柴文宇 李珍珍 李春年 于 晴

在復(fù)合樹脂修復(fù)牙體缺損時(shí)[1]，對于難以應(yīng)用橡皮障的病例，復(fù)合樹脂界面受到唾液污染是很難避免的，因此對如何妥善處理復(fù)合樹脂界面的唾液污染，提高復(fù)合樹脂粘接力的研究具有重要指導(dǎo)意義。本研究擬采用不同方式處理復(fù)合樹脂受到唾液污染的界面，通過比較復(fù)合樹脂再次粘接后，界面的微滲漏情況和復(fù)合樹脂間的拉伸強(qiáng)度，以期為提高臨床中受到唾液污染復(fù)合樹脂間的粘接力和存留時(shí)間尋找到好的解決方案。

資料和方法

1.材料與儀器：Beautifil Flow Plus F00（松風(fēng)，日本），掃描電子顯微鏡（HITACHI S-3500，日本），Single Bond Universal（3M ESPE，德國），35%磷酸凝膠（Heraeus公司，德國），冷熱循環(huán)機(jī)（天津泰斯特儀器有限公司），萬能實(shí)驗(yàn)機(jī)（深圳萬測試驗(yàn)設(shè)備有限公司）。

2.實(shí)驗(yàn)方法

（1）樹脂塊制作：制作流動樹脂塊100塊。制造成型樹脂塊的模具，取三塊大小一致塑料塊（10mm×10mm×30mm），將其中兩塊塑料塊按最長邊呈空間平行排列，間距為3mm，將兩塊平行塑料塊其中一端固定到另一塑料塊上，保持間距不變，固定完成后在兩平行塑料塊間填充蠟塊及樹脂塊。在模具內(nèi)放置流動樹脂，流動樹脂塊固化前，用硬塑料板封閉模具，光固化燈照射，最終取得體積為3mm×3mm×5mm樹脂塊。

（2）分組與處理：將樹脂塊隨機(jī)均分為5組，每組20塊。A組：樹脂塊界面不做處理；B組：樹脂界面被唾液污染30s，吹干；C組：樹脂界面被唾液污染30s，流動水沖洗，吹干；D組：樹脂界面被唾液污染30s，75%酒精擦拭，吹干；E組：樹脂界面被唾液污染30s，35%磷酸處理，吹干。每組隨機(jī)抽取14塊，A組直接進(jìn)行樹脂塊粘接（定為A1組）；B、C、D、E組涂布粘接劑后，再進(jìn)行樹脂塊粘接（定為B1組、C1組、D1組、E1組）；A、B、C、D、E組進(jìn)行電子顯微鏡觀察實(shí)驗(yàn)，A1、B1、C1、D1、E1組進(jìn)行微滲漏和微拉伸強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)。

（3）實(shí)驗(yàn)樣本制作：制作自凝樹脂塊模具，取三塊大小一致塑料塊（10mm×10mm×30mm），擺放方式同樹脂塊制作方法，間距為6mm。在制作完成自凝樹脂塊最小面中央制備長方體窩洞。用流動樹脂填充滿整個(gè)窩洞，去除溢出流動樹脂，備用。A1、B1、C1、D1、E1每組內(nèi)隨機(jī)選取8塊，將樹脂塊非處理端包埋入自凝樹脂塊內(nèi)。將A1、B1、C1、D1、E1組內(nèi)所有樹脂塊處理面與自凝樹脂窩洞內(nèi)流動樹脂接觸，光固化。最終得到一端自凝樹脂包埋的微滲漏實(shí)驗(yàn)樣本和兩端自凝樹脂塊包埋的微拉伸實(shí)驗(yàn)。

3.微滲漏實(shí)驗(yàn)：將A1、B1、C1、D1、E1組微滲漏實(shí)驗(yàn)樣本，進(jìn)行冷熱循環(huán)，每1次循環(huán)包括0℃～5℃冰水及55℃～60℃熱水，各30s，共500次。于樹脂粘接面邊緣1mm以外涂2層指甲油，晾干。室溫下置于1%亞甲藍(lán)溶液中24h。流水沖洗牙體表面的染料，剝落表面指甲油。用低速切片機(jī)沿樹脂粘接體長軸方向連續(xù)切2～3片，每片厚約0.3mm。在體式顯微鏡下僅觀察測量充填后染料滲透深度。每小組選取6塊試樣，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

4.掃描電鏡觀察：將A、B、C、D、E組樹脂塊經(jīng)真空干燥，噴金，掃描電鏡下觀察各組復(fù)合樹脂粘接界面的表面形態(tài)。

5.拉伸強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)：將A1、B1、C1、D1、E1組微拉伸實(shí)驗(yàn)樣本，通過力學(xué)拉伸實(shí)驗(yàn)觀察粘接界面斷裂需要的力大小，用電子萬能試驗(yàn)機(jī)測試各樣本的微拉伸強(qiáng)度，拉伸速度為1.0mm/min，傳感器量程1～200N，記錄斷裂時(shí)的最大載荷力并計(jì)算拉伸強(qiáng)度值：拉伸強(qiáng)度（MPa）＝樣本斷裂力值（N）/粘接面積（mm2）。如果在安裝或切片試件時(shí)發(fā)生自發(fā)的界面脫粘，粘結(jié)強(qiáng)度記錄為0MPa。每組8個(gè)樣本測試，最終合格結(jié)果每組取6個(gè)，共30塊合格樣本進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

6.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPSS 26.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)滿足正態(tài)分布及方差齊性，應(yīng)用單因素方差分析進(jìn)行檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1.微滲漏實(shí)驗(yàn)結(jié)果：根據(jù)單因素方差分析結(jié)果，A1組微滲漏深度最小，E1組與A1組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但均小于B1、C1、D1組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；B1、C1和D1組微滲漏深度依次減小，各組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 各組標(biāo)本微滲漏深度

2.掃描電子顯微鏡觀察結(jié)果

A組、E組的樹脂塊粘接界面可見明顯的裂隙和不規(guī)則陷窩，如圖1、5所示；而B、C、D組樹脂塊的表面相對光滑，表明水、空氣、唾液可能存留在樹脂層之間，如圖2～4所示。

圖1 A組樹脂塊表面形態(tài)（A：×200；B：×1000）

圖2 B組樹脂塊表面形態(tài)（A：×200；B：×1000）

圖3 C組樹脂塊表面形態(tài)（A：×200；B：×1000）

圖4 D組樹脂塊表面形態(tài)（A：×200；B：×1000）

圖5 E組樹脂塊表面形態(tài)（A：×200；B：×1000）

3.微拉伸強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)結(jié)果：根據(jù)單因素方差分析結(jié)果，A1組拉伸強(qiáng)度稍高于E1組，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但E1組拉伸強(qiáng)度均高于B1、C1、D1組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。B1、C1、D1組拉伸強(qiáng)度依次高，各組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 各組標(biāo)本微拉伸強(qiáng)度

討 論

在復(fù)合樹脂充填的臨床操作中，由于隔濕困難，經(jīng)常出現(xiàn)復(fù)合樹脂分層固化過程中被唾液污染的情況。如果是牙體表面被污染，只需重新酸蝕處理即可，不影響后續(xù)治療，但是如果復(fù)合樹脂表面被唾液污染，則會影響其表面的厭氧層，唾液中的黏蛋白會影響復(fù)合樹脂的粘接強(qiáng)度。一般臨床中會采用直接吹干涂復(fù)合樹脂粘接劑、三用槍沖洗吹干涂復(fù)合樹脂粘接劑、酒精擦拭后涂復(fù)合樹脂粘接劑、酸蝕劑處理吹干涂復(fù)合樹脂粘接劑這幾種方法處理后，再進(jìn)行復(fù)合樹脂的充填，但是這幾種方法是否可行，這是本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及進(jìn)行的初衷。

近年來，隨著納米無機(jī)填料加入，新一代直接充填型和大體積充填型流動復(fù)合樹脂出現(xiàn)，它們具有優(yōu)良的物理機(jī)械性能，并且可操作性更強(qiáng)，在修復(fù)后牙Ⅱ類洞鄰面壁和非齲性頸部缺損等方面應(yīng)用廣泛，故本實(shí)驗(yàn)選擇其中代表Beautifil Flow Plus F00作為實(shí)驗(yàn)材料。

人口腔中天然唾液是由99.4%水及0.6%其它無機(jī)復(fù)合物、蛋白質(zhì)類等有機(jī)復(fù)合物組成。有研究認(rèn)為，唾液中糖蛋白成分影響牙本質(zhì)表面與粘結(jié)劑的粘結(jié)效果[2，3]。因此在流動復(fù)合樹脂修復(fù)過程中，一旦復(fù)合樹脂界面受到唾液污染，應(yīng)及時(shí)處理粘接界面黏附的唾液蛋白，最大程度恢復(fù)復(fù)合樹脂間粘接強(qiáng)度，減小微滲漏[4]。

磷酸處理是牙釉質(zhì)粘接術(shù)的關(guān)鍵步驟，通過酸蝕可以去除牙齒表面唾液中的沉淀和蛋白質(zhì)，以獲得更好的牙釉質(zhì)粘接效果[5]。有研究表明，在經(jīng)過酸蝕的牙本質(zhì)界面，受唾液污染后，通過再酸蝕可使全酸蝕粘結(jié)獲得較高的粘結(jié)強(qiáng)度，可能與酸蝕劑能去除復(fù)合樹脂表面污染的蛋白質(zhì)有關(guān)[3，6]。粘結(jié)劑也會使復(fù)合樹脂具有更好的表面潤濕性和滲透性[7]。本研究中應(yīng)用磷酸酸蝕去除復(fù)合樹脂表面的唾液蛋白質(zhì)，不涉及到牙本質(zhì)小管變化的問題，因此在結(jié)果中能夠提高唾液污染復(fù)合樹脂界面粘接強(qiáng)度。

在掃描電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，未受污染復(fù)合樹脂界面顯現(xiàn)出許多凹坑、不規(guī)則裂隙；復(fù)合樹脂被唾液污染后，復(fù)合樹脂界面表現(xiàn)為光滑的表面形態(tài)，這可能是復(fù)合樹脂界面覆蓋了一層唾液蛋白膜的原因，唾液污染復(fù)合樹脂界面經(jīng)過35%磷酸處理后，表面的不規(guī)則裂隙重新顯現(xiàn)出來。Sigurdur等[8]的研究表明唾液接觸到復(fù)合材料，即使唾液停留很短時(shí)間或用水沖洗干凈，唾液膜也會沉積在復(fù)合材料上，會降低下一層的復(fù)合樹脂的粘結(jié)強(qiáng)度[9]，也會對復(fù)合樹脂粘接產(chǎn)生影響。為了保證復(fù)合樹脂間的粘接強(qiáng)度和減小微滲漏，及時(shí)清除唾液污染就顯得尤為重要。

微滲漏是評價(jià)充填質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，反映了充填材料與牙齒之間的密合程度。本研究采用的體外冷熱循環(huán)實(shí)驗(yàn)?zāi)軌虼篌w模擬口腔內(nèi)的環(huán)境，用于檢驗(yàn)各種修復(fù)材料的臨床實(shí)用性。染料滲入法是檢查微滲漏最常用的方法[10～12]，該方法具有較高敏感性；本研究選擇滲透速度較快的1.0%亞甲基藍(lán)溶液[13]，能在短時(shí)間內(nèi)達(dá)到預(yù)想的微滲漏效果。在體視顯微鏡下觀察復(fù)合樹脂間微滲漏深度情況，比較各組微滲漏深度的改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示35%磷酸和自酸蝕粘接劑處理唾液污染的復(fù)合樹脂粘接界面后，最大程度接近了未受污染的微滲漏深度。

微拉伸強(qiáng)度指標(biāo)可受多種因素影響，如樣本的幾何形態(tài)，粘接面積大小以及制備過程等。本研究中用35%磷酸和粘接劑處理唾液污染的粘接界面后，粘接強(qiáng)度增強(qiáng)，能降低唾液污染對復(fù)合樹脂間粘接的影響，達(dá)到與對照組相似的拉伸強(qiáng)度，而75%乙醇擦拭并不能降低唾液污染的作用[14，15]。

總之，通過本研究發(fā)現(xiàn)，唾液污染會明顯降低復(fù)合復(fù)合樹脂間的粘接強(qiáng)度，經(jīng)35%磷酸酸蝕和粘接系統(tǒng)處理后，微滲漏和粘接強(qiáng)度均能明顯改善；35%磷酸酸蝕、粘接系統(tǒng)應(yīng)用的處理方法基本能消除唾液污染對于復(fù)合樹脂間粘接的影響，單純吹干、流動水沖洗、75%乙醇擦拭不能消除唾液污染的影響。