南 洋,李 昕，劉政甲

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 1.放療科；2.胸外科，吉林 長(zhǎng)春130033)

研究顯示中國(guó)肺癌患者在2024年會(huì)達(dá)到500萬(wàn)例[1]，以現(xiàn)有的肺癌死亡人數(shù)占比18.4%來計(jì)算，預(yù)計(jì)死亡人數(shù)將達(dá)到或超過92萬(wàn)[2]。肺癌的術(shù)前診斷主要依據(jù)影像學(xué)檢查，存在一定的誤診風(fēng)險(xiǎn)[3-4]。CD44是廣泛表達(dá)于細(xì)胞膜上的跨膜蛋白多糖分子，屬于白細(xì)胞黏附分子(LAM),已被證實(shí)CD44參與結(jié)直腸癌、卵巢癌、前列腺癌等多種疾病的腫瘤侵襲及演進(jìn)過程[4-6]。本研究通過檢測(cè)老年肺癌患者CD44表達(dá)差異，探討CD44對(duì)老年肺癌患者預(yù)后的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2020年1月至2021年1月就診本院的老年肺癌患者100例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)影像學(xué)檢查、病理組織學(xué)檢查符合原發(fā)性肺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡60-80歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他腫瘤患者；②合并肺部其他疾病；③慢性感染性疾病患者；④不能確定死亡原因或病史信息不詳者。其中復(fù)發(fā)37例、伴發(fā)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移55例。100例患者中男性63例、女性37例，年齡60-78歲，平均年齡(66.71±4.08)歲，病理類型均為非小細(xì)胞肺癌，其中鱗癌63例、腺癌37例，放化療患者75例、手術(shù)治療25例。募集患者肺癌組織標(biāo)本及對(duì)應(yīng)病理證實(shí)無腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)的正常癌旁組織標(biāo)本。

1.2 方法

1.2.1分組方法 將納入患者依據(jù)首發(fā)肺癌、復(fù)發(fā)肺癌、伴發(fā)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況進(jìn)行分組，分為復(fù)發(fā)組、轉(zhuǎn)移組，對(duì)應(yīng)將其余患者歸入首發(fā)組、未轉(zhuǎn)移組。

1.2.2免疫組化染色 按試劑盒使用說明書操作。高倍鏡(×400)下選擇10個(gè)視野，當(dāng)陽(yáng)性(細(xì)胞質(zhì)中存在棕黃色或棕褐色顆粒)細(xì)胞數(shù)占視野細(xì)胞總數(shù)百分比×細(xì)胞著色深淺評(píng)分≥4分視為CD44染色結(jié)果陽(yáng)性[7]。

1.2.3免疫組化半定量評(píng)價(jià) 將免疫組化所得組織切片取10個(gè)視野圖像，利用Image-Pro Plus圖像分析軟件進(jìn)行CD44蛋白表達(dá)的光密度值(OD)[8]計(jì)算，取OD(CD44)平均值加以比較。

1.2.4基線數(shù)據(jù)調(diào)查 收集患者性別、年齡、臨床TNM分期、腫瘤直徑、病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)情況信息。

1.3 隨訪情況

以電話隨訪或門診隨訪為主，隨訪時(shí)間為6個(gè)月，每個(gè)月隨訪1次。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 老年肺癌復(fù)發(fā)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者基線數(shù)據(jù)差異組間比較兩組性別、年齡、臨床TNM分期、病理類型、治療方式均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(見表1)。

表1 老年肺癌復(fù)發(fā)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者基線數(shù)據(jù)差異

2.2 肺癌組織與癌旁組織間CD44陽(yáng)性率及OD(CD44)值比較肺癌患者中CD44陽(yáng)性者共56例，陽(yáng)性表達(dá)率為56%(56/100)，以癌旁組織為對(duì)照，肺癌患者病灶CD44陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于癌旁組織的CD44陽(yáng)性表達(dá)率8%(8/100)(χ2=52.941，P<0.001);病灶組織的OD(CD44)值顯著高于癌旁組織(Z=13.611，P<0.001)(見表2)。

表2 不同組織間CD44陽(yáng)性率及OD(CD44)值比較

2.3 不同組間CD44陽(yáng)性率及OD(CD44)值比較首發(fā)病灶、復(fù)發(fā)病灶相比，復(fù)發(fā)病灶CD44陽(yáng)性表達(dá)率、OD(CD44)值更高(P<0.05)；轉(zhuǎn)移病灶與未轉(zhuǎn)移組病灶相比，轉(zhuǎn)移病灶的OD(CD44)值更高(P<0.05)(見表3)。

表3 老年肺癌患者不同組間CD44陽(yáng)性率及OD(CD44)值比較

2.4 老年肺癌患者OD(CD44)值用于預(yù)后情況診斷效能從ROC曲線結(jié)果來看，OD(CD44)值用于復(fù)發(fā)病灶、轉(zhuǎn)移病灶的靈敏度分別為86.49%、96.36%；OD(CD44)值用于復(fù)發(fā)病灶、轉(zhuǎn)移病灶的特異性分別為85.19%、69.44%；OD(CD44)值用于復(fù)發(fā)病灶、轉(zhuǎn)移病灶的約登指數(shù)分別為0.72、0.66；OD(CD44)值用于復(fù)發(fā)病灶、轉(zhuǎn)移病灶的曲線下面積分別為0.799、0.814(見表4)。

表4 OD(CD44)值用于不同預(yù)后的診斷效能

3 討論

CD44參與淋巴細(xì)胞活化、增殖與腫瘤細(xì)胞再循環(huán)過程，而CD44高表達(dá)的惡性腫瘤細(xì)胞更容易逃避人體的免疫系統(tǒng)，進(jìn)入淋巴細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞遷移[9-10]。CD44為重要的干細(xì)胞因子，在腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移中起促進(jìn)作用[11]。

本研究采用免疫組化及免疫組化半定量法對(duì)100例老年肺癌患者CD44陽(yáng)性表達(dá)及OD(CD44)值加以測(cè)定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，老年肺癌患者腫瘤組織的CD44陽(yáng)性表達(dá)及OD(CD44)值均高于癌旁組織?？梢姡夏攴伟┗颊叩陌┙M織內(nèi)CD44具有高表達(dá)的特征[12]。結(jié)果顯示腫瘤病灶CD44陽(yáng)性表達(dá)情況判斷肺癌患者的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)困難(P>0.05)。但OD(CD44)值在首發(fā)與復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移與未轉(zhuǎn)移患者病灶間均存在差異(P<0.01)。CD44蛋白能夠與透明質(zhì)酸相結(jié)合，產(chǎn)生降解物，對(duì)腫瘤細(xì)胞滋養(yǎng)血管的生長(zhǎng)產(chǎn)生促進(jìn)作用[13]。馮丹等[14]將圖像分析軟件引入CD44的OD值評(píng)估，進(jìn)行半定量檢測(cè)，確定OD值(CD44)在卵巢癌組織中存在高表達(dá)現(xiàn)象，且在術(shù)前接受化療與初發(fā)患者間比較存在明顯差異。因此，老年肺癌患者應(yīng)用OD值(CD44)的半定量形式有助于判斷病灶的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)。

目前，腫瘤組織中CD44的陽(yáng)性表達(dá)與不良預(yù)后關(guān)系已經(jīng)在乳腺癌[15]、腦膠質(zhì)瘤[16]等腫瘤中得到證實(shí)，CD44高表達(dá)能夠?qū)︻A(yù)后不良產(chǎn)生提示作用[17]。從本研究的ROC曲線結(jié)果來看，OD值(CD44)可作為腫瘤復(fù)發(fā)、病灶轉(zhuǎn)移的鑒別指標(biāo)。研究證實(shí)，CD44與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、腫瘤發(fā)生、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[18]。肺癌組織會(huì)對(duì)患者正常細(xì)胞的自我更新調(diào)控機(jī)制產(chǎn)生干擾作用[19]。CD44等干細(xì)胞因子已經(jīng)成為腫瘤治療及預(yù)測(cè)的新型靶點(diǎn)[20]。

綜上所述，老年肺癌患者癌組織CD44處于高表達(dá)水平，對(duì)于復(fù)發(fā)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者均具有一定的篩查優(yōu)勢(shì)，尤其是對(duì)于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者可大幅度降低漏診風(fēng)險(xiǎn)。