李慧芳

（1.江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院病理科，江蘇常州 213004；2.徐州醫(yī)科大學(xué)武進(jìn)臨床學(xué)院，江蘇常州 213002）

乳腺癌是婦科女性常見病，調(diào)查顯示，我國乳腺癌發(fā)病率逐年增加，且呈年輕化趨勢[1]。近年來，隨著醫(yī)療技術(shù)進(jìn)步，乳腺癌治療方案不斷優(yōu)化，預(yù)后得到改善，但研究顯示，乳腺癌不良預(yù)后差異顯著。尤其是中晚期乳腺癌患者，預(yù)后較差，5年生存率僅30%[2]。因此，準(zhǔn)確評(píng)估乳腺癌病情，對(duì)乳腺癌進(jìn)行早期篩查和治療具有重要臨床價(jià)值。堿性纖維母細(xì)胞生長因子（bFGF）是具有加快腫瘤組織分裂增殖的癌癥相關(guān)蛋白分子，含146個(gè)氨基酸，既往已有報(bào)道顯示，bFGF表達(dá)水平與乳腺癌預(yù)后相關(guān)[3]。P16蛋白位于人染色體9p21，既往研究顯示P16蛋白屬細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4抑制因子，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞增殖[4]。本研究收集84例乳腺癌患者臨床資料，探討bFGF和P16表達(dá)的臨床意義，為臨床診療提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年7月至2021年7月江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院收治的84例乳腺癌患者作為研究對(duì)象，患者年齡35~75歲，平均年齡（57.29±13.76）歲；病理分型：浸潤性導(dǎo)管癌69例，導(dǎo)管內(nèi)癌10例，浸潤小葉癌5例；腫瘤直徑1~5 cm，平均直徑（3.27±1.33）cm；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：有27例，無57例。本研究經(jīng)江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中國抗癌協(xié)會(huì)乳腺癌診治指南與規(guī)范(2015版)》[5]中乳腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)病理組織活檢確診，且均在江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院接受治療；②患者年齡≥18歲；③臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠或哺乳期患者；②有嚴(yán)重心、肺基礎(chǔ)疾病或肝、腎功能不全者；③既往接受乳腺手術(shù)治療者。

1.2 檢測方法 取乳腺癌和癌旁組織各1.0cm×1.0 cm×1.0 cm作為檢測標(biāo)本，以蘇木精-伊紅常規(guī)染色，石蠟切片。采用全自動(dòng)免疫組化染色系統(tǒng)（上海三崴醫(yī)療設(shè)備有限公司，國械備20160026號(hào)，型號(hào)：BenchMark ULTRA型）檢測bFGF和P16蛋白表達(dá)水平。bFGF試劑盒購自上海彩佑實(shí)業(yè)有限公司，P16試劑盒購自上海信裕生物科技有限公司。隨機(jī)選取10個(gè)視野，在高倍鏡（×400）下計(jì)數(shù)1 000個(gè)乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行結(jié)果判斷，分別按著色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)進(jìn)行評(píng)分[6]，見表1。根據(jù)兩項(xiàng)評(píng)分結(jié)果，計(jì)算乘積，以評(píng)分≤1分為陰性（-），2~3分為弱陽性（+），4~6分為陽性（++），≥7分為強(qiáng)陽性（+++）。

表1 免疫組化染色結(jié)果

1.3 觀察指標(biāo) ①不同組織中bFGF和P16表達(dá)水平。包括癌組織和癌旁組織bFGF和P16表達(dá)水平。②比較不同bFGF表達(dá)水平患者病理特征。③比較不同P16表達(dá)水平患者病理特征。④比較不同bFGF和P16蛋白表達(dá)水平患者預(yù)后。所有患者均隨訪半年，記錄半年生存率。⑤分析bFGF和P16蛋白判斷患者短期預(yù)后價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以（）表示，兩兩比較行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，兩兩比較行χ2檢驗(yàn)，預(yù)測價(jià)值采用受試者工作曲線（ROC）分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組織中bFGF和P16表達(dá)水平比較 84例患者中，癌組織內(nèi)bFGF陽性率顯著高于癌旁組織，P16陽性率顯著低于癌旁組織，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 不同組織中bFGF和P16表達(dá)水平比較[例(%)]

2.2 不同bFGF表達(dá)水平患者病理特征比較 84例患者中bFGF陽性者73例，陽性率為86.90%，其中弱陽性（+）19例，陽性（++）24例，強(qiáng)陽性（+++）30例。不同bFGF表達(dá)水平患者腫瘤分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。不同bFGF表達(dá)水平患者病理分型和腫瘤直徑情況比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見表3。

表3 不同bFGF表達(dá)水平患者病理特征比較[例(%)]

2.3 不同P16表達(dá)水平患者病理特征比較 84例患者中P16陽性者48例，陽性率為57.14%，其中弱陽性（+）24例，陽性（++）15例，強(qiáng)陽性（+++）9例。不同P16蛋白表達(dá)水平患者腫瘤分期、腫瘤直徑及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表4。

表4 不同P16表達(dá)水平患者病理特征比較[例(%)]

2.4 不同bFGF和P16蛋白表達(dá)水平患者預(yù)后比較 不同bFGF和P16蛋白表達(dá)水平患者半年生存率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表5。

表5 不同bFGF和P16蛋白表達(dá)水平患者半年生存率比較[例(%)]

2.5 bFGF和P16蛋白判斷乳腺癌患者短期預(yù)后價(jià)值分析 分別以免疫組化檢測結(jié)果評(píng)分為檢驗(yàn)變量，以半年內(nèi)是否發(fā)生死亡為狀態(tài)變量，繪制ROC曲線，分析結(jié)果顯示，bFGF和P16判斷乳腺癌患者半年生存率的AUC分別為0.782和0.761（P＜0.05），見圖1、表6。

表6 bFGF和P16判斷短期預(yù)后的ROC分析

圖1 bFGF和P16判斷乳腺癌患者短期預(yù)后的ROC曲線

3 討論

目前臨床對(duì)乳腺癌的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，但普遍認(rèn)為腫瘤血管的生成增長是維持腫瘤增殖、促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的重要條件[7]。而腫瘤生長相關(guān)蛋白因子的表達(dá)可調(diào)節(jié)血管通透性，促進(jìn)纖維蛋白原在細(xì)胞基質(zhì)沉淀[8]，為腫瘤新生毛細(xì)血管網(wǎng)絡(luò)的生長創(chuàng)造條件。因此，明確腫瘤相關(guān)蛋白因子將為腫瘤治療提供新的靶點(diǎn)。bFGF為多肽生長因子，既往已有關(guān)于bFGF調(diào)節(jié)腫瘤生長的報(bào)道，bFGF可通過誘導(dǎo)VEGF合成，并與細(xì)胞膜特異性受體FGFR結(jié)合，調(diào)節(jié)腫瘤生長[9]。本研究也顯示，癌組織中bFGF陽性率顯著高于癌旁組織，且不同bFGF表達(dá)水平患者腫瘤分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示bFGF在乳腺癌腫瘤病理進(jìn)程中發(fā)揮重要作用。劉晨旭等[10]研究也證實(shí)bFGF可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的有絲分裂過程，并通過降解細(xì)胞外基質(zhì)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向瘤區(qū)外增殖遷移，形成新的腫瘤新生血管，促進(jìn)腫瘤生長和轉(zhuǎn)移。bFGF具有胞吞作用，內(nèi)化后的bFGF可通過調(diào)節(jié)RNA聚合酶1，促進(jìn)乳腺癌腫瘤細(xì)胞G0期向G1期轉(zhuǎn)換，并經(jīng)Ras、JAK/STAT細(xì)胞通路，調(diào)節(jié)乳腺癌分裂增殖[11]。因此，bFGF表達(dá)水平有助于評(píng)估腫瘤病理狀態(tài)，為判斷預(yù)后提供依據(jù)。

P16蛋白由3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子構(gòu)成，通過與CDK結(jié)合，抑制催化真核細(xì)胞由G1向S期轉(zhuǎn)化，從而達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞增殖的目的[12]。本研究顯示，癌組織中P16陽性率顯著低于癌旁組織，且不同P16表達(dá)水平患者腫瘤直徑和腫瘤分期比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明P16具有抑癌作用，P16表達(dá)缺失可能引起腫瘤增殖加速，促進(jìn)腫瘤生長。本研究還顯示，不同P16表達(dá)水平的患者半年生存率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，bFGF和P16判斷患者短期預(yù)后的AUC值均超過0.75，且敏感度分別達(dá)0.909和0.818，提示P16還有助于判斷患者短期預(yù)后，這對(duì)于指導(dǎo)臨床進(jìn)行早期干預(yù)具有重要作用。但本研究未對(duì)bFGF和P16進(jìn)行定量檢測，還有待今后大樣本研究證實(shí)。

綜上，bFGF和P16表達(dá)水平與乳腺癌病理特征相關(guān)，監(jiān)測bFGF和P16水平有助于評(píng)估腫瘤病情和判斷預(yù)后。