謝麗明，陳亞軍，李九鳳，李麗琴

（1.韶關(guān)市婦幼保健院檢驗(yàn)與遺傳中心；2.韶關(guān)市婦幼保健院婦產(chǎn)科，廣東韶關(guān) 512026）

子宮內(nèi)膜異位癥是臨床常見(jiàn)的婦科疾病。有研究指出，子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病率為5%～15%，影響育齡期女性健康和生活質(zhì)量，故及時(shí)判斷患者子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生、發(fā)展情況及嚴(yán)重程度十分重要[1-2]。既往臨床對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病的相關(guān)因素有諸多研究，如炎癥反應(yīng)、經(jīng)血逆流等，但仍有較多未發(fā)生炎癥反應(yīng)、經(jīng)血逆流的女性出現(xiàn)子宮內(nèi)膜異位癥，故臨床對(duì)判斷子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生、發(fā)展及病情嚴(yán)重程度效果欠佳，如何選擇高效、安全的輔助診斷指標(biāo)是子宮內(nèi)膜異位癥病情觀察的難點(diǎn)[3-4]。近年有研究表明，腸道菌群與炎癥性疾病的關(guān)系較為密切，或是引起子宮內(nèi)膜異位癥的重要因素，但目前臨床關(guān)于腸道菌群與子宮內(nèi)膜異位癥炎性因子水平的關(guān)系尚存在爭(zhēng)議[5]。因此，本研究對(duì)此展開(kāi)初步探討，旨在為臨床提供可靠的參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2020年1月韶關(guān)市婦幼保健院收治的82例子宮內(nèi)膜異位癥患者，將其納入觀察組，另選取同期院內(nèi)82例健康體檢者，將其納入對(duì)照組進(jìn)行回顧性分析。兩組研究對(duì)象一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，見(jiàn)表1。本研究經(jīng)韶關(guān)市婦幼保健院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《宮內(nèi)膜異位癥長(zhǎng)期管理中國(guó)專家共識(shí)》[6]中子宮內(nèi)膜異位癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)超聲內(nèi)鏡確診；②無(wú)腸道疾病家族史者；③年齡≥18歲；④近3個(gè)月內(nèi)無(wú)抗生素治療史者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①哺乳期或妊娠期者；②血液系統(tǒng)疾病者；③伴其他惡性腫瘤疾病者；④急、慢性胃腸道疾病或盆腔炎者；⑤臨床資料不全者。

表1 兩組研究對(duì)象一般資料比較

1.2 研究方法 糞便樣本采集。采集研究對(duì)象糞便0.5 g，其中觀察組患者于術(shù)前收集，對(duì)照組患者于月經(jīng)結(jié)束后7 d內(nèi)收集。采用稀釋液稀釋糞便樣本，按10倍稀釋法稀釋至10-8，取10 μL接種，大腸桿菌、鏈球菌、志賀菌、奇異菌、普氏菌采用氧培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基培養(yǎng)，于37 ℃環(huán)境中培養(yǎng)48 h后，計(jì)數(shù)菌落數(shù)；采用格蘭染色、生化鑒定，計(jì)算每克糞便所含菌群數(shù)。實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。于清晨采集研究對(duì)象空腹肘靜脈血5 mL，置于EDTA抗凝采血管，室溫靜置1 h，以3 000 r/min轉(zhuǎn)速離心15 min，分離血清，于-80 ℃環(huán)境中保存。以酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-17（IL-17）、白細(xì)胞介素-22（IL-22）、白細(xì)胞介素-33（IL-33），試劑盒由賽默飛公司提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以（）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。采用Pearson分析兩變量相關(guān)性。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象腸道菌群數(shù)量比較 觀察組研究對(duì)象大腸桿菌、鏈球菌、志賀菌數(shù)量均高于對(duì)照組，奇異菌、普氏菌數(shù)量低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組研究對(duì)象腸道菌群數(shù)量比較（CFU/g）

2.2 兩組研究對(duì)象炎性因子水平比較 觀察組研究對(duì)象IL-6、IL-17、IL-22、IL-33水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 兩組研究對(duì)象炎性因子水平比較（ng/L，）

表3 兩組研究對(duì)象炎性因子水平比較（ng/L，）

注：IL-6：白細(xì)胞介素-6；IL-17：白細(xì)胞介素-17；IL-22：白細(xì)胞介素-22；IL-33：白細(xì)胞介素-33。

組別 例數(shù) IL-6 IL-17 IL-22 IL-33觀察組 82 171.63±32.22 79.63±25.14 559.62±119.36 349.33±94.19對(duì)照組 82 102.11±28.49 52.14±10.42 298.61±85.63 231.22±83.85 t值 14.637 9.147 16.089 8.481 P值 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 各腸道菌群數(shù)量與子宮內(nèi)膜異位癥患者炎性細(xì)胞因子的相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson檢驗(yàn)，大腸桿菌、鏈球菌、志賀菌數(shù)量與IL-6、IL-17、IL-22、IL-33水平呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），奇異菌、普氏菌與IL-6、IL-17、IL-22、IL-33水平呈負(fù)相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表4。

表4 各腸道菌群數(shù)量與子宮內(nèi)膜異位癥患者炎性細(xì)胞因子的相關(guān)性分析

3 討論

目前臨床對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制尚不明確，有學(xué)者提出異位種植學(xué)說(shuō)，認(rèn)為隨經(jīng)血逆流，部分經(jīng)期脫落的子宮內(nèi)膜會(huì)進(jìn)入盆腔種植，從而引起子宮內(nèi)膜異位癥，該學(xué)說(shuō)雖獲得多數(shù)研究證實(shí)，但經(jīng)血逆流現(xiàn)象在女性群體中較為常見(jiàn)，并不都引發(fā)子宮內(nèi)膜異位癥故該病的發(fā)病機(jī)制研究仍是臨床十分關(guān)注的問(wèn)題[7-8]。近年有諸多研究表明，腸道菌群穩(wěn)態(tài)失衡與多種炎性疾病發(fā)生、發(fā)展有關(guān)系[9]。既往也有研究指出，子宮內(nèi)膜異位癥與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，盆腔局部異常的炎癥環(huán)境或是引起異位內(nèi)膜組織定植、生長(zhǎng)的重要因素[10]。為進(jìn)一步了解子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生、發(fā)展與腸道菌群、炎性因子的相關(guān)機(jī)制，本研究針對(duì)此方面展開(kāi)初步討論。

本研究中，觀察組研究對(duì)象大腸桿菌、鏈球菌、志賀菌菌群數(shù)均高于對(duì)照組，奇異菌、普氏菌菌群數(shù)低于對(duì)照組，提示子宮內(nèi)膜異位癥患者存在腸道菌群紊亂，與既往報(bào)道[11]相似。腸道菌群具有調(diào)節(jié)免疫、預(yù)防病原體感染及提供屏障等作用，子宮內(nèi)膜異位癥患者常伴有周期性腸道癥狀及嚴(yán)重痛經(jīng)，體內(nèi)志賀菌、大腸桿菌等革蘭陰性菌數(shù)量異常增高，可通過(guò)脂多糖對(duì)異位病灶免疫微環(huán)境造成影響，進(jìn)而促進(jìn)疾病發(fā)展，加重患者病情，并可導(dǎo)致相關(guān)癥狀發(fā)生；同時(shí)細(xì)菌內(nèi)毒素脂多糖入血可持續(xù)激活程序性死亡蛋白-1通路，使其和程序性死亡蛋白配體-1過(guò)度表達(dá)，抑制T細(xì)胞活化和增殖，引起免疫耐受，為異位內(nèi)膜組織提供了一定的生長(zhǎng)條件。

有研究表明，腸道菌群失衡會(huì)引起全身炎癥反應(yīng)[12]。本研究中，觀察組研究對(duì)象IL-6、IL-17、IL-22、IL-33均高于對(duì)照組，提示子宮內(nèi)膜異位癥患者炎癥反應(yīng)水平較高，或與腸道菌群失衡有關(guān)。分析原因，腸道菌群失衡，革蘭陰性菌大量繁殖，可增高腸壁通透性，破壞腸道免疫完整性，使細(xì)菌內(nèi)毒素脂多糖大量入血，引起全身炎癥性反應(yīng)[13]。IL-6、IL-17為急性期反應(yīng)常見(jiàn)的炎癥細(xì)胞因子，對(duì)多種炎癥反應(yīng)細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞形成過(guò)程有一定促進(jìn)作用，有利于生成抗凋亡因子，大量堆積在患者腸道黏膜；IL-22、IL-33可引起子宮內(nèi)膜組織黏附、入侵和種植，可被子宮內(nèi)膜異位癥引起的損傷所激活，主要對(duì)免疫細(xì)胞和腸道細(xì)菌進(jìn)行調(diào)節(jié)。菌群失調(diào)所致的炎癥反應(yīng)可促使子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔內(nèi)巨噬細(xì)胞大量分泌IL-6、IL-17等炎性細(xì)胞因子，增加盆腹腔血管穿透性，產(chǎn)生炎性滲出物，導(dǎo)致腹腔液內(nèi)微環(huán)境異常，從而引起盆腔粘連、異常子宮出血、不孕等子宮內(nèi)膜異位癥常見(jiàn)臨床癥狀。

此外，本研究通過(guò)觀察腸道菌群與子宮內(nèi)膜異位癥患者炎性細(xì)胞因子的相關(guān)性發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌、鏈球菌、志賀菌數(shù)量與IL-6、IL-17、IL-22、IL-33水平呈正相關(guān)，奇異菌、普氏菌數(shù)量與IL-6、IL-17、IL-22、IL-33水平呈負(fù)相關(guān)，說(shuō)明腸道菌群不僅與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，還與炎癥反應(yīng)關(guān)系密切，推測(cè)腸道菌群不但參與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制，更在其炎癥反應(yīng)發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮重要作用。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)腸道菌群與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)，且與炎癥因子有關(guān)，可作為臨床評(píng)價(jià)患者病情變化及預(yù)后的有效指標(biāo)，但基于所選樣本量過(guò)低、研究時(shí)間過(guò)短等因素，本研究存在一定局限性，在今后可針對(duì)此方向進(jìn)一步論證，為該領(lǐng)域提供客觀理論依據(jù)。