林水中，王明霞，關(guān)佳佳

（鹽城生物工程高等職業(yè)技術(shù)學(xué)校，江蘇鹽城 224051）

作為促生長(zhǎng)作用的抗生素已被禁止使用，因?yàn)檫@會(huì)增加微生物耐藥性危險(xiǎn)及畜產(chǎn)品藥物殘留對(duì)人類健康的負(fù)面影響。因此，畜牧飼料行業(yè)一直在努力尋找抗生素替代品，包括有機(jī)酸、無機(jī)酸、酶、植物提取物、益生菌和納米化合物等（邱亦秀，2005）。其中，益生菌因其長(zhǎng)期的安全使用歷史和與抗生素相對(duì)相似的生物學(xué)機(jī)制，作為抗生素潛在替代品受到越來越多的關(guān)注（王偉浩，2009）。提高益生菌功效的策略之一是建立適宜的益生菌組合，在腹瀉、免疫反應(yīng)和肝臟健康方面，多菌種混合益生菌比單菌種益生菌發(fā)揮了更大的功效（蘇琴，2015）。生長(zhǎng)肥育豬日糧中添加多種益生菌配方對(duì)生長(zhǎng)性能、肉品質(zhì)和糞便有毒氣體排放均有有益影響（劉輝等，2015）。此外，日糧中添加益生菌混合物還可通過增加粘蛋白和抗菌肽的產(chǎn)量調(diào)節(jié)腸道菌群，從而對(duì)腸道防御系統(tǒng)產(chǎn)生有益影響（Kumar等，2017）。但由于缺乏宿主生理和腸道微生物種群之間的關(guān)鍵分子聯(lián)系，關(guān)于益生菌在生長(zhǎng)肥育豬中的具體作用模式的信息有限。目前已有研究報(bào)道了單一枯草芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌對(duì)動(dòng)物健康和生長(zhǎng)的影響（姚志芳等，2020；王思念等，2018）。但目前尚不清楚上述益生菌組合在生長(zhǎng)肥育豬中協(xié)同作用的確切機(jī)制。因此，本研究旨在評(píng)估日糧補(bǔ)充以枯草芽孢桿菌、乳酸菌和酵母菌組成的復(fù)合益生菌對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能、小腸絨毛形態(tài)及肝臟脂代謝相關(guān)指標(biāo)的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)將208頭體重接近的18周齡三元育肥豬隨機(jī)分為2組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)26頭豬。對(duì)照組育肥豬飼喂基礎(chǔ)日糧，處理組育肥豬飼喂基礎(chǔ)日糧+1.5 g/kg由乳酸菌、枯草芽孢桿菌和酵母菌組成的復(fù)合益生菌，飼養(yǎng)試驗(yàn)為期8周。

表1 基礎(chǔ)日糧配方原料及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2 飼養(yǎng)管理 對(duì)照組與處理組育肥豬飼養(yǎng)在相同的圈舍里，每個(gè)圈舍8～10頭。每天飼喂2次，每個(gè)圈舍配備了4個(gè)料槽和5個(gè)水碗。記錄開始、試驗(yàn)中期（28 d）和結(jié)束（56 d）的育肥豬重量和飼料用量。

1.3 樣品采集與分析 試驗(yàn)結(jié)束后每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇4頭豬采血，血液樣品靜置15 min后用于分離血清，-20℃保存。之后將豬屠宰，分離十二指腸、空腸、回腸和肝臟。參考魏小兵等（2019）的方法測(cè)定小腸絨毛形態(tài)。將肝臟用生理鹽水制備成1%勻漿，和血清樣品一并用商品試劑盒測(cè)定生化指標(biāo)。

1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)結(jié)果用SAS軟件進(jìn)行單因素方差分析，采用T檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較。P＜0.05表示組間差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合益生菌對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，與對(duì)照組相比，處理組育肥豬試驗(yàn)56 d體重、29～56 d平均日增重和料重比及1～28 d、29～56 d和1～56 d平均日采食量無顯著改善（P＞0.05）。處理組育肥豬28 d體重、1～28 d和1～56 d平均日增重較對(duì)照組顯著提高2.28%、10.33%和4.56%（P＜0.05），但1～28 d和1～56 d料重比較對(duì)照組顯著降低11.15%和5.72%（P＜0.05）。

表2 復(fù)合益生菌對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 復(fù)合益生菌對(duì)育肥豬小腸絨毛形態(tài)的影響由表3可知，對(duì)照組與處理組育肥豬十二指腸和回腸絨毛高度、隱窩深度和絨毛高度與隱窩深度比值（VH/CD）均無顯著差異（P＞0.05）。處理組空腸絨毛高度和VH/CD較對(duì)照組分別顯著提高5.45%和17.52%（P＜0.05），而隱窩深度顯著降低10.27%（P＜0.05）。

表3 復(fù)合益生菌對(duì)育肥豬小腸絨毛形態(tài)的影響

2.3 復(fù)合益生菌對(duì)育肥豬肝臟脂代謝和血清生化指標(biāo)的影響 由表4可知，對(duì)照組與處理組育肥豬血清低密度脂蛋白和高密度脂蛋白濃度及肝臟高密度脂蛋白、膽固醇和低密度脂蛋白濃度無顯著差異（P＞0.05）。處理組育肥豬血清甘油三酯和膽固醇濃度及肝臟甘油三酯濃度較對(duì)照組分別顯著降低42.31%、71.13%和9.09%（P＜0.05）。

表4 復(fù)合益生菌對(duì)育肥豬肝臟脂代謝和血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，復(fù)合益生菌組育肥豬試驗(yàn)56 d體重、29～56 d平均日增重和料重比及1～28 d、29～56 d和1～56 d平均日采食量均無顯著改善作用，但顯著提高了試驗(yàn)中期育肥豬體重、試驗(yàn)前期和全期日增重和飼料效率，這與Alexopoulos等（2004）報(bào)道的使用益生菌組合的結(jié)果一致。此外，其研究也發(fā)現(xiàn)，在生長(zhǎng)期和整個(gè)試驗(yàn)期日糧添加地衣芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌復(fù)合物后，在不影響平均日采食量的情況下，提高了豬的日增重和飼料效率。

生長(zhǎng)肥育豬雖然胃腸道發(fā)育完全，但由于飼養(yǎng)衛(wèi)生條件差，極易受到腸道致病菌感染。腸道菌群組成在維持生長(zhǎng)肥育豬腸道屏障功能方面發(fā)揮重要作用。因此，本試驗(yàn)結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，復(fù)合益生菌組育肥豬空腸絨毛高度及絨毛高度與隱窩深度比值顯著提高，這與Fanning等（2008）報(bào)道的結(jié)果一致。

由于肝臟在全身脂質(zhì)代謝中具有重要作用，我們也檢測(cè)了血清和肝臟中脂質(zhì)代謝的生物標(biāo)志物。日糧中添加復(fù)合益生菌降低了生長(zhǎng)肥育豬血清和肝臟中甘油三酯的濃度以及肝臟中膽固醇水平。近年來，腸道微生物在脂質(zhì)代謝中的作用也得到廣泛研究（Tremaroli和Backhed，2012），在其研究中發(fā)現(xiàn)，軟壁菌屬豐度降低，肝臟甘油三酯濃度降低，推測(cè)軟壁菌屬可能影響脂質(zhì)代謝。Boulange等（2016）的報(bào)道也發(fā)現(xiàn)益生菌在生長(zhǎng)肥育豬體內(nèi)的活躍脂質(zhì)代謝和產(chǎn)熱作用可能與其對(duì)柔毛門和毛螺菌科的調(diào)節(jié)作用有關(guān)，因此，后續(xù)試驗(yàn)還有待進(jìn)一步探討復(fù)合益生菌對(duì)育肥豬腸道微生物菌群的影響。

4 結(jié)論

綜上所述，日糧添加1.5 g/kg以枯草芽孢桿菌、乳酸菌和酵母菌組成的復(fù)合益生菌可以通過改善空腸絨毛形態(tài)，進(jìn)而提高育肥豬生長(zhǎng)前期和全期的平均日增重和飼料效率，降低肝臟和血清膽固醇濃度。