于紅衛(wèi) 孫楓林 鞠光秀 趙雅婷
在經(jīng)濟(jì)發(fā)展中,海產(chǎn)品食用需求提高,數(shù)量不斷增多。為了確保海產(chǎn)品的健康,驗(yàn)證海產(chǎn)品的質(zhì)量,需尋求高效的檢測技術(shù),對(duì)海產(chǎn)品成分實(shí)施評(píng)估??焖贆z測技術(shù)在這樣的背景下,被大范圍推廣。相對(duì)于傳統(tǒng)檢測儀器,快速檢測工作時(shí)間短,檢測效率較高,只需十幾分鐘,便可以斷定被檢物質(zhì)性質(zhì),評(píng)判其是否處于正常狀態(tài),從而篩查有毒物質(zhì),提高食品安全性。由此可以看出,海產(chǎn)品質(zhì)量快速檢測應(yīng)用價(jià)值高,對(duì)該技術(shù)開展研究意義深遠(yuǎn)。
引言
研究表明,在所有食品中,最具營養(yǎng)成分的就是海產(chǎn)品,這一點(diǎn)毋庸置疑。隨著人們對(duì)海產(chǎn)品的喜愛度提升,海產(chǎn)品安全檢測引發(fā)關(guān)注,作為保障海產(chǎn)品食用品質(zhì)的重要手段,安全檢測技術(shù)正在朝兩個(gè)方向發(fā)展。一是實(shí)驗(yàn)室檢測(常規(guī)檢測);二是現(xiàn)場快速檢測?,F(xiàn)實(shí)中,隨著技術(shù)速測化程度升級(jí),再加上裝備的便攜化提升,快速檢測技術(shù)成為了主流。
1. 快速檢測實(shí)現(xiàn)路徑及檢測內(nèi)容
通過研究發(fā)現(xiàn),在海產(chǎn)品加工銷售環(huán)節(jié)中,快速檢測不可或缺,是實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測的另一種表現(xiàn)形式和有效補(bǔ)充,可起到基本保障作用?,F(xiàn)實(shí)應(yīng)用中,快速檢測實(shí)現(xiàn)路徑較復(fù)雜,一是樣品前處理技術(shù)把握,這是前提,不容忽視;二是簡易檢驗(yàn)方法運(yùn)用;三是利用科學(xué)途徑,將實(shí)驗(yàn)用試劑等轉(zhuǎn)化,制作成標(biāo)準(zhǔn)化的專用產(chǎn)品,借此提高快速檢測應(yīng)用水平。結(jié)合現(xiàn)實(shí)可知,海產(chǎn)品檢測項(xiàng)目屬于食品安全性檢測中相對(duì)復(fù)雜的項(xiàng)目,包括的檢測項(xiàng)目繁雜,除了非法添加物質(zhì)外(如甲醛、火堿等),還要重點(diǎn)檢測獸藥殘留(獸藥殘留特指抗生素類物質(zhì)的含量)、微生物以及農(nóng)藥殘留等。大部分海產(chǎn)品受到大眾追捧,不僅是因?yàn)槠湮兜栗r美,同時(shí)也是源于營養(yǎng)成分高的緣故。營養(yǎng)學(xué)家曾指出,海產(chǎn)品高蛋白,同時(shí)具有低脂肪特征,在人體中既可以保證低熱量,又可以實(shí)現(xiàn)易消化吸收功效。海產(chǎn)品中,氨基酸、維生素較豐富,同時(shí)不缺乏碘、鈣、鋅等。為了提高檢驗(yàn)可行性,確保海產(chǎn)品質(zhì)量,本文將對(duì)快速檢測方法(圍繞海產(chǎn)品進(jìn)行的)實(shí)施綜述。
2. 樣品快速檢測前處理技術(shù)
實(shí)踐表明,樣品前處理至關(guān)重要,是分析測試階段最為高效的環(huán)節(jié)。在應(yīng)用期間,選擇高效的樣品前處理技術(shù),是安全檢測實(shí)施的保障,不容忽視。近十幾年來,相關(guān)研究接連不斷,海產(chǎn)品樣品前處理的支撐技術(shù)較多,除了比較熟悉的微波萃取外,還有實(shí)效性較高的超聲萃取和平穩(wěn)的超臨界流體萃取等。為了確保樣品前處理效果,還應(yīng)與色譜技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用。
2.1 微波萃取
微波萃取作用顯著,現(xiàn)實(shí)應(yīng)用中特指利用微波電磁輻射完成整個(gè)檢測過程,運(yùn)用有效手段,依托可行的方法,將目標(biāo)物質(zhì)萃取出來。總結(jié)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)可知,微波萃取應(yīng)用價(jià)值高,資源利用率低,可以用最少的樣品,完成最優(yōu)化的萃取,完成低時(shí)間成本的操作。同時(shí),萃取過程破壞性小,適用性較強(qiáng),可節(jié)省溶劑和樣品。從應(yīng)用現(xiàn)狀了解到,目前微波萃取滲透面極廣,在低沸點(diǎn)重金屬萃取中利用率較高。例如:張?zhí)m等人曾高效利用微波萃取,分解出了魚肉中的汞。采用萃取技術(shù)時(shí),同時(shí)運(yùn)用了高效液相色譜,這種方法進(jìn)行測定操作簡單,可從根源確保樣品提取效率,合理壓縮樣品分析時(shí)間,借此提高汞形態(tài)的快速效率,確保萃取與分析質(zhì)量達(dá)標(biāo)。作為一種快速前處理的核心支撐技術(shù),微波萃取值得推廣,但在其實(shí)施中,還需明確微波萃取的不足之處。結(jié)合應(yīng)用現(xiàn)狀可知,這種萃取技術(shù)經(jīng)常會(huì)迫于溫度和壓力,喪失萃取的精準(zhǔn)度,整體技術(shù)要求較高,環(huán)境控制比較復(fù)雜,所以在快速檢測中,想要高水平運(yùn)用微波萃取,需優(yōu)先考慮應(yīng)用條件是否達(dá)標(biāo)。
2.2 超聲萃取
在科技的引領(lǐng)下,超聲萃取逐漸成熟。該技術(shù)實(shí)施原理簡單,主要利用超聲波完成關(guān)鍵成分的萃取,以此來促進(jìn)重要萃取成分的擴(kuò)散,借助外力釋放萃取物,并讓其充分與溶劑混合,在整個(gè)過程中必需的設(shè)備較簡單。技術(shù)應(yīng)用期間,被萃取物質(zhì)從不具備選擇性差異。憑借其技術(shù)特征可推斷出,超聲萃取技術(shù)價(jià)值高,在食品前處理中優(yōu)勢顯著,比較適用于無機(jī)重金屬物質(zhì)萃取,同時(shí)也可以將其滲透到甲醛、食品添加劑合理的消化萃取中。實(shí)踐應(yīng)用中,國外學(xué)者M(jìn)endez等人,將該技術(shù)應(yīng)用到了貽貝等六類海產(chǎn)品中,希望可以得出總硒的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。最終結(jié)果得出:超聲萃取比較方便,檢測可靠性較高,回收率相對(duì)理想。但超聲萃取同樣有不足,主要源于萃取效率波動(dòng)大,在萃取中受樣品粒度影響直接,再加上萃取容器屏蔽作用大,會(huì)弱化萃取的效果。
2.3 超臨界流體萃取
超臨界流體萃取,跟上述方法相比,是理念最為先進(jìn)的,可以簡稱為SFE。應(yīng)用期間,SFE是以超臨界流體(特殊介質(zhì))為溶劑,在技術(shù)設(shè)備加持下,提取分離混合物。在萃取過程中,可以看到精餾的特點(diǎn),其優(yōu)勢在于萃取溶劑回收簡便,所需時(shí)間較短,適合熱穩(wěn)定性差的有毒物質(zhì)檢測?;谶@樣的特征,可以將超臨界流體萃取,巧妙融合在海產(chǎn)品農(nóng)藥殘留鑒定中。例如:學(xué)者徐敦明等,就憑借該技術(shù)原理建立了離線超臨界CO,并在設(shè)備保障下,對(duì)魚肉中毒死蟬殘留量實(shí)施了驗(yàn)證,檢測效果比較理想,最小檢出量達(dá)0.01ng。同樣,該技術(shù)并不是完美的,在應(yīng)用該技術(shù)時(shí),需考慮萃取技術(shù)局限,設(shè)法滿足高壓條件要求。
3. 樣品快速檢測技術(shù)
經(jīng)總結(jié)研究發(fā)現(xiàn),樣品快速檢測技術(shù)存在的價(jià)值較高,如果按照實(shí)施手段分類的話,該方法分為兩種,除了實(shí)驗(yàn)室快速檢測(相對(duì)常規(guī)方法),還有現(xiàn)場快速檢測。在科學(xué)檢測階段,運(yùn)用試劑較少,同時(shí)檢測結(jié)果保存時(shí)間長,分析簡單快速且準(zhǔn)確。實(shí)踐證明,樣品快速檢測滲透、有機(jī)融合到海產(chǎn)品檢測領(lǐng)域后,所衍生出的支撐技術(shù)眾多,包括化學(xué)速測法在內(nèi)多種先進(jìn)手段。下面將進(jìn)行一一介紹。
3.1 化學(xué)速測法
化學(xué)速測法值得大范圍推廣,主要源于其結(jié)果顯示直觀,同時(shí)操作相對(duì)簡便,在應(yīng)用期間,靈敏度和專一性高,在具體應(yīng)用中,存在化學(xué)比色法等多個(gè)分支。以化學(xué)比色法為例,該方法主要利用明顯顏色反應(yīng),迅速、充分檢測待測物質(zhì),同時(shí)完成半定量分析,此類方法優(yōu)勢突出,可用于非法添加物質(zhì)類的綜合測定,同時(shí)也可以將其滲透到重金屬及微生物評(píng)估中。例如:甲醛快速檢測試劑盒等,在眾多領(lǐng)域得到應(yīng)用。為了強(qiáng)化檢測成果,與試劑檢測方法配套出現(xiàn)的高效率型微型光電比色計(jì),設(shè)計(jì)理念逐漸成熟。借助食品甲醛快速檢測儀,在進(jìn)行海產(chǎn)品檢測時(shí),僅需3分鐘便可完成深度檢測,科學(xué)顯示甲醛濃度。同時(shí),甲醛快速檢測儀在使用中增加了傳感器,可遠(yuǎn)距離傳輸數(shù)據(jù),這樣就可以加強(qiáng)監(jiān)控,提高食品快速檢測的實(shí)用性。另外,重金屬類的快速檢測。學(xué)者竇紅的團(tuán)隊(duì)利用化學(xué)比色法,并參考固相萃取柱,建立了魚、蝦、蟹優(yōu)質(zhì)水產(chǎn)品的隱性孔雀石綠數(shù)據(jù)庫,并實(shí)施了快速檢測,在先進(jìn)技術(shù)保障下,檢出限達(dá)到2ug/kg,由此可證明化學(xué)比色法的價(jià)值。其應(yīng)用步驟如下:先把水產(chǎn)品打成勻漿,越均勻越好,然后再放入試紙。通過試紙顏色比對(duì),查出螃蟹、蛤蜊等是否有重金屬,借此提高水產(chǎn)品品質(zhì)?;瘜W(xué)比色法應(yīng)用效果積極,在快速檢測領(lǐng)域地位顯著,檢測速度極快。但是檢測局限性大,相比于其他方法,其金屬檢測靈敏度低,只有將化學(xué)比色法應(yīng)用到半定量的場合中,效果才能理想。
3.2 酶抑制速測法
在海產(chǎn)品快速檢測領(lǐng)域,酶抑制速測法同樣受到重視。酶抑制技術(shù)實(shí)施原理簡單,主要用于重金屬檢測。剖析其原理可知,酶抑制速測法之所以能發(fā)揮作用,主要依靠進(jìn)入生物體內(nèi)的重金屬融合酶的活性后,會(huì)促使酶活性中心結(jié)構(gòu)出現(xiàn)系列變化(中心結(jié)構(gòu)包含底物、酶系統(tǒng)等),在此基礎(chǔ)上,便可分離重金屬。酶抑制技術(shù)使用后,會(huì)使顯色劑顏色等形成變化,造成pH值、電導(dǎo)率等重要參數(shù)改變,這種改變較為明顯,可通過肉眼直觀判斷光、電信號(hào)的存在。在實(shí)踐中,酶抑制速測法優(yōu)勢突出,對(duì)重金屬的檢測滲透領(lǐng)域廣泛,一些有效的試紙條、檢測皿等產(chǎn)品接連涌現(xiàn),與光譜法相比,該項(xiàng)技術(shù)特異性強(qiáng)。但在具體實(shí)施中,可檢測重金屬種類少,這一點(diǎn)是該技術(shù)的不足之處。劉京萍等運(yùn)用該方法對(duì)鎘、錫、鉛等魚、蝦中的重金屬實(shí)施了檢測,實(shí)踐證明,標(biāo)準(zhǔn)差小于1.0%。
3.3 免疫速測法
在具體應(yīng)用中,按照標(biāo)記物的不同,可將免疫速測法細(xì)致劃分,將其分為EIA(酶免疫檢測)、RIA(放射性免疫檢測)和FIA(熒光免疫檢測)等。實(shí)踐表明,免疫速測法作用顯著,在海產(chǎn)品檢測中起到重要支撐作用,主要應(yīng)用于獸藥殘留。結(jié)合現(xiàn)實(shí)經(jīng)驗(yàn)可知,免疫速測法應(yīng)用價(jià)值在于靈敏度接近于儀器分析,這類操作適合于現(xiàn)場篩選,在應(yīng)用中可看出其特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。
3.4 分子生物學(xué)方法
除了上述方法外,分子生物學(xué)方法是重要的討論方向。在具體應(yīng)用中,因?yàn)榉肿由飳W(xué)檢測精度高,所以可將其用于生物毒素(海產(chǎn)品中)的檢測。分子生物學(xué)方法同樣存在較多分支,本文將重點(diǎn)研究PCR技術(shù)和先進(jìn)的生物芯片技術(shù)。
3.4.1 PCR技術(shù)
提到分子生物學(xué)方法,人們總是先想到PCR技術(shù)。PCR技術(shù)普及度高,是應(yīng)用范圍最廣泛的優(yōu)質(zhì)檢測方法。實(shí)踐表明,在食源性致病菌的細(xì)致化檢測中,常用到PCR技術(shù)。研究發(fā)現(xiàn),食源性致病菌的觀測,需要依據(jù)核酸序列設(shè)計(jì),不斷擴(kuò)增特異引物,然后借用凝膠電泳等觀察擴(kuò)增結(jié)果?,F(xiàn)階段,已經(jīng)開始在PCR基礎(chǔ)上發(fā)展熒光定量PCR技術(shù),將其用于致病微生物檢測,確保了檢測的特異、敏感等優(yōu)點(diǎn)。為了驗(yàn)證PCR技術(shù)可行性,翁思聰?shù)壤每煽康腜CR技術(shù),完成了水產(chǎn)品中沙門氏菌等細(xì)菌檢測試劑盒的研制。應(yīng)用結(jié)果表明,在24h內(nèi),運(yùn)用菌檢測試劑盒可完成海產(chǎn)品的檢驗(yàn),這種方法效果穩(wěn)定,同時(shí)具有理想的可重復(fù)性,可降低檢測的成本。周向陽等借助熒光定量PCR技術(shù),搭建了優(yōu)質(zhì)的沙門菌的檢測體系,在熒光定量PCR技術(shù)輔助下,樣品檢出率為10.0%,檢測數(shù)據(jù)非常貼近國標(biāo)法檢測結(jié)果。由此可以證明,PCR技術(shù)應(yīng)用的合理性。
3.4.2 生物芯片技術(shù)
生物芯片作用顯著,在技術(shù)應(yīng)用中,深度融合了化學(xué)、計(jì)算機(jī)等知識(shí),這種學(xué)科高度交叉的技術(shù),代表著快速檢測的最高水平。其原理是將待測樣品處理后,加到芯片表面,同時(shí)借助特異性親和反應(yīng),分離出待測成分,并將其與生物識(shí)別分子結(jié)合,利用這樣的方式,實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的檢測。現(xiàn)階段,檢驗(yàn)海產(chǎn)品的毒素通常會(huì)運(yùn)用該項(xiàng)技術(shù),檢測結(jié)果準(zhǔn)確穩(wěn)定。
4. 快速檢測的發(fā)展趨勢
目前,海產(chǎn)品的價(jià)值被更多人看到,隨著海產(chǎn)品需求加大,餐桌上螃蟹、蛤蜊等食材的增多,快速檢測也受到關(guān)注,市場認(rèn)可范圍逐步擴(kuò)大。因?yàn)楹.a(chǎn)品檢測復(fù)雜,涉及檢測內(nèi)容多,實(shí)施各環(huán)節(jié)需銜接緊密,同時(shí)輔助優(yōu)質(zhì)的快速檢測技術(shù),借此從源頭推動(dòng)優(yōu)質(zhì)的海產(chǎn)品安全檢測進(jìn)程,使檢測達(dá)到理想程度?,F(xiàn)實(shí)應(yīng)用中,海產(chǎn)品的快速檢測會(huì)按照以下趨勢發(fā)展。(1)改善檢測質(zhì)量,接連提升檢測靈敏度。在科技的引領(lǐng)下,檢測的高新技術(shù)會(huì)不斷涌現(xiàn),從而抬升檢測靈敏度,提升快速檢測應(yīng)用價(jià)值。(2)檢測速度不斷加快。在科技的牽引下,智能化芯片開始使用,這一大膽嘗試,提升了檢測器的性能,同時(shí)促使了檢測周期縮短。通常情況下,一項(xiàng)復(fù)雜的項(xiàng)目,在運(yùn)用快速檢測技術(shù)后,可以保證2小時(shí)內(nèi)得出結(jié)果。(3)選擇性不斷提高。研究發(fā)現(xiàn),各種傳感器的使用,提升了檢測的水平,讓原本無法實(shí)現(xiàn)的高難度混合體測定成為了可能,檢測品質(zhì)大大提高。(4)便攜化方向發(fā)展。由于微電子技術(shù)滲透,檢測儀器小型化已經(jīng)成為必然,再加上傳感器的普及,便攜化發(fā)展方向十分明確,在多種技術(shù)保障下,快速檢測的實(shí)現(xiàn)將會(huì)非常順暢。(5)前處理裝置的研究深入?;诤.a(chǎn)品樣品復(fù)雜性,在實(shí)施快速檢測期間,為達(dá)到有效檢測效果,需提升前處理技術(shù)重視程度,加大前處理裝置的研制,借助這樣的手段,縮短快速檢測時(shí)間,在處理技術(shù)保障下,提高檢測準(zhǔn)確度??偠灾?,海產(chǎn)品快速檢測發(fā)展是在充分迎合市場,同時(shí)也體現(xiàn)了我國食品安全意識(shí)的強(qiáng)化,運(yùn)用高效檢測手段,可精準(zhǔn)分析海產(chǎn)品中的不良成分,為海產(chǎn)品食用安全夯實(shí)基礎(chǔ)。
結(jié)論
綜上所述,隨著海產(chǎn)品檢測質(zhì)量要求升級(jí),在其安全檢測中,需巧妙運(yùn)用化學(xué)速測法、免疫速測法等,提高檢測的品質(zhì)。但快速檢測方法在落實(shí)期間,會(huì)忽視前處理技術(shù)應(yīng)用,降低操作規(guī)范性,導(dǎo)致不完善之處增多,弱化實(shí)際檢測成果。基于此,需加大快速檢測研究力度,通過完善檢測手段,提高快速檢測的實(shí)用性,確保健康的海產(chǎn)品市場環(huán)境。