張欣華 ，高 寒 ，王 嘉 ，袁新敏 ，王 棟 △

（1. 內(nèi)蒙古自治區(qū)藥品檢驗(yàn)研究院·內(nèi)蒙古自治區(qū)中蒙藥標(biāo)準(zhǔn)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010000；2. 上海醫(yī)藥集團(tuán)青島國(guó)風(fēng)藥業(yè)股份有限公司，山東 青島 266510；3. 內(nèi)蒙古自治區(qū)醫(yī)療器械檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020）

肉蓯蓉是我國(guó)傳統(tǒng)名貴補(bǔ)益類中藥材，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，有“沙漠人參”之稱［1］，多分布于內(nèi)蒙古、新疆、甘肅、寧夏等荒漠地區(qū)［2-3］，味甘、咸，性溫和，具有補(bǔ)腎陽(yáng)、益精血、滋目清風(fēng)、潤(rùn)腸通便功效，廣泛用于治療陽(yáng)痿、不孕、腰膝酸軟、筋骨無(wú)力、腸燥便秘等癥［4-6］。其主要含有苯乙醇苷、木脂素、多糖、生物堿、揮發(fā)油等成分［7-13］，具有抗衰老、保肝、緩解疲勞、抗骨質(zhì)疏松、潤(rùn)腸通便等多種生物活性［14］。2015 年版《中國(guó)藥典（一部）》［15］收載的肉蓯蓉為列當(dāng)科肉蓯蓉屬植物肉蓯蓉Cistanche deserticolaY.C.Ma或管花肉蓯蓉Cistanche tubulosa（Schenk）Wight 的干燥帶鱗葉的肉質(zhì)莖。為此，本研究中依據(jù)肉蓯蓉項(xiàng)下規(guī)定，對(duì)內(nèi)蒙古自治區(qū)內(nèi)抽取的23 批肉蓯蓉樣品開(kāi)展專項(xiàng)抽驗(yàn)工作，同時(shí)將采集及收集到的正品肉蓯蓉藥材與肉蓯蓉含量測(cè)定結(jié)果合格的樣品（簡(jiǎn)稱檢品）進(jìn)行了特征圖譜的對(duì)比分析，為全面評(píng)價(jià)肉蓯蓉藥材及飲片的質(zhì)量提供了參考?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 抽驗(yàn)情況

本次專項(xiàng)抽驗(yàn)中，收到內(nèi)蒙古自治區(qū)9 個(gè)市（盟）、共23 批肉蓯蓉，包括20 批飲片與3 批藥材，涉及6 個(gè)省區(qū)市的22 家生產(chǎn)企業(yè)。其中，肉蓯蓉12 批，管花肉蓯蓉11 批。采集與收集15 批正品肉蓯蓉和10 批正品管花肉蓯蓉，經(jīng)內(nèi)蒙古自治區(qū)藥品檢驗(yàn)研究院王棟副主任中藥師鑒定為正品。

2 方法與結(jié)果

2.1 法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)

2.1.1 儀器與試藥

儀器：ME5 型電子天平（德國(guó)賽多利斯公司，精度為百萬(wàn)分之一）；Mettler AE - 100 型電子天平（瑞士梅特勒-托利多公司，精度為萬(wàn)分之一）；KQ-500DE 型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，功率為500 W，頻率為40 kHz）；20AT 型高效液相色譜儀（日本島津公司）。

試藥：松果菊苷對(duì)照品（批號(hào)為111670 - 201706，純度為89.7%），毛蕊花糖苷對(duì)照品（批號(hào)為111530 -201713，純度為92.5%），京尼平苷酸對(duì)照品（批號(hào)為111828 - 201604，純度為97.4%），均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；肉蓯蓉苷A 對(duì)照品（批號(hào)為MUST -18031504，純度為95.84%），2′ - 乙酰毛蕊花糖苷對(duì)照品（批號(hào)為MUST-18031504，純度為99.28%），異毛蕊花糖苷對(duì)照品（批號(hào)為MUST - 18083110，純度為99.16%），均購(gòu)自成都曼斯特生物科技有限公司；8-表馬錢(qián)子酸對(duì)照品（上海鈺博生物科技有限公司，批號(hào)為82509-41-9，純度不低于98%）；乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純，水為高純水。

2.1.2 檢查項(xiàng)目［15］及結(jié)果

性狀：未發(fā)現(xiàn)不合格樣品，但有2 批樣品為肉蓯蓉與管花肉蓯蓉的混合品，其中大部分為管花肉蓯蓉，摻有少許肉蓯蓉。

薄層色譜鑒別：23 批肉蓯蓉檢驗(yàn)結(jié)果均符合規(guī)定，合格率為100%。供試品溶液薄層色譜圖中，在與毛蕊花糖苷和松果菊苷對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

水分：9 批管花肉蓯蓉及2 批肉蓯蓉與管花肉蓯蓉混合品的結(jié)果均符合規(guī)定，12批肉蓯蓉均不符合規(guī)定。

總灰分：23批肉蓯蓉檢驗(yàn)結(jié)果均符合規(guī)定。

浸出物：21 批肉蓯蓉檢驗(yàn)結(jié)果符合規(guī)定；其余2 批肉蓯蓉為肉蓯蓉與管花肉蓯蓉的混合品，因《中國(guó)藥典》中肉蓯蓉及管花肉蓯蓉浸出物限度分別為不得少于35.0%和25.0%，限度值不同，故無(wú)法判定2 批肉蓯蓉混合品的結(jié)果。

含量測(cè)定：21批肉蓯蓉檢驗(yàn)結(jié)果符合規(guī)定；其余2批肉蓯蓉為肉蓯蓉與管花肉蓯蓉的混合品。因《中國(guó)藥典》中肉蓯蓉及管花肉蓯蓉含量測(cè)定限度分別為含松果菊苷（C35H46O20）和毛蕊花糖苷（C29H36O15）的總量不得少于0.30%和1.5%，限度值不同，故無(wú)法判定2批肉蓯蓉混合品的結(jié)果。

檢驗(yàn)結(jié)果：合格9 批，不合格12 批，2 批無(wú)法判定結(jié)果，不合格率為52.17%。不合格項(xiàng)目為檢查項(xiàng)中的水分項(xiàng)，且不合格的均為肉蓯蓉，管花肉蓯蓉的水分項(xiàng)均合格。

2.2 肉蓯蓉及管花肉蓯蓉特征圖譜研究

2.2.1 色譜條件

色譜柱：Alltima C18柱（250 mm × 4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈（A）- 0.1%甲酸水溶液（B），梯度洗脫（0～22 min 時(shí) 5%A → 15%A，22～55 min 時(shí) 15%A →20%A，55～65 min時(shí)20%A → 15%A）；檢測(cè)波長(zhǎng)：237 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫35 ℃；進(jìn)樣量：10 μL。

2.2.2 溶液制備

取京尼平苷酸、8-表馬錢(qián)子酸、松果菊苷、肉蓯蓉苷A、毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷、2′-乙酰毛蕊花糖苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇溶解，稀釋成質(zhì)量濃度為0.2 mg/mL 的混合對(duì)照品溶液。取樣品粉末（過(guò)4 號(hào)篩）1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，超聲（功率為250 W，頻率為40 kHz）提取30 min，放冷后用70%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2.2.3 特征圖譜建立

取2.1.2 項(xiàng)下含量測(cè)定結(jié)果合格的12 批肉蓯蓉樣品和9 批管花肉蓯蓉檢品粉末，按2.2.2 項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按2.2.1 項(xiàng)下色譜條件分別進(jìn)樣測(cè)定，得各樣品的高效液相色譜圖，通過(guò)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2012 版）軟件進(jìn)行分析，分別生成正品肉蓯蓉及正品管花肉蓯蓉的特征圖譜。詳見(jiàn)圖1。

圖1 高效液相色譜特征圖譜A.Genuine Cistanche deserticola B.Genuine Cistanche tubulosaFig.1 HPLC characteristic chromatograms

2.2.4 特征峰標(biāo)定

根據(jù)正品肉蓯蓉及正品管花肉蓯蓉特征圖譜檢測(cè)結(jié)果，分別各標(biāo)定10 個(gè)共有峰。經(jīng)過(guò)與對(duì)照品比對(duì)，可知2 號(hào)峰為京尼平苷酸，4 號(hào)峰為8-表馬錢(qián)子酸，5 號(hào)峰為松果菊苷，6 號(hào)峰為肉蓯蓉苷A，7 號(hào)峰為毛蕊花糖苷，8 號(hào)峰為異毛蕊花糖苷，10 號(hào)峰為2′-乙酰毛蕊花糖苷。

2.2.5 特征圖譜分析結(jié)果

將12批檢品肉蓯蓉與正品肉蓯蓉的特征圖譜、9批檢品管花肉蓯蓉與正品管花肉蓯蓉的特征圖譜進(jìn)行相似度計(jì)算，特征圖譜匹配圖見(jiàn)圖2。各批檢品管花肉蓯蓉與正品管花肉蓯蓉特征圖譜的相似度為0.947～0.996，說(shuō)明檢品管花肉蓯蓉與正品管花肉蓯蓉相似度良好；各批檢品肉蓯蓉與正品肉蓯蓉特征圖譜的相似度為0.557～0.903，且大部分集中在0.555～0.667，說(shuō)明檢品肉蓯蓉與正品肉蓯蓉間存在一定差異。

圖2 高效液相色譜疊加特征圖譜A.12 batches of Cistanche deserticola samples tested and genuine Cistanche deserticola B.9 batches of Cistanche tubulosa samples tested and genuine Cistanche tubulosaFig.2 Superimposed HPLC characteristic chromatograms

為說(shuō)明檢品肉蓯蓉與正品肉蓯蓉有效成分含量的不同，分別計(jì)算各批檢品肉蓯蓉與正品肉蓯蓉共有峰的總峰面積值（表1）?？芍?5 批正品肉蓯蓉共有峰總峰面積值的平均值（5 795 705）約為12 批檢品肉蓯蓉共有峰總峰面積值平均值（2 925 364）的1.98 倍，說(shuō)明檢品肉蓯蓉中有效成分含量大量減少，品質(zhì)變差。因正品肉蓯蓉未經(jīng)炮制，而檢品肉蓯蓉多為炮制品，故可能因炮制不當(dāng)而造成肉蓯蓉中有效成分的大量流失。

表1 12批檢品肉蓯蓉與15批正品肉蓯蓉共有峰總峰面積Tab.1 Comparison of total peak area of common peaks between 12 batches of Cistanche deserticola samples tested and 15 batches of genuine Cistanche deserticola

3 討論

通過(guò)本次專項(xiàng)抽驗(yàn)工作，發(fā)現(xiàn)存在同批肉蓯蓉飲片中有肉蓯蓉和管花肉蓯蓉混合的現(xiàn)象，因藥典中肉蓯蓉及管花肉蓯蓉浸出物及含量測(cè)定的限度不同，故無(wú)法判定這2項(xiàng)的結(jié)果。

檢品肉蓯蓉的含量測(cè)定項(xiàng)雖符合藥典規(guī)定，但通過(guò)對(duì)檢品肉蓯蓉與收集的未經(jīng)炮制的正品肉蓯蓉特征圖譜的比對(duì)發(fā)現(xiàn)，檢品肉蓯蓉的有效成分總量較收集的正品肉蓯蓉的有效成分總量大量減少，可能由檢品肉蓯蓉的炮制不當(dāng)所致。

綜上所述，應(yīng)建立藥材專項(xiàng)抽樣的長(zhǎng)效機(jī)制；加強(qiáng)對(duì)肉蓯蓉生產(chǎn)、加工、流通、使用多環(huán)節(jié)的監(jiān)管，不斷完善和修訂標(biāo)準(zhǔn)方法；建立合理的機(jī)制，將評(píng)價(jià)抽驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的質(zhì)量問(wèn)題及時(shí)反饋給生產(chǎn)企業(yè)，保證肉蓯蓉的質(zhì)量，保障公眾用藥的安全性和有效性。