陳亞勤

（中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第909醫(yī)院血液科 福建漳州 363000）

1 前言

在臨床危急重癥患者的治療中，輸血已成為關(guān)鍵且不可替代的治療舉措。然而，隨著輸血治療在臨床應(yīng)用中實踐的增加，其潛在的巨大風(fēng)險也備受業(yè)界關(guān)注。輸血不良反應(yīng)、輸血感染等不良情況的出現(xiàn)，會對患者的生命安全造成直接威脅，其影響不容忽視。

輸血相容性檢測是保證輸血安全的重要環(huán)節(jié)，能夠有效避免患者出現(xiàn)不良反應(yīng)、輸血感染等不良情況的發(fā)生，可以提高輸血的安全性。檢測內(nèi)容主要包括輸血型定型、交叉配血試驗、不規(guī)則抗體篩檢等。相關(guān)研究表明[1]，對于ABO型血、RHD型血的定型，臨床常用輸血相容性檢技術(shù)所檢測的結(jié)果幾乎接近零失誤，但對于IgM以及IgG性質(zhì)抗體的檢測，出現(xiàn)漏檢及誤檢的失誤情況相對較多，該問題是目前相關(guān)研究人員普遍關(guān)注的問題之一。因此，本文對臨床上常用的3種輸血相容性檢測技術(shù)：凝聚胺法、微柱凝聚法、試管抗球蛋白法進(jìn)行研究，并對3種檢測技術(shù)進(jìn)行比較，以期為臨床輸血相容性檢測的安全性提供參考。

2 資料與方法

2.1 一般資料

選取2019年3月—2020年7月在我院進(jìn)行輸血治療的患者80例，男性：42例，女性：38例；年齡范圍：18~65歲，平均年齡（32.76±4.72）歲；有妊娠史者25例，有輸血史者10例，短時間內(nèi)多次輸血者3例。供血標(biāo)本主要來源于中心血站無償獻(xiàn)血者80例，男性：41例，女性：39例；年齡范圍：18~65歲，平均年齡（32.68±4.73）歲；有妊娠史者20例，有輸血史者6例，均無短時間內(nèi)多次輸血。對所有病例基線資料進(jìn)行分析，顯示性別、年齡數(shù)據(jù)指標(biāo)的差異無顯著性（均為P>0.05），2組數(shù)據(jù)具有可比性。本次研究經(jīng)本院倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者及獻(xiàn)血者均簽署知情同意書。

2.2 方法

按照ABO、RHD血型定型試劑卡說明書的操作步驟將所有的標(biāo)本定型。對所有標(biāo)本均采用凝聚胺法、微柱凝聚法及試管抗球蛋白法3種輸血相容性檢測技術(shù)進(jìn)行檢測。

2.2.1 凝聚胺法

首先在受血者及供血者的血液標(biāo)本中加入適量生理鹽水溶液，將其調(diào)配成紅細(xì)胞懸液，濃度范圍為3%~5%；制作2份血標(biāo)本，每份劑量為1 ml；再準(zhǔn)備2支試管，標(biāo)記主管和次管；在主管中，取供血者的紅細(xì)胞懸液1 ml，再加入受血者的血清溶液2 ml；在次管中，取受血者的紅細(xì)胞懸液1ml及供血者的血清溶液2 ml，再向上述2管中加入6 ml低離子介質(zhì)液，混勻處理；靜置1 min后，再分別向2管中滴入2 ml聚凝胺液，混勻處理；靜置15 s后，3 000 r/min離心15 s；去除上清溶液，輕輕搖晃試管，觀察有無凝聚現(xiàn)象。如果無凝聚現(xiàn)象，需要重新進(jìn)行實驗，再向上述2只試管中加入重懸液2 ml，輕輕搖晃試管，觀察凝聚現(xiàn)象。

2.2.2 微柱凝聚法

對試劑卡進(jìn)行標(biāo)記，再將被檢者的血清進(jìn)行分離；取濃度為0.5%~0.8%的患者紅細(xì)胞，加入受血者的血清及供血者的紅細(xì)胞各50μl，再加入受血者的紅細(xì)胞及供血者的血漿溶液各50μl；將加樣后的試劑卡置于孵育器中進(jìn)行培養(yǎng)處理，溫度37℃，孵育時間10 min；1 800 r/min離心3 min；再以2 500 r/min離心3 min，觀察凝聚現(xiàn)象。

2.2.3 試管抗球蛋白法

使用抗人球蛋白檢測卡、抗人球蛋白試劑（長春博迅生物技術(shù)有限公司），基于《全國臨床檢驗操作規(guī)程（第四版）》中的相關(guān)規(guī)范和操作標(biāo)準(zhǔn)開展檢測。

2.3 觀察指標(biāo)

觀察3種檢測方法交叉配血實驗后的陽性檢出率，以及交叉配血實驗的敏感性（次側(cè)陽性率、主側(cè)陽性率及雙側(cè)性率）的結(jié)果。

2.4 指標(biāo)評價

相合：表示交叉配血無明顯凝集以及溶血的現(xiàn)象。血清不規(guī)則抗體檢測：陰性對照為細(xì)胞不凝聚；陰性結(jié)果判定：表示被檢測的血清溶液中無不規(guī)則的抗體物質(zhì)；陽性結(jié)果判定：表示被檢測的血清溶液中含有不規(guī)則的抗體物質(zhì)。主側(cè)陽性：供血者紅細(xì)胞與受血者血清配合試驗有凝集反應(yīng)；次側(cè)陽性：受血者紅細(xì)胞與供血者學(xué)血清配合試驗有凝集反應(yīng)；雙側(cè)陽性：主、次側(cè)交叉配血實驗均有凝集反應(yīng)。

2.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS26.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，計數(shù)資料的組間比較采用χ2檢驗，以%表示。計量資料的組間對比實施t檢驗，以（x±s）表示，P<0.05，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 3種方法交叉配血試驗結(jié)果陽性率比較

3種輸血相容性檢測方法對比，微柱凝集法陽性檢出率（76.25%）最高，其次為試管抗球蛋白法陽性檢出率為（70.00%），凝聚胺法陽性檢出率（53.50%）最低，由表1數(shù)據(jù)計算可知，組間兩兩對比的差異均顯著（P<0.05）。

表1 3種檢測方法交叉配血實驗結(jié)果

3.2 42例凝聚胺法叉配血試驗陽性中其他2種方法為陽性比例

42例凝聚胺法交叉配血試驗陽性中其他2種檢測方法均為陽性71.43%（30/42）；其中微柱凝集法陽性為90.48%（38/42），試管抗球蛋白法陽性為83.33%（35/42）。

3.3 3種交叉配血試驗方法的敏感性結(jié)果

研究結(jié)果顯示，總體來看，3種輸血相容性檢測方法對比，微柱凝集法的主側(cè)陽性檢出率、次側(cè)陽性檢出率、雙側(cè)陽性檢出率（23.75%、32.50%、20.00%）最高，其次為試管抗球蛋白法主側(cè)陽性檢出率、次側(cè)陽性檢出率、雙側(cè)陽性檢出率（22.50%、30.00%、17.50%），凝聚胺法主側(cè)陽性檢出率、次側(cè)陽性檢出率、雙側(cè)陽性檢出率（17.50%、25.00%、10.00%）最低，但組間兩兩對比的差異無顯著性（P>0.05）。見表2。

表2 3種交叉配血試驗方法的敏感性結(jié)果（%）

4 討論

輸血是常見醫(yī)療技術(shù)，在救治患者生命方面發(fā)揮著重要作用。隨著輸血治療在臨床應(yīng)用范圍的增加，輸血安全也成為了醫(yī)療安全工作的重要一環(huán)。2003年，WHO就指出，血液是我們?nèi)祟惖南∪辟Y源，無比的寶貴。無論是在它的獲取，保存還是輸注應(yīng)用上，臨床安全問題是需要投入研究的，因此，建立安全的輸血前程序?qū)τ谙∪辟Y源的有效利用是很有必要的[2]。值得注意的是，血漿的成分遠(yuǎn)比我們想象中的復(fù)雜，里面不僅有多種抗原系統(tǒng)，在血漿中還存在重各種他異性抗體，這會使在輸血的過程中極易引發(fā)各種不良癥狀。在此情況下，在輸血前開展相容性檢測，以確保輸血安全至關(guān)重要。目前，臨床上用于檢測輸血相容性的檢測方法主要有凝聚胺法、微柱凝聚法、試管抗球蛋白法等。其中凝聚胺法主要采用凝聚胺技術(shù)對血液進(jìn)行檢測的一種方法，其對于絕大多數(shù)血型系統(tǒng)具有較高的敏感度，檢測方法便捷且快速，標(biāo)本用量較少，可易于實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化，主要目的是用于診斷兩配對血型之間是否存在相互穩(wěn)定共存間的交叉配血，預(yù)防或者診斷血型不合而引起的溶血病。凝聚胺法具有方便，快捷的特點，在急診搶救中有優(yōu)勢[3-4]。該方法檢測中易于受到冷凝集素、肝素以及藥物等的影響，對Kell系統(tǒng)抗體易于出現(xiàn)漏檢的情況，檢測中應(yīng)注意。微柱凝聚法屬于一種凝膠分子篩以及血型血清原理的聯(lián)合技術(shù)。其作為一種免疫學(xué)檢測技術(shù)，主要通過凝膠過濾技術(shù)、離心技術(shù)以及抗原抗體反應(yīng)來實現(xiàn)檢測目的，其對受血者免疫性不規(guī)則抗體的靈敏度較高。該方法亦便于標(biāo)準(zhǔn)化，特異性高，重復(fù)性好，結(jié)果穩(wěn)定，并便于保存結(jié)果，但試劑成本相對較高。另因其操作復(fù)雜、費時，不適于急診輸血。試管抗球蛋白法是一種用于檢測紅細(xì)胞不完全抗體的方法，此檢驗方法的主要目的是檢查紅細(xì)胞表面的不完全抗體[5]。其屬于一種安全可靠的交叉配血方法，但是臨床應(yīng)用過程中檢測操作較為復(fù)雜，對于檢測操作人員的要求相對較高。

本次研究為了進(jìn)一步探討上述3種檢測方法用于輸血相容性中的檢測效果，以我院輸血治療的80例患者以及健康受試者80例作為研究對象，觀察陽性檢出率及對比敏感性。交叉配血是確定是否進(jìn)行輸血治療的重要依據(jù)，如果主管和次管血液相容以后尚未出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，即表明患者可以采用輸血治療，如果主管出現(xiàn)明顯的凝集現(xiàn)象，需要禁止進(jìn)行輸血治療，但是如果主管未發(fā)現(xiàn)凝聚現(xiàn)象，而次管出現(xiàn)凝聚現(xiàn)象，表明必要的情況下，可以進(jìn)行少量的輸血治療或者可以通過慢速輸血治療[6]近幾年不斷地有報道指出，血型抗原會因疾病減弱，抗原的減弱會增加ABO血型的錯誤定型的頻率，這使得交叉配血的困難在一定的基礎(chǔ)上有所升高。由此，采用合適的檢測方法用于輸血相容性檢測中具有極其重要的意義[7-10]。本次研究對中心血站80例無償獻(xiàn)血者的供血標(biāo)本用3種方法交叉配血試驗的陽性檢出率比較發(fā)現(xiàn)，微柱凝集法的陽性檢出率>試管抗球蛋白法的陽性檢出率>聚凝胺法的陽性檢出率；在42例凝聚胺法交叉配血試驗陽性中其他兩種檢測方法均為陽性（+）的實驗數(shù)據(jù)是71.43%（30/42）；其中試管抗球蛋白法陽性比例為83.33%（35/42），而微柱凝集法陽性比例為90.48%（38/42）。這一結(jié)果與之前交叉配血試驗實驗的陽性檢出率的結(jié)果是保持一致的[11-12]。

綜上所述，3種輸血相容性檢測方法各自均具有一定優(yōu)勢和不足之處。臨床上需要根據(jù)實際情況，有針對性的選取合適的方法檢測溶血相容性，尤其對于疑難交叉配血病例，可以考慮采用聯(lián)合篩檢的方式進(jìn)行檢測，進(jìn)一步提高臨床輸血有效性以及安全性，同時保證臨床緊急用血的需求。