曲春燕 王璟 申敏 魯紅利 馬登科 趙敏

耳聾的病因包括遺傳、外傷、感染、藥物等因素，其中遺傳是主要的致聾原因，約占60%以上。根據(jù)遺傳方式不同，以耳聾為唯一癥狀的非綜合征型耳聾中，75%～80%為常染色體隱性遺傳，15%～20%為常染色體顯性遺傳，線粒體母系遺傳約占5%，伴性遺傳約占1%[1,2]。氨基糖苷類抗生素致聾的致病機理與mtDNA 12SrRNA基因突變有關(guān),線粒體基因的遺傳方式是母系遺傳，母系家族中可出現(xiàn)多名耳聾成員。常見的mtDNA 12SrRNA基因突變類型包括m.1555A>G均質(zhì)或異質(zhì)突變、m.1494C>T均質(zhì)或異質(zhì)突變,本研究對140例攜帶mtDNA 12SrRNA基因突變新生兒的聽力篩查結(jié)果和聽力診斷結(jié)果進行回顧性分析，報告如下。

1 資料與方法

1.1研究對象 以2012年4月～2019年10月在北京出生、耳聾基因篩查均顯示攜帶mtDNA 12SrRNA基因突變的140例新生兒，男75例，女65例，平均出生孕周39.1±1.28周，平均出生體重3 393.9±459.67克。排除標準：①攜帶mtDNA 12SrRNA基因突變之外的其它基因突變；②出生后曾在新生兒重癥監(jiān)護病房(NICU)住院；③伴有先天畸形、發(fā)育異?；蚱渌膊?；④伴父系耳聾家族史。篩查前明確告知聽力篩查和耳聾基因篩查相關(guān)知識，監(jiān)護人或家屬簽訂知情同意書。

1.2研究方法

1.2.1耳聾基因檢測 新生兒出生后，由助產(chǎn)機構(gòu)采集新生兒足跟末梢血2個血斑，每個血斑直徑≥8 mm，2012年4月1日至2018年12月31日檢測4個常見耳聾基因的9個突變位點，包括：GJB2(c.35delG、c.176del16、c.235delC、c.299_300delAT)、SLC26A4(IVS7-2A>G、c.2168A>G)、線粒體DNA 12SrRNA(m.1494C>T、m.1555A>G)、GJB3(c.538C>T)；2019年1月1日之后增加了6個檢測位點，包括：SLC26A4(c.1174A>T、c.1226G>A、c.1229C>T、c.1975G>C、c.2027T>A、 IVS15+5G>A)。采用天根干血斑核酸提取試劑盒(DP334-03)對干血斑進行基因組DNA提取，使用遺傳性聾基因芯片檢測試劑盒(博奧晶典生物技術(shù)有限公司)對樣本進行檢測；芯片結(jié)果為陽性的樣本，重新提取血斑的DNA進行Sanger測序復(fù)核，確保結(jié)果的準確性。

1.2.2新生兒聽力篩查和聽力學(xué)診斷 新生兒出生48小時后在出生醫(yī)院進行畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射(DPOAE)初篩，初篩未通過者，出生42天后在各區(qū)婦幼保健院或者指定的復(fù)篩機構(gòu)進行復(fù)篩，復(fù)篩方法為DPOAE或者DPOAE+自動聽性腦干反應(yīng)(AABR)；聽力復(fù)篩未通過者清除外耳道耵聹后，3～6月齡內(nèi)進行聽力學(xué)診斷。本組病例均在中國聽力語言康復(fù)研究中心進行聽力診斷，測試內(nèi)容包括：行為觀察測聽、耳聲發(fā)射、聽性腦干反應(yīng)(ABR)和聲導(dǎo)抗檢測，ABR檢測采用美國智聽公司Smart-EP誘發(fā)電位測試系統(tǒng)。以氣導(dǎo)ABR波V反應(yīng)閾≤30 dB nHL為正常，31～50 dB nHL為輕度聾，51～70 dB nHL為中度聾，71～90 dB nHL為重度聾，>91 dB nHL為極重度聾。

2 結(jié)果

2.1140例mtDNA 12SrRNA基因突變攜帶情況 140例攜帶mtDNA 12SrRNA基因突變的新生兒中，108例(77.1%)攜帶m.1555A>G均質(zhì)突變，26例(18.6%)攜帶m.1555A>G異質(zhì)突變；6例(14.3%)攜帶m.1494C>T均質(zhì)突變。

2.2攜帶不同 12SrRNA基因突變型的新生兒聽力篩查和診斷結(jié)果 140例中，3例3耳未通過聽力篩查，其余137例(97.86%,137/140)均通過聽力篩查(表1)，這3例中，2例攜帶m.1555A>G均質(zhì)突變，其中1例右耳通過聽力篩查，左耳未通過，雙耳1 kHz聲導(dǎo)抗均為單峰，氣導(dǎo)ABR波V反應(yīng)閾右耳30 dB nHL，左耳90 dB nHL，診斷為左耳重度感音神經(jīng)性聾，右耳聽力正常；另外1例右耳未通過聽力篩查，因家長不同意未做聽力診斷；1例攜帶m.1494C>T均質(zhì)突變者左耳通過聽力篩查，右耳未通過，雙耳1 kHz聲導(dǎo)抗均為單峰，氣導(dǎo)ABR波V反應(yīng)閾左耳20 dB nHL，右耳100 dB nHL，診斷為右耳極重度感音神經(jīng)性聾，左耳聽力正常。

表1 140例攜帶不同類型DNA 12SrRNA基因突變新生兒聽力篩查和診斷結(jié)果(例)

3 討論

氨基糖苷類抗生素導(dǎo)致藥物性聾的病理機制是mtDNA 12SrRNA基因突變導(dǎo)致機體對此類藥物易感，是遺傳因素和藥物的共同作用導(dǎo)致的[3,4]。mtDNA 12SrRNA基因突變攜帶者對氨基糖苷類藥物有超敏性，常有“一針致聾”現(xiàn)象，即應(yīng)用正常劑量或微量的此類藥物就可以導(dǎo)致聽力損失[5]。

本組140例mtDNA 12SrRNA基因突變新生兒中，137例(97.86%，137/140)通過了聽力篩查，3例3耳未通過，其中2例聽力診斷為單側(cè)重度和極重度耳聾，另外1例家長拒絕聽力診斷;提示絕大部分mtDNA 12SrRNA基因突變新生兒在出生時聽力基本正常，與之前的相關(guān)報道相符[6,7],聽力聯(lián)合基因篩查方可診斷此類患兒。本研究中這兩例單側(cè)聾的發(fā)生考慮可能與mtDNA 12SrRNA基因突變無關(guān)，是否因發(fā)育等其他原因造成的，尚需進一步的影像學(xué)進行鑒別和定期隨診。雖然絕大多數(shù)mtDNA 12SrRNA基因突變新生兒通過了聽力篩查，但是由于對氨基糖苷類抗生素易感，仍屬于耳聾的高危人群，建議終生避免使用此類藥物，以防“一針致聾”。此外，還應(yīng)對其母系家庭成員中攜帶該基因突變的人員進行用藥指導(dǎo)，包括新生兒同母的兄弟姐妹、新生兒的母親及其同母兄弟姐妹、新生兒姨母家的孩子、新生兒的姥姥及其同母兄弟姐妹、新生兒姨姥家的孩子等。通過新生兒耳聾基因篩查可以發(fā)現(xiàn)mtDNA 12SrRNA基因突變攜帶者，在進行隨訪并繪制家系圖后，給予遺傳咨詢和用藥指導(dǎo)，避免攜帶mtDNA 12SrRNA基因突變的家庭成員因為用藥不慎導(dǎo)致聽力殘疾。