000 r/min),每個(gè)樣品重復(fù)旋涂5次,最后置于60℃鼓風(fēng)烘箱中放置6 h烘干溶劑,標(biāo)記為PPEK-SO3H。

        PPEK兩種化學(xué)改性(羥基化和磺化)流程如圖1所示。

        圖1 PPEK的化學(xué)改性流程

        1.4 細(xì)胞相容性和成骨分化活性測(cè)定

        細(xì)胞培養(yǎng):用α-MEM培養(yǎng)基在細(xì)胞培養(yǎng)箱(37℃,5% CO2)中培養(yǎng)MC3T3-E1成骨細(xì)胞,培養(yǎng)基中含10%的FBS和1%的鏈霉素-青霉素。細(xì)胞每三天傳代一次,每天更新一次細(xì)胞培養(yǎng)基。

        細(xì)胞毒性測(cè)定:采用培養(yǎng)細(xì)胞所用的培養(yǎng)基在37℃條件下對(duì)樣品分別浸提24 h。將細(xì)胞懸液以每孔5×103個(gè)細(xì)胞的密度接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,培養(yǎng)4 h。然后,用不同濃度的浸提液更換培養(yǎng)基。孵育1,3 d后,每孔加10 μL 3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑(MTT)的PBS溶液(5 mg/mL)。在37°C孵育4 h后,移出溶液,加入100 μL DMSO溶解甲醛晶體。用酶標(biāo)儀在570 nm波長(zhǎng)下測(cè)吸光度,細(xì)胞活力與所測(cè)吸光度的值呈正比。

        細(xì)胞增殖:將細(xì)胞懸液以每孔5×103個(gè)細(xì)胞的密度接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,并與樣品一起培養(yǎng)。在預(yù)定的時(shí)間點(diǎn),移出樣品,向培養(yǎng)基中加入10 μL CCK-8溶液。用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。

        細(xì)胞貼附:將1×104個(gè)細(xì)胞接種在樣品表面,置于6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中共培養(yǎng)24 h。經(jīng)過(guò)4%多聚甲醛溶液固定20 min后,室溫下TRITC染色30 min,DAPI染色2 min,用單光子激光共聚焦顯微鏡觀察樣品表面的細(xì)胞形態(tài)。

        ALP活性測(cè)定:將1×104個(gè)細(xì)胞與樣品共培養(yǎng)于6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,測(cè)定ALP活性以評(píng)估成骨分化的情況。在培養(yǎng)7,14 d后,取出樣品,用1%的Triton X-100在4℃下裂解細(xì)胞。以14 000 r/min的速度離心之后,用改良的BCA蛋白檢測(cè)試劑盒計(jì)算上清液總蛋白含量。ALP活性的測(cè)定是通過(guò)量化對(duì)硝基苯酚來(lái)確定的,對(duì)硝基苯酚是磷酸對(duì)硝基苯的最終產(chǎn)物,用ALP蛋白檢測(cè)試劑盒對(duì)其進(jìn)行定量。最后,對(duì)ALP活性與總蛋白的相應(yīng)含量進(jìn)行歸一化。

        實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)PCR (RT-PCR)檢測(cè)成骨基因相關(guān)表達(dá):MC3T3-E1細(xì)胞的成骨基因表達(dá)是通過(guò)RT-PCR測(cè)定的。將1×104個(gè)細(xì)胞接種在6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中與樣品共培養(yǎng)3,7,14 d,提取細(xì)胞的信使核糖核酸(mRNA)。此后,在金屬浴中將其逆轉(zhuǎn)錄為互補(bǔ)脫氧核糖核酸(cDNA)。所選基因的正向和反向引物見(jiàn)表1。通過(guò)RT-PCR進(jìn)行定量分析成骨相關(guān)基因[包括ALP,轉(zhuǎn)錄因子(Runx2)和I型膠原蛋白(COL-I)]的表達(dá)結(jié)果。每個(gè)基因的相對(duì)mRNA表達(dá)水平通過(guò)循環(huán)閾值與管家基因3-磷酸甘油酯脫氫酶(GAPDH)進(jìn)行歸一化確定。

        表1 成骨相關(guān)基因引物序列[13]

        1.5 性能測(cè)試與表征

        FTIR測(cè)試:采用全反射的方法對(duì)樣品表面進(jìn)行測(cè)試,波數(shù)范圍是400~4 000 cm-1。

        XPS測(cè)試:激發(fā)源為Cu Kα,起飛角為20°,結(jié)合能用烷基碳C(1s)峰(284.8 eV)進(jìn)行校正。

        水接觸角測(cè)試:以去離子水為檢測(cè)液體,每次注射5 μL在樣品表面,用接觸角測(cè)量?jī)x測(cè)試材料表面的接觸角。

        QCM-D測(cè)試:將樣品用氯仿配置成10 mg/mL的溶液,旋涂在QCM-D金芯片表面(轉(zhuǎn)速1 000 r/min),每個(gè)芯片重復(fù)旋涂五次,然后在80℃真空烘箱中烘干溶劑。QCM-D測(cè)試前先通入PBS溶液沖洗至少10 min,再通入20 μg/mL的Fn溶液,待吸附穩(wěn)定后分別用PBS溶液和1%的十二烷基硫酸鈉(SDS)溶液沖洗,進(jìn)液流速為100 μL/min。

        1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

        數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差,使用Student′s t-test檢測(cè)兩個(gè)樣品組之間有無(wú)顯著性差異,P<0.05視為和PPEK相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,在后續(xù)柱狀圖中用*表示。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 PPEK化學(xué)改性分析

        圖2為PPEK,PPEK-OH和PPEK-SO3H的FTIR譜圖。由圖2可以看出,PPEK的紅外吸收峰與本課題組[14]之前的研究結(jié)果一致,PPEK-OH在3 400 cm–1處出現(xiàn)羥基的特征吸收峰,而PPEKSO3H在1 500 cm–1和1 474 cm–1處出現(xiàn)了芳香取代吸收峰,結(jié)合1 020 cm–1和1 075 cm–1處磺酸基的對(duì)稱(chēng)和不對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)峰,說(shuō)明磺酸基已經(jīng)成功引入到PPEK主鏈上[14]。

        圖2 PPEK,PPEK-OH和PPEK-SO3H的FTIR譜圖

        圖3是PPEK,PPEK-OH和PPEK-SO3H的XPS全譜圖。由圖3可以看到,對(duì)比PPEK和PPEK-OH樣品,PPEK-SO3H的表面除了C,N,O元素之外還檢測(cè)到了S元素的信號(hào)。表2為根據(jù)XPS數(shù)據(jù)計(jì)算出的PPEK,PPEK-OH和PPEKSO3H表面各元素相對(duì)含量。表2顯示,PPEKSO3H表面S元素的相對(duì)含量為1.2%。

        圖3 PPEK,PPEK-OH和PPEK-SO3H的XPS譜圖

        表2 不同樣品表面各元素相對(duì)含量 %

        圖4是PPEK,PPEK-OH和PPEK-SO3H的XPS高分辨O1s譜圖。表3為不同試樣表面O1s譜圖中各成鍵相對(duì)含量。由圖4可以看出PPEK的高分辨O1s譜圖主要?dú)w為529.8 eV和531.8 eV處的C=O和C—O,伴隨著PPEK表面的還原反應(yīng),一部分C=O轉(zhuǎn)化為C—O,在高分辨O1s譜圖這兩處的強(qiáng)度也有相應(yīng)的變化,并且在530.9 eV出現(xiàn)了歸屬于O—H的峰,同時(shí)表3顯示O—H在PPEK-OH的O1s譜圖中的成鍵相對(duì)含量達(dá)到9.2%。在PPEK-SO3H的高分辨O1s譜圖中除了C=O和C—O之外,在530.7 eV處出現(xiàn)了歸屬于S=O和S—O的信號(hào)峰,同時(shí)表3顯示S=O和S—O在PPEK-SO3H的O1s譜圖中的成鍵相對(duì)含量達(dá)到26.2%。

        圖4 PPEK,PPEK-OH和PPEK-SO3H的XPS高分辨O1s譜圖

        表3 不同樣品表面O1s譜圖中各成鍵相對(duì)含量%

        為了對(duì)官能化改性的PPEK的表面性能進(jìn)一步研究,對(duì)三種樣品的表面水接觸角進(jìn)行了測(cè)試,結(jié)果如圖5所示。從圖5可以看出,對(duì)比未改性的PPEK,PPEK-OH的表面水接觸角從86°下降到79°,PPEK-SO3H的表面水接觸角下降到了61°。FTIR和XPS均證明了PPEK-OH和PPEK-SO3H的成功制備,并且接觸角數(shù)據(jù)表面改性后材料的親水性變好。

        圖5 PPEK,PPEK-OH和PPEK-SO3H的表面水接觸角

        2.2 表面蛋白吸附能力評(píng)價(jià)

        植入體材料表面吸附的蛋白是組織細(xì)胞與植入體材料之間聯(lián)系的紐帶。通過(guò)QCM-D測(cè)定了不同樣品表面的Fn吸附密度。根據(jù)式(1)[9]計(jì)算得到的三種樣品表面最大Fn吸附密度如圖6所示。圖6顯示,PPEK樣品表面的Fn吸附密度為302 ng/cm2,PPEK-OH和PPEK-SO3H樣品表面的Fn吸附密度分別達(dá)到364,404 ng/cm2,相較PPEK樣品提高了20.5%和33.8%。

        圖6 PPEK,PPEK-OH和PPEK-SO3H樣品表面Fn吸附密度

        式中:?m——Fn吸附密度,ng/cm2;

        C——晶體的質(zhì)量靈敏度常數(shù),取C=17.7 ng/cm2;

        n——頻率倍數(shù),取n=3;

        Δfn——QCM-D芯片的頻率變化。

        QCM-D芯片振動(dòng)頻率下降的絕對(duì)值與吸附在芯片表面的蛋白質(zhì)質(zhì)量呈正比。圖7分別是三種樣品的QCM-D芯片的振動(dòng)頻率曲線(圖7中縱坐標(biāo)的標(biāo)值負(fù)號(hào)表示頻率下降)。由圖7可以看到,在蛋白吸附穩(wěn)定后通入PBS溶液,芯片振動(dòng)頻率曲線均沒(méi)有明顯的變化,說(shuō)明其表面吸附的蛋白沒(méi)有脫落。在通入SDS溶液后,三個(gè)樣品的芯片振動(dòng)頻率曲線都經(jīng)歷了先下降又上升的過(guò)程,并且最終穩(wěn)定。然而PPEK-OH和PPEK-SO3H樣品振動(dòng)頻率相對(duì)于通入PBS前變化不大,而未經(jīng)修飾的PPEK樣品振動(dòng)頻率相對(duì)于通入PBS前明顯上升。這說(shuō)明PPEK-OH和PPEK-SO3H表面吸附的蛋白與基體材料之間的相互作用更強(qiáng)。

        圖7 不同樣品表面吸附蛋白后QCM-D芯片頻率變化

        2.3 MC3T3-E1成骨細(xì)胞相容性及成骨活性評(píng)價(jià)

        采用MTT法測(cè)定樣品浸提液的細(xì)胞毒性。培養(yǎng)在PPEK,PPEK-OH和PPEK-SO3H樣品上的MC3T3-E1成骨細(xì)胞孵育1,3 d后的細(xì)胞活力如圖8所示。由圖8可以看出,樣品提取物對(duì)MC3T3-E1成骨細(xì)胞沒(méi)有明顯的細(xì)胞毒性,細(xì)胞存活率均大于85%。結(jié)果表明,三種樣品都不會(huì)在浸提液中釋放影響細(xì)胞生長(zhǎng)的物質(zhì),不具有細(xì)胞毒性。

        圖8 培養(yǎng)在不同樣品上的MC3T3-E1成骨細(xì)胞的細(xì)胞活力

        通過(guò)CCK-8法定量分析可以快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)細(xì)胞在不同樣品表面的增殖活性情況,在固定波長(zhǎng)(450 nm)處的吸光度與活細(xì)胞數(shù)量呈正比。圖9展示了不同培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)MC3T3-E1成骨細(xì)胞在PPEK,PPEK-OH和PPEK-SO3H表面的增殖活性結(jié)果。從圖9可以看出,MC3T3-E1成骨細(xì)胞在PPEK-OH和PPEK-SO3H表面的增殖情況顯著優(yōu)于其在未改性PPEK表面的增殖情況,并且PPEKSO3H表面的成骨細(xì)胞增殖活性最高。這說(shuō)明PPEK-OH樣品表面的羥基和PPEK-SO3H樣品表面的磺酸基均促進(jìn)了MC3T3-E1成骨細(xì)胞在材料表面的增殖生長(zhǎng),其中磺酸基的促進(jìn)效果更好。

        圖9 培養(yǎng)在不同樣品表面的MC3T3-E1成骨細(xì)胞在不同時(shí)期的增殖結(jié)果(*代表有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05)

        良好的生物相容性對(duì)細(xì)胞的貼附生長(zhǎng)至關(guān)重要[15]。通過(guò)單光子激光共聚焦顯微鏡觀察MC3T3-E1成骨細(xì)胞在PPEK,PPEK-OH和PPEKSO3H表面的生長(zhǎng)貼附情況,結(jié)果如圖10所示。由圖10可以看出,細(xì)胞在三種樣品表面貼附狀態(tài)良好,細(xì)胞核呈球形或橢球型,細(xì)胞膜的鋪展?fàn)顟B(tài)良好。PPEK樣品表面貼附的細(xì)胞數(shù)量較少,PPEKSO3H樣品表面的細(xì)胞數(shù)量最多,幾乎鋪滿(mǎn)了整個(gè)表面。說(shuō)明PPEK-SO3H樣品為成骨細(xì)胞的貼附提供了更好的表面微環(huán)境,促進(jìn)了細(xì)胞的鋪展和生長(zhǎng)。

        圖10 MC3T3-E1成骨細(xì)胞貼附在不同樣品表面的熒光共聚焦顯微鏡圖像

        ALP活性是衡量骨髓基質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化程度和成骨細(xì)胞功能狀態(tài)的重要指標(biāo),也是評(píng)價(jià)機(jī)體成骨活性和組織鈣化能力的具體指標(biāo)[16]。用MC3T3-E1成骨細(xì)胞的相對(duì)ALP活性作為衡量成骨活性的指標(biāo)。圖11是MC3T3-E1成骨細(xì)胞在PPEK,PPEK-OH和PPEK-SO3H表面生長(zhǎng)7 d和14 d的相對(duì)ALP活性測(cè)試結(jié)果。由圖11可以看出,成骨細(xì)胞在PPEK-OH和PPEK-SO3H表面生長(zhǎng)7 d和14 d后,都表現(xiàn)出比PPEK更高的ALP活性,表明化學(xué)改性后的PPEK,尤其是PPEK-SO3H具有明顯的促成骨效果。

        圖11 MC3T3-E1成骨細(xì)胞在不同樣品表面培養(yǎng)7,14 d的相對(duì)ALP活性(*代表有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05)

        圖12是MC3T3-E1成骨細(xì)胞在PPEK,PPEKOH和PPEK-SO3H樣 品 表 面 生 長(zhǎng)3,7,14 d后ALP,COL-I和RUNx2基因的表達(dá)結(jié)果。由圖12可以看出,與未改性的PPEK樣品相比,PPEK-OH和PPEK-SO3H表面生長(zhǎng)的細(xì)胞的成骨分化相關(guān)基因ALP,COL-I和RUNx2的表達(dá)水平顯著提高。以上數(shù)據(jù)結(jié)果表明,PPEK-OH和PPEK-SO3H都可以促進(jìn)MC3T3-E1細(xì)胞的成骨分化,其中PPEKSO3H的效果更好。

        圖12 MC3T3-E1成骨細(xì)胞在不同樣品表面培養(yǎng)不同時(shí)間的成骨相關(guān)基因表達(dá)結(jié)果(*代表有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05)

        3 結(jié)論

        (1)采用化學(xué)方法在PPEK主鏈上分別引入了羥基和磺酸基,通過(guò)模壓和溶液涂覆的方法獲得了表面羥基修飾的PPEK樣品PPEK-OH和表面磺酸基修飾的PPEK樣品PPEK-SO3H。研究了不同PPEK樣品對(duì)Fn的吸附作用,發(fā)現(xiàn)PPEK-OH和PPEK-SO3H表面對(duì)Fn有較強(qiáng)的相互作用,其中PPEK-SO3H表面吸附量更多也更穩(wěn)定。

        (2)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與未改性的PPEK相比,PPEK-OH和PPEK-SO3H表面能改善成骨細(xì)胞的增殖、貼附與成骨分化活性,并且PPEK-SO3H表面表現(xiàn)出更好的促成骨作用。

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