劉曉柳，鐘 燦，謝 景，侯鳳飛，戴甲木，張水寒，金 劍*

·綜 述·

藥食用菌新品種保護(hù)及DUS測(cè)試指南研制現(xiàn)狀與展望

劉曉柳1, 2，鐘 燦1, 2，謝 景1, 2，侯鳳飛3，戴甲木4，張水寒1, 2，金 劍1, 2*

1. 湖南中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，湖南 長(zhǎng)沙 410208 2. 湖南省中醫(yī)藥研究院中藥研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410013 3. 湖南補(bǔ)天藥業(yè)股份有限公司，湖南 長(zhǎng)沙 410017 4. 湖南省茯苓工程技術(shù)研究中心，湖南 長(zhǎng)沙 410017

藥食用菌是具有多種生物學(xué)功能的重要生物類群。近年來，我國(guó)越來越重視藥食用菌的研究和利用，藥食用菌產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展，新品種保護(hù)以及品種權(quán)等問題成為影響產(chǎn)業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵因素。介紹了我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部頒布的13個(gè)藥食用菌類DUS［特異性（distinctness）、一致性（uniformity）和穩(wěn)定性（stability）］測(cè)試指南，對(duì)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部藥食用菌DUS測(cè)試指南的范圍、頒布時(shí)間、主要內(nèi)容、提交材料要求和測(cè)試性狀等進(jìn)行了解讀和分析，概述了藥食用菌DUS測(cè)試指南研制及測(cè)試技術(shù)研究現(xiàn)狀，論述了藥食用菌新品種的發(fā)展歷程及申請(qǐng)授權(quán)情況，對(duì)藥食用菌新品種保護(hù)和DUS測(cè)試技術(shù)發(fā)展提出建議。

藥食用菌；DNA分子標(biāo)記技術(shù)；特異性；一致性；穩(wěn)定性；品種權(quán)

新品種保護(hù)是新品種種質(zhì)資源、種植、加工等一系列產(chǎn)業(yè)化過程的重要基礎(chǔ)[1]。特異性（distinctness）、一致性（uniformity）和穩(wěn)定性（stability），簡(jiǎn)稱DUS，是新品種評(píng)價(jià)的關(guān)鍵指標(biāo)[2]。特異性是指1個(gè)品種有1個(gè)以上性狀明顯區(qū)別于已知品種；一致性是指1個(gè)品種的特性除可預(yù)期的自然變異外，群體內(nèi)個(gè)體間相關(guān)的特征或特性表現(xiàn)一致；穩(wěn)定性是指1個(gè)品種經(jīng)過反復(fù)繁殖后或在特定繁殖周期結(jié)束時(shí)，其主要性狀保持不變[3]。新品種測(cè)試簡(jiǎn)稱DUS測(cè)試，是指根據(jù)相關(guān)測(cè)試技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，通過田間種植或室內(nèi)分析實(shí)驗(yàn)，對(duì)品種進(jìn)行特異性、一致性和穩(wěn)定性評(píng)價(jià)的過程，是新修訂的《種子法》中確定的品種管理的基本技術(shù)依據(jù)[4]，是我國(guó)實(shí)行新品種保護(hù)制度的核心技術(shù)要件[5]。隨著新品種保護(hù)工作的進(jìn)步與發(fā)展，新品種DUS測(cè)試工作的規(guī)范化與標(biāo)準(zhǔn)化變得越來越重要。

我國(guó)1999年4月23日正式加入國(guó)際植物新品種保護(hù)聯(lián)盟（International Union for the Protection of New Varieties of Plants，UPOV）成為UPOV第39位成員國(guó)，當(dāng)日即開始受理國(guó)內(nèi)、外植物新品種權(quán)的申請(qǐng)[6]。2021年4月23日是我國(guó)加入U(xiǎn)POV的第22個(gè)周年紀(jì)念日。22年來，我國(guó)植物新品種保護(hù)事業(yè)從無到有，各級(jí)農(nóng)業(yè)部門與其事業(yè)單位創(chuàng)造性地開展工作，使植物新品種保護(hù)事業(yè)取得了長(zhǎng)足發(fā)展，呈現(xiàn)出蓬勃向上發(fā)展的可喜局面。隨著品種保護(hù)專門機(jī)構(gòu)逐步完善，農(nóng)業(yè)部于2013年12月27日發(fā)布的《主要農(nóng)作物品種審定辦法》規(guī)定審定品種必須具備DUS[7]。2000年農(nóng)業(yè)部植物新品種測(cè)試中心成立，并在全國(guó)10大生態(tài)區(qū)設(shè)立首批14個(gè)測(cè)試分中心，每年承擔(dān)測(cè)試任務(wù)總量都在3000件以上，有效支撐了品種權(quán)的授權(quán)工作。目前，已在全國(guó)建立1個(gè)DUS測(cè)試總中心、27個(gè)分中心和6個(gè)專業(yè)測(cè)試站[8]；發(fā)布了200多種農(nóng)作物新品種DUS測(cè)試指南和18種農(nóng)作物新品種DNA指紋圖譜鑒定技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，制定了13個(gè)藥食用菌DUS測(cè)試指南，建成了包含16 000多個(gè)品種的表型、圖像和DNA指紋圖譜的品種數(shù)據(jù)庫[9]，為品種保護(hù)及品種管理提供強(qiáng)有力的技術(shù)支撐與保障[10]。

藥食用菌多為菌物中形成大型子實(shí)體的一類真菌，以擔(dān)子菌為主，少數(shù)為子囊菌[11]。我國(guó)現(xiàn)有食用菌936種[12]、藥用菌473種[13]，藥食兩用250余種[14]。隨著人們對(duì)藥食用菌健康保健功能理解和對(duì)于藥食用菌中有效成分研究的深入，藥食用菌作為一種健康食品日益受到人們的重視[15]。本文對(duì)農(nóng)業(yè)部科技發(fā)展中心藥食用菌類DUS測(cè)試指南進(jìn)行綜述和分析，為我國(guó)研制藥食用菌DUS測(cè)試指南相關(guān)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)提供參考，以促進(jìn)藥食用菌新品種保護(hù)和產(chǎn)業(yè)發(fā)展。

1 藥食用菌新品種保護(hù)現(xiàn)狀

1.1 藥食用菌新品種保護(hù)發(fā)展歷程

目前我國(guó)沒有專門針對(duì)藥食用菌新品種保護(hù)的制度，藥食用菌新品種納入植物新品種保護(hù)管理之中，其保護(hù)發(fā)展歷程見圖1。植物新品種是世界貿(mào)易組織承認(rèn)的知識(shí)產(chǎn)權(quán)形式之一，屬于國(guó)際知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)條約保護(hù)范圍[16]。1961年12月基于《保護(hù)植物新品種國(guó)際公約》在巴黎的簽訂，UPOV正式成立，UPOV成立至今有74個(gè)成員國(guó)[17]。通過各個(gè)國(guó)家對(duì)UPOV公約的實(shí)踐，以及生物技術(shù)的進(jìn)步，同時(shí)為了加大對(duì)品種權(quán)的保護(hù)，于1972、1978、1991年對(duì)其進(jìn)行了修改，相較于UPOV公約1978年文本，1991年文本更大程度保護(hù)育種者權(quán)益[18]。1997年3月20日國(guó)務(wù)院正式發(fā)布《植物新品種保護(hù)條例》，標(biāo)志著我國(guó)在植物新品種培育領(lǐng)域的知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)制度正式建立[19]。多年來，與國(guó)際通行的植物品種保護(hù)制度完全不同，我國(guó)的主要作物品種實(shí)行的是審定和認(rèn)定制度[20]。前者注重評(píng)價(jià)的是品種的經(jīng)濟(jì)性狀，后者注重鑒定的是知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬。1997年《新品種保護(hù)條例》頒布實(shí)施以來，有效調(diào)動(dòng)了育種者的積極性，促進(jìn)了優(yōu)良品種的創(chuàng)新和推廣應(yīng)用[21]。

圖1 藥食用菌新品種保護(hù)的發(fā)展歷程

1.2 藥食用菌現(xiàn)有保護(hù)新品種

隨著植物新品種保護(hù)工作的推進(jìn)，截至2019年12月底，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部共受理植物新品種申請(qǐng)33 803件，授予品種權(quán)13 959件[22]。從2017年至今，我國(guó)植物新品種權(quán)申請(qǐng)量連續(xù)位居世界第1位，已成為知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)大國(guó)[23]。就已發(fā)布的11批農(nóng)業(yè)植物品種保護(hù)名錄，受保護(hù)的植物種類達(dá)191個(gè)屬（種），其中藥食用真菌15個(gè)種屬，占總的農(nóng)業(yè)保護(hù)品種的5%[24]，已獲批的品種有白靈側(cè)耳中農(nóng)1號(hào)，羊肚菌的川羊肚菌1號(hào)、川羊肚菌3號(hào)、川羊肚菌4號(hào)、川羊肚菌5號(hào)、川羊肚菌6號(hào)，香菇的HOKSY8號(hào)菌、滬香F2、滬香F3、申香215，黑木耳的黑尊3號(hào)、黑尊4號(hào)、黑尊5號(hào)以及靈芝的仙芝2號(hào)、禪芝、峨芝（表1）。余下幾個(gè)種屬基本是在2018年開始進(jìn)行新品種保護(hù)申請(qǐng)，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部未見有品種權(quán)授權(quán)公告。藥食用菌品種保護(hù)開始的較其他物種晚，白靈側(cè)耳于2005年作為第1個(gè)藥食用菌被納入植物新品種第6批保護(hù)名錄，僅占第1～6批受保護(hù)品種種屬總量的1.6%；往后10年第10批品種保護(hù)名錄公布，增加了5個(gè)藥食用菌種屬，占比增加至4.3%；2019年第11批增加了9個(gè)種屬，占比增加至7.8%。同時(shí)UPOV數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示，截至2021年6月12日，UPOV制定并頒布了335個(gè)屬和種的植物新品種DUS測(cè)試指南以及菌類新品種DUS測(cè)試指南3個(gè)，為雙孢蘑菇、香菇[25]、平菇，占比不到1%[26]。綜合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和UPOV數(shù)據(jù)來看，雖然藥食用菌的保護(hù)種屬數(shù)量總體上呈遞增趨勢(shì)，但縱觀所有受保護(hù)植物新品種，受保護(hù)藥食用菌數(shù)量少，品種少；從2005—2016年、2016—2019年的數(shù)據(jù)空白顯示藥食用菌受保護(hù)品種增長(zhǎng)間斷且緩慢。

表1 截至2021年受保護(hù)藥食用菌品種

Table 1 Protected medicinal and edible fungi varieties until 2021

序號(hào)品種名基原物種分類公開時(shí)間已獲批品種 1白靈側(cè)耳白靈側(cè)耳Pleurotus eryngii var. tuoliensisC. J. Mou擔(dān)子菌門側(cè)耳科2005年第6批中農(nóng)1號(hào) 2羊肚菌 梯棱羊肚菌Morchella importuna M. Kuo, O’Donnell & T. J. Volk和六妹羊肚菌M. sextelata M. Kuo子囊菌亞門2016年第10批川羊肚菌1號(hào)、川羊肚菌3號(hào)、川羊肚菌4號(hào)、川羊肚菌5號(hào)、川羊肚菌6號(hào) 3香菇香菇Lentinula edodes Berk. Pegler擔(dān)子菌門光茸菌科2016年第10批HOKSY8號(hào)菌、滬香F2、滬香F3、申香215 4黑木耳黑木耳Auricularia auricula-judae Bull. Quel.擔(dān)子菌門木耳科2016年第10批黑尊3號(hào)、黑尊4號(hào)、黑尊5號(hào) 5靈芝赤芝Ganoderma lucidumLeyss. ex Fr. Karst.或紫芝G. sinense Zhao, Xu et Zhang真菌門多孔菌科2016年第10批仙芝2號(hào)、禪芝、峨芝 6雙孢蘑菇雙孢蘑菇Agaricus bisporus J. E. Lange Imbach 擔(dān)子菌門蘑菇科2016年第10批— 7金針菇金針菇Flammulina velutipes Curtis, Singer擔(dān)子菌門口蘑科2019年第11批— 8蛹蟲草蛹蟲草Cordyceps militaris L. Fr.子囊菌門麥角菌科2019年第11批— 9長(zhǎng)根菇長(zhǎng)根菇Hymenopellis raphanipes Berk. Pegler & T. W. K. Young擔(dān)子菌門膨瑚菌科2019年第11批— 10猴頭菌 猴頭菇Hericium erinaceus Bull. Pers擔(dān)子菌門2019年第11批— 11毛木耳毛木耳Auricularia polytricha Mont. Sacc擔(dān)子菌亞門木耳科2019年第11批— 12蟬花蟬花Isaria cicadae Miq. 子囊菌門蟲草科2019年第11批— 13真姬菇 真姬菇Hypsizygus marmoreus Peck H. E. Bigelow擔(dān)子菌門離褶傘科2019年第11批— 14平菇 平菇P. ostreatus Jacq. P. Kumm擔(dān)子菌門側(cè)耳科2019年第11批— 15秀珍菇 秀珍菇P. geesteranus Jandialik擔(dān)子菌門2019年第11批—

“—”表示沒有已獲批品種

“—” indicates that there are no approved varieties

2 藥食用菌DUS測(cè)試指南研究進(jìn)展

2.1 發(fā)布現(xiàn)狀

DUS測(cè)試指南既是判定測(cè)試品種是否屬于新品種，提供植物新品種保護(hù)判定的可靠依據(jù)，也是指導(dǎo)測(cè)試機(jī)構(gòu)開展DUS測(cè)試工作的技術(shù)手冊(cè)[27]。農(nóng)業(yè)農(nóng)村科技發(fā)展中心已經(jīng)公布209個(gè)植物屬或種的DUS測(cè)試指南，菌類15種。由圖2可看出花卉所占比例最大，占全部DUS測(cè)試指南的29%；其次是果樹和蔬菜，分別占20%、17%；然后是大田作物（15%）、藥用植物（8%）和牧草（5%）；菌類占比（6%）僅高于牧草。相比于其他植物新品種保護(hù)，藥食用菌保護(hù)力度較低，保護(hù)進(jìn)度較慢[28]。

圖2 藥食用菌DUS測(cè)試指南分布

2.2 內(nèi)容組成

DUS測(cè)試指南是指導(dǎo)DUS測(cè)試開展工作的行動(dòng)指南。我國(guó)DUS測(cè)試主要有官方測(cè)試、現(xiàn)場(chǎng)考察和育種人自主或委托測(cè)試等方式[29]。目前我國(guó)大部分DUS測(cè)試指南是在參考UPOV指南的基礎(chǔ)上制定的[30]。農(nóng)業(yè)部科技發(fā)展中心發(fā)布的藥食用菌DUS測(cè)試指南由10個(gè)部分組成，即范圍，規(guī)范性引用文件，術(shù)語和定義，符號(hào)，繁殖材料的要求，測(cè)試方法，特異性、一致性和穩(wěn)定性結(jié)果的判定，性狀表，分組性狀和技術(shù)問卷。其中，繁殖材料的要求，測(cè)試方法，特異性、一致性和穩(wěn)定性結(jié)果的判定以及性狀表是測(cè)試指南制定中尤為重要的部分。

2.3 制定繁殖材料的要求

繁殖材料的要求是對(duì)提交的待測(cè)品種繁殖材料的形式、數(shù)量、規(guī)格、保存條件等作出規(guī)定。在農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的現(xiàn)行13種菌類DUS測(cè)試指南中，繁殖材料主要以菌種或母種2種形式提供，提交的母種或菌種數(shù)量至少為3支。繁殖材料的具體要求為均使用規(guī)格（180～200 mm）×（18～20 mm）的母種試管；采用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)保存；要求提供外觀整潔，菌落邊緣整齊，菌絲活力強(qiáng)的母種平板。除羊肚菌屬和金針菇保證送抵時(shí)菌齡為7～10 d外，其他均為10～14 d（表2）。DUS測(cè)試指南也要求當(dāng)測(cè)試單位收到菌種后，應(yīng)立即擴(kuò)繁留存菌種，并妥善保存，已備復(fù)查，如有特殊保藏要求，應(yīng)提供保藏的詳細(xì)說明。提交的材料應(yīng)符合中國(guó)植物檢疫的有關(guān)規(guī)定，除非審批機(jī)關(guān)允許或要求進(jìn)行處理，提交的繁殖材料一般不進(jìn)行任何影響品種性狀正常表達(dá)的處理，如果已處理，應(yīng)提供處理的詳細(xì)說明。

2.4 制定測(cè)試方法

測(cè)試方法是對(duì)測(cè)試周期、測(cè)試地點(diǎn)、田間試驗(yàn)、性狀觀察、附加測(cè)試等進(jìn)行具體要求。已公布的13個(gè)藥食用菌DUS測(cè)試指南的指定的測(cè)試方法見表3。藥食用菌的測(cè)試周期至少為2個(gè)獨(dú)立的生長(zhǎng)周期，即從發(fā)菌到第1潮子實(shí)體菌蓋完全打開、展平。通常在1個(gè)地點(diǎn)進(jìn)行測(cè)試，如果某些性狀在該地點(diǎn)不能充分表達(dá)，可在其他符合條件的地點(diǎn)對(duì)其進(jìn)行觀測(cè)。田間試驗(yàn)的每小區(qū)栽培數(shù)依據(jù)品種不同而不同，但都進(jìn)行2個(gè)重復(fù)，在此之前，田間測(cè)試實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的要素是要在能保證菌種正常生長(zhǎng)、性狀正常表達(dá)以及有利于觀測(cè)的條件下進(jìn)行。最后，在進(jìn)行個(gè)體觀測(cè)性狀時(shí)可對(duì)菌絲體、子實(shí)體或栽培種取樣；進(jìn)行群體觀測(cè)性狀時(shí)必須選取整個(gè)小區(qū)或規(guī)定大小的混合樣本進(jìn)行觀測(cè)；而在觀測(cè)個(gè)體或某部位時(shí)，每個(gè)個(gè)體只需取1個(gè)樣本進(jìn)行觀測(cè)。

2.5 制定特異性、一致性和穩(wěn)定性結(jié)果的判定

特異性、一致性和穩(wěn)定性結(jié)果的判定是對(duì)總體原則以及3種特性的判定依據(jù)和方法進(jìn)行定義（表4）。當(dāng)申請(qǐng)品種至少在1個(gè)性狀上與近似品種具有明顯且可重現(xiàn)的差異時(shí)，即可判定申請(qǐng)品種具備特異性。如果1個(gè)品種具備一致性，則可認(rèn)為該品種具備穩(wěn)定性，一般不對(duì)穩(wěn)定性進(jìn)行測(cè)試；必要時(shí)，可以使用繼代培養(yǎng)物進(jìn)行栽培，與以前提供的繁殖材料相比，若性狀表達(dá)無明顯變化，則可判定該品種具備穩(wěn)定性。測(cè)試品種一致性判定時(shí)，采用不同的群體標(biāo)準(zhǔn)和至少95%的接受概率，以及樣本大小不同時(shí)，最多可允許的不同數(shù)量異型株表示。

表2 藥食用菌DUS測(cè)試待測(cè)品種繁殖材料的要求

Table 2 Requirements for propagation materials of medicinal and edible fungi to be tested in DUS test

品種名提交形式提交數(shù)量/支培養(yǎng)溫度/℃菌齡/d 白靈側(cè)耳菌種≥325±1*10～14 羊肚菌屬母種≥320±1* 7～10 香菇菌種≥32510～14 黑木耳菌種≥32510～14 靈芝菌種≥325±1*10～14 雙孢蘑菇菌種≥325±110～14 金針菇母種≥321±1* 7～10 蛹蟲草菌種≥32510～14 長(zhǎng)根菇母種≥325±1*— 猴頭菌母種≥325±110～14 蟬花母種≥325±110～14 真姬菇菌種≥32510～14 糙皮側(cè)耳菌種≥325±1*—

“*”表示性狀表注釋中的菌絲培養(yǎng)溫度 “—”表示DUS測(cè)試指南中無明確菌齡要求

“*” indicates the culture temperature of mycelium in the notes of character table “—” indicates that there is no clear requirement for bacterial age in DUS test guideline

表3 藥食用菌DUS測(cè)試方法的要求

Table 3 Requirements of DUS test method for medicinal and edible fungi

名稱測(cè)試周期/個(gè)測(cè)試地點(diǎn)/個(gè)田間試驗(yàn)測(cè)試數(shù)量 小區(qū)栽培數(shù)重復(fù)數(shù)群體個(gè)體/個(gè)部位/個(gè) 白靈側(cè)耳21≥300袋2整個(gè)小區(qū)或規(guī)定大小的混合樣本植株≥80— 羊肚菌21≥50袋2同上菌絲體≥5個(gè)平板，栽培種≥20，子實(shí)體≥401 香菇21≥60袋2同上子實(shí)體為601 黑木耳21≥60根菌棒2同上子實(shí)體為601 靈芝21≥50袋2同上個(gè)體≥401 雙孢蘑菇21≥3瓶菌種2同上個(gè)體為1201 金針菇21100瓶2同上菌絲體≥4個(gè)平板，子實(shí)體≥601 蛹蟲草21≥100瓶2同上菌絲體≥4個(gè)平板，子實(shí)體≥601 長(zhǎng)根菇21≥30袋3同上菌絲體≥3個(gè)平板，子實(shí)體≥60，每個(gè)重復(fù)取20個(gè)1 猴頭菌21≥100袋2同上菌絲體≥4個(gè)平板，子實(shí)體≥601 蟬花21≥100瓶2同上子實(shí)體≥601 真姬菇2160瓶2同上個(gè)體≥301 糙皮側(cè)耳21≥100袋2同上菌絲體≥5個(gè)平板，子實(shí)體≥601

“—”表示無特定數(shù)量

“—” indicates that there is no specific quantity

2.6 制定性狀表

性狀表是對(duì)性狀表的內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明、舉例和注釋，性狀表詳細(xì)列出了性狀名稱、表達(dá)類型、表達(dá)狀態(tài)及相應(yīng)的代碼和標(biāo)準(zhǔn)品種、觀測(cè)時(shí)期和方法等內(nèi)容，見表5。據(jù)統(tǒng)計(jì)可知，每個(gè)品種測(cè)試指南制定時(shí)性狀選取的數(shù)量在18～32個(gè)，性狀表達(dá)也不一致，除白靈側(cè)耳的質(zhì)量性狀表達(dá)數(shù)量為0以外，其他性狀表達(dá)數(shù)量均在1個(gè)以上；測(cè)試過程中至少選取4個(gè)時(shí)期、2種以上單種或2種測(cè)試方法聯(lián)用的方法進(jìn)行性狀觀察；進(jìn)行測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)品種不低于3種。

表4 特異性、一致性和穩(wěn)定性結(jié)果的判定

Table 4 Determination of specificity, consistency and stability of medicinal and edible fungi

名稱特異性的判別穩(wěn)定性的判別一致性的判別 群體標(biāo)準(zhǔn)/%接受概率/%允許異型體/個(gè) 白靈側(cè)耳至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化1≥95樣本42～69：≤3；樣本70～99：≤4 羊肚菌至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化8≥95樣本5：≤0；樣本20：≤1；樣本36～82：≤2 香菇至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化1≥95樣本60：≤2 黑木耳至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化1≥95樣本60：≤2 靈芝至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化2≥95樣本42～69：≤3；樣本70～99：≤4 雙孢蘑菇至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化1≥95樣本120：≤3 金針菇至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化1≥95樣本60：≤2 蛹蟲草至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化1≥95樣本60：≤2 長(zhǎng)根菇至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化2≥95樣本100～131：≤5 猴頭菌至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化8≥95樣本60：≤8 蟬花至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化2≥95樣本60：≤2 真姬菇至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化1≥95樣本30～35：≤1；樣本36～60：≤2 糙皮側(cè)耳至少1個(gè)性狀繼代培養(yǎng)物栽培，性狀無明顯變化2≥95樣本100：≤5

表5 藥食用菌DUS測(cè)試指南性狀數(shù)量統(tǒng)計(jì)

Table 5 Quantitative statistics of DUS test guide for medicinal and edible fungi

名稱數(shù)量觀測(cè)方法 總性狀質(zhì)量性狀假質(zhì)量性狀數(shù)量性狀觀測(cè)時(shí)期標(biāo)準(zhǔn)品種 白靈側(cè)耳280 8205 3VS、VG、MG、VS 羊肚菌屬25214 96 3VG、VG/VS、MS 香菇357 919518MS、VG、VS、MG 黑木耳192 215612MS、VG 靈芝屬323 8218 6MG、MS、VG 雙孢蘑菇231 517810VG、VG/MS、MG 金針菇212 217623VG、MS、MG、MS/VG 蛹蟲草214 215713MS、VG、MG 長(zhǎng)根菇181 3144 6VG、MS、MG 猴頭菌201 316514MS、VG、VG/MS 蟬花181 1167 8MS、VG、MG 真姬菇284 519513VG、MS 糙皮側(cè)耳243 318523VG、MS/VG、MG、MS

MG-群體測(cè)量 MS-個(gè)體測(cè)量 VG-群體目測(cè) VS-個(gè)體目測(cè)

MG-population measurement MS-individual measurement VG-group visual inspection Vs-individual visual inspection

3 展望與建議

3.1 增加受保護(hù)藥食用菌新品種

藥食用菌申請(qǐng)量以及授權(quán)品種量雖呈大幅增長(zhǎng)的趨勢(shì)，但就目前僅公布的13個(gè)DUS測(cè)試指南數(shù)和授權(quán)品種數(shù)目在總體受保護(hù)品種數(shù)目?jī)H占6%，藥食用菌新品種申請(qǐng)及授權(quán)主要集中在白靈側(cè)耳、羊肚菌屬、香菇、黑木耳和靈芝5個(gè)種屬，其他已有DUS測(cè)試指南的藥食用菌，如雙孢蘑菇、金針菇和蛹蟲草等8個(gè)種屬雖已有新品種的申請(qǐng)但均未見獲批，藥食用菌新品種申請(qǐng)及授權(quán)呈現(xiàn)分布不均勻、新品種權(quán)保護(hù)的力度遠(yuǎn)小于其他種類的現(xiàn)象。建議組織開展藥食用菌新品種DUS測(cè)試指南的制定，完善藥食用菌新品種保護(hù)制度，調(diào)動(dòng)育種者申請(qǐng)藥食用菌新品種保護(hù)的積極性。

3.2 提升藥食用菌DUS測(cè)試技術(shù)

藥食用菌DUS測(cè)試測(cè)試性狀多，工作量較大，測(cè)試性狀多數(shù)為數(shù)量性狀，受溫度、時(shí)間等因素的影響較大，目前觀測(cè)技術(shù)較為傳統(tǒng)。建議提升藥食用菌DUS測(cè)試技術(shù)，合理應(yīng)用分子生物學(xué)前沿技術(shù)推動(dòng)藥食用菌優(yōu)良新品種轉(zhuǎn)化，如通過分子標(biāo)記技術(shù)[31]和多基因關(guān)聯(lián)分析[32]篩選和鑒定藥食用菌優(yōu)良品種。通過測(cè)試新技術(shù)、新方法的研究，穩(wěn)定藥食用菌DUS測(cè)試技術(shù)指標(biāo)和參數(shù)，提高藥食用菌新品種評(píng)價(jià)的科學(xué)性。

3.3 建立藥食用菌專用DUS測(cè)試中心

我國(guó)現(xiàn)有的27個(gè)測(cè)試分中心其主要功能是研究相關(guān)植物的測(cè)試技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)、承擔(dān)DUS測(cè)試技術(shù)鑒定工作和技術(shù)咨詢服務(wù)[33]?，F(xiàn)有DUS測(cè)試分中心大多為綜合性測(cè)試機(jī)構(gòu)或以糧食作物為重點(diǎn)的測(cè)試中心。截至目前，只有上海和公主嶺2個(gè)測(cè)試分中心承擔(dān)部分食用菌DUS測(cè)試，未有1個(gè)測(cè)試分中心是專用于藥食用菌DUS測(cè)試。由于藥食用菌在種質(zhì)培育、種植生產(chǎn)過程中與植物作物存在顯著差異，建議建立藥食用菌專用DUS測(cè)試中心，更加專業(yè)化地開展藥食用菌新品種測(cè)試服務(wù)。

3.4 加強(qiáng)藥食用菌新品種保護(hù)的國(guó)際對(duì)接

伴隨著知識(shí)經(jīng)濟(jì)成為時(shí)代潮流，新品種創(chuàng)新成為國(guó)際環(huán)境下中國(guó)種業(yè)的核心競(jìng)爭(zhēng)力之一。藥食用菌新品種權(quán)對(duì)外申請(qǐng)數(shù)量少、知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)意識(shí)不足等問題突出[28]，在藥食用菌領(lǐng)域，目前我國(guó)缺少走出國(guó)門、走向國(guó)際的意識(shí)。為提升藥食用菌新品種創(chuàng)新，建議加強(qiáng)國(guó)際對(duì)接；學(xué)習(xí)國(guó)際新品種培育與測(cè)試先進(jìn)技術(shù)，在已被UPOV采用的茶、山茶、牡丹和丁香的國(guó)際指南基礎(chǔ)上編制出藥食用菌國(guó)際指南[34]，強(qiáng)化DUS測(cè)試信息化模式，與各成員國(guó)交換共享品種名審查系統(tǒng)，DUS試驗(yàn)設(shè)計(jì)與數(shù)據(jù)分析軟件及設(shè)備[35]，與“一帶一路”沿線國(guó)家建立持續(xù)有效的合作，促進(jìn)藥食用菌新品種保護(hù)國(guó)際化發(fā)展。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Development status and perspective of new varieties protection and DUS test guide for medicinal and edible fungi

LIU Xiao-liu1, 2, ZHONG Can1, 2, XIE Jing1, 2, HOU Feng-fei3, DAI Jia-mu4, ZHANG Shui-han1, 2, JIN Jian1, 2

1. Academy of Chinese Medicine, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, China 2. Institute of Chinese Materia Medica, Hunan Academy of Chinese Medicine, Changsha 410013, China 3. Hunan Butian Pharmaceutical Co., Ltd., Changsha 410017, China 4. Hunan Fuling Engineering Technology Research Center, Changsha 410017, China

Medicinal and edible fungi are important biological groups with many biological functions. In recent years, more and more attention has been paid to research and utilization of medicinal and edible fungi in China. The industry and species of medicinal and edible fungi are rapidly diversified, and the problems of new variety protection and variety rights are becoming prominent. Thirteen DUS (distinctness, uniformity and stability) testing guidelines for fungi issued by Ministry of Agriculture and rural areas are introduced in this paper, and the scope, issuing time, main contents, submission requirements and test characteristics of DUS testing guidelines for fungi issued by the Ministry of Agriculture and rural areas are interpreted and analyzed. The development of DUS test guide for medicinal and edible fungi and research status of test technology are summarized. The development process and application for authorization of new varieties of edible fungi are discussed. Finally, suggestions on protection of new varieties of medicinal and edible fungi and development and existing problems of DUS testing technology are put forward.

medicinal and edible fungi; DNA molecular marker technology; specificity; consistency; stability; variety right

R282

A

0253 - 2670(2022)04 - 1173 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.04.026

2021-09-22

湖南省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（2022NK2005）；湖南創(chuàng)新型省份建設(shè)專項(xiàng)（2020SK2029、2020NK4197）；長(zhǎng)沙市杰出創(chuàng)新青年培養(yǎng)計(jì)劃項(xiàng)目（kq2009084）；2018年中醫(yī)藥公共衛(wèi)生服務(wù)補(bǔ)助專項(xiàng)“全國(guó)中藥資源普查”（財(cái)社[2018]43號(hào)）

劉曉柳（1995—），女，碩士，研究方向?yàn)榉肿由帉W(xué)。E-mail: liu992482176@163.com

金 劍，副研究員，碩士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橹兴幧锛夹g(shù)與中藥資源綜合開發(fā)利用。E-mail: jinjian2016@163.com

[責(zé)任編輯 崔艷麗]