余建洪，彭慶遠，殷明剛

（自貢市第一人民醫(yī)院檢驗科，四川 自貢 643000）

胃蛋白酶原作為胃蛋白酶的無活性前體，反映了胃黏膜的功能和狀態(tài)[1]，除可用于萎縮性胃炎、胃癌[2-3]及食管鱗狀細胞癌[4]等疾病的診斷外，還可作為胃癌患者死亡風險預(yù)測的生物標志物[5]。疾病的診斷和預(yù)測均離不開檢驗項目的參考區(qū)間，而科學的參考區(qū)間可以避免不必要的臨床干預(yù)[6]。目前，尚無自貢地區(qū)成人胃蛋白酶原參考區(qū)間的相關(guān)報道。為此，本研究擬建立自貢地區(qū)成人血清胃蛋白酶原的參考區(qū)間。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2017年1—12月自貢市第一人民醫(yī)院健康體檢者。所有對象均被告知調(diào)查目的并簽訂知情同意書，然后進行問卷調(diào)查、體格檢查、胸部X線片、彩色多普勒超聲、心電圖、13C尿素呼氣試驗等檢查，并檢測相關(guān)實驗室指標。納入標準：（1）年齡18～79歲；（2）采血前1周內(nèi)未使用過抗菌藥物、抑酸藥物及胃黏膜保護劑；（3）體檢者為自貢市戶籍居民或本地常住人口。排除標準參照文獻[7]中的排除標準。

根據(jù)納入和排除標準，共篩選出2 880名表觀健康者，根據(jù)世界衛(wèi)生組織對年齡的劃分標準分為18～44歲組（1 468名），其中男936名、女532名；45～59歲組（1 160名），其中男724名、女436名；>59歲組（252名），其中男144名、女108名。

1.2 方法

所有體檢者采血前3 d正常飲食、活動，采血前空腹8～12 h，次日清晨采集所有對象坐姿狀態(tài)靜脈血2 mL，置于含促凝劑的真空采血管中，5 ℃ 3 072×g離心10 min，分離血清，2 h內(nèi)完成檢測。

采用膠乳增強免疫比濁法檢測血清胃蛋白酶原Ⅰ（pepsinogenⅠ，PGⅠ）、胃蛋白酶原Ⅱ（pepsinogenⅡ，PGⅡ），試劑及配套校準品、質(zhì)控品購自上海聚創(chuàng)醫(yī)藥科技有限公司，檢測儀器為7600-020全自動生化分析儀（日本日立公司）。計算胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ比值（pepsinogen Ⅰ/pepsinogen Ⅱ ratio，PGR）。檢測系統(tǒng)每年進行1次性能驗證及校準，檢測性能符合試劑和儀器說明書要求。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 23.0軟件進行統(tǒng)計分析。采用Dixon法[8]剔除離群值，采用Kolmogorov-Smirnov檢驗進行正態(tài)性檢驗。呈非正態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)（M）[四分位數(shù)（P25～P75）]表示，2個組間比較采用Mann-Whitney U檢驗，多組間比較采用Kruskal-Wallis H檢驗。采用百分位數(shù)法（P2.5～P97.5）建立參考區(qū)間。采用Kendall's tau-b相關(guān)分析評價 PGⅠ、PGⅡ、PGR、幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，HP）陽性的相關(guān)性。交互作用采用嵌套方差分析。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評價PGⅠ、PGⅡ、PGR判斷HP陽性的效能。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不同性別表觀健康者血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR比較

男性血清PGⅠ、PGⅡ水平均高于女性（P＜0.05），PGR低于女性（P＜0.05）。見表1。

表1 不同性別表觀健康者血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR比較

2.2 不同年齡表觀健康者血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR的比較

18～44歲組、45～59歲組、>59歲組血清PGⅠ和PGⅡ水平依次升高，各組間差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；各年齡組間PGR差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表2。

表2 不同年齡組之間血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR的比較

2.3 各年齡組不同性別表觀健康者血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR比較

各年齡組同性別表觀健康者比較，血清PGⅠ、PGⅡ水平差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），PGR差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。18～44歲組男、女性之間血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。45～59歲組男、女性之間血清PGⅠ和PGⅡ水平差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），PGR差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。>59歲組男、女性之間血清PGⅡ水平差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），血清PGⅠ水平及PGR差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表3。

表3 各年齡組不同性別表觀健康者血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR比較

2.4 血清PGⅠ、PGⅡ和PGR的參考區(qū)間

以13C尿素呼氣試驗陰性作為HP篩查陰性，共篩選出HP陰性表觀健康者1 975名。根據(jù)嵌套方差分析結(jié)果，不同性別和年齡組之間血清PGⅠ、PGⅡ存在交互作用（P＜0.05），PGR無交互作用（P>0.05）。故采用百分位數(shù)法（P2.5～P97.5）建立參考區(qū)間。血清PGⅠ、PGⅡ根據(jù)性別和年齡分別建立參考區(qū)間，PGR按性別建立參考區(qū)間，見表4。

表4 血清PGⅠ、PGⅡ和PGR的參考區(qū)間

2.5 PGⅠ、PGⅡ和PGR判斷表觀健康者HP陽性的價值及相關(guān)性

以13C尿素呼氣試驗陽性作為HP陽性的依據(jù)，2 880名表觀健康者中有905名（男554名，女351名）HP陽性，陽性率為31.42%。不同性別表觀健康者HP陽性率差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。18～44歲組、45～59歲組和>59歲組HP陽性率分別為27.11%（398/1 468）、35.34%（410/1 160）、38.49%（97/252），各組間差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

ROC曲線分析結(jié)果顯示，PGⅠ、PGⅡ和PGR判斷HP陽性的曲線下面積分別為0.712、0.825和0.799，最佳臨界值分別為59.85 ng/mL、12.25 ng/mL和4.76，敏感性分別為65.2%、79.1%和76.5%，特異性分別為71.0%、77.0%和76.0%，Youden指數(shù)分別為0.362、0.561和0.525。見圖1、圖2。

圖1 血清PGⅠ和PGⅡ判斷HP陽性的ROC曲線

圖2 PGR判斷HP陽性的ROC曲線

相關(guān)性分析結(jié)果顯示，P GⅠ、P GⅡ與HP陽性均呈正相關(guān)（r值分別為0.286、0.440，P＜0.01），PGR與HP陽性呈負相關(guān)（r=-0.403，P＜0.01）。

3 討論

目前，我國胃癌發(fā)病率居所有惡性腫瘤的第2位，患者死亡率居第3位[9]。內(nèi)鏡及內(nèi)鏡下活檢是診斷胃癌的金標準，但患者接受度較低[9]。胃蛋白酶原作為反映胃底腺黏膜功能的血清學指標[10]，患者接受度較高，可用于胃癌高危人群的篩查[11]。目前，我國胃蛋白酶原檢測方法及試劑生產(chǎn)廠商眾多，加上不同地區(qū)人群飲食習慣差異較大，因此血清胃蛋白酶原尚無統(tǒng)一的參考區(qū)間。為此，本研究通過檢測2 880名表觀健康者的血清PGⅠ、PGⅡ水平，初步建立了自貢地區(qū)表觀健康成人血清PGⅠ、PGⅡ及PGR的參考區(qū)間。

本研究建立的自貢地區(qū)表觀健康成人的血清PGⅠ、PGⅡ參考區(qū)間，與試劑說明書聲明的參考區(qū)間（PGⅠ≥40 ng/mL，PGⅡ 0.3～25.0 ng/mL）差異較大。本研究結(jié)果顯示，男性PGⅠ、PGⅡ水平均高于女性（P＜0.05），與文獻報道[12]一致。原因可能與男性胃主細胞多于女性，或男性吸煙率較高，導致胃酸增加有關(guān)[13]。本研究結(jié)果還顯示，表觀健康成人HP陽性率無性別差異，為31.43%，低于包頭地區(qū)成人HP陽性率[14]，可能與不同地區(qū)人群飲食習慣不同有關(guān)[15]；表觀健康者血清PGⅠ、PGⅡ水平隨年齡的增長而逐漸升高，與文獻報道[16]一致，可能與HP感染與否有關(guān)，隨著年齡的增長，HP感染率逐漸升高[17]，從而導致血清PGⅠ和PGⅡ水平升高。

本研究ROC曲線分析結(jié)果顯示，PGⅠ、PGⅡ和PRG判斷表觀健康者HP陽性的曲線下面積分別為0.712、0.825和0.799，敏感性分別為65.2%、79.1%和76.5%，特異性分別為71.0%、77.0%和76.0%。提示PGⅠ、PGⅡ和PGR在判斷HP陽性中有一定的價值，結(jié)合其他臨床指標或可避免對未感染人群進行不必要的內(nèi)鏡檢查[18]。方香玉等[19]建立了不同性別、不同年齡和不同HP感染狀態(tài)人群血清胃蛋白酶原參考區(qū)間，但臨床醫(yī)師據(jù)此進行HP感染的評估時，需同時進行胃蛋白酶原和HP檢測，增加了患者的負擔。本研究根據(jù)性別和年齡分層建立了自貢地區(qū)HP陰性表觀健康者血清PGⅠ和PGⅡ的參考區(qū)間，當高于參考區(qū)間時再進行HP和內(nèi)鏡檢查，可有效降低醫(yī)療成本。

綜上所述，本研究初步建立了自貢地區(qū)表觀健康成人血清PGⅠ、PGⅡ及PGR的參考區(qū)間。臨床醫(yī)師應(yīng)根據(jù)不同人群選擇對應(yīng)的參考區(qū)間。當血清胃蛋白酶原水平高于參考區(qū)間時，有必要進一步行HP和胃鏡等檢查。