胡進(jìn)平 陳 健 張金玉 任文陟

(吉林大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，長春 130062)

比格犬(Beagle)，又稱為米格魯獵兔犬。由于其具有性格溫順，適應(yīng)性強(qiáng)等優(yōu)良的特點，且在實驗結(jié)果上具有均一性、可重復(fù)性等特征，是世界上公認(rèn)的實驗用犬[1]。在生理學(xué)、毒理學(xué)和外科學(xué)等眾多學(xué)科中，比格犬均被廣泛應(yīng)用[2]。而比格犬的飼養(yǎng)環(huán)境則是根據(jù)實驗需求變化而變化，大多數(shù)為普通環(huán)境。為了更好地提供實驗環(huán)境，SPF級比格犬對于飼養(yǎng)環(huán)境的要求更加嚴(yán)格。由于不同的飼養(yǎng)環(huán)境會導(dǎo)致比格犬的血液學(xué)和生理生化指標(biāo)等相關(guān)參考值產(chǎn)生差異[3]。

本研究以SPF級比格犬作為研究對象，分析隨著月齡增長血液生化指標(biāo)的變化，并分析血液生化指標(biāo)不同月齡的變化及其原因，以此來對SPF級比格犬的基礎(chǔ)資料進(jìn)行填充，有利于SPF級比格犬的育種，并為有關(guān)疾病的預(yù)防提供理論依據(jù)，填充SPF級比格犬作為國際公認(rèn)的實驗用犬的血液相關(guān)指標(biāo)的數(shù)據(jù)庫。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

SPF級比格犬由青島博隆實驗動物有限公司(中國唯一的SPF級實驗用比格犬種群飼養(yǎng)基地)提供，嚴(yán)格按照SPF級要求進(jìn)行飼養(yǎng)。隨機(jī)選取健康且體質(zhì)量給出范圍的2、6和9月齡比格犬各12只用于后續(xù)樣本采集。

1.2 血液采集和分析

分別采集不同月齡SPF級比格犬的血樣。采血前，禁食12 h，在清醒不麻醉狀態(tài)下，于前肢靜脈采血10 mL，分裝于含有肝素鋰的抗凝采血管，作為生化指標(biāo)監(jiān)測使用。

實驗主要進(jìn)行的血液生化指標(biāo)包括：鉀(K，mmol/L)、鈉(Na，mmol/L)、氯(Cl，mmol/L)、鈣(Ca，mmol/L)、鎂(Mg，mmol/L)、無機(jī)磷(P，mmol/L)、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血清總蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、總膽紅素(TBIL)、血清堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LDH)、血清肌酸激酶(CK)、尿素(urea)、尿酸(UA)、血清總膽固醇(TC)、血清三酰甘油(TG)和空腹血糖(GLU)。

1.3 儀器和試劑

貝克曼庫爾特AU5800全自動生化分析儀(貝克曼庫爾特有限公司)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 血液電解質(zhì)離子濃度分析

不同月齡SPF級比格犬的血液電解質(zhì)濃度分析結(jié)果。如圖1A～C，鈉離子(Na+)濃度在9月齡最高(145.00 mmol/L)，與2月齡氯離子(Cl-)濃度(108.48 mmol/L)比較，6月齡(106.14 mmol/L)降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。9月齡趨于穩(wěn)定，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與2月齡鉀(K)和無機(jī)磷(P)比較，9月齡差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。鎂離子(Mg2+)含量不同月齡無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 血液肝功能指標(biāo)分析

如圖1D所示，在不同月齡中，血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)含量上下浮動，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.3 血液代謝指標(biāo)分析

如圖1F，尿酸(UA)的含量6月齡降低，9月齡上升，并與6月齡相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)?？偰懠t素(TBIL)含量沒有較大的波動。SPF級比格犬不同月齡的三酰甘油(TG)和空腹時血糖含量均處于一個平穩(wěn)狀態(tài)，不同月齡之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。如圖1G中所示，尿素(urea)含量在6月齡時達(dá)到5.73 mmol/L(5.43～6.87 mmol/L)，到9月齡時出現(xiàn)顯著性下降(P<0.05)。血清中總膽固醇(TC)含量6月齡呈上升趨勢，9月齡趨于平穩(wěn)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

注：A～C.血液電解質(zhì)離子濃度分析；D.血液肝功能指標(biāo)分析；E.血液蛋白含量分析；F.血液尿素和總膽紅素含量分析；G.血液代謝相關(guān)指標(biāo)分析；H.血液ALP、LDH、CK含量分析

3 討論

血清中電解質(zhì)的含量，是檢測心力衰竭和失水等的必需項目。不同月齡的檢測結(jié)果，鈉離子(Na+)含量最高，且隨著月齡的增加逐漸升高。鎂離子(Mg2+)含量在所有無機(jī)鹽中最低，且在不同月齡中沒有出現(xiàn)明顯變化[4]。根據(jù)這些無機(jī)鹽的變化可以適當(dāng)調(diào)整SPF級犬的飼養(yǎng)，適當(dāng)補(bǔ)充相應(yīng)的無機(jī)鹽能夠增加SPF級犬的健康程度，有利于其生長[5]。

血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)等酶的含量能夠快速準(zhǔn)確的反應(yīng)肝細(xì)胞是否發(fā)生損傷以及損傷的程度[6]。血清總蛋白(TP)包括了血清白蛋白(ALB)和球蛋白兩種，是能夠清楚反應(yīng)肝合成和儲存功能的指標(biāo)。白蛋白含量的下降表示肝合成能力出現(xiàn)問題[7-8]。血清堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LDH)和血清肌酸激酶(CK)等酶類的含量則能夠充分的反應(yīng)出動物機(jī)體的健康水平[9]。

肝和腎的分泌與排泄等功能則是通過總膽紅素(TBIL)和尿酸(UA)進(jìn)行的反應(yīng)[10]。膽固醇(TC)和三酰甘油(TG)是臨床上重要的生化指標(biāo)，三酰甘油是血液中十分必要的一種脂肪[11]。血糖(GLU)是指血液中的葡萄糖，是機(jī)體中相當(dāng)重要的成分，能夠保障機(jī)體中的能量來源，維持機(jī)體的運行[12]。不同月齡間的SPF級比格犬的血糖和三酰甘油的含量沒有明顯差異，SPF級比格犬在不同月齡中的健康狀態(tài)保持相對穩(wěn)定。

通過以上分析，不同月齡SPF級比格犬的血液生化指標(biāo)的分析，豐富了SPF級實驗用犬的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，重新考慮怎么描述SPF級比格犬的飼養(yǎng)以及環(huán)境，繼續(xù)維持均一性、可重復(fù)性的優(yōu)良特點，能夠更加健康，避免疾病的侵害。