金月 謝靜 張巖 趙海鷹 馬偉麗 常承東

[摘要]目的比較槐角不同炮制品中槐角昔成分的含量。方法采用HPLC法測(cè)定槐角昔的含量：Inertsil ODS C₁₈色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）;柱溫30℃;流動(dòng)相為甲醇-乙睛-0.1磷酸溶液（12：20：68）;等度洗脫;體積流量1.0 ml/mm;檢測(cè)波長(zhǎng)：260 nm。比較槐角生品、砂炒、麩炒炮制品槐角苷的含量。結(jié)果不同槐角炮制品中槐角昔的含量：生品（6.15%）>砂炒（5.92%）>麩炒（5.74%）。結(jié)論槐角飲片中黃酮類(lèi)成分經(jīng)過(guò)砂炒、麩炒炮制后槐角甘含量略降低。

[關(guān)鍵詞]槐角;砂炒槐角;麩炒槐角;槐角苷;含量測(cè)定

[中圖分類(lèi)號(hào)]R284??? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A??? [文章編號(hào)]2095-0616（2022）05-0075-03

Determination of sophoricoside in different processed products of sophora fruit

JIN Yue1??? XIE Jing2??? ZHANG Yan1??? ZHAO Haiying1??? MA Weili1??? CHANG Chengdong1

1. Preparation Center，Affiliated Hospital of Gansu University of Chinese Medicine，Gansu，Lanzhou 730000，China;2. Department of Traditional Chinese Medicine，F(xiàn)ood，Drug and Medical Device Inspection and Testing Center of Jiayuguan City，Gansu，Jiayuguan 735300，China

[Abstract] Objective To compare the content of sophoricoside in different processed products of sophora fruit. Methods The content of sophoricoside was determined by High Performance Liquid Chromatography （HPLC）in an Inertsil ODS C₁₈column （250 mm×4.6 mm，5 μm）with column temperature of 30℃. The isocratic elution was performed with a mobile phase of methanol-acetonitrile-0.1 phosphoric acid solution （12：20：68）. The volume flow rate was set to 1.0 ml/min，and the detection wavelength was 260 nm. The contents of sophoricoside in sophora fruit of raw，sand-fried and bran-fried were compared. Results The content of sophoricoside in different processed products of sophora fruit：raw sophora fruit （6.15%）>sand-fried sophora fruit （5.92%）>bran-fried sophora fruit （5.74%）. Conclusion The content of sophoricoside in sophora fruit decoction pieces is slightly reduced after the flavonoids contained are sand-fried and bran-fried.

[Key words] Sophora fruit;Sand-fried sophora fruit;Bran-fried sophora fruit;Sophoricoside;Content determination

槐角為豆科植物槐（Sophora japonica L.）的干燥成熟果實(shí)，主要分布于我國(guó)河北、天津等地。也稱(chēng)作槐實(shí)、槐子，初次記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，并將其列為上品。其性寒、味苦，歸肝、大腸經(jīng)，主要功效以清熱瀉火，涼血止血見(jiàn)長(zhǎng)[1]。中醫(yī)臨床主要用于治療腸熱便血、痔腫出血等癥狀[2]。本研究選用麩炒和砂炒兩種方法，嚴(yán)格按照炮制規(guī)范操作，對(duì)兩種炮制品進(jìn)行含量測(cè)定。2020年版《中國(guó)藥典》[3]選取槐角昔作為槐角的指標(biāo)性成分，因此，本研究選擇槐角苷為指標(biāo)成分進(jìn)行檢測(cè)，將砂炒槐角和麩炒槐角與生品槐角中的槐角苷含量進(jìn)行比較，為槐角的臨床使用提供參考。

1??? 材料與儀器

高效液相色譜儀（日本島津公司，LC-20AD）;電子天平（Sartorius公司，CPA225D）;電子天平（Sartorius公司，BSA224S）;數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，KQ-500VDE型）;數(shù)顯恒溫水浴鍋（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）;離心機(jī)（長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司）;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（鄭州杜甫儀器廠，SHB-3A）。

槐角藥材購(gòu)自甘肅康樂(lè)藥業(yè)有限公司，經(jīng)甘肅中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院主任中藥師楊錫倉(cāng)鑒定為豆科植物槐的干燥成熟果實(shí);槐角苷對(duì)照品購(gòu)自成都埃法生物科技有限公司，CAS：152- 95-4，批號(hào)：AF-8103093，純度：98%。

2??? 方法與結(jié)果

2.1??? 樣品制備

生品槐角：除去雜質(zhì)，充分干燥后粉碎，過(guò)50目篩;砂炒槐角：取河砂置于鍋內(nèi)，武火加熱至靈活狀態(tài)，投入槐角藥材，不斷用熱砂掩埋、翻炒至膨脹鼓起，篩去砂，放涼，粉碎，過(guò)50目篩;麩炒槐角：用武火將鍋燒熱，撒入麥麩至起煙時(shí)，投入槐角藥材，不斷翻動(dòng)并控制火力，炒制藥材表面深黃色且鼓起時(shí)取出，篩去麩皮放涼，粉碎，過(guò)50目篩，計(jì)算各樣品的粉碎率（粉碎率=篩下部分/總樣品量×100%）。其3種不同樣品的性狀及水分測(cè)定（烘干法）結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2??? 測(cè)定條件

色譜條件：Inertsil ODS C₁₈（250mm×4.6 mm，5 μm）;檢測(cè)波長(zhǎng)：260 nm;流速：1.0 ml/min;柱溫：30℃;進(jìn)樣量：10 μl;流動(dòng)相：甲醇-乙腈-0.07%磷酸溶液（12：20：68）。

2.3?? ?對(duì)照品溶液制備

取槐角昔對(duì)照品11.46 mg，加甲醇50 ml，得到濃度為0.2292 mg/ml的對(duì)照品溶液，備用。

2.4??? 供試品溶液制備

取“2.1”項(xiàng)下生品、砂炒、麩炒槐角3種不同粉末約2 g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇50 ml，稱(chēng)定重量，超聲處理（功率300 w，頻率25 kHz）45 min，放冷，再稱(chēng)定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，過(guò)濾。精密量取續(xù)濾液0.5 ml，置20 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得[3]。

2.5??? 線性關(guān)系考察

精密吸取槐角昔對(duì)照品儲(chǔ)備液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，混勻，配制成11.46、22.92、34.38、45.84、57.30、68.76 μg/ml對(duì)照品溶液。精密吸取上述溶液各10 μl，按“2.2”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以峰面積值為縱坐標(biāo)，對(duì)照品濃度（μg/ml）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程為Y=581 043X-35 897，R²=0.9994，表明槐角昔在11.46～68.76 μg/ml范圍內(nèi)線性良好。

2.6??? 精密度試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果槐角苷峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.80%，表明進(jìn)樣精密度良好。

2.7??? 穩(wěn)定性試驗(yàn)

將供試品溶液在室溫下貯存，分別于0、4、8、12.24 h測(cè)定，峰面積積分值的RSD為1.39%，結(jié)果表明樣品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8??? 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批槐角藥材樣品，按“2.4”項(xiàng)下方法制備5份平行樣品，按照“2.2”條件測(cè)定，以峰面積計(jì)算，槐角苷RSD為0.46%，表明該樣品重復(fù)性良好。

2.9??? 加樣回收率試驗(yàn)

精密稱(chēng)取同批槐角6份，加入槐角苷對(duì)照品適量，按“2.4”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行分析，測(cè)得加樣回收率分別為96.58%、99.15%、96.66%、96.41%、97.29%、98.10%，RSD 為1.10%。

2.10??? 樣品含量測(cè)定

取3批槐角樣品各約2.0 g，精密稱(chēng)定，按“2.4”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，將各樣品中的峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算各樣品中槐角昔的含量，色譜圖見(jiàn)圖1。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析來(lái)看，槐角昔的含量經(jīng)炮制后略有降低，依次為生品>砂炒>麩炒，RSD值為3.46%，見(jiàn)表2。

3??? 討論

槐角為中醫(yī)臨床常用藥物之一，目前在醫(yī)院調(diào)劑使用時(shí)多用槐角和槐角炭，其中槐角清熱涼血力強(qiáng)，用于血熱妄行的出血癥和肝火目赤、頭痛眩暈等[4];槐角炭寒性減弱，長(zhǎng)于收斂止血，常用于便血、痔血、崩漏等?；苯桥谥破肥褂迷跉v代本草中有不同的記載，南北朝劉宋時(shí)代有乳汁制（《雷公》），唐朝有燒灰（《千金》），宋代《總錄》記載有麩炒法，明代《回春》《禁方》《保元》分別記載了膽汁制、煮制和黑豆拌蒸等炮制方法，而清代則廣泛應(yīng)用炒黃、炒炭、麩炒等法[5]?；苯腔瘜W(xué)成分復(fù)雜，其主要活性成分為黃酮類(lèi)化合物，此外還含有三萜皂苷、生物堿、磷脂、氨基酸以及多糖等其他成分。黃酮類(lèi)成分主要有蕓香苷、槲皮素、異鼠李素、槐屬苷等[6]?；苯蔷哂兄寡⑾?、抑菌等作用，此外還具有抗癌及雌性激素樣作用，對(duì)腸、痔瘡等出血可有效治療，對(duì)胃腺癌、肺癌等癌癥及心血管疾病等也有一定的防治作用[7]。

根據(jù)我院臨床使用統(tǒng)計(jì)，現(xiàn)藥房中藥處方調(diào)劑中槐角使用量很少，槐角多人制劑使用，如槐角丸[8]或地榆槐角丸[9]，而且療效較好。我院常用院內(nèi)制劑大黃消痔栓[10]中，槐角是主藥之一?；苯峭栌贸椿苯恰⒌赜芑苯峭栌妹刍苯?，我院制劑使用槐角。在藥廠與醫(yī)院制劑過(guò)程中，藥材在前處理中都需要粉碎成細(xì)粉，生品黏性較大，粉碎時(shí)有一定的難度，容易與其他藥材粘連或堵塞篩網(wǎng)，影響細(xì)度，對(duì)制劑最后的成型和療效都有一定影響。麩炒和砂炒均有文獻(xiàn)記載和出處，生品槐角經(jīng)過(guò)麩炒或砂炒，黏性變小，質(zhì)地變酥脆，便于粉碎，有利于生產(chǎn)。因此，本研究選用麩炒和砂炒兩種方法，并對(duì)兩種炮制品槐角昔進(jìn)行含量測(cè)定。經(jīng)測(cè)定，兩種炮制方法對(duì)有效成分槐角苷影響很小，而且提高了前期的粉碎效率，有利于生產(chǎn)需要。以上研究結(jié)果對(duì)整體評(píng)價(jià)槐角及其不同炮制品也提供了一定依據(jù)。但麩炒和砂炒兩種炮制方法緩和了生品的寒涼之性，兩種炮制方法對(duì)槐角中其他成分的影響如何[11-15]，是否完全可以替代使用等問(wèn)題，還需后續(xù)進(jìn)一步研究，這是本研究的不足之處。

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