陳蓉 馬冬陽(yáng) 蔡雪萍 蘇靜華 顧曉紅 郭彬 朱乃軍 許丹 郝剛 邢以文

(蘇州市藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究中心，蘇州 215104)

頭孢哌酮(C25H27N9O8S2)為第三代廣譜半合成頭孢菌素，通過(guò)抑制胞壁黏肽合成酶，從而阻礙細(xì)胞壁黏肽合成，使細(xì)菌胞壁缺損，菌體膨脹裂解。能對(duì)抗多種β-內(nèi)酰胺酶的降解作用，抗菌譜廣，對(duì)革蘭陽(yáng)性菌及陰性菌均有作用[1]。舒巴坦鈉(C8H10NNaO5S)屬于半合成青霉烷砜類(lèi)衍生物，為不可逆的競(jìng)爭(zhēng)性β-內(nèi)酰胺酶抑制劑，是繼克拉維酸后第二種用于臨床的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑，本身的抗菌活性弱，略強(qiáng)于克拉維酸，單用時(shí)僅對(duì)淋球菌和不動(dòng)桿菌屬有殺菌作用，但其對(duì)多數(shù)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素耐藥菌株產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶具有不可逆的抑制作用，因而可保護(hù)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素免受水解破壞[2]。兩種藥物合用，具有明顯的協(xié)同作用，其抗菌作用較單用頭孢哌酮高4倍[3]。

注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉(cefoperazone sodium and sulbactam sodium for injection)是頭孢哌酮鈉與舒巴坦鈉組成的復(fù)方制劑。最先由美國(guó)輝瑞公司研制，1986年在日本率先上市，1994年9月由大連輝瑞制藥有限公司獲批原研進(jìn)口，1997年起國(guó)內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)相繼獲批上市。臨床上主要用于抗易感菌株引起的中度和重度感染治療，并限用于有明確藥敏試驗(yàn)證據(jù)或重癥感染的患者。主要治療由敏感細(xì)菌所引起的呼吸道感染、泌尿道感染、腹內(nèi)感染、敗血癥、腦膜炎、皮膚及軟組織感染、眼部感染、骨骼及關(guān)節(jié)感染等；預(yù)防因腹腔、婦科、心血管、骨科及整形手術(shù)所引起的手術(shù)后感染[4]。美國(guó)胸科學(xué)會(huì)/感染學(xué)會(huì)(ATS/IDSA)指南(2019年)推薦亞洲國(guó)家將注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉作為中重度院內(nèi)獲得性肺炎(HAP)、呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎(VAP)、多重耐藥菌株(MDR)、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、不動(dòng)桿菌屬等感染的初始經(jīng)驗(yàn)用抗生素之一。

注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉由頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉原料直接無(wú)菌分裝制成，因此其原料的品質(zhì)直接影響制劑的質(zhì)量[5]。中國(guó)藥典2015年版二部[6]和日本藥典JP17版[7]收載了原料及其制劑，歐洲藥典(EP)9.0[8]僅收載了原料標(biāo)準(zhǔn)。該品種臨床使用非常廣泛，連續(xù)多年蟬聯(lián)國(guó)內(nèi)醫(yī)療機(jī)構(gòu)抗感染藥物使用量TOP1。不良反應(yīng)發(fā)生數(shù)較高，常見(jiàn)的嚴(yán)重不良反應(yīng)為皮疹、瘙癢、呼吸困難、胸悶、凝血障礙、過(guò)敏樣反應(yīng)、寒戰(zhàn)、過(guò)敏反應(yīng)、血小板減少[9]。隨著近年來(lái)“限抗令”的實(shí)施，對(duì)該品種的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制尤為重要。

目前國(guó)內(nèi)共有注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉生產(chǎn)企業(yè)89家，批準(zhǔn)文號(hào)352個(gè)，包括11種規(guī)格。國(guó)家藥品監(jiān)督管理局將本品種列入2020年度國(guó)家藥品抽驗(yàn)計(jì)劃。按照要求，我單位對(duì)國(guó)內(nèi)39家企業(yè)生產(chǎn)的260批次注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉進(jìn)行了法定檢驗(yàn)和探索性研究，客觀評(píng)價(jià)該品種的質(zhì)量現(xiàn)狀，查找可能存在的影響品種安全性和有效性的因素，提出質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)完善建議，為企業(yè)提高生產(chǎn)工藝起到積極作用，同時(shí)也為上市后的藥品監(jiān)管提供可靠的的技術(shù)支撐。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Waters Acquity H Class超高效液相色譜儀(美國(guó)Waters公司)；Waters ACQUITY 2D UPLC液相色譜系統(tǒng)，Xevo G2-XS Q-TOF質(zhì)譜系統(tǒng)配備MassLynx工作站(美國(guó)Waters公司)；Agilent 7200 Accurate-Mass Q-TOF GC/MS配備N(xiāo)IST MS Search2.0工作站(美國(guó)Agilent公司)；Thermo X-Series 2型ICP-MS，配備PlasmaLab工作站(美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司)；HACH TL2350濁度儀(美國(guó)Hach公司)；Mastersizer 2000智能激光粒度儀(英國(guó)Malvern公司)；XSE205DU型電子天平(瑞士Mettler Toledo公司)；Direct-Q3型超純水機(jī)(美國(guó)Millipore公司)；SK8210HP型超聲波清洗器(上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司)；XMTD-204型數(shù)顯式電熱恒溫水浴鍋(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司)；Metrohm 915KF卡氏水分測(cè)定儀(瑞士萬(wàn)通公司)。

1.2 試藥

對(duì)照品：頭孢哌酮、頭孢哌酮雜質(zhì)A、頭孢哌酮雜質(zhì)C(1-甲基-5-巰基四氮唑)、頭孢哌酮雜質(zhì)F(頭孢哌酮S異構(gòu)體)與舒巴坦、N-亞硝基二甲胺，以上均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究；頭孢哌酮雜質(zhì)B、頭孢哌酮雜質(zhì)D、舒巴坦雜質(zhì)A、舒巴坦雜質(zhì)C、舒巴坦雜質(zhì)E、舒巴坦雜質(zhì)F為EP對(duì)照品； 鉛、鎘、砷、汞、鈷、鎳、釩、硒、鋰、銻、鋇、鉻、鉬、銅、錫、鈀、鋅、鐵，以上均購(gòu)自國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心；BHT(2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚)、八甲基環(huán)四硅氧烷均購(gòu)自Sigma公司。

試劑：乙腈、四丁基氫氧化銨均為色譜純；冰醋酸、硝酸均為UP級(jí)；水為超純水，其余試劑均為分析純。

1.3 樣品

260批次注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉均為2020年國(guó)家藥品計(jì)劃抽驗(yàn)樣品，涉及39個(gè)生產(chǎn)企業(yè)。企業(yè)覆蓋率43.8%、批準(zhǔn)文號(hào)覆蓋率24.1%；抽樣覆蓋了全國(guó)22個(gè)省、4個(gè)直轄市、5個(gè)自治區(qū)，抽樣數(shù)量在各省之間分布均勻。其中從生產(chǎn)企業(yè)抽樣112批，經(jīng)營(yíng)企業(yè)抽樣139批，醫(yī)療機(jī)構(gòu)抽樣9批。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)

此次抽驗(yàn)全部批次按照《中國(guó)藥典》2015年版二部注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，部分項(xiàng)目涉及到國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)5個(gè)：YBH00672013、YBH11332006、YBH15742005、YBH28592005、WS1-(XG-002)-2005。

2.2 探索性研究

為全面評(píng)價(jià)注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉的質(zhì)量，完善質(zhì)控體系，探討工藝對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響，結(jié)合企業(yè)調(diào)研結(jié)果、法檢結(jié)果、以及常見(jiàn)抗生素粉針劑研究方向等參考資料[10-12]，圍繞藥品安全性和有效性?xún)蓚€(gè)方面進(jìn)行相關(guān)的探索性研究。

2.2.1 有關(guān)物質(zhì)I

根據(jù)EP 9.0頭孢哌酮及舒巴坦項(xiàng)下有關(guān)物質(zhì)方法，探索頭孢哌酮雜質(zhì)A、B、C、D、F以及舒巴坦雜質(zhì)A、C、E、F等雜質(zhì)的分離，建立統(tǒng)一的UPLC方法進(jìn)行檢查，結(jié)合雜質(zhì)單標(biāo)對(duì)照品定位和破壞試驗(yàn)，考察樣品的雜質(zhì)譜。

色譜條件：色譜柱：Waters Acquity UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm，1.8 μm)；以0.05%三氟乙酸水溶液為流動(dòng)相A，以乙腈為流動(dòng)相B，按表1梯度洗脫；流速：0.4 mL/min；柱溫：35℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；進(jìn)樣量：2 μL。

表1 梯度洗脫程序Tab.1 Gradient elution program

2.2.2 有關(guān)物質(zhì)Ⅱ

引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)的過(guò)敏原是β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素中的聚合物類(lèi)雜質(zhì)[13]。建立聚合物類(lèi)雜質(zhì)的定量分析方法，并采用二維柱切換超高效液相色譜-四級(jí)桿/飛行時(shí)間質(zhì)譜(UPLC-Q/TOF-MS)聯(lián)用技術(shù)對(duì)其雜質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)推斷。

第一維色譜條件：色譜柱：TSK-gel G2000SWxl凝膠柱(7.8 mm×300 mm，5 μm)；以磷酸鹽緩沖液(pH7.0)[0.005 mol/L磷酸氫二鈉溶液-0.005 mol/L磷酸二氫鈉溶液(61:39)]-乙腈(95:5)為流動(dòng)相；流速：0.5 mL/min；柱溫：25℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm；進(jìn)樣量：20 μL。第二維色譜條件：色譜柱：ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm，1.8μm)；以0.005 mol/L甲酸銨水溶液為流動(dòng)相A，以乙腈為流動(dòng)相B，按表2梯度洗脫；流速：0.4 mL/min；柱溫：25℃；切換用定量環(huán)體積：250 μL。

表2 梯度洗脫程序Tab.2 Gradient elution program

質(zhì)譜條件：ESI離子源；正離子模式；一級(jí)質(zhì)譜掃描范圍：m/z50～1500；離子源溫度：110℃；毛細(xì)管電壓：2.50 kV；錐孔電壓：40 V；去溶劑氣(N2)溫度：250℃；流量：600 L/h；錐孔氣流：50 L/h。

2.2.3 金屬元素的提取和遷移

玻璃由于本身的化學(xué)成分及生產(chǎn)工藝等因素，其中的金屬離子或陽(yáng)離子團(tuán)均有可能從玻璃中遷移出來(lái)，造成藥品中殘留無(wú)機(jī)金屬元素雜質(zhì)。為了進(jìn)一步研究樣品中金屬元素雜質(zhì)的含量及與工藝等的內(nèi)在聯(lián)系，開(kāi)展了西林瓶及藥物中金屬元素的提取及遷移量研究。根據(jù)元素雜質(zhì)可能的幾種來(lái)源，包括合成催化劑、玻璃包材常用元素及ICH相關(guān)要求，選擇了鉛、鎘、砷、汞、鈷、鎳、釩、硒、鋰、銻、鋇、鉻、鉬、銅、錫、鈀、鋅和鐵等18種元素作為考察對(duì)象，建立ICP-MS法考察39個(gè)廠家使用的西林瓶及108批制劑中上述金屬元素的提取及遷移量，評(píng)價(jià)西林瓶的安全性。

2.2.4 膠塞相容性

在藥物的貯存過(guò)程中，膠塞直接與粉末接觸，膠塞中的一些揮發(fā)性成分不可避免的與頭孢菌素發(fā)生相互作用，其與特定揮發(fā)性成分的吸附作用是導(dǎo)致注射劑澄清度變差的最主要原因。建立GC-MS法測(cè)定各廠家膠塞和制劑中的4種硅氧烷類(lèi)和2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)等揮發(fā)性成分，采用濁度儀測(cè)定溶液的濁度值，同時(shí)選取兩家企業(yè)的頭孢哌酮鈉原料藥、舒巴坦鈉原料藥進(jìn)行模擬實(shí)驗(yàn)，與膠塞揮發(fā)物試劑(BHT和八甲基環(huán)四硅氧烷)一同密閉放置1、2和5d后，考察揮發(fā)性成分及濁度值變化，探討兩者之間的相關(guān)性，為膠塞的選擇提供參考。

2.2.5 粒度與粒度分布

藥物的粒子大小也是決定其溶解速率的因素之一，采用Malvern Mastersizer 2000激光粒度分析儀對(duì)39家企業(yè)260批制劑的粒度和粒度分布進(jìn)行了測(cè)定。實(shí)驗(yàn)參數(shù)：干法測(cè)定。背景及樣品的掃描時(shí)間為10 s；顆粒折射率1.52；顆粒吸收率0.1；分散壓力2.0 bar；進(jìn)樣速率50%；遮光度0.5%～5%。

同時(shí)考查各廠家制劑復(fù)溶時(shí)間：取各廠家制劑1支，分別加入注射用水適量，使頭孢哌酮含量為125 mg/mL，置震蕩器上振搖溶解，轉(zhuǎn)速100 r/min，觀察并計(jì)時(shí)。

2.2.6 影響因素考察

參照中國(guó)藥典2015年版通則9001原料藥與制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則，考察高溫(60℃，30%)、高濕(25℃，90%)、光照(25℃，4000Lx)3種條件下，39家生產(chǎn)企業(yè)的53批樣品放置1個(gè)月后的酸度、有關(guān)物質(zhì)Ⅰ、有關(guān)物質(zhì)Ⅱ等指標(biāo)的變化情況。

2.2.7 含量均勻度

中國(guó)藥典2015年版四部通則0941含量均勻度檢查法項(xiàng)下規(guī)定，藥物間或藥物與輔料間采用混粉工藝制成的注射用無(wú)菌粉末均應(yīng)檢查含量均勻度。雖然注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉制劑標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下并未規(guī)定含量均勻度檢查，但雙組分不同配比的制劑，通過(guò)含量均勻度考察可以對(duì)藥品質(zhì)量及分裝均勻性進(jìn)行評(píng)價(jià)，使含量的分析結(jié)果更客觀。

色譜條件、系統(tǒng)適用性、對(duì)照品溶液配制等條件均同法檢含量測(cè)定。供試品溶液配制：取本品10瓶，分別溶解并定量稀釋制成約含頭孢哌酮0.5mg/mL溶液。對(duì)39個(gè)廠家260批不同規(guī)格注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉進(jìn)行含量均勻度檢查，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。

3 結(jié)果與分析

3.1 法定檢驗(yàn)結(jié)果

按現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，39家企業(yè)的260批次樣品均符合規(guī)定，合格率100%。本次抽樣樣品生產(chǎn)時(shí)間介于2018年11月至2020年6月之間，由圖1可知，檢驗(yàn)結(jié)果表明該產(chǎn)品質(zhì)量與生產(chǎn)時(shí)間具有一定的相關(guān)性，隨著樣品從生產(chǎn)距離檢驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)，頭孢哌酮雜質(zhì)A、頭孢哌酮雜質(zhì)C、有關(guān)物質(zhì)Ⅱ雜質(zhì)呈變大的趨勢(shì)，溶液的澄清度從淺于0.5號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液逐漸加深至淺于1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液，溶液的顏色由淺于黃色或黃綠色2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液逐漸加深至淺于黃色或黃綠色4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液。本次從不同抽樣點(diǎn)抽取同企業(yè)同批號(hào)樣品12組(24批)，對(duì)其酸度、水分、頭孢哌酮雜質(zhì)A、雜質(zhì)C、其他最大單雜、其他總雜、頭孢哌酮含量、舒巴坦含量8個(gè)檢驗(yàn)指標(biāo)結(jié)果進(jìn)行了SPSS配對(duì)t檢驗(yàn)，結(jié)果表明同批號(hào)樣品檢驗(yàn)結(jié)果間無(wú)顯著差異(P＞0.05)，表明在規(guī)定的儲(chǔ)藏條件下(密閉，在涼暗干燥處)保存，樣品質(zhì)量與抽樣地?zé)o明顯相關(guān)性，具體結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 同批號(hào)配對(duì)樣本檢驗(yàn)Tab.3 Paired sample test of same batch samples

3.2 探索性研究結(jié)果

3.2.1 有關(guān)物質(zhì)I

《中國(guó)藥典》2015年版二部?jī)H控制頭孢哌酮雜質(zhì)A、頭孢哌酮雜質(zhì)C兩個(gè)已知單雜及其他單雜、其他總雜，典型供試品色譜圖如圖2。采用“2.2.1”項(xiàng)下建立的雜質(zhì)譜分析方法共檢出9個(gè)雜質(zhì)峰，各雜質(zhì)峰與2個(gè)主峰(峰3為舒巴坦峰，峰9為頭孢哌酮峰)分離度較好，如圖3～4，溶劑空白表明基線基本無(wú)干擾，9種成分在各自標(biāo)曲范圍內(nèi)均呈現(xiàn)良好線性(r≥0.9998)，精密度、重復(fù)性、回收率均滿(mǎn)足要求(RSD＜2.0%)，頭孢哌酮雜質(zhì)A、B、C、D、F和舒巴坦雜質(zhì)A、C、E、F檢出限分別為：0.022、0.313、0.093、0.316、0.319、0.029、0.836、2.194和0.265 μg/mL。經(jīng)檢測(cè)260批樣品：有27批檢出了舒巴坦雜質(zhì)A(峰1)，按舒巴坦標(biāo)示量計(jì)為0.07%～0.18%；有108批檢出了頭孢哌酮雜質(zhì)F(峰10)，按頭孢哌酮標(biāo)示量計(jì)為0.05%～0.22%；頭孢哌酮雜質(zhì)A(峰7)，按頭孢哌酮標(biāo)示量計(jì)為0.3%～1.0%。頭孢哌酮雜質(zhì)C(峰2)，按頭孢哌酮標(biāo)示量計(jì)為0.1%～0.5%；其他最大單雜按自身對(duì)照法計(jì)為0.1%～0.5%；其他雜質(zhì)總和按自身對(duì)照法計(jì)為0.4%～2.4%。

由圖5可知，與現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法相比，新建方法的頭孢哌酮雜質(zhì)A和頭孢哌酮雜質(zhì)C結(jié)果差異不明顯；其他最大單雜、其他雜質(zhì)總和的檢出數(shù)量和含量均明顯增加，且檢出的雜質(zhì)含量平均偏差小于法檢方法。由于雜質(zhì)多樣性以及檢測(cè)手段的局限性，UPLC法仍需要進(jìn)一步進(jìn)行研究論證，方可作為該品種有關(guān)物質(zhì)檢查標(biāo)準(zhǔn)提高的補(bǔ)充。

3.2.2 有關(guān)物質(zhì)Ⅱ

按“2.2.2”項(xiàng)下方法檢驗(yàn)，測(cè)定結(jié)果在0.81%～2.11%之間。由圖6可知，在TSK柱的測(cè)定條件下，共檢出4種雜質(zhì)，經(jīng)LC-MS分析，雜質(zhì)1和雜質(zhì)2未檢出明顯的雜質(zhì)峰，未做定性推測(cè)；雜質(zhì)3檢出1個(gè)雜質(zhì)峰，雜質(zhì)4共檢出4個(gè)雜質(zhì)峰，各雜質(zhì)可能的化學(xué)結(jié)構(gòu)及來(lái)源分析：雜質(zhì)3可能為頭孢哌酮與其降解雜質(zhì)及工藝雜質(zhì)形成的三聚物，雜質(zhì)4a可能為頭孢哌酮降解物或衍生物與頭孢哌酮雜質(zhì)E的聚合物，雜質(zhì)4b、4c、4d為同分異構(gòu)體，可能為頭孢哌酮與其降解雜質(zhì)及工藝雜質(zhì)二聚物，具體雜質(zhì)推測(cè)見(jiàn)表4。

表4 各雜質(zhì)可能的化學(xué)結(jié)構(gòu)及來(lái)源分析Fig.4 Possible chemical structures and sources of impurities

現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)僅YBH00672013對(duì)其聚合物類(lèi)雜質(zhì)(有關(guān)物質(zhì)II)進(jìn)行了控制。由上述方法測(cè)定發(fā)現(xiàn)，主峰前的色譜峰并不都是聚合物雜質(zhì)，個(gè)別色譜峰也不是純峰，而是多個(gè)化合物(雜質(zhì))的混合物[14]。有關(guān)物質(zhì)Ⅰ不能全面反映該品種的全部雜質(zhì)情況。有關(guān)物質(zhì)Ⅱ既能檢查聚合物類(lèi)雜質(zhì)，又可作為有關(guān)物質(zhì)Ⅰ檢查的一個(gè)補(bǔ)充，可完善雜質(zhì)譜，以減少不良反應(yīng)的發(fā)生。

3.2.3 金屬元素的提取和遷移

39個(gè)廠家西林瓶離子檢測(cè)結(jié)果可以得出，除鈷、鉬、汞、鈀、硒5種離子均無(wú)檢出，其余13種離子部分廠家有檢出。其中低硼硅玻璃管制注射劑瓶的Ba、Zn、Fe含量顯著高于鈉鈣玻璃模制注射劑瓶。鈉鈣玻璃模制注射劑瓶浸出的金屬離子數(shù)量和含量均較低硼硅玻璃管制注射劑瓶偏低，理論上來(lái)說(shuō)相對(duì)更安全。與《化學(xué)藥品注射劑與藥用玻璃包裝容器相容性研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)》及ICH Q3D “元素雜質(zhì)指導(dǎo)原則”規(guī)定的PDE(每日允許暴露量)相比，39家企業(yè)采用的西林瓶浸出離子含量均符合規(guī)定。108批制劑離子檢測(cè)結(jié)果顯示，除銻、鈀、硒3種離子均無(wú)檢出，其余15種離子大部分廠家均有檢出，但離子濃度均無(wú)明顯的變化趨勢(shì)，說(shuō)明藥液與注射劑瓶?jī)?nèi)表面之間未發(fā)生明顯遷移。可認(rèn)為浸出物的量不會(huì)改變藥品的安全性，對(duì)患者的安全性風(fēng)險(xiǎn)小。表明目前采用的各類(lèi)西林瓶?jī)?nèi)包材與該品種制劑相容性較好。

3.2.4 膠塞相容性

由圖7可知，濁度較大的樣品，其揮發(fā)物中含有的硅氧烷類(lèi)和BHT越多，表明制劑溶液的濁度值與硅氧烷類(lèi)和BHT具有正相關(guān)性，提示生產(chǎn)企業(yè)在選擇膠塞時(shí)，應(yīng)著重考察膠塞中硅氧烷類(lèi)和BHT的含量。模擬吸附試驗(yàn)表明，頭孢哌酮鈉吸附的BHT含量與濁度值有一定的相關(guān)性，舒巴坦鈉吸附的硅氧烷類(lèi)和BHT含量與濁度值幾乎沒(méi)有相關(guān)性，即硅氧烷類(lèi)和BHT對(duì)溶液澄清度的影響主要作用于頭孢哌酮鈉。結(jié)合法檢和探索性研究得出，影響溶液澄清度的因素主要為藥品與膠塞作用的時(shí)間、規(guī)格、膠塞種類(lèi)等。頭孢哌酮鈉與膠塞作用時(shí)間延長(zhǎng)，濁度值增大；小規(guī)格制劑與膠塞接觸更為充分，隨著時(shí)間的推移，膠塞中的硅氧烷類(lèi)和BHT遷移到藥物粉末中的更多，濁度值越大；在膠塞選擇時(shí)盡可能選擇覆膜膠塞。國(guó)內(nèi)兩家企業(yè)的0.5g規(guī)格制劑，采用濁度儀法測(cè)定溶液的澄清度，均超過(guò)了1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液，由于同一廠家不同規(guī)格制劑均使用相同膠塞，藥物粉末與膠塞接觸而發(fā)生的相互影響是一樣的，但在澄清度時(shí)加水量不一樣，規(guī)格小的制劑可能澄清度較其他規(guī)格的差，存在影響藥品安全性的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)密切注意該風(fēng)險(xiǎn)。

3.2.5 粒度與粒度分布

由圖8復(fù)溶時(shí)間研究表明，原研樣品(9號(hào))在60秒內(nèi)全部溶解，大部分企業(yè)產(chǎn)品在60～120 s內(nèi)溶解，小部分廠家制劑120s后仍有殘留未溶解。目前該品種國(guó)內(nèi)主要有3大原料藥生產(chǎn)廠家，分別為：SZDR、QLAT、ZHLB，通過(guò)比對(duì)各廠家原料藥來(lái)源發(fā)現(xiàn)，編號(hào)為1、3、4、6、10、12、17、15、18、19、25、27、28、29、30、31、33的制劑原料藥來(lái)自于SZDR，普遍溶解較快；編號(hào)為2、8、22、23、26、34的制劑原料藥來(lái)自于ZHLB，溶解時(shí)間最長(zhǎng)；其余來(lái)自QLAT和其他原料藥廠家，溶解時(shí)間多在1～2 min內(nèi)。推測(cè)不同廠家制劑復(fù)溶行為存在差異，可能與其原料藥不同有關(guān)。

各廠家制劑的粒度分布范圍為D(0.1)=0.8～4.3 μm，D(0.5)=8.7～63.6 μm，D(0.9)=122.1～581.6 μm，原研藥品的90%粒徑范圍為197.8～361.9 μm，最大粒徑373.6 μm，來(lái)自SZDR原料藥的制劑企業(yè)的90%粒徑范圍為122.1～336.4 μm，最大粒徑380.4 μm，來(lái)自QLAT原料藥的制劑企業(yè)的90%粒徑范圍為169.4～412.4 μm，最大粒徑441.7 μm，來(lái)自ZHLB原料藥的制劑企業(yè)的90%粒徑范圍為236.4～581.6 μm，最大粒徑612.6 μm。原研藥品的粒徑比國(guó)產(chǎn)藥品的更小且分布較為均勻集中，推測(cè)可能更利于藥品的溶解，結(jié)果見(jiàn)表5。D(0.5)和D(0.9)的分布與頭孢哌酮和舒巴坦的配比具有相關(guān)性。如圖9所示，同一廠家，頭孢哌酮與舒巴坦配比為2:1規(guī)格的粒徑通常大于1:1規(guī)格。粒度分布考察可為處方配比及制劑工藝優(yōu)選提供依據(jù)，提示企業(yè)在生產(chǎn)過(guò)程中進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)原料和生產(chǎn)工藝的控制。

表5 粒徑分布分析結(jié)果Tab.5 Analysis of the particle size distribution of the samples

3.2.6 影響因素考察

高溫、高濕、光照處理后的樣品pH值均下降，其中高溫影響最顯著，高濕和光照結(jié)果相當(dāng)；頭孢哌酮雜質(zhì)A、頭孢哌酮雜質(zhì)C、其他最大單雜、其他總雜、頭孢哌酮雜質(zhì)F、舒巴坦雜質(zhì)A 6個(gè)指標(biāo)受高溫影響顯著增加；除舒巴坦雜質(zhì)A對(duì)高濕和光照敏感外，其余5個(gè)指標(biāo)在經(jīng)過(guò)高濕或光照處理后，變化趨勢(shì)不明顯；高溫處理后的樣品有關(guān)物質(zhì)Ⅱ含量顯著增長(zhǎng)，高濕處理后基本沒(méi)變化，光照處理后略有增加。綜上所述，溫度是影響pH、雜質(zhì)的最關(guān)鍵因素，提示生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)、使用各環(huán)節(jié)在儲(chǔ)存過(guò)程中必須注意溫度監(jiān)控。

3.2.7 含量均勻度

259批制劑兩種主成分的含量均勻度結(jié)果良好，A+2.2S均小于15.0；一廠家1批規(guī)格2.25g(2:1)制劑的舒巴坦含量均勻度A+2.2S超標(biāo)，可能是混粉分裝工藝存在問(wèn)題，同時(shí)發(fā)現(xiàn)該廠家藥品的粒徑分布也相對(duì)較大，頭孢哌酮與舒巴坦顆粒大小的懸殊也容易導(dǎo)致混粉不均勻。如圖10，頭孢哌酮和舒巴坦含量總體呈正態(tài)分布，其中頭孢哌酮分布的中心點(diǎn)偏向于100%的左側(cè)，而舒巴坦分布的中心點(diǎn)則偏向于100%的右側(cè)。推測(cè)可能是生產(chǎn)時(shí)頭孢哌酮投料量可能未達(dá)到100%，而舒巴坦則可能超過(guò)100%；抑或是頭孢哌酮更容易降解，導(dǎo)致測(cè)得的含量低于100%。含量均勻度考察能更全面客觀地反映產(chǎn)品含量的真實(shí)情況，尤其適用于雙組分混合比例差距較大的粉針劑品種，因此建議在注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中增加含量均勻度檢查。

4 結(jié)論

目前，注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉的法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)基本合理，限度較為合適，能夠較好的控制本品的質(zhì)量。按現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，本次抽驗(yàn)的39家生產(chǎn)企業(yè)260批樣品，均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。探索性研究修訂了有關(guān)物質(zhì)檢查、增加了含量均勻度和有關(guān)物質(zhì)Ⅱ等項(xiàng)目。采用擬修訂的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)260批樣品檢驗(yàn)，合格率99.6%。產(chǎn)品總體質(zhì)量較好。

注射用頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉為我國(guó)抗感染類(lèi)藥物臨床使用量排名第一的品種，不良反應(yīng)也相對(duì)多發(fā)。本品生產(chǎn)廠家繁多，但制劑工藝相對(duì)簡(jiǎn)單統(tǒng)一，此次抽驗(yàn)涉及中國(guó)藥典2015年版二部及5個(gè)企業(yè)注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)，上述標(biāo)準(zhǔn)主要區(qū)別在于部分企業(yè)在執(zhí)行中國(guó)藥典2015年版二部的基礎(chǔ)上，按各自企業(yè)注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行異常毒性項(xiàng)目，且部分項(xiàng)目執(zhí)行的限度不一致。各標(biāo)準(zhǔn)之間無(wú)較大差異，不利于整體質(zhì)量控制，均未能有效地控制有關(guān)物質(zhì)和聚合物雜質(zhì)，缺乏含量均勻度等檢查。探索性研發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)品在生產(chǎn)工藝、內(nèi)包材、說(shuō)明書(shū)等方面存在缺陷，臨床用藥有安全隱患。因此建議企業(yè)有條件時(shí)：①對(duì)法定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行規(guī)范統(tǒng)一；②修訂有關(guān)物質(zhì)檢查方法和控制限度；③增訂包含聚合物的有關(guān)物質(zhì)Ⅱ檢查項(xiàng)；④對(duì)其產(chǎn)品的分裝工藝進(jìn)行研究，提高批間穩(wěn)定性；⑤針對(duì)小規(guī)格制劑膠塞進(jìn)一步開(kāi)展包材相容性研究；⑥進(jìn)行原料藥晶型和基因毒性雜質(zhì)研究；⑦盡快開(kāi)展一致性評(píng)價(jià)工作。

此外，該品種目前共有批準(zhǔn)文號(hào)352個(gè)，本次抽樣僅涉及不足三成的文號(hào)，未抽到的大多數(shù)批準(zhǔn)文號(hào)可能已經(jīng)閑置，造成的不僅是社會(huì)資源的浪費(fèi)，而且企業(yè)長(zhǎng)期不生產(chǎn)，偶爾生產(chǎn)可能會(huì)存在質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)藥品生產(chǎn)監(jiān)管、上市藥品再評(píng)價(jià)、不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)非常不利。因此建議企業(yè)梳理批準(zhǔn)文號(hào)，對(duì)于長(zhǎng)期不生產(chǎn)的品種應(yīng)當(dāng)查找原因；建議藥監(jiān)部門(mén)對(duì)此類(lèi)情況進(jìn)行排查，加強(qiáng)監(jiān)管，保障藥品質(zhì)量。