葉建生，袁圣，蔣蓉，成建平，趙林果，戴建華

（1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇 泰州225300 2.無錫三智生物科技有限公司，江蘇 無錫214145 3.南京林業(yè)大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院，江蘇 南京 210037）

中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）肉質(zhì)鮮美，經(jīng)濟(jì)價值較高，養(yǎng)殖效益較好，是我國長江沿線主要養(yǎng)殖淡水蟹類，近年來養(yǎng)殖面積不斷增加，目前已經(jīng)達(dá)到666.7 hm2多[1-3]。蟹苗質(zhì)量直接關(guān)系到中華絨螯蟹成蟹養(yǎng)殖的效益。近兩年，在中華絨螯蟹的蟹苗養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中，尤其2020 年江蘇沿海的如東、射陽地區(qū)的中華絨螯蟹育苗場減產(chǎn)嚴(yán)重，蟹苗培育階段的死亡率很高[4-7]，有的育苗場減產(chǎn)近50%。在當(dāng)前中華絨螯蟹的蟹苗培育階段，由于培育親本規(guī)格不同[8]、培育餌料的不同[9，10]、培育水體鈣鎂含量差異[11]、培育過程中藥物濫用[12]、培育水體消毒不徹底[13]、培育水體微生態(tài)環(huán)境差異以及細(xì)菌和病毒性病原的感染[14]等因素給蟹苗培育帶來了不同程度的經(jīng)濟(jì)損失。

銀杏葉的發(fā)酵提取物主要含有黃酮、內(nèi)酯、多糖等生理活性成分，有清熱解毒、降低血脂、增強(qiáng)免疫等功效。目前國內(nèi)外很多研究結(jié)果均證實，銀杏葉的發(fā)酵提取物對養(yǎng)殖動物的免疫系統(tǒng)具有免疫刺激作用，能增強(qiáng)動物抵抗各種疾病的能力[15～19]。

本研究將銀杏葉的發(fā)酵提取物定量添加在餌料中，連續(xù)投喂中華絨螯蟹蟹苗，比較不同添加量的銀杏葉發(fā)酵物對中華絨螯蟹蟹苗的成活率、生長等指標(biāo)的影響，旨在為有效提高中華絨螯蟹的蟹苗培育成活率和生長提供參考。

1 材料與方法

1.1 飼養(yǎng)條件

試驗中華絨螯蟹蟹苗購自江蘇如東某蟹苗繁殖場，體質(zhì)量約為2 400 只/kg。飼養(yǎng)試驗在江蘇沙之緣農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司河蟹養(yǎng)殖基地6 個條件相同、面積約為144 m2、水深1.2 m 的墊有少量泥土的水泥池中進(jìn)行。水泥池中搭配種植少量水花生。每個飼養(yǎng)池中放養(yǎng)蟹苗2.5 kg，平均為6 000 只，保持飼養(yǎng)池的微流水，定時充氧，定期加注新水，每天吸污、換水約1/5。試驗期間水溫保持在21～28℃。每天投喂4 次，上午和下午各投喂2 次，以吃飽不?；蚵允橐恕?/p>

以江蘇某飼料公司生產(chǎn)的蟹苗專用飼料作為本試驗的基礎(chǔ)餌料，將銀杏葉發(fā)酵提取物與飼料按一定比例加少量水合成團(tuán)狀后撒在池邊。各試驗組餌料中除了添加銀杏葉發(fā)酵提取物的添加劑量不同外，其他營養(yǎng)成分完全相同。中華絨螯蟹蟹苗入池1 d 后即開始投喂實驗。

1.2 銀杏葉發(fā)酵物

本試驗所用銀杏葉發(fā)酵提取物由南京林業(yè)大學(xué)趙林果教授研制提供，采用黑曲霉和產(chǎn)朊假絲酵母菌共同發(fā)酵銀杏葉，有效成分見表1。

表1 銀杏葉發(fā)酵提取物有效成分Tab.1 Active compositions of extract of fermented ginkgo Ginkgo biloba leaf

1.3 方法

6 個中華絨螯蟹蟹苗飼養(yǎng)組的餌料中銀杏葉發(fā)酵提取物的添加量分別為：0.0 g/kg（對照組）、10.0 g/kg（Ⅰ組）、50.0 g/kg（Ⅱ組）、100.0 g/kg（Ⅲ組）、150.0 g/kg（Ⅳ組）和200.0 g/kg（Ⅴ組）。連續(xù)飼養(yǎng)60 d。飼養(yǎng)前1 周配制餌料，將銀杏葉發(fā)酵提取物分別添加到蟹苗飼料中，并經(jīng)過充分?jǐn)嚢?，存放在陰涼處保存?/p>

試驗結(jié)束時，將各試驗池中的中華絨螯蟹全部撈起計數(shù)并分別稱重，比較各試驗和對照組蟹苗的生長速度，按下式計算初始平均體質(zhì)量、群體增長量、個體平均增重、終末平均體質(zhì)量和成活率。

初始平均體質(zhì)量（g）=初始總體質(zhì)量（kg）/放養(yǎng)量（只）×1000；

群體增長量（kg）=終末總質(zhì)量（kg）-初始總質(zhì)量（kg）；

終末平均體質(zhì)量（g）=終末總體質(zhì)量（kg）/收獲量（只）×1000；

個體平均增重（g）=終末平均體質(zhì)量（g）-初始平均體質(zhì)量（g）；

成活率（%）=（收獲量/放養(yǎng)量）×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加銀杏葉發(fā)酵提取物對中華絨螯蟹蟹苗成活率的影響

由表2 可知，在飼料中添加銀杏葉發(fā)酵提取物可以提高中華絨螯蟹蟹苗的成活率。5 個試驗組中華絨螯蟹蟹苗的成活率均不同程度地高于對照組，且隨著銀杏葉發(fā)酵提取物添加劑量的增加而升高（除第Ⅱ組外）。與對照組相比，試驗組的成活率分別提高了0.6%～5.37%，第Ⅴ組成活率最高，達(dá)到74.72%。

表2 添加銀杏葉發(fā)酵提取物對中華絨螯蟹蟹苗成活率的影響Tab.2 The effect of extract of fermented ginkgo Ginkgo biloba leaf on survival rate of megalopa and juveniles of Chinese mitten handed crab

2.2 添加銀杏葉發(fā)酵提取物對中華絨螯蟹蟹苗生長速度的影響

由表4 可知，試驗組和對照組蟹苗的終末總體質(zhì)量呈快速增加趨勢，5 個試驗組的終末總體質(zhì)量都高于對照組，以第Ⅴ組增重最大，達(dá)12.74 kg，其他依次為第Ⅳ組、第Ⅲ組、第Ⅱ組、第Ⅰ組；5 個試驗組的群體增長量都高于對照組，依次為第Ⅴ組、第Ⅳ組、第Ⅲ組、第Ⅱ組、第Ⅰ組，第Ⅴ組增加最大，達(dá)10.24 kg。

個體生長速度表明（表4），5 個試驗組的終末平均體質(zhì)量都高于對照組，以第Ⅱ組（2.93 g）最高，與其他組差異不顯著（P＞0.05）；5 個試驗組的個體平均增重都高于對照組，以第Ⅱ組（2.51 g）最高，與其他組差異不顯著（P＞0.05）。

表3 添加銀杏葉發(fā)酵提取物對中華絨螯蟹蟹苗的群體生長速度的影響Tab.3 The effect of extract of fermented ginkgo Ginkgo biloba leaf on population growth rate of megalopa and juveniles of Chinese mitten handed crab

表4 添加銀杏葉發(fā)酵提取物對中華絨螯蟹蟹苗的個體生長速度的影響Tab.4 The effect of extract of fermented ginkgo Ginkgo biloba leaf on individual weight gain of megalopa and juveniles of Chinese mitten handed crab

3 討論

3.1 銀杏葉發(fā)酵提取物的適宜添加量對中華絨螯蟹生長的影響

銀杏葉中富含黃酮類化合物和銀杏內(nèi)酯等生理活性成分，而適當(dāng)劑量下的植物黃酮等利于人和動物。但是，至今基本尚未見到關(guān)于將銀杏葉發(fā)酵提取物用于中華絨螯蟹養(yǎng)殖生產(chǎn)的研究報道。根據(jù)臨床經(jīng)驗數(shù)據(jù)，銀杏葉標(biāo)準(zhǔn)提取物推薦添加劑量為40～60 mg/d[20]。曹福亮等[21]在肉仔雞的飼料中分別添加了5 g/kg、10 g/kg 和15 g/kg 的銀杏葉生物飼料添加劑。結(jié)果表明：添加銀杏葉生物飼料添加劑明顯促進(jìn)肉仔雞增重，其中10 g/kg 組添加量效果最好。Zhang 等[22]、Cao 等[23]的研究表明，在肉雞的日糧中添加5.0 g/kg 的銀杏葉發(fā)酵物顯著促進(jìn)了其生產(chǎn)性能。

本試驗中，當(dāng)飼料中銀杏葉發(fā)酵提取物的添加量達(dá)到100.0 g/kg 時，中華絨螯蟹蟹苗的成活率、終末總體質(zhì)量、群體增長量均明顯高于10.0 g/kg 和50.0 g/kg 的添加量。這可能與蟹苗的攝食和生活習(xí)性等有關(guān)，還可能與餌料投入到水體中有少量溶失有關(guān)，因而可能表現(xiàn)出與其他動物直接喂飼結(jié)果有所差異。

3.2 銀杏葉發(fā)酵提取物對中華絨螯蟹蟹苗成活率的影響

中華絨螯蟹好斗、爭食、領(lǐng)地等生活習(xí)性影響其成活率，但放養(yǎng)密度對其影響最大。在養(yǎng)殖生產(chǎn)中，中華絨螯蟹放養(yǎng)密度過高會加劇個體間對環(huán)境和食物的競爭；加大投喂量還會惡化養(yǎng)殖水體環(huán)境，影響其免疫力和抗病力及成活率[24,25]。

本試驗結(jié)果表明，在中華絨螯蟹的餌料中添加銀杏葉發(fā)酵提取物能提高蟹苗的成活率。這主要是依靠增強(qiáng)免疫力的增強(qiáng)和對環(huán)境的應(yīng)激能力。本試驗中華絨螯蟹蟹苗個體較小，未測定蟹苗的免疫力和對環(huán)境的應(yīng)激能力，但根據(jù)5 個試驗組蟹苗的成活率均高于對照組，可以推測在餌料中添加銀杏葉發(fā)酵提取物能增強(qiáng)中華絨螯蟹的免疫力和對環(huán)境應(yīng)激能力。

3.3 銀杏葉發(fā)酵提取物對中華絨螯蟹蟹苗生長速度的影響

中華絨螯蟹的生長特性往往表現(xiàn)為間斷的，即每蛻殼1 次，體長和體質(zhì)量都會呈現(xiàn)跳躍性增長[26]。在良好環(huán)境條件時，人工養(yǎng)殖提供了優(yōu)質(zhì)的餌料供應(yīng)和優(yōu)越的環(huán)境調(diào)控[27]，人工養(yǎng)殖的河蟹生長速度遠(yuǎn)高于自然環(huán)境中的河蟹。

本試驗5 個試驗組中華絨螯蟹蟹苗的群體增長量和終末總體質(zhì)量均明顯高于對照組，說明銀杏葉發(fā)酵提取物對中華絨螯蟹蟹苗具有顯著促生長的作用。但是，比較5 個試驗組的終末平均體質(zhì)量、個體平均增重即可發(fā)現(xiàn)，中華絨螯蟹蟹苗的個體生長速度與餌料中銀杏葉發(fā)酵提取物添加量并非正相關(guān)，而是與飼養(yǎng)池中的實際蟹苗數(shù)量有關(guān)。各個飼養(yǎng)池中蟹苗的成活率不同，成活率越高的飼養(yǎng)池中蟹苗數(shù)量就越多，而蟹苗數(shù)量越多飼養(yǎng)池中個體生長速度不明顯。這可能是蟹苗數(shù)量多導(dǎo)致餌料和活動空間不夠充足，間接影響了蟹苗的生長速度。

3.4 結(jié)論

在中華絨螯蟹養(yǎng)殖生產(chǎn)中，蟹苗培育關(guān)乎到扣蟹培育成活率和效益；蟹苗質(zhì)量也會影響到后期的成蟹養(yǎng)殖生產(chǎn)，如成蟹養(yǎng)殖前期第一次蛻殼期間蟹苗死亡和中后期的河蟹“水癟子病”都與蟹苗質(zhì)量有一定關(guān)系。

在中華絨螯蟹飼料中添加100.0～200.0 g/kg 銀杏葉發(fā)酵提取物有助于提高蟹苗成活率和群體生長速度，提升養(yǎng)成產(chǎn)量和規(guī)格。