張弘揚(yáng) 曹夢(mèng)圓 閆雪琪 陳明杰 陳杰 齊亞銀/石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 832099

豬瘟（CSF）是由豬瘟病毒（CSFV）引起的豬的一種急性或慢性、高熱性以及劇烈傳播性的動(dòng)物傳染病，被感染豬普遍存在高燒不退、厭食、精神沉郁或發(fā)紺等多種癥狀，發(fā)展到后期可導(dǎo)致死亡。豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）又稱(chēng)為豬藍(lán)耳病，是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）所引起的一種繁殖和呼吸系統(tǒng)的傳染病，以高熱稽留、厭食為主要特征，會(huì)造成母豬大量流產(chǎn)、配種率低，仔豬呼吸系統(tǒng)受損導(dǎo)致死亡率急劇升高。豬偽狂犬?。≒R）是由皰疹病毒的α-皰疹病毒亞科的偽狂犬病毒（PRV）引起的急性傳染病。仔豬感染該病毒后一般表現(xiàn)神經(jīng)癥狀，能繁母豬與公豬以繁殖障礙為主、中大豬則以呼吸道癥狀為主?？贵w檢測(cè)作為一種抗體水平監(jiān)測(cè)的重要手段，CSF、PRRS 抗體水平的檢測(cè)能反映豬場(chǎng)的免疫效果，PRV-gE 能了解豬偽狂犬病野毒感染情況，能夠讓養(yǎng)殖人員實(shí)時(shí)了解豬群現(xiàn)況，從而根據(jù)不同情況制定不同的免疫程序。

本試驗(yàn)采用ELSIA 法對(duì)北疆地區(qū)豬場(chǎng)CSFV、PRRSV、PRV 抗體水平進(jìn)行檢測(cè)與分析，了解北疆地區(qū)豬場(chǎng)CSFV、PRRSV 抗體水平和PRV-gE 感染情況，探討這3 種豬病的潛在風(fēng)險(xiǎn)，為合理制定豬場(chǎng)免疫程序和對(duì)傳染病防控提供參考依據(jù)。

1 材料

1.1 血樣的采集分別采集不同豬場(chǎng)不同階段豬的血液，記作A、B、C 場(chǎng)，共296 份血樣，A、B、C 三個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)均進(jìn)行過(guò)CSFV、PRRSV 的免疫，C 場(chǎng)額外進(jìn)行了PRV-gB 的免疫。采取血樣3mL，室溫靜置2～4h 后，取上清待檢。

1.2 主要試劑和儀器CSFV、PRRSV、PRV-gE 抗 體ELISA 檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自美國(guó) IDEXX 公司；小型臺(tái)式高速離心機(jī)，購(gòu)自德國(guó) Eppendorf 公司;酶標(biāo)儀，購(gòu)自美國(guó)BIORAD 公司。

2 方法

2.1 試驗(yàn)方法檢測(cè)前將待檢血清樣品和抗體檢測(cè)試劑盒恢復(fù)至室溫，每個(gè)檢測(cè)試劑盒設(shè)陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照各2 孔，CSFV、PRRSV 抗體和PRV-gE 感染抗體的檢測(cè)操作步驟按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，在酶標(biāo)儀上操作讀數(shù)，記錄結(jié)果并進(jìn)行分析。

2.2 抗體水平監(jiān)測(cè)及判定檢測(cè)采用ELISA 方法對(duì)不同場(chǎng)區(qū)的豬開(kāi)展CSFV、PRRSV、PRV-gE 抗體檢測(cè)，結(jié)合生產(chǎn)指標(biāo)業(yè)績(jī)情況，分析血清抗體阻斷率、陽(yáng)性率、離散度等指標(biāo)變化情況。具體采集樣品的結(jié)果如下表，參照各試劑盒的判定方法進(jìn)行陰、陽(yáng)性樣品的判定。

表1 不同豬場(chǎng)CSFV 的血清抗體檢測(cè)結(jié)果

表2 不同豬場(chǎng)PRRSV 的血清抗體檢測(cè)結(jié)果

表3 不同豬場(chǎng)PRV-gE 的血清抗體檢測(cè)結(jié)果

3 結(jié)果

3.1 CSFV 抗體檢測(cè)結(jié)果A、B 場(chǎng)育肥豬豬瘟抗體陽(yáng)性率均為100%，A 場(chǎng)仔豬和保育豬陽(yáng)性率在60%～80%之間，B 場(chǎng)在80%～90%之間，但保育豬離散度較高，為0.55。C場(chǎng)三個(gè)階段豬陽(yáng)性率稍低，在50%～ 70%之間，離散度高，在40%以上。

3.2 PRRSV 抗體檢測(cè)結(jié)果A 場(chǎng)PRRSV 抗體陽(yáng)性率較高，在90%以上；C 場(chǎng)稍差，在85%以上，但育肥豬較高，為96.61%。B 場(chǎng)陽(yáng)性率較低，在70%～80%之間，且保育豬離散度較大，為0.41。

3.3 PRV-gE 抗體檢測(cè)結(jié)果A 場(chǎng)仔豬及保育豬PRV-gE 抗體陽(yáng)性率低，在10%左右，育肥豬較高，為55.00%；B 場(chǎng)三個(gè)階段豬PRV-gE 抗體陽(yáng)性率均較高，在40%～50%之間，但離散度較大，三個(gè)階段均在0.8～0.9 之間；C 場(chǎng)進(jìn)行過(guò)PRV-gB 免疫后，PRV-gE 陽(yáng)性率在20%左右，比其他兩場(chǎng)穩(wěn)定，且不同階段陽(yáng)性率較為相似。

4 討論

試驗(yàn)表明，能做好豬瘟防控的養(yǎng)殖場(chǎng)，豬群血清抗體水平能穩(wěn)定在90%以上，同時(shí)能有較低的變異系數(shù)。對(duì)A、B、C 三場(chǎng)而言，在免疫了CSFV 疫苗后，A、B 兩場(chǎng)的抗體陽(yáng)性率和阻斷率相對(duì)較好，在70%以上，C 場(chǎng)陽(yáng)性率、阻斷率較低，同時(shí)離散度較大，說(shuō)明C 場(chǎng)CSFV 的免疫效果較差，且個(gè)體間抗體水平差異較大，導(dǎo)致豬群無(wú)法對(duì)疾病產(chǎn)生較好的免疫效果。同一場(chǎng)中育肥豬免疫效果最好，保育豬免疫效果最差。各場(chǎng)PRRSV 抗體水平效價(jià)及陽(yáng)性率均處于70%以上，但B 場(chǎng)陽(yáng)性率在70%～80%，比其他兩場(chǎng)略低，表明免疫效果稍差；且保育豬離散度較高，說(shuō)明此階段不同個(gè)體之間免疫效果差異較大。A 場(chǎng)育肥豬PRV-gE 抗體陽(yáng)性率為55%，說(shuō)明有一半以上的育肥豬已感染豬偽狂犬病，但仔豬及保育豬陽(yáng)性率較低。B 場(chǎng)三個(gè)階段的抗體陽(yáng)性率均在50%左右，且離散度在0.9 左右，說(shuō)明該場(chǎng)的豬有不同程度的感染，且個(gè)體間感染程度差異較大。C 場(chǎng)進(jìn)行豬偽狂犬病的免疫后，PRV-gE 抗體陽(yáng)性率較低，在20%左右，說(shuō)明還是有少部分豬感染偽狂犬病。

隨著生豬養(yǎng)殖的規(guī)模化，以及運(yùn)輸流程的增加，疾病的發(fā)生和傳染更加容易。目前在豬場(chǎng)中危害養(yǎng)豬生產(chǎn)的疾病主要分為病毒性細(xì)菌性，其中病毒性疾病更為常發(fā)。根據(jù)我國(guó)動(dòng)物疫病分類(lèi)，CSF、PRRS 為一類(lèi)動(dòng)物疫病，PRV 為二類(lèi)動(dòng)物疫病。感染這三種病后，豬只會(huì)出現(xiàn)體溫升高、呼吸困難、繁殖障礙等臨床癥狀，對(duì)養(yǎng)殖戶(hù)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)的豬注射免疫疫苗能有效防控絕大多數(shù)傳染病，同時(shí)對(duì)免疫效果進(jìn)行評(píng)估能夠幫助養(yǎng)殖戶(hù)了解豬群內(nèi)的免疫水平，并結(jié)合抗體檢測(cè)結(jié)果優(yōu)化場(chǎng)內(nèi)免疫程序，對(duì)于養(yǎng)殖場(chǎng)來(lái)說(shuō)具有重要的指導(dǎo)意義。根據(jù)本試驗(yàn)結(jié)果，注射疫苗能夠有效減少疾病的發(fā)生，如C 場(chǎng)在進(jìn)行偽狂犬病的免疫后，野毒感染就明顯低于A、B 場(chǎng)。但從離散度來(lái)看，不同個(gè)體之間的抗體水平存在差異，造成這種可能是由于疫苗在保存或運(yùn)輸途中條件不當(dāng)、免疫操作不當(dāng)?shù)?，?dǎo)致疫苗免疫失敗或變異系數(shù)大。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，A、B、C 場(chǎng)CSF、PRRS 免疫效果較好，A、B 場(chǎng)需增加PR 疫苗的接種，制訂科學(xué)的免疫程序。