莊雨龍，王洪亮，張洪濤

（黑龍江省農(nóng)墾科學(xué)院畜軟獸醫(yī)研究所 150038）

犢牛腹瀉是養(yǎng)牛場常見的一種消化系統(tǒng)疾病，主要危害30日齡下的犢牛，全年都會(huì)發(fā)生，多表現(xiàn)為暴發(fā)性腹瀉，病程短、病死率高。引起犢牛腹瀉的病因可以分為非傳染性因素和傳染性因素。非傳染因素主要與犢牛自身免疫力、飼養(yǎng)管理及營養(yǎng)因素等有關(guān)，傳染性因素主要包括細(xì)菌感染、病毒感染和寄生蟲感染等。常見的能夠引發(fā)犢牛腹瀉的細(xì)菌性病原微生物有大腸桿菌、沙門氏菌、魏氏梭菌等，寄生蟲主要為隱孢子蟲，病毒性病原微生物包括牛病毒性腹瀉-黏膜病毒、牛冠狀病毒、牛輪狀病毒等。有研究表明，出生14d內(nèi)的犢牛腹瀉的發(fā)病率約為15%，死亡率為8%左右，且大腸桿菌引發(fā)的犢牛腹瀉造成的死亡病例占總死亡病例數(shù)的73%[1]。因此，在明確導(dǎo)致犢牛腹瀉的病原微生物的前提下建立綜合防控措施格外重要。

1 發(fā)病情況

2022年7月～8月，綏化肇東市某一規(guī)模肉牛養(yǎng)殖場有正在哺乳期的犢牛120頭，其中60頭犢牛出現(xiàn)不同程度的腹瀉，隨著病情逐漸嚴(yán)重，有3頭犢牛相繼死亡。該養(yǎng)殖場的犢牛腹瀉并發(fā)病率較高，對(duì)犢牛的生長發(fā)育形成了較大的阻礙，造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。

2 臨床癥狀

犢牛發(fā)病初期拉出惡臭、綠色樣糞便，糞便污染尾巴、會(huì)陰部。后期癥狀表現(xiàn)為明顯的水樣腹瀉，呼吸與心跳加快，食欲廢絕，糞內(nèi)含有大量的黏液和血液。體溫升高至37℃以上，精神不振，吸吮反應(yīng)降低或消失，進(jìn)行性脫水，12～48h 內(nèi)出現(xiàn)肌肉無力，全身狀態(tài)下降，持續(xù)性腹瀉導(dǎo)致脫水和電解質(zhì)缺乏，體重明顯降低，腹部向內(nèi)凹陷，并伴有明顯的疼痛，常見回頭顧腹、后肢踢腹等。發(fā)病較為嚴(yán)重的犢牛出現(xiàn)肛門失禁，無法自主控制排便活動(dòng)。

剖檢發(fā)現(xiàn)，患病犢牛的胃內(nèi)有凝血塊和泡沫，伴有難聞的酸臭氣味，腸道中有少量血塊和氣泡，腸道呈卡他性、出血性炎癥變化，腸道內(nèi)容物為紅褐色，真胃、瘤胃的黏膜嚴(yán)重充血，部分黏膜脫落，小腸漿膜表面有針尖大小至米粒大小的出血點(diǎn)或出血斑，空腸、回腸黏膜出血、壞死、脫落，呈壞死性炎癥，盲腸呈透明狀，高度擴(kuò)張。腸系膜和心臟冠狀溝處的脂肪呈膠凍狀，心臟內(nèi)膜、外膜有大小不同的出血點(diǎn)、出血斑。肝臟、淋巴結(jié)有明顯腫脹，且伴隨一定程度的出血。

由于犢牛腹瀉的發(fā)病原因較為復(fù)雜，各種病原體感染導(dǎo)致的腹瀉僅根據(jù)臨床癥狀無法區(qū)分，采集3頭死亡犢牛的腸內(nèi)容物和臟器，立即送實(shí)驗(yàn)室化驗(yàn)。

3 診斷

將采集的病料用無菌環(huán)進(jìn)行抹片、脾臟等臟器進(jìn)行涂片，經(jīng)干燥、火焰固定后，革蘭氏染色鏡檢，油鏡下（10×100 倍）可見，兩端呈鈍圓形的短桿菌，成對(duì)或單個(gè)存在，無芽孢，無莢膜，革蘭氏陰性（G-），符合大腸桿菌特征。

經(jīng)細(xì)菌培養(yǎng)后，將細(xì)菌分別劃線接種于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18～24h，觀察細(xì)菌的生長情況、菌落特征等培養(yǎng)特性，可見普通營養(yǎng)瓊脂平板上菌落呈現(xiàn)邊緣整齊，半圓形半透明狀，表面光滑，直徑在1.5～2mm之間，呈灰白色，帶有特殊的糞便樣臭味；伊紅美藍(lán)瓊脂上菌落呈深紫色，反射出綠色并帶有金屬光澤，直徑約為 0.8～1mm；麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上菌落呈粉紅色。

最后進(jìn)行生化試驗(yàn)，用接種針分別挑取分離培養(yǎng)的細(xì)菌，接種于葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖等微量生化發(fā)酵管中，在37℃的溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)2～3d，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該細(xì)菌在葡萄糖、麥芽糖、甘露醇發(fā)酵管內(nèi)呈陽性，乳糖、蔗糖為陰性；將純培養(yǎng)物接種于蛋白胨水中，37℃下培養(yǎng)2～3d，加入吲哚試劑觀察到陽性反應(yīng)；將純培養(yǎng)物接種于葡萄糖蛋白胨水中，37℃下培養(yǎng)2～3d，分別加入MR和VP指示劑，發(fā)現(xiàn)MR試驗(yàn)為陽性，VP試驗(yàn)為陰性；將純培養(yǎng)物接種在枸櫞酸鹽培養(yǎng)基上，37℃下培養(yǎng)18～24h，結(jié)果為陰性。生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合大腸桿菌的培養(yǎng)特性，因此，判定此次犢牛腹瀉為大腸桿菌感染引起。

4 治療

根據(jù)犢牛的臨床表現(xiàn)和診斷結(jié)果，確診為犢牛大腸桿菌感染，對(duì)分離得到的菌株用藥敏紙片擴(kuò)散法（K-B）進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，結(jié)果表明大觀霉素抑菌環(huán)直徑為18.2±0.7mm、頭孢哌酮抑菌環(huán)直徑為12.7±0.2mm、蒽諾沙星抑菌環(huán)直徑為16.5±0.3mm、萬古霉素抑菌環(huán)直徑為13±0.9mm、氨芐西林抑菌環(huán)直徑為7.5±0.7mm、阿莫西林抑菌環(huán)直徑為3.0±0.5mm，證明分離病原菌株對(duì)大觀霉素、頭孢哌酮、蒽諾沙星和萬古霉素較敏感，對(duì)氨芐西林和阿莫西林有耐藥性。結(jié)合藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇適宜的抗生素進(jìn)行抗菌消炎，防止繼發(fā)感染。選用含量大觀霉素2g（200萬IU）、林可霉素1g，同時(shí)接種梭菌滅活疫苗進(jìn)行協(xié)同預(yù)防治療，批號(hào)：202216（哈藥生物），母牛產(chǎn)前15～20d接種，犢牛初生接種，按說明書參考劑量肌肉注射，連續(xù)用藥3～5d。針對(duì)腹瀉嚴(yán)重，有血樣糞便的犢牛，進(jìn)行中藥灌服止瀉散（白頭翁、黃連、黃柏、秦皮），連續(xù)灌服3d。由于患病犢牛均有一定程度的脫水，因此在進(jìn)行上述治療的同時(shí)使用0.9%的氯化鈉溶液進(jìn)行補(bǔ)液，劑量為10～15mL/kg，經(jīng)過持續(xù)治療，第4d大多數(shù)犢牛逐漸恢復(fù)正常，預(yù)后良好，說明該方案適合綏化肇東地區(qū)犢牛腹瀉病例的治療，且效果顯著。

值得注意的是，由于抗生素藥物使用劑量的不斷加大和耐藥基因的擴(kuò)散、傳播，大腸桿菌的耐藥性也越來越常見，多重耐藥性和耐藥率也在不斷提高。在劉伯承等人研究大腸桿菌導(dǎo)致犢牛腹瀉的病原藥敏試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)其分離得到的astA毒力基因大腸桿菌對(duì)紅霉素、慶大霉素、復(fù)方新諾明、四環(huán)素、頭孢唑林、氟苯尼考、氨芐西林、阿奇霉素、青霉素以及氯霉素的敏感率為0，耐藥率100%[2]，這與我們的大腸桿菌耐藥性試驗(yàn)結(jié)果相差較大。這證明不同大腸桿菌菌株的耐藥性有顯著差異，同時(shí)也說明了大腸桿菌的耐藥性已經(jīng)稱為了養(yǎng)殖環(huán)節(jié)中較為突出的問題，各個(gè)養(yǎng)殖場都應(yīng)當(dāng)盡量減少抗生素的使用，預(yù)防和治療疾病的過程中盡可能選擇中草藥制劑等抗生素替代品，在確需使用抗生素時(shí)，應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照說明書的要求或在執(zhí)業(yè)獸醫(yī)的指導(dǎo)下用藥。

5 預(yù)防措施

犢牛腹瀉病的預(yù)防應(yīng)當(dāng)從兩方面著手，在預(yù)防非傳染性因素導(dǎo)致的犢牛腹瀉時(shí)要注重母牛圍產(chǎn)期的飼養(yǎng)管理和減少應(yīng)激反應(yīng)等；而在預(yù)防傳染性因素導(dǎo)致的犢牛腹瀉時(shí)要注意養(yǎng)殖環(huán)境衛(wèi)生、增強(qiáng)犢牛的免疫功能并注重生物安全。

5.1 母牛圍產(chǎn)期的飼養(yǎng)管理

母牛的營養(yǎng)水平與犢牛的健康息息相關(guān)，當(dāng)母牛日糧營養(yǎng)不均衡或不充足時(shí)會(huì)增加犢牛各類疾病的發(fā)病率和死亡率，特別是產(chǎn)前三個(gè)月內(nèi)，胎兒生長速度較快，需要更全面、充足的營養(yǎng)，此時(shí)如果飼料攝入量不足或微量元素缺乏時(shí)會(huì)導(dǎo)致犢牛的生長發(fā)育受阻，免疫功能較弱。例如，當(dāng)妊娠期母牛日糧中維生素D的補(bǔ)充量不足時(shí)，會(huì)導(dǎo)致新生犢牛出現(xiàn)異食的現(xiàn)象，犢牛會(huì)舔舐自身或其他犢牛的被毛、墊草、沙子等，這些異物進(jìn)入到犢牛的消化系統(tǒng)中無法被正常排出，而新生犢牛的前胃功能尚不完善，無法進(jìn)行反芻，食入的異物會(huì)沉積在瘤胃和網(wǎng)胃的底部，異物刺激瘤胃、網(wǎng)胃黏膜，引發(fā)出血、潰瘍，而后常常繼發(fā)大腸桿菌或沙門氏菌的感染，導(dǎo)致犢牛腹瀉。有研究表明，初乳質(zhì)量和數(shù)量與體況評(píng)分有著密切的關(guān)系，體況評(píng)分接近于6的多胎母牛是比較理想的（體況評(píng)分以1～10分為范圍），體況評(píng)分越低的母牛意味著營養(yǎng)水平越低，胎兒的生長發(fā)育也會(huì)有較大影響，通常產(chǎn)出的犢牛生長發(fā)育緩慢、生產(chǎn)性能較差、對(duì)于各種疾病更加易感。除了注重日糧營養(yǎng)均衡、充足外，還應(yīng)當(dāng)盡量避免和減少難產(chǎn)的發(fā)生，不能一味的追求高營養(yǎng)，使母牛的膘情過肥，容易增加難產(chǎn)的幾率。當(dāng)母牛發(fā)生難產(chǎn)時(shí)，犢牛通常會(huì)因長時(shí)間擠壓或缺氧導(dǎo)致頭部、舌頭充血、腫脹，這會(huì)影響犢牛出生后的采食量，與健康的犢牛相比，經(jīng)歷難產(chǎn)的犢牛對(duì)初乳中的免疫球蛋白吸收率會(huì)低一些，而初乳是犢牛獲取免疫力的重要方式，當(dāng)免疫球蛋白吸收率較低時(shí)，被動(dòng)免疫較弱，更容易被病原微生物侵襲而引發(fā)疾病。

5.2 減少應(yīng)激反應(yīng)

氣候的突然變化、長途運(yùn)輸、突然更換飼料、斷奶等均會(huì)對(duì)犢牛產(chǎn)生一定的應(yīng)激，也會(huì)增加犢牛對(duì)腹瀉病的易感性。這是由于新生犢牛剛剛從母體的環(huán)境中脫離出來，外界的環(huán)境變化較大，且犢牛的體溫調(diào)節(jié)功能不完全，當(dāng)外界環(huán)境溫度不在適宜范圍內(nèi)時(shí)，很容易導(dǎo)致犢牛的體溫過高或過低，從而損害免疫系統(tǒng)。對(duì)母牛而言，應(yīng)激反應(yīng)會(huì)影響機(jī)體的代謝功能，也有可能會(huì)誘發(fā)難產(chǎn)。

5.3 注意養(yǎng)殖環(huán)境衛(wèi)生

圈舍定期進(jìn)行清掃和消毒，及時(shí)更換墊草，做好通風(fēng)，保持室內(nèi)的空氣清新，保證犢牛圈舍的干凈、干燥和舒適，這樣才能確保犢牛的身體和避免病菌的繁殖。此外，在母牛分娩時(shí)應(yīng)當(dāng)對(duì)母牛外陰甚至后軀部進(jìn)行消毒，接產(chǎn)人員的手臂和接產(chǎn)工具應(yīng)全面消毒，避免在接產(chǎn)、分娩過程中造成感染。新生犢牛在進(jìn)行斷臍時(shí)，斷口應(yīng)與腹部保持5cm左右的距離，剪斷后應(yīng)將犢牛臍帶的斷斷置于10%的碘酊內(nèi)浸泡1min。犢牛舍在使用前要用2%的火堿進(jìn)行沖刷消毒，使用過程中要及時(shí)的更換墊草。

5.4 增強(qiáng)犢牛免疫力

抗體無法通過牛的胎盤被動(dòng)傳遞給胎兒，因此新生犢牛無法在母體中獲取任何抗體，出生后環(huán)境變得復(fù)雜，有較多的病原微生物，為了使?fàn)倥１M快建立自身免疫力，應(yīng)當(dāng)及時(shí)灌服足量初乳。初乳的主要功能是通過被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)抗體和細(xì)胞介導(dǎo)的免疫來促進(jìn)犢牛的免疫功能，較為理想的是在犢牛出生后0.5～1h內(nèi)飼喂出生體重10%的初乳，體重大于30kg的犢牛應(yīng)飼喂4kg初乳，間隔8h后飼喂第二次初乳，飼喂量為2kg，初乳內(nèi)的抗體、T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、補(bǔ)體、乳鐵蛋白、轉(zhuǎn)化生長因子、干擾素和其他可溶性因子均能夠提高犢牛的免疫力。在飼喂初乳的同時(shí)也應(yīng)當(dāng)對(duì)初乳質(zhì)量進(jìn)行評(píng)定，使用初乳折光儀進(jìn)行分析，當(dāng)百利糖度達(dá)到22%以上時(shí)為優(yōu)質(zhì)初乳，處于18%～22%之間為合格初乳，低于18%的為不合格初乳[3]。對(duì)于優(yōu)質(zhì)初乳除飼喂外應(yīng)當(dāng)進(jìn)行冷凍保存，當(dāng)有體弱犢牛或初生重較輕的犢牛時(shí)，應(yīng)當(dāng)將冷凍的優(yōu)質(zhì)初乳進(jìn)行解凍后升溫至39℃左右灌服給犢牛；合格初乳可裝入初乳灌喂袋內(nèi)后用巴氏消毒機(jī)進(jìn)行消毒，即60℃下消毒60min，當(dāng)溫度逐步將至39℃左右時(shí)灌服給犢牛。有條件的養(yǎng)殖場還可以對(duì)2～3日齡的犢牛進(jìn)行血清總蛋白的檢測，當(dāng)血清總蛋白大于5.5g/dL時(shí)證明犢牛的免疫功能處于較好的狀態(tài)，另外進(jìn)行血清免疫球蛋白G（IgG）含量檢測，當(dāng)血清IgG含量大于1000mg/dL時(shí)為合格，如果血清IgG含量低于500mg/dL，則證明犢牛極易受到病原微生物的侵襲，容易產(chǎn)生多種疾病。

當(dāng)養(yǎng)殖場已經(jīng)被特定病原體感染時(shí)（如大腸桿菌、產(chǎn)其莢膜梭菌等），可對(duì)妊娠母牛進(jìn)行免疫以增加初乳中抗把病原體特異性抗體的濃度。

5.5 注重生物安全

在做到以上幾點(diǎn)的基礎(chǔ)上，還應(yīng)當(dāng)控制養(yǎng)殖密度，過度擁擠的養(yǎng)殖環(huán)境容易增加感染的發(fā)生概率，因此應(yīng)當(dāng)有計(jì)劃的進(jìn)行繁育，可以有效地減少新生犢牛與病原微生物的接觸，根據(jù)產(chǎn)犢日期將犢牛進(jìn)行合理的分組，始終保持養(yǎng)殖場內(nèi)有一塊干凈的場地或無病原微生物的區(qū)域。有學(xué)者認(rèn)為沙丘產(chǎn)犢體系（SCS）在防控多種病原體引起的犢牛腹瀉方面有顯著效果[4]，這一體系是根據(jù)產(chǎn)犢的時(shí)間順序?qū)倥＿M(jìn)行分組，從而維持產(chǎn)犢區(qū)的清潔，避免新生犢牛過早的接觸到病原微生物。在實(shí)踐中，可在犢牛出生后，將其從生產(chǎn)舍移入單獨(dú)的犢牛舍或犢牛島內(nèi)，避免病原微生物的污染，同時(shí)人為飼喂初乳，避免犢牛直接通過乳頭采食，這樣能夠杜絕母牛攜帶病原引發(fā)犢牛疾病，同時(shí)也能夠抑制牛病毒性腹瀉病、牛白血病、牛副結(jié)核病等通過乳汁傳播的疾病的發(fā)生，從而保證犢牛的健康。

6 討論與小結(jié)

良好的飼喂管理是牧場可持續(xù)發(fā)展的重要前提，養(yǎng)殖場（戶）在母牛妊娠至犢牛出欄的過程中需要重視各環(huán)節(jié)中存在的致病因素，采取相應(yīng)措施保障母牛健康生產(chǎn)，提高犢牛抵抗力，降低腹瀉的發(fā)生率。大腸桿菌病作為犢牛養(yǎng)殖環(huán)節(jié)中較為常見的一種流行性疾病，各個(gè)養(yǎng)殖場（戶）應(yīng)當(dāng)通過預(yù)防+治療的模式對(duì)其進(jìn)行控制，當(dāng)發(fā)生因大腸桿菌感染而導(dǎo)致的犢牛腹瀉時(shí)，應(yīng)當(dāng)本著抑菌消炎、積極補(bǔ)液的原則，同時(shí)結(jié)合重要治療的方式，緩解腹瀉癥狀，達(dá)到抗菌效果，提升犢牛腹瀉并的治愈率。