車南青

(茂名市農(nóng)業(yè)科技推廣中心，廣東 茂名 525000)

2021年7月15日，廣東省信宜市一家養(yǎng)殖場草魚發(fā)病，茂名市農(nóng)業(yè)科技推廣中心立即組織技術(shù)員抵達(dá)現(xiàn)場了解情況，并采集水樣、魚樣進(jìn)行檢測。

一、池塘條件

發(fā)病魚塘約5畝，東西走向，水深1.5米，單養(yǎng)草魚，放養(yǎng)草魚4 500尾(規(guī)格約500克/尾)，主要投喂配合飼料和青飼料，每天2次。養(yǎng)殖池塘屬于老塘，養(yǎng)殖前未進(jìn)行清淤曬塘處理，池塘配置增氧機(jī)2臺。

二、發(fā)病情況

據(jù)養(yǎng)殖戶反映，7月11日將草魚過塘，7月14日開始出現(xiàn)數(shù)十尾草魚在塘邊靜止不動、對外界刺激不敏感，有的發(fā)生陣發(fā)性亂竄、亂游。

三、檢測

1.水樣檢測

7月15日上午取水樣進(jìn)行檢測，水體透明度21厘米、溶氧4.3毫克/升、pH 7.2、亞硝酸鹽0.339毫克/升、氨氮0.35毫克/升。

2.病魚檢測

魚體表黏液增多，上下頜、口腔、鰓蓋、鰭條及魚體兩側(cè)輕度充血，腹部稍膨大(圖1)。解剖病魚發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)有少量淡黃色透明腹水，肝腎腫大、色淡，腸內(nèi)有少量食物(圖2)。取病魚患病部位體表黏液、鰓絲等顯微鏡檢測，未發(fā)現(xiàn)寄生蟲。

圖1 病魚外表

圖2 病魚解剖

3.細(xì)菌鑒定與藥敏試驗

(1)細(xì)菌分離、純化。用70%的酒精消毒病魚體表，斷尾放血后解剖，用灼燒后冷卻的接種環(huán)蘸取肝、腎、脾組織，分別接種至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，倒置于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時，長出優(yōu)勢菌落。菌落呈淡黃色、圓形、光滑、微凸形態(tài)。用接種環(huán)挑選單菌落，在培養(yǎng)基上進(jìn)行3次重復(fù)單菌落劃線。

(2)革蘭氏染色。選取6株優(yōu)勢菌株進(jìn)行革蘭氏染色，結(jié)果顯示6株細(xì)菌均為革蘭氏陰性菌。鏡檢觀察，6株菌體大都呈桿狀，多數(shù)單個、個別雙個排列。

(3)生理生化鑒定。取6株優(yōu)勢菌株(編號為1～6)進(jìn)行生理生化鑒定，6株分離菌株均氧化酶陽性、接觸酶陽性、精氨酸雙水解酶陽性、賴氨酸脫羧酶陽性、鳥氨酸脫羧酶陰性、發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、不發(fā)酵肌醇、甘油產(chǎn)氣、V.P.試驗陽性、M.R.試驗陰性、發(fā)酵阿拉伯糖、水楊甙陽性、半乳糖苷酶陽性、水解七葉靈。根據(jù)《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊》(第9版)，初步鑒定1～6號菌株為嗜水氣單胞菌。

(4)PCR技術(shù)檢測。取1～6號菌株進(jìn)行PCR檢測，結(jié)果顯示6株菌株均為嗜水氣單胞菌。

(5)藥敏試驗。采用恩諾沙星、氟苯尼考、慶大霉素、土霉素4種藥物(每種藥物兩個重復(fù)求平均值)對各菌株進(jìn)行藥敏試驗，測量其抑菌圈大小，結(jié)果見表1。菌株對慶大霉素、恩諾沙星、氟苯尼考極敏感，對土霉素敏感。

表1 藥物對菌株的抑菌圈直徑

四、診斷結(jié)果

根據(jù)調(diào)查、檢測，診斷病魚為感染嗜水氣單胞菌引起的細(xì)菌性敗血病。

五、病因分析

細(xì)菌性敗血病流行時間為3-11月，高峰期常為5-9月，水溫9～36℃均有流行，尤以水溫持續(xù)在25℃以上時嚴(yán)重。拉網(wǎng)捕魚、搬運過程中導(dǎo)致魚體表皮機(jī)械損傷，從而為致病菌入侵提供機(jī)會。

發(fā)病魚塘是多年老塘，養(yǎng)殖前未做好塘底清淤消毒工作，池塘底質(zhì)老化、溶氧低、有害物質(zhì)多，氨氮、亞硝酸鹽明顯高于正常標(biāo)準(zhǔn)，一方面給病原細(xì)菌的滋生提供了溫床；另一方面魚整天生活在此水體中，抵抗力下降，易引發(fā)疾病。

六、治療過程

魚類細(xì)菌性敗血病最有效的治療方法是采用外潑殺菌藥和內(nèi)服藥飼相結(jié)合。7月16日，全池潑灑漂白粉1克/米3；17日用氟苯尼考拌飼投喂，每千克魚體重使用20毫克(1次量)，連用5天。用藥1周內(nèi)觀察效果，基本控制了細(xì)菌性敗血病的蔓延。

七、建議

1.清塘

養(yǎng)殖前清除塘底過多淤泥或排干池水后對池底進(jìn)行翻曬。用生石灰清塘，干法清塘用量為60～75千克/畝，帶水清塘用量為125～150千克/畝。清塘后7～10天藥性消失，即可放入水產(chǎn)養(yǎng)殖動物。

2.苗種放養(yǎng)

魚種下塘前，注射預(yù)防細(xì)菌性敗血病的疫苗，用高錳酸鉀15～20毫克/升藥浴10～30分鐘或4%的食鹽水藥浴5～20分鐘；選擇優(yōu)質(zhì)健壯魚種，放養(yǎng)密度要合理，根據(jù)養(yǎng)殖技術(shù)水平及防病能力確定放養(yǎng)密度。

3.日常管理

在養(yǎng)殖過程中定期加換新水，一般每7～10天加水1次，每次加入新水20～30厘米；每20天換水1次，每次換水30%左右，換水應(yīng)在晴天白天進(jìn)行。發(fā)病季節(jié)每月用生石灰20～30克/米3全池遍灑1～2次，使池水的pH保持在8左右。

正確掌握投飼量，多投喂天然飼料及優(yōu)質(zhì)飼料，以提高魚體抗病力。草魚飼料主要有兩種，一種是配合飼料，一種是青飼料，投喂應(yīng)以配合飼料為主、青飼料為輔。每周食場周圍潑灑漂白粉1～2次，消毒食場，用量視食場大小及水深而定，一般為250～500克。

在拉網(wǎng)前后要用漂白粉等含氯消毒劑消毒池塘水，減少魚感染細(xì)菌的機(jī)會。當(dāng)發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖魚患病時切忌拉網(wǎng)，否則會加劇病魚的死亡。

加強(qiáng)巡塘工作，定期抽取魚樣并進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)魚病及時進(jìn)行防治。在發(fā)病季節(jié)，定期殺滅寄生在魚體外的寄生蟲，防止寄生蟲破壞魚體表而受細(xì)菌入侵。發(fā)病魚池用過的工具要進(jìn)行消毒，病死魚要及時撈出深埋，不能到處亂扔。病好后仍應(yīng)繼續(xù)做好防病工作，否則魚還會再次感染發(fā)病。