蘇換換，馬冬梅，朱華平，林明輝，樊佳佳，池金泉，梁康威

( 1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院 珠江水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部熱帶亞熱帶水產(chǎn)資源利用與養(yǎng)殖重點實驗室，廣東 廣州 510380； 2.廣州銳灃漁業(yè)發(fā)展有限公司，廣東 廣州 511447 )

云斑尖塘鱧(Oxyeleotrismarmoratus)和線紋尖塘鱧(O.lineolatus)均屬鱸形目、蝦虎魚亞目、塘鱧科、尖塘鱧屬，是我國從國外引進的名特優(yōu)魚類[1-2]。云斑尖塘鱧，俗稱泰國筍殼魚，原產(chǎn)于泰國、越南等東南亞國家，其體表黃褐色，斑紋明顯，外形美觀，市場售價高，但養(yǎng)殖過程中的大吃小現(xiàn)象影響?zhàn)B成成活率[1]。線紋尖塘鱧，俗稱澳洲筍殼魚，原產(chǎn)于澳大利亞，其體表顏色黑，外形不及云斑尖塘鱧美觀，市場售價相對較低，但因其具有性格溫順、生長速度較快、耐粗飼等優(yōu)點，目前養(yǎng)殖面積較大[2]。

雜交育種是最有效的育種途徑之一，它可以在品種改良和新品種培育方面產(chǎn)生較大的效益[3]。目前通過雜交育種技術(shù)已經(jīng)成功獲得較多具有雜種優(yōu)勢的雜交種，如建鯉(Cyprinuscarpiovar.Jian)[4]、奧尼羅非魚(Oreochromisniloticus♀×O.aureus♂)[5]、雜交黃顙魚(Pelteobagrusvachelli♀×P.fulvidraco♂)“黃優(yōu)1號”[6]等。李春枝等[7]于2009年以云斑尖塘鱧為母本、線紋尖塘鱧為父本成功獲得雜交尖塘鱧后代。李敏等[8]在相同人工養(yǎng)殖條件下對云斑尖塘鱧和線紋尖塘鱧自交后代和其雜交尖塘鱧子一代生長性狀進行檢測，表明雜交尖塘鱧后代比親本自交后代生長速度快，表現(xiàn)出顯著的超親雜種優(yōu)勢，超親雜種優(yōu)勢平均為105.65%。因雜交尖塘鱧生長速度快，且兼具線紋尖塘鱧耐粗飼優(yōu)點，該雜交種深受養(yǎng)殖戶的喜愛。肌肉營養(yǎng)成分分析是對養(yǎng)殖魚類品質(zhì)進行評價的十分重要的指標(biāo)。云斑尖塘鱧為母本與線紋尖塘鱧為父本雜交后代的生長速度的加快對其肌肉中營養(yǎng)成分是否有影響是評價雜交種雜交效果的重要研究內(nèi)容之一，為此筆者對相同養(yǎng)殖環(huán)境條件下飼養(yǎng)的云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧和雜交尖塘鱧的肌肉營養(yǎng)成分進行測定與分析，旨在對雜交尖塘鱧肌肉品質(zhì)及營養(yǎng)價值做出初步評價，也為尖塘鱧遺傳育種的開展提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗用云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧、云斑尖塘鱧(♀)×線紋尖塘鱧(♂)雜交個體均取自廣東省廣州市番禺區(qū)良種培育基地。3種尖塘鱧均為2017年6月繁殖后代，魚種培育至約10 cm時，每個群體隨機選擇200尾注射金屬絲標(biāo)記進行群體區(qū)分，然后放入1334 m2池塘中進行混養(yǎng)，每日投喂冰鮮魚打成的魚糜，并適量添加維生素、魚粉等，日飽食投喂2次(8:00、17:00)。試驗魚同塘飼養(yǎng)6個月后,每種魚隨機取樣12尾用于肌肉營養(yǎng)成分測定，每種魚設(shè)3組平行，每組平行采集4尾魚的背部肌肉混合后作為樣品。試驗魚利用100 mg/L魚安樂(MS-222)進行麻醉處理，根據(jù)金屬絲標(biāo)記位置確定其種類，擦干體表水分，測量其體質(zhì)量。所取的云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧和雜交尖塘鱧樣品平均體質(zhì)量分別為(238.71±5.78) g、(275.27±6.39) g、(376.50±7.86) g，每尾魚選取背部相同部位肌肉60 g，然后將樣品混合后切成小塊，搗碎、混勻，用于肌肉營養(yǎng)成分測定。

1.2 營養(yǎng)成分檢測

參照食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)，水分含量采用GB 5009.3—2016《食品中水分的測定》直接干燥法進行測定；粗脂肪含量采用GB 5009.6—2016《食品中脂肪的測定》索氏提取法進行測定；粗蛋白含量采用GB 5009.5—2016《食品中蛋白質(zhì)的測定》凱氏定氮法進行測定；灰分含量采用GB 5009.4—2016《食品中灰分的測定》稱量質(zhì)量法進行測定；氨基酸的組成與含量參照GB 5009.124—2016《食品中氨基酸的測定》的方法，共檢測到16種氨基酸，胱氨酸和色氨酸含量未測定；脂肪酸的組成與含量參照GB 5009.168—2016《食品中脂肪酸的測定》的方法進行測定；礦質(zhì)元素鈣和磷含量參照GB 5009.268—2016《食品中多元素的測定》的方法進行測定，硒含量的測定采用GB 5009.93—2017《食品中硒的測定》氫化物原子熒光光譜法測定。樣品重復(fù)測定3次。

1.3 氨基酸營養(yǎng)品質(zhì)評定

將肌肉中氨基酸的含量換算成每克蛋白中所含氨基酸的毫克數(shù)，再與聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織蛋白質(zhì)評價的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)模式和全雞蛋蛋白質(zhì)的氨基酸模式進行比較，并計算氨基酸評分(AAS)、化學(xué)評分(CS)和必需氨基酸指數(shù)(EAAI)[9]。

式中，wAA為樣品中氨基酸含量(mg/g)；wT為樣品(濕樣)中某氨基酸含量(mg/100 g)；wP為樣品(濕樣)粗蛋白質(zhì)含量(g/100 g)；wFAO/WHO為聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織評分模式中同種氨基酸含量(mg/g)；wEgg為全雞蛋蛋白質(zhì)中同種氨基酸含量(mg/g)；n為比較的必需氨基酸數(shù)量；A、B、C…J為尖塘鱧肌肉蛋白質(zhì)中必需氨基酸的含量 (mg/g)；EA、EB、EC…EJ為全雞蛋蛋白質(zhì)中同種氨基酸含量 (mg/g)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

利用Excel 2013軟件記錄和處理試驗數(shù)據(jù)，SPSS 19.0軟件的單因素方差分析模塊對試驗數(shù)據(jù)進行顯著性檢驗，試驗數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差形式表示。

2 結(jié) 果

2.1 一般營養(yǎng)成分比較

云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧、雜交尖塘鱧的常規(guī)營養(yǎng)成分見表1。3組尖塘鱧水分含量為75.80%～79.23%，粗蛋白含量為18.33%～19.23%，粗脂肪含量為0.62%～1.63%，粗灰分含量為1.20%～1.33%。其中云斑尖塘鱧肌肉中水分含量顯著高于線紋尖塘鱧(P<0.05)，與雜交尖塘鱧相比差異不顯著(P>0.05)。雜交尖塘鱧肌肉中粗蛋白與粗脂肪含量顯著高于云斑尖塘鱧(P<0.05)，且粗脂肪含量又顯著高于線紋尖塘鱧(P<0.05)。云斑尖塘鱧肌肉中粗灰分含量顯著低于線紋尖塘鱧(P<0.05)。

表1 3種尖塘鱧肌肉營養(yǎng)成分比較(鮮質(zhì)量) %Tab.1 Comparison of nutritional compositions in muscle of three sleeper Oxyeleotris species(fresh weight)

2.2 氨基酸組成比較

利用酸水解法預(yù)處理云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧與雜交尖塘鱧肌肉樣品，并檢測3種尖塘鱧肌肉氨基酸組成及含量，共檢測出16種氨基酸(表2)。其中雜交尖塘鱧肌肉中異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸的含量均顯著高于云斑尖塘鱧(P<0.05)，而與線紋尖塘鱧相比差異不顯著(P>0.05)，而其他必需氨基酸在3組之間的差異均未達到顯著水平(P>0.05)。云斑尖塘鱧和線紋尖塘鱧肌肉中精氨酸含量顯著高于雜交尖塘鱧(P<0.05)，而線紋尖塘鱧和云斑尖塘鱧肌肉中脯氨酸含量則顯著低于雜交尖塘鱧(P<0.05)，3組尖塘鱧肌肉中其他非必需氨基酸含量均差異不顯著。雜交尖塘鱧肌肉中的總鮮味氨基酸、必需氨基酸、非必需氨基酸和總氨基酸含量均高于云斑尖塘鱧和線紋尖塘鱧，但差異不顯著(P>0.05)。3種尖塘鱧肌肉中鮮味氨基酸含量占總氨基酸含量的37.66%～39.82%，必需氨基酸含量占總氨基酸含量的40.12%～44.35%，必需氨基酸/非必需氨基酸為75.64%～79.63%。

表2 3種尖塘鱧肌肉中氨基酸組成及含量比較分析 g/100 gTab.2 Comparison of the amino acids in muscle of three sleeper Oxyeleotris species

2.3 必需氨基酸營養(yǎng)價值比較

根據(jù)所測的肌肉中氨基酸含量，參考聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織建議的評分標(biāo)準(zhǔn)(1973)和全雞蛋蛋白質(zhì)評分標(biāo)準(zhǔn)，計算3種尖塘鱧必需氨基酸評分、化學(xué)評分和必需氨基酸指數(shù)并進行評價[10-11]。本試驗中氨基酸的組成與含量測定采用食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)中GB 5009.124—2016《食品中氨基酸的測定》的方法，共檢測到16種氨基酸。其中，必需氨基酸中的色氨酸未測定，因此在各個比值計算中均去掉胱氨酸和色氨酸的含量進行比較。線紋尖塘鱧、云斑尖塘鱧及雜交尖塘鱧的必需氨基酸評分、化學(xué)評分和必需氨基酸指數(shù)計算結(jié)果顯示(表3)：3組尖塘鱧的第一限制性氨基酸均為纈氨酸；在雜交尖塘鱧中第二限制性氨基酸為蘇氨酸，其他2組尖塘鱧為異亮氨酸。必需氨基酸評分為0.94～1.78，化學(xué)評分為0.71～1.40，評分中計算得到的必需氨基酸占總氨基酸的40.59%～41.57%，高于聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織評分模式的31.50%，接近于全雞蛋白蛋白質(zhì)模式的43.10%，必需氨基酸指數(shù)為91.82～92.37，3組中所有必需氨基酸評分和化學(xué)評分指標(biāo)均差異不顯著(P>0.05)。

表3 3種尖塘鱧肌肉必需氨基酸組成與評價 mg/gTab.3 Evaluation and comparison of essential amino acids in muscle of three sleeper Oxyeleotris species

2.4 脂肪酸組成比較

云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧與雜交尖塘鱧肌肉中的脂肪酸組成及含量比較見表4，在3種魚中共檢測到26種脂肪酸，其中雜交尖塘鱧的豆蔻酸、十五烷酸、十七烷酸、豆蔻一烯酸、戊二烯酸和二十碳四烯酸含量均顯著高于線紋尖塘鱧(P<0.05)，而與云斑尖塘鱧相比未達到顯著水平(P>0.05)。油酸、花生一烯酸和亞油酸在雜交尖塘鱧肌肉中的含量顯著高于云斑尖塘鱧(P<0.05)。雜交尖塘鱧的不飽和脂肪酸的含量為78.51%，顯著高于云斑尖塘鱧(64.02%)(P<0.05)。雜交尖塘鱧肌肉中多不飽和脂肪酸的含量為48.18%，顯著高于線紋尖塘鱧(P<0.05)，而與云斑尖塘鱧相比未達到顯著水平(P>0.05)。雜交尖塘鱧肌肉中多不飽和脂肪酸與飽和脂肪酸的比值為1.23，略高于線紋尖塘鱧與云斑尖塘鱧肌肉中的比值(1.10)。

表4 3種尖塘鱧肌肉脂肪酸組成與含量比較 %Tab.4 Comparison of compositions and contents of fatty acids in muscle of three sleeper Oxyeleotris species

2.5 礦物質(zhì)元素比較

線紋尖塘鱧、云斑尖塘鱧及雜交尖塘鱧肌肉中鈣、磷、硒3種礦物質(zhì)元素的含量見表5，其中鈣和磷元素在3種尖塘鱧肌肉中的含量比較接近，均未達到顯著水平。而硒元素在云斑尖塘鱧肌肉中的含量(0.38 mg/kg)顯著高于線紋尖塘鱧(0.28 mg/kg)與雜交尖塘鱧(0.29 mg/kg)(P<0.05)。

表5 3種尖塘鱧肌肉中3種礦質(zhì)元素含量比較 mg/kgTab.5 Comparison of three mineral elements in muscles of three sleeper Oxyeleotris species

3 討 論

3.1 試驗樣品的選擇

本試驗中，云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧和雜交尖塘鱧試驗樣品均為2017年6月的自交和雜交后代，保證試驗魚養(yǎng)殖周期基本一致。在魚種體長約10 cm時，每個群體隨機選擇200尾試驗魚進行同塘混養(yǎng)，也盡量保證試驗魚養(yǎng)殖環(huán)境和飼料營養(yǎng)一致，通過這些操作，最大限度避免因養(yǎng)殖周期、養(yǎng)殖環(huán)境、飼料營養(yǎng)和飼養(yǎng)管理等不同而導(dǎo)致試驗結(jié)果出現(xiàn)誤差，保證分析的肌肉營養(yǎng)成分差異主要來自遺傳效應(yīng)。在同塘飼養(yǎng)6個月后，每個群體隨機取樣12尾進行肌肉營養(yǎng)成分測定，測得體質(zhì)量分別為(238.71±5.78)、(275.27±6.39) g和(376.50±7.86) g。比較顯示，雜交尖塘鱧比母本云斑尖塘鱧自交后代體質(zhì)量增加57.72%，比父本線紋尖塘鱧自交后代體質(zhì)量增加36.78%，顯示出明顯的雜種優(yōu)勢。李敏等[8]利用生長對比試驗，比較云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧和雜交尖塘鱧的體質(zhì)量，同樣顯示雜交尖塘鱧幼魚的雜種優(yōu)勢十分明顯，超過云斑尖塘鱧雜種優(yōu)勢76.37%，超過線紋尖塘鱧雜種優(yōu)勢146.58%。但因為本試驗取樣量少，若想獲得3種尖塘鱧群體較準(zhǔn)確的生長對比數(shù)據(jù)，還需要進一步設(shè)置不同養(yǎng)殖模式、養(yǎng)殖條件等，系統(tǒng)分析3種尖塘鱧的生長規(guī)律。

3.2 一般營養(yǎng)成分的比較分析

目前關(guān)于尖塘鱧肌肉營養(yǎng)成分研究較少，僅見陳永樂等[12]分析體質(zhì)量80～210 g的線紋尖塘鱧肌肉營養(yǎng)成分，研究顯示其水分含量為79.07%，粗蛋白含量為19.44%，粗脂肪含量為0.13%，粗灰分含量為1.17%。本試驗中，對達到上市規(guī)格的云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧和雜交尖塘鱧的肌肉營養(yǎng)成分進行測定，顯示其水分含量為75.80%～79.23%，粗蛋白含量為18.33%～19.23%，粗脂肪含量為0.62%～1.63%，粗灰分含量為1.20%～1.33%，其成分含量與陳永樂等[11]所測得數(shù)據(jù)比較接近。分析3種尖塘鱧粗蛋白和粗脂肪含量可知，均為雜交尖塘鱧>線紋尖塘鱧>云斑尖塘鱧，表明在相同養(yǎng)殖環(huán)境條件下，雜交尖塘鱧肌肉中粗蛋白和粗脂肪含量表現(xiàn)出一定的雜種優(yōu)勢。達里湖瓦氏雅羅魚(Leuciscuswaleckii)♀×松花江瓦氏雅羅魚♂雜交后代的粗蛋白和粗脂肪含量也顯著高于親本自交后代[13]，表明通過雜交育種可以適當(dāng)改良魚類的肌肉營養(yǎng)成分。

3.3 氨基酸含量與營養(yǎng)評價

通過分析3種尖塘鱧肌肉中氨基酸組成和含量可知，云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧和雜交尖塘鱧的必需氨基酸與總氨基酸比值分別為43.41%、43.12%和44.35%，其中雜交尖塘鱧最高，必需氨基酸與非必需氨基酸比值分別為76.48%、75.64%和79.63%，同樣雜交尖塘鱧最高。根據(jù)聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織提出的蛋白參考模式，優(yōu)質(zhì)食品蛋白源的必需氨基酸含量約占氨基酸總量的40%，必需氨基酸與非必需氨基酸的比值應(yīng)大于60%[14-16]，3組尖塘鱧的必需氨基酸含量均符合優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)，且雜交尖塘鱧這兩個比值均略大于線紋尖塘鱧與云斑尖塘鱧。云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧和雜交尖塘鱧鮮味氨基酸與必需氨基酸比值分別為39.82%、37.66%和39.28%，雜交尖塘鱧鮮味氨基酸含量介于親本之間，推測雜交尖塘鱧肌肉鮮味程度并未顯著下降。參考聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織建議的評分標(biāo)準(zhǔn)(1973)和全雞蛋蛋白質(zhì)評分標(biāo)準(zhǔn)，計算3種尖塘鱧必需氨基酸評分、化學(xué)評分和必需氨基酸指數(shù)并進行評價，結(jié)果顯示，3種尖塘鱧必需氨基酸評分為0.94～1.78，化學(xué)評分0.71～1.40，計算得到的必需氨基酸與總氨基酸的比值為40.59%～41.57%，高于聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織評分模式的31.50%，接近于全雞蛋蛋白質(zhì)模式的43.10%[10-11]，必需氨基酸指數(shù)為91.82～92.17，3組中所有必需氨基酸評分和化學(xué)評分均比較相似，不存在顯著差異。綜上所述，線紋尖塘鱧、云斑尖塘鱧及雜交尖塘鱧肌肉中的氨基酸含量豐富，必需氨基酸組成符合聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織模式標(biāo)準(zhǔn)，接近全雞蛋蛋白質(zhì)模式，雜交尖塘鱧蛋白質(zhì)的含量和品質(zhì)與線紋尖塘鱧、云斑尖塘鱧比較接近，均屬于優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)食品，且雜交尖塘鱧氨基酸成分略優(yōu)于云斑尖塘鱧和線紋尖塘鱧。這與瓦氏雅羅魚雜交種[11]、黃顙魚“黃優(yōu)1號”[17]和牙鲆雜交(Paralichthysolivaceus♂×P.dentatus♂)F1代[18]分析結(jié)果類似，均顯示雜交種氨基酸成分略優(yōu)與親本。

3.4 脂肪酸含量的比較分析

脂肪酸含量與組成也是評價魚類肌肉營養(yǎng)價值的重要指標(biāo)之一[19]。云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧與雜交尖塘鱧肌肉中共檢測到26種脂肪酸。其中雜交尖塘鱧在豆蔻酸、十五烷酸、十七烷酸、豆蔻一烯酸、戊二烯酸和二十碳四烯酸均顯著高于線紋尖塘鱧(P<0.05)，而與云斑尖塘鱧相比未達到顯著水平(P>0.05)。油酸、花生一烯酸和亞油酸在雜交尖塘鱧肌肉中的含量顯著高于云斑尖塘鱧(P<0.05)。雜交尖塘鱧的不飽和脂肪酸的含量為78.51%，高于線紋尖塘鱧(75.13%)，并顯著高于云斑尖塘鱧(64.02%)的不飽和脂肪酸的含量，表明雜交尖塘鱧不飽和脂肪酸表現(xiàn)出一定的雜種優(yōu)勢，這在瓦氏雅羅魚雜交種研究中有類似結(jié)果[17]。雜交尖塘鱧肌肉中多不飽和脂肪酸的含量為48.18%，顯著高于線紋尖塘鱧(38.64%)，而與云斑尖塘鱧(40.34%)未達到顯著水平。雜交尖塘鱧肌肉中多不飽和脂肪酸/飽和脂肪酸為1.23，略高于線紋尖塘鱧與云斑尖塘鱧肌肉中的比值(1.10)，但3種尖塘鱧比值均高于聯(lián)合國健康部門推薦的理想脂肪酸組成的推薦值(0.40)。人體攝入過多的飽和脂肪酸不利于心腦血管健康[20]，而不飽和脂肪酸特別是多不飽和脂肪酸具有預(yù)防人類心腦血管病、降血脂、降血壓、抑癌、抑過敏、抗炎和抗衰老等作用[21]，本試驗結(jié)果表明，雜交尖塘鱧多不飽和脂肪酸含量也顯著高于親本自交后代，顯示出一定的雜種優(yōu)勢。

3.5 礦物質(zhì)元素含量比較分析

比較云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧和雜交尖塘鱧肌肉中的3種礦質(zhì)元素含量，顯示鈣、磷元素在3種尖塘鱧肌肉中的含量比較接近，但均未達到顯著水平(P>0.05)。硒是人體必需的微量元素之一，具有提高人體免疫力的作用，并參與組織中的多種代謝[22-23]。參照DB61/T 556—2012《富硒食品與其相關(guān)產(chǎn)品硒含量標(biāo)準(zhǔn)》，鮮肉中硒含量應(yīng)達到 0.02～0.50 mg/kg[24]，硒元素在3種尖塘鱧肌肉中的含量逾0.28 mg/kg，均達到富硒標(biāo)準(zhǔn)。表明3種尖塘鱧肌肉均屬于富硒優(yōu)質(zhì)食品。

4 結(jié) 論

對同期繁殖、同塘養(yǎng)殖的云斑尖塘鱧、線紋尖塘鱧和雜交尖塘鱧樣品肌肉營養(yǎng)成分進行測定和分析，結(jié)果顯示，3種尖塘鱧蛋白質(zhì)含量均較高，且氨基酸組成合理，3種尖塘鱧肌肉均屬于優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)食品。另外3種尖塘鱧肌肉脂肪酸含量均比較豐富且富含不飽和脂肪酸。雜交尖塘鱧與其親本自交后代肌肉營養(yǎng)成分比較分析顯示，雜交尖塘鱧在粗蛋白含量、粗脂肪含量、必需氨基酸含量和不飽和脂肪酸含量上均略優(yōu)于親本自交后代，表明雜交尖塘鱧良種可作為良種進行推廣養(yǎng)殖。