劉曉華 徐 萍 岳素敏 滕 笑 張國(guó)婧 劉善利

(山東省昌樂(lè)縣人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科 山東 濰坊 262400)

引言：梅毒為臨床治療過(guò)程中的傳染病，并且具有較大的危害性，梅毒本身就是病原體，具有較高傳染性。通過(guò)目前臨床感染疾病發(fā)病分析過(guò)程中，提高了梅毒感染發(fā)病率，嚴(yán)重威脅了人類的生命健康與身體健康[1]。人們?cè)诟腥久范局髸?huì)發(fā)生全身性反應(yīng)，影響了人們的器官和身體組織，并且病程比較長(zhǎng)，存在大量的臨床表現(xiàn)和反應(yīng)，如果沒(méi)有對(duì)患者及時(shí)控制和治療，會(huì)導(dǎo)致病情加重，出現(xiàn)嚴(yán)重后果[2]。梅毒臨床檢驗(yàn)方法不同，所以校驗(yàn)存在不同的靈敏度與準(zhǔn)確性，本文對(duì)比分析三種梅毒血清檢測(cè)方法，從而為選擇梅毒校驗(yàn)方法方法提供臨床根據(jù)：

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象

選擇我院在2020年6月～2021年2月收治的梅毒患者78例進(jìn)行分析，包括46例男性患者，32例女性患者?；颊吣挲g為20-67歲，平均年齡為(35.8±2.4) 歲。11例早期梅毒患者，37例一期梅毒，37例二期梅毒，12例三期梅毒。本文患者均知情并且簽署知情同意書。

1.2檢測(cè)方法

對(duì)全部患者開(kāi)展ELISA、TPPA、TRUST三種不同方法的梅毒血清檢測(cè)，具體步驟為：

在清晨收集本文研究中患者的空腹血液樣本，并且抽取患者5ml外周血開(kāi)展抗凝處理，在離心機(jī)中放置以300r/min開(kāi)展10分鐘離心，取上清液放到1.5ml的Epprndorrff管中。在本文研究過(guò)程中，使用三種不同方法對(duì)患者的血液標(biāo)準(zhǔn)開(kāi)展試驗(yàn)：

ELISA試驗(yàn)通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附進(jìn)行測(cè)定，使用珠海麗珠試劑有限公司所生產(chǎn)的試劑盒；TPPA試驗(yàn)使用日本復(fù)式株式會(huì)所生產(chǎn)的試劑盒；TRUST試驗(yàn)上海榮盛生物有限公司試劑盒。

在本文試驗(yàn)過(guò)程中，嚴(yán)格根據(jù)試劑盒中要求開(kāi)展試驗(yàn)。通過(guò)專人進(jìn)行校驗(yàn)，避免因?yàn)椴僮鲗?dǎo)致出現(xiàn)試驗(yàn)誤差。

1.3觀察指標(biāo)

對(duì)三種梅毒血清檢測(cè)方法的靈敏度、陽(yáng)性率、特異性進(jìn)行檢測(cè)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

利用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)本文數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，利用表示計(jì)量資料，通過(guò)t進(jìn)行檢驗(yàn)，使用%表示計(jì)數(shù)資料，通過(guò)x2進(jìn)行檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義通過(guò)p<0.05進(jìn)行表示。

2 結(jié)果

2.1三種檢測(cè)方法的檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)比分析

本文研究過(guò)程中，不同檢測(cè)方法血清陽(yáng)性率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。其中TPPA檢測(cè)梅毒陽(yáng)性率對(duì)比其他兩種方式，數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。而且TPPA檢測(cè)三期梅毒陽(yáng)性率和其他兩種方式對(duì)比，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.5)，詳見(jiàn)表1：

表1 三種梅毒血清檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果對(duì)比

2.2三種檢測(cè)方法的靈敏度、特異性比較

本文研究過(guò)程中的梅毒血清檢測(cè)方法特異性與敏感度存在一定差別，TPPA檢測(cè)靈敏度和特異性對(duì)比其他方法，數(shù)據(jù)差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)，RLISA檢測(cè)特異性和靈敏度比其他兩種方法要高，但是無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)，詳見(jiàn)表2：

表2 三種檢測(cè)方法的靈敏度、特異性比較

3 討論

梅毒屬于臨床中慢性傳染性疾病，是由于梅毒螺旋體感染導(dǎo)致的全身性慢性差傳感性疾病，傳播途徑包括接吻、性傳播、輸血、哺乳等[3]。目前，梅毒感染發(fā)病率在不斷的提高，梅毒感染患者臨床癥狀越來(lái)越復(fù)雜，使漏診率得到提高。為了在患者治療過(guò)程中使治療效果提高，降低誤診和漏診率，梅毒感染臨床校驗(yàn)具有重要作用[4]。

在人體感染梅毒螺旋體之后，會(huì)使人機(jī)體產(chǎn)生大量抗磷脂抗原、抗梅毒的非特性抗體，檢測(cè)患者的梅毒血清，主要是檢測(cè)這兩種抗體[5]。目前臨床梅毒感染有多種校驗(yàn)方法，不同校驗(yàn)方法的敏感度、陽(yáng)性率、特異性具有不同的差別，比如明膠凝集試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等[6]。檢測(cè)梅毒血清過(guò)程中，不同方法的安全性、價(jià)格、有效性、操作也各有不同。ELISA、TPPA、TRUST為臨床常用梅毒血清檢測(cè)方法。

甲苯氨紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)是一種非特異性的病毒篩選試驗(yàn)，利用牛心提取心磷脂、膽固醇、卵磷脂，然后通過(guò)甲苯胺紅溶液實(shí)現(xiàn)以上成分性病研究WDRL抗原的重懸，對(duì)血漿或者血清反應(yīng)素進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)非特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)，但是非特異性抗體產(chǎn)生的較晚，且隨著患者病情的發(fā)展，在有效的治療后，其又會(huì)下降到正常范圍，因此檢測(cè)存在一定的難度，所以該種梅毒檢測(cè)方法在實(shí)際的檢測(cè)應(yīng)用中，還存在一定的不足[7]。另外，TRUST試驗(yàn)會(huì)受到多種因素影響，患者因?yàn)楦鞣N疾病會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)，比如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、病毒性感染、肝炎、病毒性感染等，在一期梅毒早期、三期梅毒與治療后梅毒還有可能存在假陽(yáng)性。

目前，臨床血清學(xué)檢測(cè)法在不斷的發(fā)展，ELIAS就是其中之一。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試驗(yàn)在梅毒血清檢測(cè)中，主要是檢測(cè)血清梅毒螺旋體抗體。ELIAS通過(guò)微孔板實(shí)現(xiàn)梅毒螺旋體抗原的包被，重組抗原表達(dá)基因，利用雙抗原夾心法在測(cè)定過(guò)程中對(duì)敏感性與特異性得到提高。相關(guān)醫(yī)學(xué)研究表示，TPPA和ELISA的特異性和敏感性類似，檢測(cè)的靈敏度和特異性較強(qiáng)，且準(zhǔn)確度也較高，操作簡(jiǎn)單。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)與其他兩種方法對(duì)比具有較高的靈敏度，并且操作比較簡(jiǎn)單，還能夠降低檢測(cè)成本。另外，梅毒是LGG和LGM作為混合性質(zhì)的抗體，梅毒LGG抗體在一定時(shí)間中被治愈，仍然能夠在一定時(shí)期中檢測(cè)出高陽(yáng)性率。所以，ELISA能夠應(yīng)用到初步感染期與曾經(jīng)感染后病毒檢測(cè)。但是，因?yàn)槎喾N生理病理因素會(huì)對(duì)特異性病毒血清學(xué)試驗(yàn)造成影響，導(dǎo)致假陽(yáng)性率的出現(xiàn)，主要人群為高齡老年人。我國(guó)相關(guān)研究人員全面分析，如果老年患者有基礎(chǔ)疾病，那么患者會(huì)釋放的抗類脂質(zhì)抗體，老年患者體內(nèi)還存在其他螺旋體，以此出現(xiàn)了交叉反映抗體。

基于TPPA實(shí)現(xiàn)特異性試驗(yàn)，此檢驗(yàn)方法是指通過(guò)明膠顆粒實(shí)現(xiàn)特異性梅毒螺旋體抗原包的血清抗體檢測(cè)，生物因素并不會(huì)對(duì)其造成影響影響，敏感性與特異性良好，屬于公認(rèn)的梅毒抗體檢測(cè)確診方法。TPPA試驗(yàn)?zāi)軌蜩b別部分生物學(xué)假陽(yáng)性病例，在梅毒血清檢驗(yàn)中，其檢測(cè)的結(jié)果準(zhǔn)確性較好，敏感度和特異性均較好，但是其操作相對(duì)的復(fù)雜[8]。另外，TPPA試驗(yàn)試劑的價(jià)格成本比較高，耗時(shí)比較長(zhǎng)，結(jié)果判斷比較主觀，對(duì)于操作人員的操作要求比較高，無(wú)法應(yīng)用到大規(guī)模樣品檢測(cè)中。那么，TPPA試驗(yàn)為梅毒確診試驗(yàn)。

另外，在對(duì)梅毒患者進(jìn)行正規(guī)治療之后，患者的臨床體征和癥狀都消失，要對(duì)患者開(kāi)展定期隨訪。相關(guān)研究人員對(duì)229例早期梅毒患者進(jìn)行一年的正規(guī)治療之后的血清性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)與其他方法對(duì)比，陰轉(zhuǎn)率分別為70%、92%。出現(xiàn)此種情況，可能和患者在治療前一次或者多次二期梅毒復(fù)發(fā)具有密切關(guān)系，雖然通過(guò)正規(guī)抗病毒治療，但是體內(nèi)的多克隆免疫記憶B細(xì)胞還具有作用，此情況需要深入的研究。

為了能夠全面診斷檢測(cè)梅毒血清，對(duì)本文使用的三種檢測(cè)方法的特異性、敏感度和結(jié)果進(jìn)行分析，結(jié)果表示三種不同的檢測(cè)方法血清陽(yáng)性率具有明顯的差異，TPPA檢測(cè)梅毒陽(yáng)性率、靈敏度、特異性對(duì)比其他方法，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；ELISA檢測(cè)特異性和靈敏度和其他兩種方法進(jìn)行對(duì)比有差異，但是數(shù)據(jù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。

在本文研究過(guò)程中，TPPA、ELIAS和TUST三種不同的檢測(cè)方法在檢測(cè)梅毒血清過(guò)程中具有良好的特異性、敏感度和精準(zhǔn)率，并且三種方法的差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。另外，TPPA檢測(cè)方法具備良好的精準(zhǔn)性和靈敏度，然后是ELISA檢測(cè)方法，最后為TRUST方法。在對(duì)梅毒血清實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中，為了對(duì)梅毒血清檢測(cè)精準(zhǔn)性進(jìn)行保證，要使用針對(duì)性檢測(cè)方法或者聯(lián)合檢測(cè)，從而提高檢測(cè)精準(zhǔn)性，以此為患者治療提供診斷基礎(chǔ)。