孫瑞瑞 吳晗 齊艷姝 黃如意 傅鑒乾

[摘要]目的探討死亡相關(guān)蛋白激酶3（DAPK3）和細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶8（CDK8）在宮頸癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法選取廈門(mén)市第五醫(yī)院2018年1月至2021年1月進(jìn)行宮頸癌手術(shù)治療的患者86例，取手術(shù)過(guò)程中的宮頸癌組織與癌旁正常組織進(jìn)行研究，探討宮頸癌組織與癌旁正常組織中DAPK3與CDK8 表達(dá)情況、宮頸癌組織中DAPK3與CDK8表達(dá)與臨床特征的關(guān)系及DAPK3與CDK8表達(dá)在宮頸癌組織中的相關(guān)性。結(jié)果宮頸癌組織DAPK3低表達(dá)率（75.58%）明顯高于癌旁正常組織（16.28%），CDK8高表達(dá)率（86.05%）明顯高于癌旁正常組織（9.30%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;DAPK3與CDK8在宮頸癌組織中的表達(dá)同年齡、病理類(lèi)型、FIGO分期、分化程度無(wú)明顯相關(guān)性，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;DAPK3與CDK8表達(dá)在宮頸癌組織中呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)性中度（r=-0.552，P=0.000）。結(jié)論在宮頸癌組織中DAPK3表現(xiàn)為低表達(dá)，CDK8表現(xiàn)為高表達(dá)，兩者呈中度負(fù)相關(guān)，兩者與患者年齡、病理類(lèi)型等臨床特征不存在相關(guān)性，可為臨床提供參考。

[關(guān)鍵詞]死亡相關(guān)蛋白激酶3;細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶8;宮頸癌;免疫組織化學(xué);陽(yáng)性細(xì)胞

[中圖分類(lèi)號(hào)]R737.33??? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A??? [文章編號(hào)]2095-0616（2022）02-0163-04

Expression and clinical significance of DAPK3 and CDK8 in cervical carcinoma tissues

SUN Ruirui??? WU Han??? QI Yanshu??? HUANG Ruyi??? FU Jianqian

Department of Medical Oncology，the Fifth Hospital of Xiamen，F(xiàn)ujian，Xiamen 361101，China

[Abstract]Objective To investigate the expression and clinical significance of death-associated protein kinase 3 （DAPK3）and cyclin-dependent kinase 8 （CDK8）in cervical carcinoma tissues. Methods A total of 86 patients who received surgical treatment of cervical carcinoma in the Fifth Hospital of Xiamen from January 2018 to January 2021 were selected for a study of their cervical carcinoma tissues and the normal tissues adjacent to the carcinoma during the operation. The expression of DAPK3 and CDK8 in the cervical carcinoma tissues and the normal tissues adjacent to the carcinoma，the relationship between the expression of DAPK3 and CDK8 in the cervical carcinoma tissues and clinical features，and the correlation between the expression of DAPK3 and CDK8 in the cervical carcinoma tissues were investigated. Results The low expression rate of DAPK3 in the cervical carcinoma tissues （75.58%）was significantly higher than that in the normal tissues adjacent to the carcinoma （16.28%），and the high expression rate of CDK8 （86.05%）was significantly higher than that in the normal tissues adjacent to the carcinoma （9.30%），with statistically significant differences （P<0.05）. The expression of DAPK3 and CDK8 in the cervical carcinoma tissues had no significant correlation with the age，pathological type，F(xiàn)IGO staging and degree of differentiation，and the differences were statistically insignificant （P>0.05）. The expression of DAPK3 in the cervical carcinoma tissues was negatively correlated with that of CDK8，and the correlation was moderate （r=-0.552，P=0.000）. Conclusion In cervical carcinoma tissues，the expression of DAPK3 is low expression，while the expression of CDK8 is high expression. The two are moderately negatively correlated. There is no correlation between them and the clinical characteristics of the patients such as age and pathological types，etc. These can be reference for clinical practice.

[Key words]Death-associated protein kinase 3;Cyclin-dependent kinase 8;Cervical carcinoma;Immunohistochemistry;Positive cell

宮頸癌臨床發(fā)病率高，侵襲性強(qiáng)，預(yù)后差，其病死率在婦科惡性腫瘤中僅次于乳腺癌[1]。宮頸癌的致病因素復(fù)雜，一般認(rèn)為是由于人乳頭狀病病毒（human papillomavirus，HPV）的持續(xù)感染及癌基因與抑癌基因表達(dá)異常引起的[2]。死亡相關(guān)蛋白激酶3（death-associated protein kinases 3，DAPK3）與細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶8（cyclin-dependent kinase 8，CDK8）分別屬于機(jī)體細(xì)胞抑癌基因與癌基因表達(dá)的產(chǎn)物，DAPK3高度表達(dá)可抑制細(xì)胞集落形成，從而促進(jìn)細(xì)胞凋亡叫CDK8作為人體周期素依賴(lài)性激酶家族的一員，則通過(guò)與中介體結(jié)合，從而發(fā)揮促癌功能[4]。臨床發(fā)現(xiàn)DAPK3與CDK8在宮頸癌組織中存在著基因表達(dá)失調(diào)，兩者與宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān)。但目前宮頸癌組織DAPK3和CDK8表達(dá)情況的共同研究較少，且相關(guān)研究中未提及DAPK3和CDK8兩者表達(dá)情況的相關(guān)性。本已經(jīng)為進(jìn)一步探討DAPK3和CDK8 在宮頸癌組織中的表達(dá)及臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1??? 資料與方法

1.1??? 一般資料

選取廈門(mén)市第五醫(yī)院2018年1月至2021年1月進(jìn)行宮頸癌手術(shù)治療的患者86例，取手術(shù)過(guò)程中的宮頸癌組織與癌旁正常組織進(jìn)行研究。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)病理檢查初次確診為宮頸鱗癌或?qū)m頸腺癌;②根據(jù)國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（International Federation of Gynecology and Obstetrics，F(xiàn)IGO）宮頸癌分期（2018年）[5-6]為I～I(xiàn)I期。排除標(biāo)準(zhǔn)：①手術(shù)之前進(jìn)行過(guò)化療、免疫藥物治療等治療的患者;②其他惡性腫瘤或惡性腫瘤病史者;③腦梗死、心肌梗死等重大疾病或重大疾病病史。本研究用組織均為病理診斷后剩余的新鮮無(wú)壞死組織，組織的獲取取得患者或其家屬的知情同意，研究獲得醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。86例患者年齡23～83歲，平均（52.45±15.77）歲;病理類(lèi)型：腺癌34例;鱗癌52例;FIGO分期：I A 13 例，I B 35例，II A 20例，II B 18例;分化程度：高分化32例，中分化23例，低分化31例。

1.2??? 方法及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

所有組織標(biāo)本新鮮取材后，經(jīng)10%甲醛水溶液固定至少24 h，采用全自動(dòng)組織脫水機(jī)（Leica Biosystems Nussloch GmbH，型號(hào)：Leica ASP300S）脫水，組織包埋機(jī)（Leica Biosystems Nussloch GmbH，型號(hào)：Leica HistoCore Arcadia）進(jìn)行石蠟包埋，平推式切片機(jī)（Leica Biosystems Nussloch GmbH，型號(hào)：Leica SM2010 R）進(jìn)行切片。采用免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry，IHC）法檢測(cè)DAPK3 和CDK8表達(dá)情況[7]，DAPK3免疫組化試劑盒購(gòu)自上海圻明生物科技有限公司，CDK8免疫組化試劑盒購(gòu)自上海雅吉生物科技有限公司。在400倍光學(xué)顯微鏡（美國(guó)SWIFT三目光學(xué)生物顯微鏡，型號(hào)：SW380T ）下觀察宮頸癌組織與癌旁正常組織切片，任意選取6個(gè)視野，每個(gè)視野觀察100個(gè)細(xì)胞。其中，CDK3為核染色蛋白，細(xì)胞核出現(xiàn)著色視為陽(yáng)性細(xì)胞;DAPK3表達(dá)于胞漿，細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)著色視為陽(yáng)性細(xì)胞。陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)叫陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤5%為0分;>5%、≤20%為1分;>20%、≤50% 為2 分;>50%、≤75% 為3 分;>75% 為4分。著色程度強(qiáng)弱評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[9]：無(wú)著色為0分;輕度為1分;中度為2分;重度為3分。表達(dá)強(qiáng)度=著色程度強(qiáng)弱評(píng)分×陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)評(píng)分?？傇u(píng)分≤5分為低表達(dá)，>6分為高表達(dá)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2??? 結(jié)果

2.1??? 宮頸癌組織與癌旁正常組織中DAPK3與CDK8表達(dá)情況比較

宮頸癌組織DAPK3低表達(dá)率（75.58%）明顯高于癌旁正常組織（16.28%），CDK8高表達(dá)率（86.05%）明顯高于癌旁正常組織（9.30%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P <0.05），見(jiàn)表1。

2.2??? 宮頸癌組織中DAPK3與CDK8表達(dá)與臨床特征的關(guān)系

DAPK3與CDK8在宮頸癌組織中的表達(dá)與年齡、病理類(lèi)型、FIGO分期、分化程度無(wú)明顯相關(guān)性（P >0.05），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表2。

2.3??? DAPK3與CDK8表達(dá)在宮頸癌組織中的相關(guān)性分析

DAPK3與CDK8表達(dá)在宮頸癌組織中呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)性中度（r=-0.552，P=0.000），見(jiàn)表3。

3??? 討論

宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展同機(jī)體癌基因和抑癌基因的表達(dá)息息相關(guān)，了解和掌握細(xì)胞癌基因和抑癌基因的表達(dá)有利于腫瘤疾病的診斷和治療[10]。DAPK3作為DAPK家族中的一員，其基因?qū)儆?號(hào)常染色體的抑癌基因，在許多腫瘤組織中表達(dá)失調(diào)[11]。臨床表明DAPK3是一種多域結(jié)構(gòu)蛋白，與細(xì)胞增殖、死亡等信號(hào)傳導(dǎo)途徑相關(guān)聯(lián)，其過(guò)度表達(dá)具有抑制細(xì)胞集落形成、促進(jìn)細(xì)胞凋亡的生物學(xué)能力[12]。而與DAPK3相反，CDK8作為CDK家族的一員，是原癌基因的產(chǎn)物，其參與細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞分裂等過(guò)程，其過(guò)度表達(dá)可以加快癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和分裂進(jìn)程[13]?？梢?jiàn)，在臨床宮頸癌疾病的診斷和治療過(guò)程中，對(duì)DAPK3與CDK8表達(dá)情況的了解和探討具有重要意義。

本研究中，宮頸癌組織DAPK3低表達(dá)率明顯高于癌旁正常組織（P<0.05），CDK8高表達(dá)率明顯高于癌旁正常組織（P<0.05），提示DAPK3與CDK8在宮頸癌組織中表達(dá)失調(diào)，兩者與宮頸癌的發(fā)生有著密切關(guān)系;宮頸癌組織中DAPK3出現(xiàn)低表達(dá)和CDK8出現(xiàn)高表達(dá)的可能性更大，而癌旁正常組織中DAPK3出現(xiàn)高表達(dá)和CDK8出現(xiàn)低表達(dá)的可能性更大，預(yù)示著DAPK3低表達(dá)情況與CDK8 高表達(dá)情況可以預(yù)測(cè)宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展，在臨床宮頸癌診斷與治療中具有一定的參考價(jià)值[14]。DAPK3與CDK8在宮頸癌組織中的表達(dá)同年齡、病理類(lèi)型、FIGO分期、分化程度均無(wú)明顯相關(guān)性（P>0.05），提示DAPK3與CDK8表達(dá)失調(diào)與患者年齡、病理類(lèi)型、FIGO分期、分化程度等臨床特征均無(wú)明顯線(xiàn)性相關(guān)，意味著DAPK3與CDK8的表達(dá)不受患者病理類(lèi)型、分化程度等臨床特征的影響;同時(shí)也表明DAPK3與CDK8的表達(dá)主要與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)[15]。DAPK3與CDK8表達(dá)在宮頸癌組織中呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)性中度（r=-0.552，P=0.000），提示在宮頸癌組織中DAPK3與CDK8表達(dá)是存在相關(guān)性的，并且是呈中度的負(fù)相關(guān)，將出現(xiàn)此消彼長(zhǎng)現(xiàn)象。同時(shí)結(jié)果中顯示，86例宮頸癌組織中有65例出現(xiàn)DAPK3低表達(dá)和CDK8高表達(dá)，提示DAPK3低表達(dá)患者往往也具有CDK8高表達(dá)情況，預(yù)示患者抑癌基因與癌基因表達(dá)會(huì)同時(shí)出現(xiàn)失調(diào)現(xiàn)象;而宮頸癌組織中DAPK3出現(xiàn)低表達(dá)，同時(shí)CDK8出現(xiàn)高表達(dá)，將有利于癌細(xì)胞的增殖和生長(zhǎng)[16]。由此可知，DAPK3與CDK8的表達(dá)情況對(duì)于預(yù)示宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展具有非常重要的意義，能夠?yàn)閷m頸癌疾病的發(fā)生提供早期依據(jù)，對(duì)于宮頸癌癌細(xì)胞的增殖情況也具有提示作用。但因?yàn)楸狙芯颗R床數(shù)據(jù)較少，且入選患者均為宮頸癌早期手術(shù)患者，故存在一定的局限性，僅能為臨床提供一定參考。在今后的臨床相關(guān)研究中，可能需要增加樣本量，擴(kuò)大FIGO分期范圍，來(lái)進(jìn)行進(jìn)一步的研究和探討。

綜上所述，在宮頸癌組織中DAPK3表現(xiàn)為低表達(dá)，CDK8表現(xiàn)為高表達(dá)，兩者表達(dá)情況呈中度負(fù)相關(guān)，兩者表達(dá)情況與患者年齡、病理類(lèi)型、FIGO分期、分化程度均不存在相關(guān)性，可為臨床提供參考。

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