袁慧敏，孫燕，李彩艷，劉雙巧，張玉鑫，劉錦鋼，湯陽(yáng)，張淑靜，馮婧，鄭豐杰

北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029

特應(yīng)性皮炎（atopic dermatitis，AD）是一種慢性復(fù)發(fā)性、瘙癢性、炎癥性皮膚疾病，以炎性滲出、濕疹樣皮損、苔蘚化和皮膚干燥為主要臨床表現(xiàn)，其患病率呈逐步上升趨勢(shì)，特別是兒童患病率超過(guò)20%，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量［1］。AD病因及發(fā)病機(jī)制尚未闡明，目前認(rèn)為其與遺傳、環(huán)境、皮膚屏障損傷和神經(jīng)免疫失調(diào)等因素密切相關(guān)［2］，而皮膚屏障和免疫炎癥失衡之間的內(nèi)外竄擾是AD發(fā)生發(fā)展的重要病理機(jī)制，已成為業(yè)內(nèi)共識(shí)，皮膚屏障損傷及修復(fù)已成為AD防治領(lǐng)域的重要研究課題之一［3］。

AD屬于中醫(yī)學(xué)“乳癬”“奶癬”“四彎風(fēng)”等病證范疇，其病因病機(jī)主要是先天稟賦不足、胎毒遺熱或后天調(diào)攝不當(dāng)、脾失健運(yùn)，復(fù)感風(fēng)、濕、熱邪，蘊(yùn)郁肌膚，具有表里同病、虛實(shí)夾雜的病證特點(diǎn)［4］。麻黃連軺赤小豆湯出自《傷寒論》，外可發(fā)散風(fēng)濕熱邪，內(nèi)能健脾和中、清熱利濕，是公認(rèn)的表里雙解、標(biāo)本同治之劑，臨床用其加減辨治AD療效頗佳［5-6］，但其對(duì)AD皮膚屏障功能的影響尚需要進(jìn)一步的研究。

1 材料

1.1 動(dòng)物SPF級(jí)6周齡雄性BALB／c小鼠120只，體質(zhì)量（20±2）g，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，許可證號(hào)：SYXK（京）2016-0006。飼養(yǎng)于北京中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物房IVC通氣籠，環(huán)境溫度（25±2）℃，濕度40%～60%，每天自由飲水進(jìn)食。本研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用和處置方法符合動(dòng)物福利的要求，實(shí)驗(yàn)經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)審查批準(zhǔn)（動(dòng)物倫理編號(hào)：BUCM-4-2019091101-3047）。

1.2 藥物與試劑麻黃、連翹、苦杏仁、赤小豆、大棗、桑白皮、炙甘草、生姜（北京同仁堂藥店）；糠酸莫米松凝膠［規(guī)格：0.1%，華潤(rùn)三九（南昌）藥業(yè)有限公司，批號(hào)：2006007J］；2，4-二硝基氟苯（2，4-diitrofluorobenzene，DNFB，美國(guó)Sigma公司，批號(hào)：M24318031）；丙酮、無(wú)水乙醇（分析純，北京化工廠，批號(hào)：20170209、20200617）；橄欖油（西班牙Mueloliva公司，批號(hào)：20190515）；二甲苯（分析純，天津市凱通化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20190325）；蘇木素染色液、伊紅染色液（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：20042002、20060901）；分化液、返藍(lán)染色液（北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司，批號(hào)：20200730、20200528）。

1.3 儀器H6型獨(dú)立通風(fēng)籠（蘇杭科技器材有限公司）；MPA4型皮膚多探頭測(cè)試儀（德國(guó)Courage+Khazakz公司）；HistoCore PEARL型全自動(dòng)封閉式組織脫水機(jī)、HistoCore Arcadia H型石蠟包埋機(jī)、HistoCore Arcadia C型組織切片冷臺(tái)、M2255型全自動(dòng)切片機(jī)、HI1210型攤片機(jī)、HI1220型烤片機(jī)（德國(guó)Leica公司）；Revolve FL型正倒置一體熒光顯微鏡（美國(guó)Echo公司）。

2 方法

2.1 藥物制備《傷寒論》記載麻黃連軺赤小豆湯由麻黃（二兩）、連軺（二兩）、杏仁（四十個(gè)）、赤小豆（一升）、大棗（十二枚）、生梓白皮（一升）、生姜（二兩）、炙甘草（二兩）組成，本課題組前期經(jīng)考證實(shí)測(cè)，得出其現(xiàn)今臨床參考劑量［7］：麻黃6 g，連翹6 g，苦杏仁3 g，赤小豆34 g，大棗7 g，桑白皮11 g，生姜6 g，炙甘草6 g。按上述劑量稱(chēng)取各藥材，共79 g，為1次灌胃所需的生藥量，加10倍量的水（即790 g），將藥材完全沒(méi)于水中浸泡1 h后，煎煮1.5 h，將藥液倒出。再加入8倍量的水，煎煮1.5 h。將兩次藥液混合后，水浴濃縮，濃縮至1 g生藥·mL-1，4℃冰箱儲(chǔ)存?zhèn)溆?。每次取?dāng)日灌胃劑量，于灌胃前30 min預(yù)熱至適宜溫度。

2.2 分組、造模與給藥采用隨機(jī)數(shù)字表法將120只雄性BALB／c小鼠分為正常組（n＝24）、模型組（n＝32）、糠酸莫米松組（n＝32）和麻黃連軺赤小豆湯組（n＝32）。除正常組外，其余組小鼠采用DNFB反復(fù)刺激皮膚的方法制備AD小鼠模型［8］。具體方法如下（見(jiàn)圖1）：致敏前用電推剪和脫毛膏除去小鼠背部毛發(fā)，面積約2.0 cm×3.0 cm。在1.0 cm×1.0 cm的紗布上滴加1%的DNFB溶液200μL，并均勻涂抹在小鼠背部皮膚，每周2次（即第1、4、8、11天）。第15天開(kāi)始改用0.2%的DNFB溶液涂抹小鼠背部皮膚，每周2次，持續(xù)3周（即第15、18、21、25、28、32、35天）。正常組小鼠于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)在背部涂抹等量基質(zhì)溶液（丙酮∶橄欖油＝4∶1）。分別在實(shí)驗(yàn)第4、18、32、39天進(jìn)行藥物干預(yù)，麻黃連軺赤小豆湯組用麻黃連軺赤小豆湯灌胃（11.98 g·kg-1·d-1），每日2次；糠酸莫米松組于小鼠皮損處均勻涂抹適量0.1%糠酸莫米松凝膠，每日2次；正常組和模型組給予等量常溫蒸餾水灌胃，每日2次，連續(xù)7天。

圖1 AD模型小鼠制備流程

2.3 動(dòng)物處死與取材各時(shí)間點(diǎn)分別給藥一周后，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行取材，即分別于實(shí)驗(yàn)第11、25、39、46天，分四批次（每批次動(dòng)物n＝30）對(duì)各組小鼠進(jìn)行2%戊巴比妥鈉溶液麻醉后，摘眼球取血處死，無(wú)菌條件下取小鼠皮損處皮膚組織，以4%多聚甲醛溶液固定保存；其他皮膚皮損組織-80℃保存，用于指標(biāo)檢測(cè)。

2.4 皮損評(píng)分參照文獻(xiàn)［9］進(jìn)行皮損評(píng)分評(píng)估。每次皮膚致敏前肉眼觀察皮膚變化并拍照記錄，從出血／紅斑、疤痕／干燥、水腫、表皮脫落／侵蝕／苔蘚樣變四方面進(jìn)行等級(jí)評(píng)分。

2.5 經(jīng)皮水分散失（trans epidermal water loss，TEW L）檢測(cè)于每次皮膚致敏前和處死前，平展小鼠背部剃毛區(qū)域，使用Tewameter TM300探頭輕觸小鼠皮膚，應(yīng)用皮膚測(cè)定儀測(cè)定皮損及非皮損處經(jīng)皮散水量，使用標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量法，設(shè)置每次測(cè)定時(shí)間為20 s，重復(fù)檢測(cè)3次，讀取平均值。保持每次檢測(cè)時(shí)間、室內(nèi)環(huán)境、檢測(cè)人員及其他條件相對(duì)一致。

2.6 皮膚pH值檢測(cè)于每次皮膚致敏前和處死前，使用pH 905探頭測(cè)定皮損及非皮損處pH值，每次重復(fù)檢測(cè)3次，結(jié)果取平均值。保持每次檢測(cè)時(shí)間、室內(nèi)環(huán)境、檢測(cè)人員及其他條件相對(duì)一致。

2.7 皮膚組織病理學(xué)取小鼠剃毛區(qū)域皮膚組織，以4%多聚甲醛溶液固定過(guò)夜，將組織標(biāo)本脫水、石蠟包埋、切片（厚度6μm）、脫蠟、蘇木精-伊紅（htoxylin eosin，HE）染色，顯微鏡下觀察組織病理改變。

2.8 皮損評(píng)分、TEW L、pH的相關(guān)性分析考察選擇模型組四個(gè)時(shí)間點(diǎn)皮損評(píng)分、pH值與TEWL值的相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行斯皮爾曼（Spearman）相關(guān)性分析，評(píng)估三者對(duì)AD模型的影響。

2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用GraphPad Prism 9統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析，各組數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。多組計(jì)量資料采用單因素方差分析。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 麻黃連軺赤小豆湯對(duì)AD模型小鼠皮膚狀態(tài)的影響AD模型組小鼠復(fù)制過(guò)程中不同時(shí)間點(diǎn)，其皮損呈現(xiàn)出與臨床相近的不同病理進(jìn)程［2，10-11］，即急性期（第1—11天）依次為紅斑、出血點(diǎn)→皮膚水腫潰爛→新生血痂→血痂變硬；急性進(jìn)展期（第12—25天）表現(xiàn)為血痂脫落與新生瘢痕并存；亞急性期（第26—39天）皮膚散在紅斑出血點(diǎn)、瘢痕增生、鱗屑或苔蘚樣干燥等；慢性期（第39天以后）主要以皮膚干燥為主?？匪崮姿珊吐辄S連軺赤小豆湯均可有效改善AD小鼠皮損，且麻黃連軺赤小豆湯作用效果優(yōu)于糠酸莫米松，可顯著減少AD模型小鼠皮膚亞急性期出血點(diǎn)，改善皮膚干燥鱗屑或苔蘚樣現(xiàn)象。見(jiàn)圖2。

圖2 不同時(shí)間點(diǎn)各組小鼠背部皮損觀察

3.2 麻黃連軺赤小豆湯對(duì)AD模型小鼠皮損評(píng)分的影響與正常組相比，模型組小鼠各時(shí)間點(diǎn)皮損評(píng)分均顯著升高（P＜0.01）。與模型組相比，糠酸莫米松組小鼠皮損評(píng)分在急性期、急性進(jìn)展期有下降趨勢(shì)；麻黃連軺赤小豆湯組在各時(shí)期均有下降趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。見(jiàn)表1。

表1 不同時(shí)間點(diǎn)各組小鼠背部皮損評(píng)分比較 （±s，n＝6）

表1 不同時(shí)間點(diǎn)各組小鼠背部皮損評(píng)分比較 （±s，n＝6）

注：與正常組比較，**P＜0.01

組別 皮損評(píng)分（分）第11天 第25天 第39天 第46天0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00模型組 4.67±0.52** 1.67±0.52** 1.50±0.55** 1.33±0.52**糠酸莫米松組 4.33±0.52 1.50±0.55 1.67±0.52 1.33±0.52麻黃連軺赤小豆湯組正常組3.83±0.41 1.33±0.52 1.33±0.52 1.17±0.41

3.3 麻黃連軺赤小豆湯對(duì)AD模型小鼠皮膚組織病理學(xué)改變的影響正常組小鼠皮膚組織結(jié)構(gòu)規(guī)則，細(xì)胞形態(tài)正常，上皮層次完整清楚。AD模型組小鼠4個(gè)觀察點(diǎn)皮膚組織表現(xiàn)依次為：表皮增厚，以棘細(xì)胞層增厚為主→表皮增厚，棘細(xì)胞層增生變厚→表皮增厚，棘細(xì)胞層顯著增厚→表皮增厚減輕，棘細(xì)胞層增生減輕等。與模型組相比，糠酸莫米松和麻黃連軺赤小豆湯可不同程度的改善模型小鼠皮膚病理改變，如減少上皮增生等。見(jiàn)圖3。

圖3 不同時(shí)間點(diǎn)各組小鼠皮膚組織病理學(xué)觀察（HE染色，×10）

3.4 麻黃連軺赤小豆湯對(duì)AD模型小鼠皮膚TEWL的影響與正常組相比，模型組小鼠皮損區(qū)各時(shí)間點(diǎn)TEWL值均顯著升高（P＜0.01）。與模型組相比，麻黃連軺赤小豆湯組與糠酸莫米松組小鼠第11天皮膚TEWL明顯升高（P＜0.01），第25、39、46天3個(gè)時(shí)間點(diǎn)皮膚TEWL均降低，且麻黃連軺赤小豆湯組小鼠第39、46天兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)TEWL值顯著下降（P＜0.01）。見(jiàn)表2。

表2 不同時(shí)間點(diǎn)各組小鼠背部皮損區(qū)皮膚TEWL比較 （±s，n＝6）

表2 不同時(shí)間點(diǎn)各組小鼠背部皮損區(qū)皮膚TEWL比較 （±s，n＝6）

注：與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，＃＃P＜0.01

組別 皮膚TEWL（g·h-1·m-2）第11天 第25天 第39天 第46天12.93±2.61 12.60±2.11 16.85±3.07 8.70±2.37模型組 72.73±6.24** 54.97±4.65** 50.80±9.02** 14.40±1.43**糠酸莫米松組 88.20±3.01＃＃ 45.18±9.12 45.52±4.81 11.92±1.13麻黃連軺赤小豆湯組 89.03±6.55＃＃ 41.63±12.80 33.50±2.44＃＃ 9.70±1.22正常組＃＃

3.5 麻黃連軺赤小豆湯對(duì)AD模型小鼠皮膚pH的影響與正常組相比，模型組小鼠皮損區(qū)第11、25、39天3個(gè)觀測(cè)點(diǎn)pH值均明顯升高（P＜0.01），第46天有升高趨勢(shì)。與模型組相比，糠酸莫米松組小鼠第11天皮膚pH值顯著降低（P＜0.01）；麻黃連軺赤小豆湯組小鼠第11、25、39天3個(gè)觀測(cè)點(diǎn)皮膚pH值均明顯降低（P＜0.05），第46天有降低趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。見(jiàn)表3。

表3 不同時(shí)間點(diǎn)各組小鼠背部皮膚pH比較 （±s，n＝6）

表3 不同時(shí)間點(diǎn)各組小鼠背部皮膚pH比較 （±s，n＝6）

注：與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01

組別 皮膚pH第11天 第25天 第39天 第46天5.59±0.20 6.31±0.35 6.74±0.28 6.42±0.40模型組 6.33±0.21** 7.07±0.19** 7.20±0.22** 6.54±0.13糠酸莫米松組 5.64±0.08＃＃ 6.81±0.49 7.08±0.17 6.51±0.18麻黃連軺赤小豆湯組 5.86±0.31＃ 6.43±0.21＃＃ 6.84±0.09＃正常組6.41±0.26

3.6 皮損評(píng)分、TEWL、pH的相關(guān)分析AD模型小鼠皮損評(píng)分與pH值呈線性正相關(guān)關(guān)系（Spearman R2＝0.211 7，P＝0.014 7）；皮損評(píng)分與TEWL值呈線性正相關(guān)關(guān)系（Spearman R2＝0.610 4，P＜0.000 1）；pH值與TEWL值呈線性正相關(guān)關(guān)系（Spearman R2＝0.351 2，P＝0.002 3）；提示經(jīng)皮水分丟失增加，皮膚表面pH升高，可共同加重皮膚屏障功能障礙。見(jiàn)圖4。

圖4 皮損評(píng)分、TWEL、pH的相關(guān)分析

4 討論

AD與遺傳、過(guò)敏等因素有關(guān)，但其確切病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，目前占主導(dǎo)地位的是學(xué)者Peter M.Elias提出的“內(nèi)外串?dāng)_病機(jī)學(xué)說(shuō)”［12-13］?！皟?nèi)外串?dāng)_病機(jī)學(xué)說(shuō)”中，“內(nèi)”主要指機(jī)體免疫功能失常及其引發(fā)的全身性過(guò)敏性炎癥，“外”主要指遺傳或后天環(huán)境因素造成的皮膚屏障功能受損，而關(guān)于皮膚屏障功能在AD發(fā)病中作用的揭示是過(guò)去10年里AD研究領(lǐng)域最重要的發(fā)現(xiàn)。皮膚屏障檢測(cè)可客觀反映皮膚功能，常用于皮膚病患者的診療［14］。HE組織學(xué)、皮膚B超、皮膚共聚焦顯微鏡等常用于皮膚細(xì)胞、結(jié)構(gòu)層面觀察；皮脂、天然保濕因子、神經(jīng)酰胺等為皮膚成分測(cè)量指標(biāo)；TEWL、皮膚pH、皮損評(píng)分等是進(jìn)行皮膚屏障功能評(píng)估的常用無(wú)創(chuàng)性指標(biāo)［15-16］。

完整的皮膚屏障是皮膚作為物理和免疫屏障的先決條件［17］。皮膚屏障功能的破壞作為AD發(fā)病的一個(gè)重要原因，不但引起水分丟失導(dǎo)致皮膚干燥、瘙癢，還使皮損部位對(duì)外界化學(xué)物質(zhì)或病原體侵害刺激更敏感，促使炎癥反應(yīng)的發(fā)生，造成慢性、持續(xù)性皮膚炎癥［18-19］，繼而加重皮膚屏障功能損傷，形成惡性循環(huán)。以改善皮膚屏障功能為出發(fā)點(diǎn)的研究可能是打破AD惡性循環(huán)的重要突破口［20］。隨著AD研究的深入，中醫(yī)藥對(duì)皮膚屏障功能的修復(fù)作用也越來(lái)越受到重視［21］。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，AD多因先天稟賦不足、胎毒遺熱或后天調(diào)攝不當(dāng)，脾失健運(yùn)，生濕化熱，復(fù)感風(fēng)濕熱邪，蘊(yùn)結(jié)肌膚，內(nèi)外合邪而發(fā)?。?2］，具有從急性期向慢性期轉(zhuǎn)化并逐漸呈慢性的特征。從中醫(yī)證候類(lèi)型來(lái)看，以風(fēng)濕熱蘊(yùn)證、濕熱內(nèi)蘊(yùn)證（或濕熱蘊(yùn)結(jié)證）、脾虛濕盛證、血虛風(fēng)燥證最為常見(jiàn)，發(fā)病初期或急性發(fā)作期以風(fēng)濕熱蘊(yùn)、濕熱內(nèi)蘊(yùn)（或濕熱蘊(yùn)結(jié)）、脾虛濕盛為主，久則血虛風(fēng)燥，肌膚失養(yǎng)［23-24］。而AD皮損評(píng)分和TEWL從高到低依次為濕熱蘊(yùn)結(jié)＞脾虛濕蘊(yùn)＞血虛風(fēng)燥，且濕熱蘊(yùn)結(jié)證型以皮損紅斑、丘疹、滲液為主要表現(xiàn)，其皮膚屏障功能損害最為嚴(yán)重［25］。

麻黃連軺赤小豆湯出自《傷寒論》，主治濕熱發(fā)黃兼表邪未解者，由麻黃、連軺、赤小豆、生梓白皮、杏仁、生姜、炙甘草、大棗組成。方中連軺，現(xiàn)今臨床多由連翹代替，因而也被稱(chēng)為麻黃連翹赤小豆湯。生梓白皮，后世醫(yī)家多以桑白皮、茵陳等替代，實(shí)踐證明行之有效［26］?，F(xiàn)今臨床廣泛應(yīng)用本方治療特應(yīng)性皮炎、濕疹及過(guò)敏性疾病，證屬濕熱熏蒸于表者［6，27］。如周芳等［28］報(bào)道用麻黃連軺赤小豆湯加減治療青少年及成人特應(yīng)性皮炎，可明顯改善AD皮損及瘙癢，療效優(yōu)于開(kāi)瑞坦；國(guó)醫(yī)大師禤國(guó)維在治療特應(yīng)性皮炎時(shí)，也強(qiáng)調(diào)及早修復(fù)皮膚免疫防御功能的重要性［29］；本課題組常用本方治療特應(yīng)性皮炎、濕疹等皮膚病，屢獲良效。但目前有關(guān)麻黃連軺赤小豆湯治療AD的效應(yīng)機(jī)制，僅有抗變態(tài)反應(yīng)等相關(guān)研究，如陳建等［30］發(fā)現(xiàn)本方可抵抗組胺引起的瘙癢、抑制IgE產(chǎn)生和肥大細(xì)胞脫顆粒，研究尚待深入。

本課題組為觀察麻黃連軺赤小豆湯防治AD的療效及其效應(yīng)機(jī)制，確定其治療最佳時(shí)機(jī)，根據(jù)半抗原DNFB反復(fù)刺激皮膚建立AD小鼠模型的復(fù)制過(guò)程，結(jié)合不同時(shí)期AD的皮損特點(diǎn)，在造模開(kāi)始第11、25、39、46天四個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀測(cè)。結(jié)果表明：實(shí)驗(yàn)初期模型小鼠急性發(fā)作，皮膚水腫潰爛結(jié)痂，急性進(jìn)展期脫痂與瘢痕增生共現(xiàn)，亞急性期與慢性期表現(xiàn)為紅斑出血點(diǎn)、鱗屑或苔蘚樣變以及皮膚干燥；中藥麻黃連軺赤小豆湯和糠酸莫米松都能不同程度的改善皮損狀況，相比于糠酸莫米松，麻黃連軺赤小豆湯在亞急性期及慢性期的治療效果更為顯著且持久，可明顯緩解亞急性期及慢性期紅斑、出血點(diǎn)表現(xiàn)與皮膚干燥、鱗屑或苔蘚樣變，減少經(jīng)皮水分散失，降低pH值，改善皮損病理?yè)p傷。

值得注意的是，與其他時(shí)期各干預(yù)組小鼠TEWL下降相比，糠酸莫米松組和麻黃連軺赤小豆湯組小鼠急性期（第1～11天）TEWL明顯升高；其次，AD慢性進(jìn)展階段（第39天以后），各組小鼠皮膚pH差異不明顯。AD不同進(jìn)展階段其主要病理表現(xiàn)不同，實(shí)驗(yàn)初期，AD模型以皮膚水腫、潰爛為主，進(jìn)而結(jié)痂，麻黃連軺赤小豆湯作為表里雙解之劑，在內(nèi)健脾和中清熱利濕，在外發(fā)散風(fēng)濕熱邪，麻黃、杏仁調(diào)肺發(fā)表之功，可促進(jìn)皮膚津液宣發(fā)輸布，加速AD皮損水腫、潰爛進(jìn)程，故而TEWL明顯升高；而糠酸莫米松凝膠質(zhì)地滋潤(rùn)，在治療AD皮損的同時(shí)，亦可在水腫、潰爛皮損表面形成更加濕潤(rùn)的保護(hù)膜，故而糠酸莫米松組小鼠皮損TEWL亦升高。實(shí)驗(yàn)中后期，AD模型小鼠主要以皮膚干燥鱗屑樣改變?yōu)橹饕p表現(xiàn)，出血、結(jié)痂、瘢痕增生等癥狀不明顯，故而pH變化不顯著。

綜上所述，麻黃連軺赤小豆湯可有效改善AD模型小鼠皮膚屏障，以亞急性期效果最佳。在此基礎(chǔ)上，我們后續(xù)將進(jìn)一步從皮膚屏障組成如絲聚蛋白（filaggrin，F(xiàn)LG）、兜甲蛋白（loricrin，LOR）、內(nèi)披蛋白（involucrin，IVL）和神經(jīng)酰胺1（Ceramide 1，Cer 1）、Cer 3等角度，探討麻黃連軺赤小豆湯改善皮膚屏障功能的相關(guān)效應(yīng)機(jī)制，并將進(jìn)行拆方研究，從AD“內(nèi)外竄擾”發(fā)病環(huán)節(jié)探討“表里雙解”之麻黃連軺赤小豆湯防治AD的效應(yīng)機(jī)制。