林浩，徐賽，孟偉，楊志偉，彭懷晴，黃蘭雅

雅安職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川 雅安 625000

0 引言

隨著現(xiàn)代環(huán)境污染的日益加劇，城市空氣質(zhì)量顯著降低，這在一定程度上加劇了人們各類呼吸道疾病的發(fā)生概率，為人們的身心健康帶來極大困擾。其中，支氣管哮喘就是現(xiàn)階段最為常見和高發(fā)的呼吸道疾病之一。根據(jù)相關(guān)統(tǒng)計顯示，目前全世界有哮喘病人1.5億～2億人，每年死于哮喘病的人達18萬之多。其中我國哮喘發(fā)病率為1%～5%，約有3000萬哮喘病人，且每年發(fā)病人數(shù)仍才呈現(xiàn)遞增趨勢，且發(fā)病人群年齡越來越小，自身免疫力低下的兒童正成為哮喘病的高發(fā)群體。哮喘患者容易受到空氣污染的影響。特定的污染物（PM2.5）能夠引起氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性，二者均為哮喘的特征性表現(xiàn)。大量的證據(jù)表明環(huán)境中PM水平能夠引起哮喘的誘發(fā)和加重[1]。隨著我國社會經(jīng)濟的高速發(fā)展，霧霾等空氣污染問題變得日益嚴重，其中，四川盆地是全國嚴重的霧霾區(qū)域，雅安地區(qū)處于盆地邊緣，四周環(huán)山，霧霾現(xiàn)象僅次于成都平原。霧霾中主要成分為PM2.5等顆粒，由霧霾引起的過敏性哮喘在雅安各大醫(yī)院病例數(shù)逐漸增多。雖然一直以來臨床上已經(jīng)形成了針對過敏性哮喘的相關(guān)治療方法，且西醫(yī)在此領(lǐng)域具有一定效果，但是面對日益復(fù)雜的過敏性哮喘病情，以往治療方法也有其不足之處，所以中西醫(yī)領(lǐng)域近年來也都在進行過敏性哮喘臨床治療的更多研究。在我國，2012年以來，雅安政府確立了以雅安三九中藥產(chǎn)品為基礎(chǔ)，重點開展資源瀕危品種如雅蓮、重樓、黃芪等野生藥材撫育馴化栽培，已有初步成效[2]。為進一步明確雅安產(chǎn)黃芪在過敏性支氣管哮喘臨床治療上的效用，本課題就主要立足雅安本地野生馴化栽培的相關(guān)藥材，如黃芪等配伍形成的湯劑，進行基礎(chǔ)藥理學(xué)研究，觀察雅安產(chǎn)黃芪及其配伍的湯劑在防止霧霾誘發(fā)的過敏性哮喘的藥效。該研究成果可極大程度服務(wù)于雅安地區(qū)的各類人群，特別是兒童，減小霧霾對肺部損傷。

1 資料與方法

1.1 一般資料

（1）實驗動物與藥材：本實驗動物為SPF級SD大鼠，雄性，共60只，體重（200±10）g，4～6周齡，購買于四川普萊美行之生物科技有限公司后飼養(yǎng)。環(huán)境溫度（22±2）℃，濕度50%～80%。于四川康寶藥業(yè)有限責(zé)任公司購買雅安本土種植的黃芪、杏仁、蘇子、紫菀、款冬花、甘草等中藥材各200g，其他省份同類藥材各200g備用。

（2）儀器選擇：CX41-12C02型倒置顯微鏡；YC-Y800B型亞都超聲波醫(yī)用霧化器（北京亞都科技股份有限公司）；BioTek-Synergy2多功能酶標(biāo)儀；CM3800全自動冷凍切片機（常州郝思琳醫(yī)用儀器有限公司）；L500型低速自動平衡離心機（湘儀離心機儀器有限公司）；成像系統(tǒng)ChemiDocTM CXRS+System（BIO-RAD）；小型垂直電泳槽 Mini-PROTEANTetra System（BIO -RAD）。

1.2 方法

（1）煎藥：將兩組藥材按照適當(dāng)比例配合后加水浸泡30分鐘，加水量以稍沒過中藥為度，武火煎煮至沸騰，然后轉(zhuǎn)至文火維持60min，倒出藥液，然后再加水煎煮，方法如前，將兩次藥液混合并濃縮，配置成霧化裝置[3]。煎藥過程進行必要管理，確保嚴格按照規(guī)范程序進行操作，以保證藥品質(zhì)量。

（2）動物造模與給藥方法：將60只大鼠進行適應(yīng)性的喂養(yǎng)，時間為1周，按照隨機數(shù)字表法對其進行分組，分別為實驗組和對照組兩組，兩組大鼠分別置于自制不完全密閉玻璃箱內(nèi)，在實驗開始兩周內(nèi)每天定時兩個小時將少量燃燒煙塵（含PM2.5顆粒）輸入玻璃容器中進行造模[4-5]。當(dāng)大鼠出現(xiàn)呼吸急促，躁動不安、搔抓嗆咳、噴嚏、皮膚及口唇發(fā)紺、肌肉痙攣抽搐、點頭運動、精神萎靡、站立不穩(wěn)、大便量多等表現(xiàn)時視為造模成功。實驗組購買雅安本土種植的黃芪、杏仁、蘇子、紫菀、款冬花、甘草等中藥材組方的煎煮物進行霧化吸入，對照組用其他產(chǎn)地同類藥材煎煮物進行霧化吸入。過程中對兩組大鼠情況進行觀測，如果出現(xiàn)其他異常情況，要及時處理，避免對試驗整體造成影響。

1.3 觀察指標(biāo)

準(zhǔn)備好顯微鏡、超聲波醫(yī)用霧化器、多功能酶標(biāo)儀等試驗儀器（部分外借）。通過檢測大鼠肺組織的相關(guān)炎癥因子的表達觀察湯劑的藥效學(xué)。大鼠恢復(fù)的程度主要分為三個等級，分別為顯效、有效、無效。治療顯效為：肺部陰影消失呼吸困難等癥狀消失，以上的情況均屬于治療顯效。治療有效為：肺部陰影消失一半，呼吸困難等癥狀明顯好轉(zhuǎn)。沒有以上的治療顯效和治療有效的情況，視為無效治療。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

此次研究所有數(shù)據(jù)資料均在Excel預(yù)處理的基礎(chǔ)上，采用SPSS 21.0軟件包進行處理分析，用%表示計數(shù)資料，設(shè)定為P＜0.05，差異具備統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

實驗組大鼠治療后效果對比明顯優(yōu)于對照組，實驗組追蹤有效率達96.26%，對照組總有效率僅為60.22%（P＜0.05），說明兩組數(shù)據(jù)的差異顯著，詳見表1。

表1 兩組大鼠治療效果對比[n（%）]

3 討論

中藥復(fù)方抗過敏作用機制研究集中在過敏反應(yīng)過程中的幾個關(guān)鍵步驟，如IgE產(chǎn)生、細胞脫顆粒、細胞介質(zhì)誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)等方面，反映了中藥復(fù)方抗過敏作用研究多途徑特點[6]。而這些研究途徑也為深入探索中藥復(fù)方抗過敏作用提供了多元思路，有助于推動我國中藥復(fù)方抗過敏研究不斷實現(xiàn)創(chuàng)新型突破。

現(xiàn)階段相關(guān)研究取得的主要成就包括明確了一批具有抗過敏活性的中藥復(fù)方、中藥提取物和化學(xué)成分，部分揭示了其可能的作用機制；存在的不足主要包括：①中藥抗過敏藥理研究工作以藥效評價居多，藥理機制研究不足，尤其對活性化合物的作用靶點及其作用機制所知甚少；②中藥復(fù)方和單味中藥提取物的化學(xué)研究不足，由于活性化學(xué)成分不明確，直接影響了生物活性機制研究工作難于深入；③中藥復(fù)方研究思路有待創(chuàng)新，中藥復(fù)方是中醫(yī)臨床療效的載體真正體現(xiàn)著中醫(yī)藥理論特色，目前采用天然藥物化學(xué)研究思路不能充分揭示中藥復(fù)方內(nèi)涵，亟須發(fā)展。這些不足都反映出對于天然藥物在抗過敏方面的研究仍有較大推進空間，未來實踐中應(yīng)繼續(xù)從其作用機制出發(fā)，進行深入探索，彌補當(dāng)前研究中所存在的各類空白。

支氣管哮喘是一類氣道慢性炎性病變，主要表現(xiàn)為肥大細胞反應(yīng)和酸性粒細胞的侵襲。其發(fā)生機制涉及多種細胞、細胞因子、介質(zhì)以及它們的交互作用。中醫(yī)復(fù)合方劑對氣道慢性炎癥的機制的探討涉及許多方面，如病因、調(diào)節(jié)和后果等不同的環(huán)節(jié)[7]。其于西藥治療相比，從支氣管哮喘的發(fā)病的源頭進行研究，充分發(fā)揮了傳統(tǒng)中醫(yī)理論中標(biāo)本兼治的理念優(yōu)勢，能夠給予患者全方位的治療。同時，中藥復(fù)方劑在治療哮喘的過程中，可以針對患者的不同情況給予針對性調(diào)節(jié)控制，使治療更符合患者的實際情況。此外，在治療一段時間后，還可以根據(jù)治療效果進行用藥調(diào)整，雖然其治療周期較長，但相較西醫(yī)治療方法在效果上并不遜色，且由于其從源頭進行醫(yī)治，反而能夠起到強身固本之效，在一定程度上防范患者哮喘的再次發(fā)生。

許多學(xué)者從分子生物學(xué)角度探討了哮喘的炎癥機制，并在此基礎(chǔ)上進行了大量的試驗,相關(guān)研究結(jié)果為進一步驗證中藥的療效和療效提供了科學(xué)的基礎(chǔ)，并為臨床和科研工作提供了有益的參考[8-10]。不可否認的是，當(dāng)前這一領(lǐng)域的研究仍然存在著一些問題和不足：①研究的起點比較單一。盡管這類研究涵蓋了哮喘的各種證候，但也有清、溫、補的應(yīng)用；雖然治療方法有多種，但是試驗指標(biāo)的選取比較集中，無法反映出各種治療方法在氣道炎癥機制上的差異，從而無法體現(xiàn)出中醫(yī)的治療本質(zhì)[11]。②以往的研究大多是從一個環(huán)節(jié)、一個角度來解釋中藥的作用機制，而忽略了中草藥在整個炎癥的發(fā)展和預(yù)后中的作用，因而未能充分反映出中醫(yī)整體觀念。基于此，研究認為針對此類問題還需要進一步完善與擴展。①在未來的研究中，應(yīng)當(dāng)以中醫(yī)學(xué)整體觀為指導(dǎo)，應(yīng)用臟腑相關(guān)的內(nèi)外相對應(yīng)的理論，來考察中醫(yī)藥對哮喘的整體作用[12-13]。②在科研中要引進最新的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)，改變過去試驗指標(biāo)太過單一。在此基礎(chǔ)上，進一步將神經(jīng)肽的定性和定量分析應(yīng)用于氣道炎癥的另一機制[14]。③支氣管哮喘是一種具有遺傳性的疾病，“幼稚天哮”在中醫(yī)學(xué)文獻上的記載也很多，如果能將其與家系、基因標(biāo)記相結(jié)合進行研究，無疑會極大地提升整體科研水平。哮喘是一種多層次的復(fù)雜疾病，應(yīng)從多個層面進行多目標(biāo)的治療，并在此基礎(chǔ)上進一步開展多環(huán)節(jié)靶點的研究[15-16]。雅安地區(qū)80%以上為中高山區(qū)，海拔600～3000米，屬于中緯度亞熱帶濕潤氣候，四季分明，年平均溫度16.2℃，沒有霜凍。優(yōu)質(zhì)的空氣、水源、土壤等為優(yōu)質(zhì)的中草藥的成長提供了良好的條件；高海拔高、地形條件好，能適應(yīng)多種中草藥的需要；森林覆蓋率高，是中藥有效成分含量高的主要原因。

本次研究中，實驗組在采用雅安產(chǎn)黃芪及其配伍的湯劑霧化吸入方案治療后，動物模型各項康復(fù)指標(biāo)均優(yōu)于對照（P＜0.05），且治療效果明顯輕于對照組（P＜0.05），與上述研究一致，此研究表明雅安產(chǎn)黃芪及其配伍的湯劑霧化吸入方案在臨床應(yīng)用價值顯著。

綜上所述，我國對于中藥復(fù)方劑治療哮喘的方法已多有研究，目前已經(jīng)形成了相關(guān)理論和治療方法，然而在天然藥物的臨床應(yīng)用上，現(xiàn)階段我國的研究相對較少。此次研究以動物造模的方式對比分析了雅安產(chǎn)黃芪及配伍湯劑在治療過敏性哮喘上的效果，且結(jié)果證實雅安產(chǎn)黃芪及配伍湯劑對于該病癥的治療具有更為明顯的效果。因此，在未來對過敏性支氣管哮喘患者的治療過程中，雅安產(chǎn)黃芪及其配伍的湯劑霧化吸入是值得在臨床上推廣使用的，同時這也能夠為推廣地方藥材提供理論上的支持。