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        魚子麻黃與普通炮制品煎煮效率比較

        2022-03-30 02:05:16朱田密張亞志段雪云閆斌謝俊飛曾政薩吉坦木依斯馬依力胡曉雪陳樹和湖北省中醫(yī)院藥事部武漢30061湖北中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院武漢30061湖北省中醫(yī)藥研究院武漢3007湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院武漢30065
        中南藥學(xué) 2022年2期

        朱田密,張亞志,段雪云,閆斌,謝俊飛,曾政,薩吉坦木·依斯馬依力,胡曉雪,陳樹和*(1. 湖北省中醫(yī)院藥事部,武漢 30061;2. 湖北中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,武漢 30061;3. 湖北省中醫(yī)藥研究院,武漢 3007;. 湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,武漢 30065)

        麻黃是臨床常用中藥,為麻黃科植物草麻黃Ephedra sinicaStapf、中麻黃Ephedra intermediaSchrenk et C.A.Mey.或木賊麻黃Ephedra equisetinaBge.的干燥草質(zhì)莖。秋季采割綠色的草質(zhì)莖,曬干[1]。2020年版《中國(guó)藥典》一部載麻黃炮制方法為“除去木質(zhì)莖、殘根及雜質(zhì),切段”。飲片成品呈圓柱形的段。各省、市、自治區(qū)的炮制規(guī)范收載麻黃炮制也是切段,長(zhǎng)度不盡相同,有“長(zhǎng)段”“中段”和“短段”,有的規(guī)定段長(zhǎng)度為1~2 cm[2]。此外尚有蜜麻黃、麻黃絨、蜜麻黃絨、炒麻黃等炮制品[1,3],以麻黃、蜜麻黃最為常用。魚子麻黃是一種傳統(tǒng)手工切制的特色飲片。1963年版《武漢中藥制用規(guī)范》以及湖北省中醫(yī)院全國(guó)首批名老中醫(yī)藥專家涂紹川的中藥炮制手稿載有其炮制方法,用荷葉包成小把,切1分長(zhǎng)的段[4]。飲片呈細(xì)小段狀形似“魚子”。該方法現(xiàn)已作為中藥特色飲片炮制技術(shù)進(jìn)行傳承。魚子麻黃與普通麻黃段的區(qū)別在于其切制精細(xì),片形整齊美觀。目前尚未見有關(guān)魚子麻黃炮制品煎煮效果或臨床療效的研究報(bào)道。本文從成分煎出效率角度對(duì)魚子麻黃的實(shí)用性進(jìn)行研究,并與普通方法炮制的麻黃段對(duì)比。

        1 材料

        1.1 儀器

        PB203-E電子天平(美國(guó)梅特勒托利多公司),ES225SM-DR電子天平(瑞士普利賽斯公司),DZTW調(diào)溫電熱套(北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司),Waters e2695高效液相色譜儀(美國(guó)Waters公司),4H-6恒溫水浴鍋(金壇市易晨?jī)x器制造有限公司),電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海一恒科學(xué)儀器有限公司)。

        1.2 試藥

        麻黃原藥材(產(chǎn)自內(nèi)蒙古,由湖北省中醫(yī)院朱田密副主任藥師鑒定為麻黃科植物草麻黃Ephedra sinicaStapf的干燥草質(zhì)莖,依據(jù)2020年版《中國(guó)藥典》一部檢驗(yàn)合格,藥材按干燥品計(jì)算,含鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的總量為1.07%)。鹽酸麻黃堿對(duì)照品(批號(hào):171241-20180,純度:100.0%)、鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品(批號(hào):171237-20151,純度:99.8%)(中國(guó)食品藥品檢定研究院)。極性乙醚連接苯基鍵合硅膠色譜柱(美國(guó)賽分科技有限公司)。煎藥用水為自來(lái)水,高效液相用水為超純水,甲醇為色譜純,磷酸、三乙胺、二正丁胺等試劑均為分析純。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 飲片炮制

        2.1.1 魚子麻黃的制備[4]取原藥材,擇去雜草,剪去根須,搶水洗凈,撈起濾干,用干荷葉包成小把(防止切制時(shí)麻黃蹦跳),用線索纏扎緊,切成3~5 mm的段,用藥篩篩去荷葉、線索,晾干。飲片外觀見圖1A。

        2.1.2 普通麻黃段的制備[1-2]取同一批原藥材,除去木質(zhì)莖、殘根及雜質(zhì),搶水洗凈后悶潤(rùn),切成10~20 mm的段,晾干。飲片外觀見圖1B。

        圖1 魚子麻黃(A)與普通麻黃段(B)圖Fig 1 Ephedra decoction pieces in the shape of fish roe(A)and commonly processed products(B)

        2.2 麻黃飲片的煎煮試驗(yàn)

        分別稱取魚子麻黃與普通麻黃段各6.0 g,平行操作4份[5]。分別置1000 mL圓底燒瓶中,每份加水400 mL,浸泡20 min,采用電熱套回流加熱,煎煮3次,按沸騰之時(shí)計(jì),一煎煎煮15 min;二煎加水量為300 mL,煎煮10 min;三煎加水量為300 mL,煎煮10 min。每份飲片每次煎煮后用二層篩網(wǎng)趁熱過(guò)濾(40目+80目)得到煎液,分別放置在燒杯中,放冷,用量筒測(cè)量各煎液體積。

        2.3 出膏率的測(cè)定

        精密吸取放冷后的各煎液25 mL,置于干燥至恒重的蒸發(fā)皿中,水浴蒸干,置105℃烘箱中3 h,取出,冷卻,稱定質(zhì)量。根據(jù)各煎液體積,計(jì)算出膏率。出膏率(%)=(W膏/取液量)×得液量/W飲片×100%[6]。結(jié)果見表1。

        表1 不同麻黃飲片水煎煮的出膏率( ±s,n=4)Tab 1 Extract rate of different ephedra decoction pieces ( ±s,n=4)

        表1 不同麻黃飲片水煎煮的出膏率( ±s,n=4)Tab 1 Extract rate of different ephedra decoction pieces ( ±s,n=4)

        注(Note):與普通麻黃段比較,**P<0.01(Compared with the common processed products,**P<0.01)。

        煎煮次數(shù) 出膏率/%普通麻黃段 魚子麻黃一煎 14.9±0.4 21.7±2.3**二煎 4.2±0.6 4.1±0.9三煎 3.1±0.7 2.6±0.1總和 22.2±1.2 28.4±2.5**

        2.4 HPLC法測(cè)定鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿的煎出量

        2.4.1 色譜條件 參考2020年版《中國(guó)藥典》麻黃項(xiàng)下含量測(cè)定色譜條件[1],以極性乙醚連接苯基鍵合硅膠為填充劑,以甲醇-0.092%磷酸溶液(含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺)(1.5∶98.5)為流動(dòng)相,流速1 mL·min-1,進(jìn)樣量10 μL,檢測(cè)波長(zhǎng)210 nm,柱溫25℃,記錄色譜圖,見圖2。

        圖2 HPLC色譜圖Fig 2 HPLC chromatogram

        2.4.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱定鹽酸麻黃堿對(duì)照品10.91 mg,鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品9.92 mg,加甲醇分別制成質(zhì)量濃度為52.37、47.52 μg·mL-1的混合對(duì)照品溶液。

        2.4.3 供試品溶液的制備 取麻黃飲片各水煎液,用0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾,取續(xù)濾液,即得。

        2.4.4 線性關(guān)系考察 分別取鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿的對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇分別制成含鹽酸麻黃堿850.00、255.00、102.00、20.40、4.08 μg·mL-1與含鹽酸偽麻黃堿491.42、147.42、58.97、11.79、2.36 μg·mL-1的混合對(duì)照品溶液,進(jìn)樣測(cè)定。以進(jìn)樣量(X,μg)為橫坐標(biāo),峰面積積分值(Y)為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸,得鹽酸麻黃堿回歸方程Y=1315.1X+39.06(r=0.9999),線性范圍為0.0408~8.50 μg;鹽酸偽麻黃堿回歸方程Y=927.3X+9.162(r=0.9999),線性范圍為0.0236~4.91 μg。表明兩種成分在進(jìn)樣量范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

        2.4.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取同一混合對(duì)照品溶液,連續(xù)進(jìn)樣6次,鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿峰面積RSD值分別為0.94%、1.6%,表明儀器精密度良好。

        2.4.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液,于制備后0、4、8、12、16、20、24 h分別進(jìn)樣,鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿峰面積RSD值分別為3.2%、5.0%,表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

        2.4.7 重復(fù)性試驗(yàn)[7]取同一麻黃飲片水煎液6份,按“2.4.3”項(xiàng)下方法平行制備供試品溶液,進(jìn)樣測(cè)定,鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿峰面積RSD值分別為2.2%、4.6%,表明重復(fù)性良好。

        2.4.8 加樣回收試驗(yàn)[7-8]精密吸取已測(cè)得含量的麻黃飲片水煎液50 mL于100 mL量瓶中,平行6份,各精密加入兩種對(duì)照品適量,加水至刻度線,搖勻,按“2.4.3”項(xiàng)下方法操作,進(jìn)樣測(cè)定,計(jì)算得鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿的平均加樣回收率分別為102.5%、103.5%,RSD分別為3.4%、4.6%。

        2.5 含量結(jié)果

        分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μL,進(jìn)樣測(cè)定。計(jì)算各水煎液中鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿的濃度,根據(jù)公式計(jì)算生物堿煎出量。成分煎出量=測(cè)得成分濃度×煎液體積。結(jié)果見表2、圖3。魚子麻黃三次煎煮的總出膏率比普通麻黃段高28%,鹽酸麻黃堿總煎出量比普通麻黃段高57%,鹽酸偽麻黃堿總煎出量比普通麻黃段高61%。其中一煎的煎出效率提高得尤為顯著。

        圖3 魚子麻黃與普通麻黃段的煎煮效率示意圖Fig 3 Decoction efficiency of ephedra decoction pieces in the shape of fish roe and commonly processed products

        表2 不同麻黃飲片水煎煮鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿煎出量( ±s,n=4)Tab 2 Decoction quantity of ephedrine hydrochloride and pseudoephedrine hydrochloride from different ephedra decoction pieces ( ±s,n=4)

        表2 不同麻黃飲片水煎煮鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿煎出量( ±s,n=4)Tab 2 Decoction quantity of ephedrine hydrochloride and pseudoephedrine hydrochloride from different ephedra decoction pieces ( ±s,n=4)

        注(Note):與普通麻黃段比較,**P<0.01(Compared with the common processed products,**P<0.01)。

        煎煮次數(shù)鹽酸麻黃堿煎出量/mg 鹽酸偽麻黃堿煎出量/mg普通麻黃段 魚子麻黃 普通麻黃段 魚子麻黃一煎 21.1±1.4 37.3±1.5** 8.8±0.4 15.7±0.5**二煎 4.9±0.4 6.3±0.3** 1.9±0.2 2.5±0.1**三煎 3.5±0.3 2.7±0.2** 1.3±0.1 1.0±0.1**總和 29.5±2.0 46.3±1.3** 11.9±0.6 19.2±0.4**

        3 討論

        麻黃飲片的常規(guī)用量為2~10 g[1]。故選擇中位數(shù)6 g進(jìn)行煎煮試驗(yàn),煎煮次數(shù)、加水量和煎煮時(shí)間參考實(shí)際應(yīng)用情況設(shè)計(jì)。

        關(guān)于麻黃切制的歷史沿革,漢代認(rèn)為將麻黃切為黃豆大為好,南北朝時(shí)期《雷公炮炙論》云“槐砧上用銅刀細(xì)銼”,強(qiáng)調(diào)銼細(xì),唐代時(shí)切成寸段,宋代認(rèn)為“銼”不如“碎”好,“碎”可使藥力易出而無(wú)遺力,金元時(shí)期以細(xì)切、碎和搗為主,明代與前代同,清代在切制方面較簡(jiǎn)單,認(rèn)為切段即可[9]。清末至民國(guó)時(shí)期,藥鋪商家之間的激烈競(jìng)爭(zhēng)促使飲片加工技術(shù)更加精細(xì),片型規(guī)格多樣化,如“黃芪柳葉片”“麻黃魚子樣”“檳榔一百零八片”等[10]。此類精良的手工飲片切制工藝已作為傳統(tǒng)炮制技藝進(jìn)行傳承。魚子麻黃與普通麻黃段的實(shí)質(zhì)區(qū)別是切制的長(zhǎng)度不同。麻黃是草質(zhì)莖,貌似容易煎透,受飲片長(zhǎng)度的影響不大,但結(jié)果證明麻黃飲片長(zhǎng)度對(duì)成分的煎出有顯著影響,并經(jīng)過(guò)了反復(fù)驗(yàn)證。

        中藥的煎煮原則上是浸出物質(zhì)盡量多即濃度高為好[11],飲片有效成分的煎出率與飲片的片型規(guī)格有關(guān)[5,11]。如肉桂絲和粉狀肉桂在浸泡煎煮和直接后下兩種方式中桂皮醛提取率始終高于塊狀肉桂,原因是較大塊片成分釋放較緩慢或被阻礙[12]。又如浙貝母等飲片不易煎煮透心,搗碎后煎出物含量提高60%以上[13]。受擴(kuò)散和吸附的影響,大黃飲片粒度從3~4 cm逐漸減小到超微粉時(shí),煎出的化學(xué)成分量呈先增加后減再增加的變化趨勢(shì)[14]。本文首次報(bào)道了麻黃切制長(zhǎng)度對(duì)煎煮效率的影響,麻黃切細(xì)小段顯著提高了煎出率。由于麻黃不屬于含淀粉多的藥材,切細(xì)小段后煎煮也不粘連糊化,易于過(guò)濾,煎煮的可操作性強(qiáng)。故魚子麻黃的片型不單美觀、精致,也有實(shí)用性,有利于療效發(fā)揮。

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