潘海平，孫曉通，許 雷

（青島市中心血站檢驗科，山東 青島 266071）

輸血傳染病原體的殘余風(fēng)險評估是預(yù)防輸血傳染病的研究熱點[1]。文獻報道，發(fā)達國家中輸血傳染病原體的殘余風(fēng)險已降至1/10萬～1/100萬以下[2]。由于檢測試劑“窗口期”等原因，輸血傳播疾病的殘余風(fēng)險不可避免[3]。近年來，我國各地區(qū)關(guān)于輸血傳播人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）殘余風(fēng)險報道有所增加，但由于各地區(qū)流行率、感染率的不同，導(dǎo)致輸血傳播的殘余風(fēng)險不同[4]。因此，為了解青島地區(qū)經(jīng)輸血傳播HIV的殘余風(fēng)險，本研究分析了2種血液安全篩查模式下、不同獻血次數(shù)下，無償獻血者HIV殘余風(fēng)險，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取青島市中心血站2014年至2019年的672 527例無償獻血者血液標(biāo)本。按血液篩查模式分為兩組：1遍ELISA+1遍核酸檢測（時間：2014年1月1日至2016年4月7日）、2遍ELISA+1遍核酸檢測（時間：2016年4月8日至2019年12月31日）。按獻血次數(shù)分為兩組：初次無償獻血者（只獻過1次血的獻血者）、重復(fù)獻血者（獻血次數(shù)≥2次）。

1.2 試劑與儀器 人類免疫缺陷病毒抗體/抗原酶聯(lián)免疫法試劑盒（萬泰、麗珠、新創(chuàng)），人類免疫缺陷病毒核酸檢測試劑（Roche、Grifols），所有試劑均在有效期內(nèi)使用。全自動加樣系統(tǒng)（Hamilton Bonaduz AG, 國械注進20142225821，型號Microlab STAR Venus），全自動酶免分析系統(tǒng)[Hamilton Bonaduz AG，國食藥監(jiān)械（進）字2004第3400030號，型號FAME 24/30]，核酸檢測系統(tǒng)（Roche Molecular Systems.Inc, 國械備20160771號，型號Cobas s201）。

1.3 血液安全篩查模式 1遍ELISA+1遍核酸檢測：使用1種HIV Ag/Ab ELISA試劑對青島市中心血站無償獻血者血液標(biāo)本進行HIV檢測，如初檢呈反應(yīng)性，以原管和血導(dǎo)管做雙孔復(fù)檢，復(fù)檢結(jié)果任一孔出現(xiàn)反應(yīng)性判為HIV初篩陽性。復(fù)檢結(jié)果為反應(yīng)性的不進行核酸檢測。ELISA無反應(yīng)性標(biāo)本以Cobas s201核酸檢測系統(tǒng)進行6個標(biāo)本混樣檢測，混檢反應(yīng)性進行拆分單檢，拆分結(jié)果為HIV RNA反應(yīng)性為初篩陽性。2遍ELISA+1遍核酸檢測：使用2種不同廠家HIV Ag/Ab ELISA試劑進行HIV檢測，任何一種試劑呈反應(yīng)性，以原管和血導(dǎo)管以反應(yīng)性試劑做雙孔復(fù)檢，復(fù)檢結(jié)果任一孔出現(xiàn)反應(yīng)性判為HIV初篩陽性。復(fù)檢結(jié)果為反應(yīng)性的不進行核酸檢測。ELISA無反應(yīng)性標(biāo)本以Cobas s201核酸檢測系統(tǒng)進行6個標(biāo)本混樣檢測，混檢反應(yīng)性進行拆分單檢，拆分結(jié)果為HIV RNA反應(yīng)性為初篩陽性。初篩陽性標(biāo)本送青島市CDC進行確證，確證流程：首先進行 免疫印跡法檢測抗體，如結(jié)果為陰性/陽性，則確證結(jié)果為陰性/陽性；如結(jié)果為不確定，再進行HIV-1核酸定量檢測，檢測結(jié)果 ＞5 000 CPs/mL，確證結(jié)果為陽性。

1.4 評估方法 （1）根據(jù)“流行率/窗口期”數(shù)學(xué)模型計算公式評估輸血傳播HIV的危險度：RR=∑Ri;Ri=(WFi+HFi)×Di; WFi=Ii×(Li/365)=Pi×Li/Ti; HFi=E×Pi。RR：每單位血液中未檢出HIV陽性的加權(quán)平均數(shù)；Ri：各分組中每單位血液中未檢出HIV陽性數(shù)；WFi：各分組中窗口期因素；HFi：人為或其他錯誤因素；Di：各分組的加權(quán)值；Ii：各分組的HIV新發(fā)感染率；Li：窗口期天數(shù)（d）；Pi：各分組中HIV流行率；Ti：各分組中獻血者暴露HIV感染的天數(shù)；E：錯誤率。窗口期和錯誤率的確定與血液檢測方法和試劑有關(guān)，核酸檢測HIV的平均窗口期（Li）為11 d。錯誤率根據(jù)青島市中心血站歷年參加衛(wèi)健委臨檢中心室間質(zhì)評結(jié)果和實驗室室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)確定為0.1%。

（2）1(2)遍ELISA和 1遍核酸檢測HIV新發(fā)感染率 =1(2)遍ELISA和1遍核酸檢測經(jīng)確證陽性的血液標(biāo)本數(shù)量/[1(2)遍ELISA 和1遍核酸檢測血液標(biāo)本數(shù)量×獻血間隔時間（年）]；重復(fù)獻血者HIV新發(fā)感染率 =HIV檢測以前為陰性現(xiàn)在為陽性的血液標(biāo)本數(shù)量/[重復(fù)獻血者血液標(biāo)本數(shù)量×獻血間隔時間（年）]；首次獻血者HIV新發(fā)感染率=重復(fù)獻血者HIV新發(fā)感染率×首次獻血者HIV流行率/重復(fù)獻血者抗 - HIV流行率。

（3）加權(quán)值。各分組的加權(quán)值 = 各分組獻血人數(shù)/總獻血人數(shù)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 25.0進行統(tǒng)計學(xué)方法，不同組間率的比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同篩查模式和不同獻血者的HIV檢測情況 1遍ELISA+1遍核酸檢測HIV的流行率為0.022%，高于2遍ELISA+1遍核酸檢測HIV的流行率0.016%。重復(fù)獻血者的HIV流行率為0.013%，低于初次獻血者的HIV流行率0.026%。結(jié)果見表1、表2。

表1 2種篩查模式分布情況

表2 重復(fù)獻血者與初次獻血者分布情況

2.2 HIV抗原/抗體檢測后的殘余危險度 1遍ELISA+1遍核酸檢測HIV的殘余風(fēng)險為1/463 404，低于2遍ELISA+1遍核酸檢測HIV的殘余風(fēng)險1/388 568；重復(fù)獻血者的HIV殘余風(fēng)險為1/560 161，低于初次獻血者的HIV殘余風(fēng)險1/446 114。結(jié)果見表3、表4。

表3 2種篩查模式對人群傳播HIV殘余危險度估算

表4 不同獻血次數(shù)人群的傳播HIV殘余危險度估算

3 討論

獻血者中HIV流行率是影響HIV經(jīng)血傳播的一個重要因素。本研究期間青島市無償獻血者HIV的流行率為0.018%，是2006年至2010年HIV流行率（0.005 76%）[5]的3.14倍，這與我國HIV整體流行率不斷增長[4]有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)重復(fù)獻血者HIV流行率低于初次獻血者（P＜0.01），與太原[6]、安陽[7]等地報道一致。

由于“窗口期”的存在，即使經(jīng)過血液檢測“合格”的血液依然存在傳播病原體的風(fēng)險?！傲餍新?窗口期”數(shù)學(xué)模型是評估輸血傳播病毒殘余風(fēng)險的經(jīng)典方法，其局限性在于假設(shè)所有的殘余風(fēng)險均來自于“窗口期”，對于病毒變異、靜默感染造成的感染殘余風(fēng)險并未計入。由于因“窗口期”造成的殘余風(fēng)險仍然是目前輸血傳播HIV的主要因素，故認(rèn)為采用“流行率/窗口期”數(shù)學(xué)模型是合理的。本研究采用上述方法對2014年至2019年青島市無償獻血者HIV殘余風(fēng)險進行了評估。其中重復(fù)獻血者HIV殘余風(fēng)險為1/560 161，初次獻血者為1/446 114。本研究結(jié)果與國內(nèi)其他地區(qū)相比，HIV殘余風(fēng)險高于石家莊[8]、晉城[9]無償獻血者，低于東莞[10]、深圳[11]、成都[12]、太原[6]、蘭州[13]無償獻血者。與青島市2006年至2010年[5]無償獻血者相比，HIV殘余風(fēng)險有所下降。應(yīng)當(dāng)注意到，在青島市獻血者HIV流行率是前期3.14倍的情況下，輸血傳播HIV的殘余風(fēng)險卻呈下降趨勢，分析認(rèn)為這與研究期間重復(fù)獻血者HIV流行率低，重復(fù)獻血者比例由38%增加到61.4%有關(guān)[5]。可見建立固定獻血者隊伍的重要性。

本研究中，1遍ELISA+1遍核酸檢測HIV的殘余風(fēng)險為1/463 404，低于2遍ELISA+1遍核酸檢測HIV的殘余風(fēng)險1/388 568。這與東莞市2009年至2016年2種血液篩查模式下HIV殘余風(fēng)險結(jié)果一致[14]。通過分析推測2遍ELISA+1遍核酸比1遍ELISA+1遍核酸殘余風(fēng)險高的原因如下：①將Ri計算公式變形后，可得Ri=n/N×(Li/Ti+E)，其中n為確證陽性標(biāo)本數(shù)，N為檢測總數(shù)。本研究統(tǒng)計期間進行HIV RNA檢測，窗口期(Li)均為11 d，2種篩查模式下獻血者暴露HIV感染的天數(shù)(Ti)極為接近，各組中確證陽性標(biāo)本數(shù)在殘余風(fēng)險計算上起到了主要作用，因本次研究期間雙試劑模式下確證人數(shù)較高，導(dǎo)致殘余風(fēng)險較高；②由不同試劑之間的敏感度、特異性差異造成的。《血站技術(shù)操作規(guī)程（2019版）》關(guān)于HIV檢測策略規(guī)定：HIV感染標(biāo)志物應(yīng)至少采用核酸和血清學(xué)試劑各進行1次檢測[15]。本研究的結(jié)果提示，目前在青島地區(qū)無償獻血者中采用1遍ELISA+1遍核酸檢測HIV并會不增加HIV的輸血后殘余風(fēng)險。下一步可以針對不同試劑的殘余風(fēng)險做進一步分析，為實驗室評估各試劑的檢測性能，從而選擇更適宜的試劑和檢測策略。

綜上所述，輸血后殘余風(fēng)險是客觀存在的，但可以加以控制和降低。加強對血液篩查試劑的評估，建立更適宜的篩查模式；同時采取積極措施，招募低危人群獻血，鼓勵合格獻血者再次獻血，建立一支固定的志愿者無償獻血隊伍，從而降低輸血傳播病原體的殘余風(fēng)險，確保臨床輸血安全。