楊侃侃

（遼寧省農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)校 121000）

隨著仔豬斷奶日齡的不斷提前，斷奶后仔豬的應(yīng)激現(xiàn)象越來(lái)越明顯，主要表現(xiàn)為采食量下降，生長(zhǎng)速度減慢，腹瀉率升高，成活率下降，另外對(duì)機(jī)體免疫功能、血液循環(huán)系統(tǒng)及內(nèi)分泌系統(tǒng)也會(huì)產(chǎn)生一定影響[1]。通過(guò)安全有效的免疫調(diào)節(jié)劑來(lái)緩解仔豬斷奶后的應(yīng)激現(xiàn)象將會(huì)非常有效地促進(jìn)養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。刺五加多糖(Acathopanas senticosus polysaccharides,ASPS) 作為一種生物活性多糖，主要是從刺五加的根莖及籽實(shí)中提取所得。ASPS 不但能提高機(jī)體免疫力及抗氧化能力，同時(shí)具有抗感染、抗腫瘤等作用[2]。近年來(lái)有關(guān)ASPS 的應(yīng)用在生物醫(yī)藥領(lǐng)域較廣泛，其在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用研究卻很少。因此，本試驗(yàn)旨在通過(guò)研究不同水平的ASPS 對(duì)早期斷奶仔豬血清酶及血清激素指標(biāo)的影響，為更好地將新型免疫調(diào)節(jié)劑應(yīng)用于仔豬養(yǎng)殖過(guò)程中提供指導(dǎo)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)以刺五加根為原料，經(jīng)過(guò)提取后所得的ASPS 為棕黃色粉末。采用苯酚-硫酸法測(cè)得多糖純度為87.5%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)化設(shè)計(jì)，選取80 頭平均體重為（7.65±0.86）kg 為（26±2）d 的“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交斷奶仔豬，隨機(jī)分為5 個(gè)處理，每個(gè)處理4 次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4 頭仔豬。其中處理1 為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧，其為參照NRC(1998) 仔豬營(yíng)養(yǎng)需要量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行配制的飼料，日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。處理2～5 組為試驗(yàn)組，分別將300、500、800、1000mg/kg 的ASPS 添加于基礎(chǔ)飼糧中。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)，單位：%）

粗蛋白質(zhì)、鈣、磷含量為實(shí)測(cè)值，其他營(yíng)養(yǎng)水平均為計(jì)算值。

1.3 飼養(yǎng)管理

仔豬采用地面飼養(yǎng)方式，自由采食和飲水，仔豬舍為半開(kāi)放式，通風(fēng)和采光良好，溫度、濕度適宜。按照豬場(chǎng)常規(guī)程序進(jìn)行消毒、免疫、驅(qū)蟲(chóng)。試驗(yàn)期為28d。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)及測(cè)定方法

1.4.1 血液樣品制備

試驗(yàn)第14 天從每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取1 頭仔豬，為每頭仔豬肌肉注射1mg/kg 雞卵清白蛋白（OVA）。試驗(yàn)第28 天，取第14天注射過(guò)OVA 的仔豬前腔靜脈采血5mL，用冷凍離心機(jī)離心10min，分離血清，放于-20℃冰箱凍存，用于測(cè)定血清皮質(zhì)醇水平。

試驗(yàn)第28 天從余下的3 個(gè)重復(fù)中每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取1 頭仔豬，共20 頭，對(duì)每頭仔豬進(jìn)行前腔靜脈采血10mL，離心后分離血清，置于-4℃和-20℃冰箱凍存，分別用于酶類(lèi)指標(biāo)和血清激素指標(biāo)的測(cè)定。

1.4.2 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.2.1 血清酶指標(biāo)測(cè)定

采用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒測(cè)定谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）活性、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）活性、堿性磷酸酶（AKP）活性，嚴(yán)格按照說(shuō)明進(jìn)行操作。

1.4.2.2 血清激素指標(biāo)測(cè)定

生長(zhǎng)激素（GH）、胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF-I）、甲狀腺素（T4）、皮質(zhì)醇（Cor）均采用豬的酶聯(lián)免疫吸附試劑盒(ELISA)測(cè)定。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)采用SPSS 17.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，再用LSD 法進(jìn)行多重比較，＜0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 ASPS 對(duì)斷奶仔豬血清酶的影響

由表2 可知，與對(duì)照組相比，各試驗(yàn)組血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均有所提高，其中處理3、4 組酶活性顯著高于對(duì)照組(＞0.05)，處理2、5 組酶活性與對(duì)照組差異不顯著(＜0.05)；各試驗(yàn)組谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性與對(duì)照組相比有升高趨勢(shì)，其中處理4組酶活性最高，但各組之間差異不顯著(＞0.05)；在堿性磷酸酶活性方面，處理2、3、4、5 組酶活性均顯著高于對(duì)照組(＜0.05)，其中處理3 組酶活性最高，與對(duì)照組相比顯著提高25.44% (＜0.05)。

表2 ASPS 對(duì)斷奶仔豬血清GOT、GPT 和AKP 的影響（單位：IU/L）

2.2 ASPS 對(duì)斷奶仔豬血清激素指標(biāo)的影響

由表3 可知，各試驗(yàn)組生長(zhǎng)激素水平與對(duì)照組相比均有所提高，處理2 組與對(duì)照組相比差異不顯著(＞0.05)，處理3、4、5 組生長(zhǎng)激素水平顯著高于對(duì)照組(＜0.05)；各試驗(yàn)組胰島素樣生長(zhǎng)因子水平均顯著高于對(duì)照組(＜0.05)，其中處理4 組胰島素樣生長(zhǎng)因子水平最高；各試驗(yàn)組甲狀腺素水平均高于對(duì)照組，處理2 組與對(duì)照組差異不顯著(＞0.05)，處理3、4、5組甲狀腺素水平顯著高于對(duì)照組(＜0.05)；各試驗(yàn)組皮質(zhì)醇水平與對(duì)照組相比均有所下降，處理2 組與對(duì)照組差異不顯著(＞0.05)，處理3、4、5 組皮質(zhì)醇水平顯著低于對(duì)照組(＜0.05)。

表3 ASPS 對(duì)斷奶仔豬部分血清激素指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 ASPS 對(duì)斷奶仔豬血清酶的影響

谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（GPT）是氨基酸參加轉(zhuǎn)氨基作用時(shí)最重要的酶。谷氨酸與丙酮酸之間的轉(zhuǎn)氨作用由GPT 催化，其中以肝臟中GPT 活力最大，GPT 活力可作為診斷肝細(xì)胞功能的指標(biāo)。谷氨酸與草酰乙酸轉(zhuǎn)變成α-酮戊二酸和天冬氨酸時(shí)由GOT 催化，其中以心臟中GOT 活力最大，GOT 活力可以作為心臟病變?cè)\斷的指標(biāo)。劉合軍等[3]研究發(fā)現(xiàn)，0.1%刺五加水提物可提高斷奶仔豬血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性，與本試驗(yàn)結(jié)果相一致。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，整個(gè)試驗(yàn)期ASPS 對(duì)斷奶仔豬血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性沒(méi)有產(chǎn)生顯著影響（＞0.05），說(shuō)明ASPS 對(duì)斷奶仔豬肝臟功能無(wú)不良影響；日糧中添加500mg/kg 與800mg/kg ASPS 組仔豬血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于對(duì)照組（＜0.05），說(shuō)明ASPS 能提高氨基酸的分解利用率。

血清堿性磷酸酶(AKP) 廣泛分布于肝臟、骨骼、腸、腎等組織經(jīng)肝臟向膽外排出的一種酶，AKP 作為一種非特異性磷酸單酯酶，其對(duì)機(jī)體骨骼發(fā)育、脂肪代謝及糖類(lèi)和蛋白質(zhì)的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程非常重要。Yablanski 指出，AKP 活性增強(qiáng)有利于仔豬日增重及生產(chǎn)性能提高[4]。燕富永[5]研究結(jié)果表明，刺五加提取物組血清AKP 水平高于對(duì)照組（＞0.05），這與動(dòng)物生長(zhǎng)速度有關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，添加ASPS 的各組AKP 活力顯著高于對(duì)照組，日糧中添加500mg/kg ASPS 組AKP 活力最高（＜0.05），這正好與上述研究結(jié)果相符合。

3.2 ASPS 對(duì)斷奶仔豬血清激素指標(biāo)的影響

生長(zhǎng)激素（GH）是腺垂體細(xì)胞分泌的一種蛋白質(zhì)，GH 處于生長(zhǎng)軸的中心環(huán)節(jié)，對(duì)機(jī)體蛋白質(zhì)沉積、骨骼生長(zhǎng)等具有促進(jìn)作用。胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF）包括IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ兩種，IGF-Ⅰ依賴于GH，可促進(jìn)體外培養(yǎng)的多種細(xì)胞增殖，對(duì)蛋白質(zhì)和DNA 合成均具有促進(jìn)作用。熊文中等[6]研究發(fā)現(xiàn)，用豬生長(zhǎng)激素處理的育肥豬，其日增重顯著增加（＜0.05）。燕富永等[7]試驗(yàn)研究表明，將刺五加提取物添加到仔豬日糧中，對(duì)下丘腦-垂體-腎上腺軸功能及與生長(zhǎng)相關(guān)的激素水平具有調(diào)節(jié)作用，與本試驗(yàn)結(jié)果相一致。李?lèi)?ài)菊[8]試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加刺五加多糖可提高斷奶仔豬的采食量、日增重。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，添加ASPS 后，仔豬血清GH 和IGF-Ⅰ水平均高于對(duì)照組，其中添加800mg/kg 組GH 和IGF-Ⅰ水平最高，說(shuō)明ASPS 能通過(guò)調(diào)節(jié)GH、IGF-Ⅰ水平來(lái)發(fā)揮其促生長(zhǎng)作用，提高仔豬生長(zhǎng)速度。

T4 的生理作用十分廣泛，生理劑量的T4 能增強(qiáng)腸道對(duì)半乳糖和葡萄糖的吸收，促進(jìn)肝糖原的合成與糖原異生；另外對(duì)脂肪分解也有一定的促進(jìn)作用，進(jìn)而減少脂肪儲(chǔ)存。T4 能通過(guò)刺激mRNA 的形成對(duì)蛋白質(zhì)及各種酶的生成起到促進(jìn)作用，尿素氮水平下降[9]?？梢?jiàn)T4 具有調(diào)節(jié)機(jī)體糖、蛋白質(zhì)和脂肪代謝的作用。另有報(bào)道稱(chēng)，T4 能促進(jìn)機(jī)體GH 和IGF-Ⅰ的分泌。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，仔豬日糧中添加ASPS 后血清T4 水平高于對(duì)照組（＜0.05），其中800mg/kg 組的T4 水平最高，說(shuō)明ASPS 對(duì)下丘腦-垂體-甲狀腺軸活性具有促進(jìn)作用，從而提高了機(jī)體基礎(chǔ)代謝。而且隨著血清T4 水平的升高，血清堿性磷酸酶活性也會(huì)隨之升高，這體現(xiàn)了T4 對(duì)機(jī)體的促生長(zhǎng)作用，尤其是促進(jìn)了骨骼的發(fā)育。

皮質(zhì)醇（Cor）是下丘腦-垂體-甲狀腺軸在應(yīng)激反應(yīng)里分泌的一種類(lèi)激素，屬于糖皮質(zhì)激素的一種，其水平可反映動(dòng)物遭受應(yīng)激程度。Founderburke 等研究了28 日齡斷奶仔豬受到應(yīng)激影響（主要包括溫度應(yīng)激、心理應(yīng)激、營(yíng)養(yǎng)應(yīng)激）后血清皮質(zhì)醇水平顯著升高[10]。張金枝在蛋雞熱應(yīng)激狀態(tài)下向飼料中添加刺五加水提物后的產(chǎn)蛋率和飼料轉(zhuǎn)化率均有所提高[11]。張一然等[12]研究認(rèn)為，刺五加多糖對(duì)免疫應(yīng)激仔豬的生長(zhǎng)抑制具有緩解作用，與本試驗(yàn)結(jié)果相一致。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，日糧中添加ASPS 使仔豬血清皮質(zhì)醇水平產(chǎn)生下降趨勢(shì)，其中500、800 和1000mg/kg ASPS 組能顯著降低仔豬血清皮質(zhì)醇水平，說(shuō)明ASPS 對(duì)仔豬斷奶后的應(yīng)激具有一定的緩解作用，有利于仔豬生長(zhǎng)發(fā)育。

4 結(jié)論

（1）ASPS 可提高斷奶仔豬血清中GOT、GPT 和AKP 活性，促進(jìn)仔豬胃腸對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，減弱營(yíng)養(yǎng)應(yīng)激。

（2）ASPS 可提高斷奶仔豬血清中GH、IGF-I 和T4 水平，降低血清皮質(zhì)醇水平，在促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)的同時(shí)能降低仔豬應(yīng)激反應(yīng)。

（3）綜合本試驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)，斷奶仔豬飼糧中ASPS 的最適宜添加量為800mg/kg。