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        藏用藥棘豆的種類及其藥用價值研究進展

        2022-04-25 23:14:44裴娜歐陽輝馮育林楊世林鐘國躍
        食品界 2022年4期
        關(guān)鍵詞:棘豆柔毛沙棘

        裴娜 歐陽輝 馮育林 楊世林 鐘國躍

        藏用藥棘豆包含的品種多樣,有必要對其品種進行整理,并對其活性成分進行研究。本文概述了藏用藥棘豆的基本特點和生長習(xí)慣,進一步整理了藏用藥棘豆品種整理,分析了藏用藥棘豆活性成分,以為該藥物的臨床應(yīng)用提供可行性借鑒。

        在傳統(tǒng)的藏藥中,以較為常見的鐮形棘豆為例,其作為豆科棘豆屬植物鐮形棘豆的干燥全草,清熱解毒,用于疫癘等疾病的治療中,可發(fā)揮生肌愈瘡、澀脈止血、通便的效能;外敷治瘡癤腫痛。主要組成成分為黃酮類、生物堿類、多糖類、揮發(fā)油及皂苷等。棘豆的化學(xué)成分和體外抑菌活性,采用GC-MS技術(shù)對各植物乙醇提取物的化學(xué)成分進行分析與鑒定;巖青蘭、旱辣蓼和輪葉棘豆中具有生物活性的化合物分別為13、19、15種,其中黃酮類化合物分別為9、12、13種。現(xiàn)就藏用藥棘豆品種整理和活性成分研究如下。

        1. 藏用藥棘豆概述

        藏用藥棘豆為多年生草本,密被灰白色短柔毛。嫩莖呈鈍方柱形,密被柔毛,老莖近圓柱形的藥材。羽狀復(fù)葉長2-5cm;托葉膜質(zhì),基部與葉柄貼生,分離部分披針狀錐形,疏被柔毛。多花組成頭形總狀花序,果時伸長;花冠紫色。其生長習(xí)性為:在半干旱半荒漠地區(qū)生長良好。極度耐旱,耐寒性亦佳。由于美麗棘豆建植和維護成本低,抗干擾能力和自我修復(fù)能力強,同其他沙漠化植物一樣,是良好的干旱區(qū)城市園林綠化的優(yōu)良花卉植物選擇。輪葉棘豆 Oxytropis chiliophylla Royle的全草 。7-9月收集狼把草,清洗切條,晾干。茯苓功效特異,苦,寒。有毒性;功效與作用特異,活血消炎,治腹瀉止痛。用于外傷流血、瘡癤腫疼、腸炎腹瀉;外敷可快速消腫、活血。

        2. 藏用藥棘豆品種整理

        基于中醫(yī)異病同治理論,預(yù)測出棘豆止咳散中多葉棘豆治療急性支氣管炎、哮喘具有多成分-多靶點-多通路的特點,為棘豆止咳散的基礎(chǔ)研究、臨床應(yīng)用提供了理論依據(jù);利用中藥數(shù)據(jù)庫(TCMID)搜索多葉棘豆單味蒙藥治療急性支氣管炎、哮喘的靶點,通過String數(shù)據(jù)庫對關(guān)鍵作用靶點構(gòu)建蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò);多葉棘豆治療急性支氣管炎、哮喘的作用機制,借助Clue Go對關(guān)鍵作用靶點進行基因分析和KEGG富集;共得到86個多葉棘豆治療急性支氣管炎、哮喘的作用靶點,富集分析其生物過程與細胞缺氧反應(yīng)、炎癥反應(yīng)最為密切,KEGG分析腫瘤壞死因子(TNF)信號通路最為顯著,靶點腫瘤壞死因子α與有強烈的結(jié)合活性。

        基于沙棘油的調(diào)控研究等,因其化學(xué)成分變化賦予了其多成分、多靶點調(diào)控機制,故在實踐中發(fā)揮了顯著的臨床指導(dǎo)效應(yīng);采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)法檢測沙棘油樣品中脂肪酸的組成;通過中藥系統(tǒng)藥理數(shù)據(jù)庫與分析平臺(TCMSP)搜索,Swiss TargetPrediction數(shù)據(jù)庫預(yù)測沙棘油有效成分對應(yīng)靶點;通過DisGeNET等數(shù)據(jù)庫,獲取炎癥相關(guān)靶點;構(gòu)建沙棘油抗炎的“活性成分-作用靶點”的網(wǎng)絡(luò)圖譜軟件,基于生物活性的潛在分析等,在錄入STRING平臺構(gòu)建靶點間的蛋白相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò)的靶點中,基于GO富集分析和KEGG通路富集的數(shù)據(jù)庫等發(fā)揮了顯著的富集效應(yīng);通過測定并篩選得到肉豆蔻酸、棕櫚酸、棕櫚油酸等8種活性成分,檢索并預(yù)測得到208個對應(yīng)靶點。利用在線網(wǎng)站篩選出PPARG、PPARA、PTPN1、PTGES、RORC等19個成分和疾病的交集靶點,涉及信號通路有癌癥通路、非酒精性脂肪肝(NAFLD)等。

        采用超高效液相色譜-四極桿-靜電場軌道阱高分辨率質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)對西藏沙棘中的化學(xué)成分進行定性分析,隨后通過DPPH自由基和超氧陰離子清除實驗評價石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水4個不同極性部位的抗氧化活性,并利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法進行功能富集和通路分析,篩選抗氧化相關(guān)成分并初步闡釋作用機制,在此基礎(chǔ)上整合多源信息對抗氧化質(zhì)量標(biāo)志物進行預(yù)測分析;從西藏沙棘中共鑒定出51個化學(xué)成分,包括黃酮類18個、萜類14個、生物堿類6個、香豆素和苯丙素類各4個、揮發(fā)性成分3個、多酚類2個。不同部位的抗氧化能力:乙酸乙酯>正丁醇>水>石油醚。西藏沙棘的主要年成分分析中,基于槲皮素、木犀草素及山柰酚等黃酮類成分的分析,在PI3K/Akt和FoxO信號通路發(fā)揮抗氧化作用。綜合干法和濕法結(jié)果預(yù)測槲皮素、木犀草素和山柰酚為西藏沙棘的抗氧化質(zhì)量標(biāo)志物。

        國內(nèi)外學(xué)者從黃花棘豆中發(fā)現(xiàn)了近300多個化合物,包括生物堿類、黃酮類和三萜皂苷類等類型。其生物活性涉及抗腫瘤、抗乙型肝炎病毒、殺蟲、抑菌、抗缺氧等相關(guān)化合物的效應(yīng)。采用CCK-8法,檢測黃酮化合物對人肺腺癌A549細胞的抑制作用;從鐮形棘豆的乙酸乙酯部位分離中得到7-羥基二氫黃酮及2、4-二羥基二氫查爾酮;且經(jīng)HPLC純度證實>98%;CCK-8法結(jié)果顯示,7-羥基二氫黃酮及2,4-二羥基二氫查爾酮均能顯著抑制A549細胞活力,并呈量效關(guān)系,48h的IC50值分別為137.6μg/mL和63.83μg/mL。分離得到的2個黃酮成分對A549細胞均有良好的抑制作用,為后期抗肺癌機制研究提供了實驗基礎(chǔ)。由己內(nèi)酰胺聚合而成的尼龍6和由己二酸和己二胺聚合而成的尼龍66。聚酰胺分子中含有豐富的酰胺基團,可與酚類、醌類、硝基化合物等形成氫鍵而被吸附,與不能形成氫鍵的化合物分離。常用藏藥材鐮形棘豆(Oxytropis falcata Bunge)和肉果草(Lancea tibetica Hook.f.et Thoms)為研究對象,構(gòu)建了高效、普適性、能實現(xiàn)系統(tǒng)分離的二維液相色譜方法;利用建立的二維液相色譜分離方法,對鐮形棘豆和肉果草進行了化學(xué)成分研究;ODS C18和XAqua C18色譜柱具有分離選擇性。因此,在二維制備中選擇了XAqua C18制備柱對組分1-5進行了進一步的分離并從鐮形棘豆中得到了8個純度大于98%的化合物。其中包括1個酚酸類化合物、1個酰胺類生物堿以及6個黃酮類化合物。通過對兩種藏藥的化學(xué)成分及其分離方法的研究,進一步完善了鐮形棘豆和肉果草的物質(zhì)基礎(chǔ)研究,實現(xiàn)HPLC-DPPH分析方法與二維制備液相色譜的結(jié)合,為從天然產(chǎn)物中導(dǎo)向分離活性化合物提供了參考。從瘤胃瘺管每天給5只山羊投服黃花棘豆粉末(10g/kgB·W),以研究該草對山羊的毒性。試驗羊在18-22天開始出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,表現(xiàn)為精神沉郁,目光呆滯,反應(yīng)遲純,喜臥,四肢無力,后肢麻痹,少尿等;在33-65天內(nèi)死亡。實驗室檢查發(fā)現(xiàn),肝功明顯變化,GOT活性,黃疸指數(shù)明顯升高,血漿α-甘露糖苷酶活性降低,(GSH-Px)活性無變化,尿低聚糖含量升高,在濃縮尿中可檢出生物堿。

        3. 不同品種藏用藥棘豆活性成分研究綜述

        經(jīng)D101大孔樹脂純化后,沙棘黃酮中相關(guān)指標(biāo)的純度如:沙棘果渣、沙棘籽、沙棘葉分別為73.3%、66.7%、36.7%。單因素分析表明,沙棘葉,優(yōu)化乙醇體積分?jǐn)?shù)、料液比、提取時間和提取次數(shù);以總黃酮提取率、石油醚脫脂、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度、料液比(g/mL)、提取時間、提取次數(shù)、總黃酮提取率70%、80℃,1:16,2h,3次,7.10%。

        砂珍棘豆,多年生草本,高5-15cm。根長圓柱形,黃褐色。莖短縮或幾乎無地上莖。葉叢生,多數(shù)葉為輪生小葉的復(fù)葉,葉軸密被長柔毛,每葉有6-12輪,每輪有4-6小葉,均密被長柔毛;托葉卵形,先端尖,密被長柔毛;小葉片線形、披針形或線狀長圓形,長3-10mm,寬1-2mm,先端銳尖,基部楔形,邊緣常內(nèi)卷??偦ü6噍^葉長,總狀花序縮短近頭狀,生于花室頂端;苞片線形;萼鐘狀,長3-4mm,密被長柔毛;萼齒線形,與萼簡近等長或為萼簡長的1/3,密被長柔毛;花較小,長8-10mm,粉紅色或帶紫色,旗瓣倒卵形,先端圓或微凹,基部有短爪,翼瓣和龍骨瓣較旗瓣短;雄蕊10,二體;子房有短柔毛,花柱先端稍內(nèi)彎。莢果寬卵形,膨脹,長約1cm,先端具短喙,表面密被短柔毛。花期5-7月,果期7-9月。LC-MS/MS檢測推測沙棘黃酮的快速降血糖的藥用功能可能跟異鼠李素、槲皮素和山奈酚含量相關(guān)。

        寬苞棘豆中含有酚類物質(zhì)、鞣質(zhì)、還原性糖、皂甙、生物堿、黃酮及其甙類、氨基酸和氰甙。鐮形棘豆有19個共有指紋峰,輪葉棘豆有24個共有指紋峰,鐮形棘豆和輪葉棘豆有11個共有指紋峰。通過對照品對照,指認(rèn)了兩種藥材中共有的7個指紋峰以及輪葉棘豆特有的1個指紋峰的化合物結(jié)構(gòu)。研究結(jié)果表明,兩種藥材盡管在化學(xué)成分上存在一定差異,但是其主要成分基本相同,因此從化學(xué)成分的角度上為兩種藥材均作為“俄大夏”入藥提供了科學(xué)依據(jù),同時也提示為了保證臨床用藥的療效和一致性。利用MTT比色法測定大果沙棘果渣黃酮對HT29結(jié)腸癌細胞生長的抑制率;用單細胞凝膠電泳技術(shù)(SCGE)觀察大果沙棘果渣黃酮對HT29細胞DNA的損傷情況。大果沙棘果渣黃酮在濃度20-200mg/L時對結(jié)腸癌細胞有明顯的抑制作用,作用72h最大抑制率為81.28%;單細胞凝膠電泳顯示大果沙棘果渣黃酮作用細胞48h后可見明顯的彗星狀拖尾。

        綜上所述,藏用沙棘豆的活性成分中,黃酮類和三萜皂苷類等類型,在抗腫瘤上,通過提取相關(guān)化合物,以發(fā)揮抗乙型肝炎病毒、殺蟲、抑自由基等的突出作用。上文概述了藏用藥棘豆的基本特點和生長習(xí)慣,進一步整理了藏用藥棘豆品種整理,分析了藏用藥棘豆活性成分,以為本病的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)機制研究提供可行性借鑒。

        作者簡介:

        裴娜(1983.9-),漢族,女,江西余干人,本科,藥師;研究方向:主要從事藥學(xué)研究。

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