孫婷婷，郭 凡，伊爾夏提·地里夏提，賽亞爾·斯迪克

（1.伊犁師范大學(xué) 化學(xué)與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，新疆 伊犁 835000；2.伊犁師范大學(xué) 化學(xué)與環(huán)境科學(xué)學(xué)院 新疆普通高等學(xué)校天然產(chǎn)物化學(xué)與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆 伊犁 835000）

沙棘為胡頹子科植物，是一種雌雄異株的落葉性灌木或小喬木。新疆光熱資源豐富，沙棘果及葉子的營養(yǎng)物質(zhì)含量較高[1-4]。沙棘耐寒冷、耐干旱，適應(yīng)性強(qiáng)，可以在鹽堿化土地上生存，因此被廣泛用于水土保持。中國是沙棘資源最豐富的國家，沙棘面積占世界沙棘總面積的95%[5]。我國沙棘的故鄉(xiāng)是新疆，新疆地區(qū)沙棘總產(chǎn)量在我國的占比超過1/2。伊犁沙棘葉子小，植株高3～4 m，枝條和軀干生有鋒利的刺，屬于胡頹子科沙棘，在新疆天山南北都有分布。沙棘的根、莖、葉、花、果，特別是沙棘果實(shí)，含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)和生物活性物質(zhì)。新疆沙棘不僅是營養(yǎng)豐富的食品，還是治療心臟病、高血壓等疾病的良藥，健胃消食、活血散瘀，其葉片、果肉和種子含有豐富的黃酮類成分，具有止咳平喘、抗腫瘤等功效[6-11]。

伊犁的小檗系小檗科小檗屬植物，是中亞地區(qū)特有的集藥用、食用、生態(tài)、觀賞價(jià)值于一體的多年生帶刺落葉灌木，具有抗逆性強(qiáng)、抗寒、抗旱、耐修剪、耐鹽堿的特點(diǎn)[12-14]。研究結(jié)果表明，小檗屬植物含多種小檗堿類、酚酸類、黃酮類和有機(jī)酸類化合物，具有抗腫瘤、抗氧化、降血壓、改善記憶和抑菌等藥理作用[15-18]。小檗屬植物三顆針為我國藥典收錄藥材[19]。目前，國內(nèi)外對小檗屬植物的研究主要集中于根莖中的小檗堿類成分，對其他部位的研究相對較少。

黃銅是人體必需營養(yǎng)素，具有抗癌、抗氧化的作用且直接源于天然植物。黃酮類化合物幾乎存在于沙棘和小檗的所有部位[20-22]。為合理開發(fā)沙棘和小檗資源，提高資源的附加值、促進(jìn)資源的深度加工利用，本實(shí)驗(yàn)采用分光光度法對新疆伊犁河谷野生沙棘和小檗中總黃酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行了比較研究。

1 材料和儀器

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)樣品是采自新疆伊犁河谷的野生沙棘和小檗果實(shí)，新鮮采集，自然晾干至恒重，待測。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品購自上海金穗生物科技有限公司，氫氧化鈉、無水乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁等試劑均為分析純。

1.2 儀器

紫外-可見分光光度計(jì)（UⅤ-2550，日本島津）。

2 總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)測定方法與結(jié)果

2.1 樣品處理

沙棘和小檗果經(jīng)粉碎后分別過80目和100目的篩子，細(xì)粉于烘箱中60 ℃干燥4 h待用。

2.2 對照品儲(chǔ)備液的制備

準(zhǔn)確稱取0.030 4 g蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶解轉(zhuǎn)入100.0 mL容量瓶，用95%乙醇定容至刻度線，搖勻，得0.300 0 mg/mL蘆丁對照品溶液。分別準(zhǔn)確取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL蘆丁對照品溶液置于10.0 mL容量瓶中，加0.3 mL 5%亞硝酸鈉溶液，搖勻，放置6 min；加0.3 mL 10.000 0%硝酸鋁溶液，搖勻，放置6 min；添加4.0 mL 4%氫氧化鈉溶液以及95%乙醇定容至刻度，搖勻，放置12 min；在450～600 nm波長內(nèi)測定吸光度，確定510 nm處是最大吸收波長并測得吸光度A。以蘆丁對照品溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程：Y=0.065+0.003 52X，R=0.998 86。其中，Y為吸光度，X為黃酮質(zhì)量濃度，單位為“mg/mL”，在0.015 0～0.150 0 mg/mL線性關(guān)系良好。

測定小檗時(shí)，分別準(zhǔn)確取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL蘆丁對照品溶液置于10.0 mL容量瓶中，其他同上?；貧w方程：Y=0.008 1+12.203 94X，R=0.999 18，在0.015 2～0.076 0 mg/mL線性關(guān)系良好。

2.3 樣品溶液的制備

分別稱取沙棘和小檗樣品5.000 0 g，加入100.0 mL乙醇浸泡24 h，控溫85 ℃，水浴加熱3 h、加熱回流5 h，趁熱過濾，分別加入100.0 mL無水乙醇溶解待測。

2.4 總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)測定

分別取沙棘和小檗樣品溶液1.0 mL和3.0 mL加入10.0 mL比色管，按與標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的方法顯色測定。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出沙棘和小檗樣品總黃酮平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別約為1.24%和0.36%。

2.5 加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)

分別準(zhǔn)確取0.2 mL沙棘標(biāo)準(zhǔn)溶液和0.5 mL樣品溶液置于10.0 mL比色管中，取0.5 mL小檗標(biāo)準(zhǔn)溶液和3.0 mL樣品溶液置于10.0 mL比色管中，按與標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的方法顯色測定，測得沙棘和小檗平均回收率分別為97.540 0%、98.500 0%。

3 結(jié)語

黃酮類化合物是中草藥的重要有效成分，在含有黃酮類成分的中草藥及其制劑生產(chǎn)中控制質(zhì)量和制定藥品標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，多以黃酮類成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)采用紫外-可見分光光度法測定伊犁河谷沙棘和小檗中總黃酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，方法簡便、快速、準(zhǔn)確率高。沙棘總黃酮平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.235 9 mg/g，加樣回收率為97.540 0%，RSD為1.560 0%。沙棘和小檗果實(shí)含有黃酮類化合物，且總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高，其降壓的藥理作用很有可能與此有關(guān)。由此可見，新疆沙棘和小檗有較高的營養(yǎng)保健價(jià)值和藥用價(jià)值，具有一定的開發(fā)利用前景和優(yōu)勢。