魏晴，林彤遠，2，王強，王雷，3，4，陳衛(wèi)東，3，4*（. 安徽中醫(yī)藥大學藥學院，合肥 23002；2.華東師范大學附屬蕪湖醫(yī)院（蕪湖二院），藥劑科，安微 蕪湖 2400；3. 中藥復方安徽省重點實驗室，合肥 23002；4. 安徽省中醫(yī)藥科學院藥物制劑研究所，合肥 23002）

癌癥發(fā)病隱匿，大部分癌癥患者明確診斷時已屬進展期，錯過了最佳手術(shù)時間，這部分患者主要依賴于化療藥物治療。但是大多數(shù)化療藥物本身不具有腫瘤特異性，通過靜脈全身給藥，殺傷腫瘤細胞的同時，對正常細胞也有較大的毒性，甚至會破壞免疫系統(tǒng)，這些因素阻礙了化療藥物在臨床上的廣泛應(yīng)用。為提高化療藥物的水溶性及靶向性，降低毒副作用，納米載藥體系應(yīng)運而生。近年來，納米技術(shù)的發(fā)展為解決藥物穩(wěn)定性低、水溶性差、半衰期短、選擇性低等問題提供了新的思路和突破點。脂質(zhì)立方液晶作為新興載藥體系逐漸受到關(guān)注，脂質(zhì)立方液晶納米粒作為納米載體一個新興的分支，其具有生物可降解性、避免藥物發(fā)生化學和生理降解以提高藥物穩(wěn)定性、控制藥物釋放等特點。適用于各種藥物的包載，包括小分子藥物、多肽、蛋白質(zhì)和核酸等。除此以外，脂質(zhì)立方液晶納米粒的特殊空間結(jié)構(gòu)，使其具有可同時包載親脂性和親水性藥物的潛力。

中藥藤黃是藤黃科植物藤黃所分泌出的干燥樹脂，新藤黃酸（gambogenic acid，GNA，CHO）（結(jié)構(gòu)式見圖1A）是中藥藤黃中的主要抗腫瘤化學成分之一，其對多種腫瘤細胞都有不同程度的抑制作用。新藤黃酸的抗腫瘤作用是通過誘導細胞凋亡、阻滯細胞周期進展和抑制腫瘤血管生成而產(chǎn)生的，其可以抑制細胞周期蛋白依賴激酶催化活性位點，阻斷細胞周期G/G期，直接殺傷腫瘤細胞。其抗腫瘤活性強且確切，對肺癌、胰腺癌、肝癌、乳腺癌、胃癌等都具有較好的療效，對正常動物造血系統(tǒng)和免疫功能不產(chǎn)生或很少產(chǎn)生影響。然而其水溶性差、體內(nèi)消除快、靜脈給藥血管刺激性強、生物利用度低等缺陷，嚴重限制了其在臨床上的廣泛應(yīng)用。

PLHSpT（結(jié)構(gòu)式見圖1B）是一種含磷酸化的絲/蘇氨酸的多肽序列，與乳腺癌特異性靶點Polo樣激酶1（polo-like kinase 1，PLK1）特異性高親和（

K

＝0.45±0.11 μmol·L）。PLK1作為腫瘤確診以及腫瘤愈后重要的標記物之一，在正常細胞中低表達甚至不表達，而在乳腺癌甚至晚期乳腺癌腦轉(zhuǎn)移過程中高表達。因此，PLHSpT可作用于PLK1來阻滯腫瘤細胞使其停留在有絲分裂的G/M期，進而導致腫瘤細胞凋亡。但PLHSpT體內(nèi)穩(wěn)定性差、穿膜能力差。新型的磷酸化多肽類藥物聯(lián)合傳統(tǒng)的中藥單體同時使用，能夠顯著增強腫瘤細胞對藥物的敏感性，增加協(xié)同抗腫瘤的效果。PLHSpT與GNA兩種藥物對腫瘤細胞的殺傷原理截然不同，兩者作用于腫瘤細胞周期的不同階段及代謝途徑，可多種途徑共同起到協(xié)同抗腫瘤的效果。本研究旨在制備共載GNA與PLHSpT的脂質(zhì)立方液晶納米粒[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]，并對其理化性質(zhì)及體外藥效學進行研究。

圖1 GNA的結(jié)構(gòu)式（A）和PLHSpT的結(jié)構(gòu)式（B）Fig 1 Structure formula of GNA（A）and PLHSpT（B）

1 材料

1.1 儀器

島津LC-15C高效液相色譜儀、SPD-15C紫外檢測器（日本島津公司）；AB135-S 型十萬分之一電子分析天平（德國 Mettler Toledo公司）；DF-101B集熱式恒溫磁力攪拌器（金壇市鑫鑫實驗儀器廠）；LC-4016低速離心機（安徽中科中佳科學儀器有限公司）；Zetasizer3000HS型激光粒度儀（英國Malvern公司）；Hitachi-HT7700透射電鏡（上海滬西分析儀器廠有限公司）；KQ-300B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；DZF-6050型真空干燥箱（上海傅訊實業(yè)有限公司）；ESCO二氧化碳培養(yǎng)箱（新加坡 Esco 公司）；Cascada超純水儀（美國PALL 公司）。

1.2 試藥

GNA對照品（純度≥ 98%，由安徽中醫(yī)藥大學藥學院GNA課題組提供）；PLHS-PThr-NH2（PLHSpT）（純度≥95%，上海沐晉生物科技有限公司）；泊洛沙姆407（p407）（BASF公司）；單油酸甘油酯（GMO）（天津希恩思生化科技有限公司）；無水乙醇（上海潤捷化學試劑有限公司）；甘露醇（阿拉丁試劑公司）；色譜甲醇（瑞典Oceanpak公司）；胎牛血清（Gibco公司）；DMEM培養(yǎng)基（賽百慷上海生物科技股份有限公司）；青霉素-鏈霉素溶液、0.25%胰酶、MTT（Biosharp公司）。

1.3 細胞

乳腺癌SK-BR-3 細胞購自中國科學院上海細胞所。

2 方法與結(jié)果

2.1 [Cubs-（GNA＋PLHSpT）]的制備

基于實驗室前期研究基礎(chǔ)，采用乳化蒸發(fā)-低溫固化法制備[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]。即將適量GNA和GMO在60℃的水浴中完全溶解于5.00 mL無水乙醇中，得到有機相。將處方比例的磷酸化五肽和泊洛沙姆407溶于定量水中，水浴加熱到與油相相同溫度構(gòu)成水相。然后在攪拌的條件下，于水浴中用1 mL注射器緩慢勻速將生成的有機溶液注入水溶液中，繼續(xù)攪拌直至有機溶劑揮發(fā)完全得到均勻乳狀液，在攪拌條件下將熱乳液倒入適量冰水中冰浴，待其在冰水中完全分散即得淡黃色澄清透明脂質(zhì)立方液晶納米粒。

2.2 單因素考察及正交試驗

影響脂質(zhì)立方液晶納米粒的制備因素很多，如乳化溫度與時間、固化溫度與時間、轉(zhuǎn)速、GNA與PLHSpT的比例等。根據(jù)實驗室前期研究基礎(chǔ)，在原有處方基礎(chǔ)上以外觀、粒徑、粒徑分布和包封率作為考察指標，考察GNA與PLHSpT不同比例、攪拌速度、GNA加入量、藥脂比等對載藥體系的影響，篩選[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]脂質(zhì)立方液晶納米粒的最優(yōu)處方。

2.2.1 GNA與PLHSpT質(zhì)量比篩選 將水溶性磷酸化五肽作為水相加入反應(yīng)體系中，在固定其他條件不變的情況下，以粒徑、粒徑分布、外觀、包封率為考察指標?？疾觳煌|(zhì)量比（m∶m＝1∶1，2∶1，4∶1，6∶1，8∶1，10∶1，12∶1）下[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]的制備情況。結(jié)果GNA與PLHSpT不同質(zhì)量比對[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]的PDI影響較小，對其外觀、粒徑與包封率有明顯影響，綜合考慮選擇8∶1～12∶1較為適宜。

2.2.2 攪拌速度的選擇 在固定其他條件不變的情況下，僅改變轉(zhuǎn)速的大小，選擇攪拌速度分別為400、800、1000 r·min制備[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]溶液，以粒徑、粒徑分布、外觀、包封率作為考察指標，結(jié)果攪拌速度為400 r·min時粒徑、粒徑分布、外觀及包封率均不理想；攪拌速度為800、1000 r·min時外觀無較明顯差別，但受粒徑與包封率的影響較大，當轉(zhuǎn)速為1000 r·min時，其粒徑較小、分散性較好、包封率較高，故選擇攪拌速度為1000 r·min。

抓斗式清淤是指利用抓斗式挖泥船開挖河底淤泥，但淤泥清除率只能達到30% 左右，很難改善水質(zhì)。絞吸式清淤挖泥、輸泥和卸泥都是一體化完成，施工精度較高，不會出現(xiàn)淤泥泄露的問題，缺點是容易出現(xiàn)回淤問題，清淤效率并不高。水上挖掘機清淤可懸浮在浮泥或水上自由行走，被廣泛使用于河道清淤和水域治理、資源開發(fā)、環(huán)境整治等復雜的工程中。新一代的水上挖掘機能在水深5m的狹窄區(qū)域內(nèi)進行清淤作業(yè)，但其缺點也較為明顯，不能輸送淤泥，清淤效率較低。

2.2.3 GNA加入量的選擇 在固定其他制備條件不變的情況下，改變GNA加入量（5、8、10 mg）制備[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]溶液，以粒徑、粒徑分布、外觀、包封率作為考察指標，考察不同GNA加入量對[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]的影響。結(jié)果當GNA加入量逐漸增大時，其平均粒徑與PDI也逐漸增大，包封率隨之減小，所制備的[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]乳液透明度亦隨之降低，藍色乳光消失，故選擇5～6.5 mg進行后續(xù)考察。

2.2.4 藥脂比的選擇 在固定其他制備條件不變的情況下，選擇藥脂比1∶10、1∶20、1∶30、1∶40制備[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]溶液，以粒徑、粒徑分布、外觀、包封率作為考察指標，結(jié)果粒徑分布對藥脂比影響較小，隨著藥脂比的增加，粒徑與包封率有一定變化，當藥脂比過大時很不穩(wěn)定，溶液較渾濁，放置一段時間會有沉淀產(chǎn)生，綜合比較藥脂比在1∶20～1∶30較佳。

2.2.5 綜合加權(quán)評分法綜合評價[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]的處方 以單因素考察的結(jié)果為基礎(chǔ)，分別選擇m∶m比例（A）、藥脂比（

w/w

）（B）、GNA加入量（C）、空白因素（D），按正交試驗表L（3）試驗方案考察各因素對包封率和粒徑的影響。最佳工藝條件要滿足包封率高、粒徑小的特點，因此采用綜合加權(quán)評分法考察最優(yōu)工藝條件，考慮到包封率對制劑影響大于粒徑，因此包封率與粒徑的權(quán)重比分別為60%、40%，即GNA包封率（

EE

）、PLHSpT包封率（

EE

）、粒徑分別按30%、30%、40%的權(quán)重系數(shù)計分，綜合評分標準為：

Y

＝

Y

/

Y

×30%＋

Y

/

Y

×30%－

Y

/

Y

×40%，即綜合評分總分等于各項指標與各項指標最大值之比乘以各指標加權(quán)系數(shù)之和。正交設(shè)計各因素水平見表1，加權(quán)評分結(jié)果及方差分析見表2～3。

表1 因素水平表
Tab 1 Factor and level of orthogonal experiment

水平 因素A B C D 1 8∶1 15% 5.0 －2 10∶1 20% 5.5 －3 12∶1 25% 6.5 －

表2 正交設(shè)計與綜合評分結(jié)果
Tab 2 Orthogonal design and comprehensive scoring results

試驗號 因素 EE1/% EE2/% 粒徑/nm綜合評分A B C D 1 1 1 1 1 73.80 70.98 139.43 18.86 2 1 2 2 2 87.54 85.68 136.21 29.28 3 1 3 3 3 79.96 76.75 138.56 23.12 4 2 1 2 3 74.61 72.39 137.70 20.00 5 2 2 3 1 89.12 86.65 134.65 30.49 6 2 3 1 2 74.40 72.26 130.20 21.53 7 3 1 3 2 72.48 68.59 176.73 9.41 8 3 2 1 3 87.66 85.67 157.00 24.76 9 3 3 2 1 76.90 76.85 182.50 12.49 K1 23.7516.0921.72 K2 24.0128.1820.59 K3 15.5619.0521.01極差 8.4512.09 1.13

由表2可知，各因素影響主次順序為B＞A＞C，由表3可知，B因素有顯著性意義。因此，綜合分析以包封率和粒徑為考察指標得到的評分結(jié)果，確定[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]最佳處方工藝條件為ABC，即

m

∶

m

為10∶1，藥脂比（

w/w

）為20%，GNA加入量為5 mg，攪拌速度為1000 r·min。

表3 方差分析表
Tab 3 Variance analysis

注：（2，2）＝19.00，（2，2）＝99.00。

方差來源 偏差平方和 自由度 F值 F臨界值 顯著性A 138.76 2 12.77 19.00 P＞0.05 B 238.19 2 21.92 19.00 P＜0.05 C 1.95 2 0.18 19.00 P＞0.05

2.3 [Cubs-（GNA＋PLHSpT）]的質(zhì)量評價

2.3.1 外觀考察 由圖2可知，所制備的空白立方液晶納米粒外觀帶有淡藍色乳光的澄清透明液體，沒有沉淀或絮凝，而[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]則呈現(xiàn)黃色。

圖2 空白立方液晶納米粒（左）和[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]（右）的外觀Fig 2 Appearance of the blank Cubs（left）and [Cubs-（GNA＋PLHSpT）]（right）

2.3.2 形態(tài)學考察 取適量納米乳液滴加于有碳膜的銅網(wǎng)上，靜候30 min用濾紙吸去多余納米乳液，并用2.0%的磷鎢酸溶液負染約2 min，自然晾干后置于透射電鏡下觀察[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]的外觀形態(tài)，結(jié)果見圖3。從圖3可以看出，制備的[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]近似圓形，稍立體，粒子與粒子之間無粘連。

圖3 [Cubs-（GNA＋PLHSpT）]的透射電鏡圖Fig 3 Transmission electron microscopy of [Cubs-（GNA＋PLHSpT）]

2.3.3 平均粒徑與Zeta電位 取適量的[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]用超純水稀釋30倍，在室溫條件下用納米激光粒度儀分別測定其粒徑和Zeta電位。由圖4可知，本試驗制備的[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]平均粒徑為（133.7±0.57）nm，多分散 系 數(shù)PDI為（0.171±0.01），Zeta電 位 為（－12.40±0.41）mV，表明本試驗所制備的脂質(zhì)立方液晶納米粒粒徑較小，粒徑分布的范圍較窄，Zeta電位絕對值小于30 mV。

圖4 [Cubs-（GNA＋PLHSpT）]的粒徑分布圖（A）及Zeta電位圖（B）Fig 4 [Cubs-（GNA＋PLHSpT）] particle size distribution（A）and Zeta potential（B）

圖5 6種樣品的DSC圖Fig 5 DSC map of 6 samples

EE

%＝

M

/

M

×100%

EE

%＝（

W

－

W

）/

W

×100%式中

M

、

M

、

W

、

W

分別為過柱后脂質(zhì)立方液晶納米粒內(nèi)被包封GNA的質(zhì)量、分散體系中總GNA的質(zhì)量、游離PLHSpT的含量、脂質(zhì)立方液晶納米粒中總PLHSpT的含量。依據(jù)公式計算可知，本試驗中所制備的[Cubs-（GNA＋PLHSpT]中

EE

為（89.70±0.39）%，

EE

為（87.74±0.71）%。

2.3.6 體外釋放

① 色譜條件：島津LC-15C高效液相色譜儀、SPD-15C紫外檢測器（日本島津公司）；色譜柱：COSMOSIL C柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；柱溫：30℃；流速：1.0 mL·min；進樣量：20 μL；流動相：甲醇-0.1%磷酸水溶液（90∶10，

V/V

）；檢測波長：360 nm。

② 釋放介質(zhì)：根據(jù)實驗室前期的基礎(chǔ)，選擇pH＝7.4的磷酸鹽緩沖液作為釋放介質(zhì)，添加1%的吐溫80作為增溶劑，對[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]載藥體系的體外釋放行為進行初步考察。

③ 標準曲線：取適量的GNA對照品溶液，加PBS溶液（含1%的吐溫80）制備成不同濃度的對照品溶液，12 000 r·min離心10 min，取上清液，進樣測定。以峰面積（

y

）為縱坐標、質(zhì)量濃度（

x

）為橫坐標作標準曲線圖進行線性擬合，得到GNA 線性回歸方程：

y

＝1.06×10

x

－2.64×10（

R

＝0.9997，

n

＝8），結(jié)果表明GNA在1.0～64.0 μg·mL與峰面積線性關(guān)系良好。④ 體外釋放研究：本試驗采用透析法（21 mm，8000～14 400 Da）對等量的GNA溶液以及[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]體外釋放性能進行考察，以GNA溶液為對照。分別取等量的GNA溶液以及[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]置于預(yù)先處理好的透析袋中，然后將透析袋浸入相同的釋放介質(zhì)中，在37℃下以200 r·min攪拌。在預(yù)定的時間點各取樣1 mL，同時補加等量釋放介質(zhì)，12 000 r·min離心10 min，取上清液進樣后測定，按以下公式計算累計釋藥百分比（

Q

）并繪制累計釋放曲線，如圖6所示。游離GNA在釋放介質(zhì)中釋放迅速，8 h后幾乎釋放完全，累計釋放率達99.63%；[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]載體中藥物的釋放前12 h快速釋放，12 h后釋放趨于平緩，在24 h內(nèi)累計釋放率為72.26%。

圖6 GNA及[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]的體外釋藥曲線Fig 6 In vitro release profile of GNA solution and [Cubs-（GNA＋PLHSpT）]

Q

＝｛

CV

＋（

C

＋

C

＋…＋

C

）

V

｝/

M

×100%其中，

C

，

C

，

C

，

C

分別為第1，2，

i

－1，

i

等時間點釋放介質(zhì)中GNA的濃度；

V

表示釋放介質(zhì)總體積；

V

表示所取樣品的體積。

2.4 [Cubs-（GNA＋PLHSpT）]體外抗腫瘤活性研究

2.4.1 細胞培養(yǎng) 將人乳腺癌細胞株SK-BR-3細胞培養(yǎng)于含有10%胎牛血清、1%青霉素-鏈霉素混合液的DMEM（含1.5 g·LNaHCO）培養(yǎng)基的透氣培養(yǎng)瓶中，置于飽和濕度二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（37℃，5%CO），24～48 h后更換培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)（具體時間視細胞生長狀態(tài)以及培養(yǎng)基狀態(tài)而定），待細胞密度達70%～90%（約培養(yǎng)3～5 d），即按1∶2的比例進行傳代培養(yǎng)。

2.4.2 體外抗腫瘤評價 細胞分為調(diào)零組，對照組，空白納米立方液晶、游離GNA、游離PLHSpT、PLHSpT-Cubs、GNA-Cubs、[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]給藥組。

將生長狀態(tài)優(yōu)良的SK-BR-3細胞消化，制成單細胞懸液并計數(shù)以備用，以1×10個/孔，每孔懸液體積為200 μL，接種至96孔板內(nèi)，照分組及濃度梯度的數(shù)量鋪板，剩余空白孔鋪滿PBS（避免邊緣效應(yīng)），培養(yǎng)箱孵育24 h后，實驗組各孔（每個藥物不同濃度各設(shè)6個復孔）加入對應(yīng)藥物，37℃孵育36 h，吸去舊培養(yǎng)基，每孔加入200 μL新鮮培養(yǎng)基及20 μL含5 mg·mLMTT的DMEM混合液，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，吸去培養(yǎng)基，每孔加入150 μL二甲基亞砜（DMSO），搖床恒溫（37℃）充分避光震蕩10 min，使反應(yīng)生成的紫藍色結(jié)晶物充分溶解，在自動酶標儀上以490 nm波長測定實驗孔每孔

OD

值，計算細胞存活率（%）和半抑制濃度（

IC

），結(jié)果游離GNA、游離PLHSpT、PLHSpT-Cubs、GNA-Cubs、[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]的

IC

分別為（14.33±0.59）、（15.67±0.68）、（9.03±0.41）、（6.73±0.22）、（3.46±0.11）μg·mL，結(jié)果見圖7。

圖7 不同濃度制劑（A）以及游離藥物（B）對SK-BR-3 細胞存活率的影響（Mean±SD，n＝3）Fig 7 Effect of different agent concentrations（A）and different concentrations of free drugs（B）on the survival rate of SK-BR-3 cells（B）（Mean±SD，n＝3）

由圖7可知，與游離GNA和游離PLHSpT相比，空白脂質(zhì)立方液晶納米粒毒性較低，對細胞影響較小，游離GNA對SK-BR-3細胞的抑制作用優(yōu)于游離PLHSpT。與單獨載GNA或PLHSpT的納米立方液晶相比，[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]對SKBR-3細胞的的細胞抑制效果更明顯，對 SK-BR-3細胞的

IC

值最小，為（3.46±0.11）μg·mL，抑制效果是游離GNA的4.14倍，游離PLHSpT的4.52倍，GNA-Cubs的1.95倍，PLHSpT-Cubs的2.61倍。[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]對細胞抑制率隨GNA濃度增大而增大，說明同時包載GNA和PLHSpT的脂質(zhì)立方液晶納米粒能發(fā)揮協(xié)同作用，其體外抗腫瘤效果最好。

3 討論

本研究采用高溫乳化蒸發(fā)-低溫固化法制備了同時包裹GNA與PLHSpT的脂質(zhì)立方液晶納米粒[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]，通過單因素與正交試驗確定最優(yōu)處方，得到粒徑較小，分布均勻，理化特性理想的脂質(zhì)立方液晶。并通過外觀、類型、粒徑、多分散系數(shù)、透射電鏡、DSC等方法對其進行了系統(tǒng)的表征。結(jié)果表明，最優(yōu)處方下的[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]平均粒徑為（133.7±0.57）nm，多分散系數(shù)PDI為（0.171±0.01），Zeta電位為（－12.40±0.41）mV；GNA和PLHSpT包封率分別為（89.70±0.39）%和（87.74±0.71）%。透射電鏡顯示[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]呈球形或者類球形，DSC分析結(jié)果亦驗證了確有新的物相生成。體外釋藥曲線表明，與游離GNA相比，[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]具有明顯的緩釋效果。MTT法檢測[Cubs-（GNA＋PLHSpT）]對 SK-BR-3 細胞有明顯的增殖抑制作用，初步證明了脂質(zhì)立方液晶納米?？梢栽鰪奊NA對腫瘤的抑制作用。

對傳統(tǒng)載藥系統(tǒng)而言，本實驗借助脂質(zhì)立方液晶納米粒同時包載PLHSpT及GNA，提高了PLHSpT的體內(nèi)穩(wěn)定性、細胞穿膜能力，同時也延長了GNA體內(nèi)半衰期、增加了體內(nèi)生物利用度、減少了其對血管的刺激性。對乳腺癌而言，新型肽類藥物PLHSpT與中藥GNA單體可通過不同作用機制實現(xiàn)抗腫瘤作用，兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用有望使該復方脂質(zhì)立方液晶納米粒載藥體系對乳腺癌細胞的殺傷力增加，提高抗腫瘤效果，為后續(xù)研究提供一定理論基礎(chǔ)。