范良志
(福建省福鼎市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 福建寧德 355200)
山羊傳染性胸膜肺炎又稱“爛肺病”、山羊支原體肺炎,該病主要是由山羊支原體山羊肺炎亞種引起的,其臨床特征主要表現(xiàn)咳嗽、發(fā)熱、胸和胸膜出現(xiàn)漿液性和纖維素性肺炎,發(fā)病過程急性、慢性均有,臨床上病死率較高,部分養(yǎng)殖場死亡率及淘汰率高達50%以上,該病對山羊產(chǎn)業(yè)的發(fā)展危害大。因此,本文就山羊傳染性胸膜肺炎相關(guān)問題進行探討,并提出綜合防治措施,以期為廣大山羊養(yǎng)殖戶提供防治經(jīng)驗借鑒。
福鼎市某羊場存欄山羊730 只,其中:種公羊15 只,種母羊270 只。2020 年12 月間從外地購入南江黃羊成年種公羊1 只,后備母羊10 只,近距離隔離在獨立羊舍,1 周內(nèi)未見異常。為便于管理,將新引種的山羊并入原有羊舍同群飼養(yǎng),3d 后發(fā)現(xiàn)引種的種公羊發(fā)病,接著羊群中部分羊只發(fā)病,病初體溫在40~41.7℃之間,并伴有咳嗽、流漿液性鼻液等癥狀。按照感冒治療方案給予注射氨基比林+慶大霉素治療,不見好轉(zhuǎn)。1 周后,發(fā)病羊只數(shù)量猛增,對病羊進行肺部聽診出現(xiàn)支氣管呼吸音,叩診肺部出現(xiàn)濁音,病羊可視黏膜發(fā)紺,一些病羊出現(xiàn)腹瀉,懷孕后期母羊有流產(chǎn)現(xiàn)象,部分病羊死亡時口鼻流血。到2021 年1 月底,從發(fā)病初始20 多天,共有154 只羊發(fā)病,發(fā)病率為20.8%;死亡27 只,死亡率為3.6%。本次發(fā)病造成了較大的經(jīng)濟損失,但筆者發(fā)現(xiàn)年齡較大的山羊發(fā)病率低,治愈率也高。
根據(jù)病程和臨床癥狀可分為最急性、急性和慢性。
1)最急性型。在最急性期,病羊體溫最高可達40.5~41.7℃之間,厭食,呼吸急促且困難,往往會不由自主發(fā)出哀鳴,隨時間延長而出現(xiàn)一系列肺炎癥狀,如咳嗽、流漿性帶血的鼻液、呼吸不利,肺泡呼吸音呈捻發(fā)音,肺部有濁音等。隨著病情不斷發(fā)展,甚至有部分病羊臥地不起,并出現(xiàn)全身顫抖、難以呼吸、可視黏膜發(fā)紺、目光呆滯等癥狀,在呻吟聲中死亡?;疾『?,最急性型病程在5d 內(nèi),有的短至1~2d。
2)急性型。此型最為常見。病初體溫升高,繼之出現(xiàn)短而濕的咳嗽,伴有膿性或漿性鼻漏,口內(nèi)角及鼻唇部出現(xiàn)帶泡沫的液體,并發(fā)出呻吟聲。4~5d 后,鼻液轉(zhuǎn)為黏液-膿性并呈鐵銹色,高熱不退,食欲銳減,呼吸困難,眼瞼腫脹,流淚,眼有黏液-膿性分泌物。有的出現(xiàn)腹瀉、口腔潰瘍現(xiàn)象,唇、乳房等部皮膚紅疹塊,部分懷孕母羊出現(xiàn)流產(chǎn)現(xiàn)象。嚴重的病羊出現(xiàn)臥地不起、器官衰竭。瀕臨死亡時,體溫異常下降,最后衰竭死亡,未死病羊轉(zhuǎn)為慢性型。
3)慢性型。一般由急性型轉(zhuǎn)化而來,同時存在腹瀉、咳嗽、流涕現(xiàn)象,體溫最高可達40℃,被毛雜亂、病羊消瘦。如果管理不善,病情會趨向嚴重或者引發(fā)其他并發(fā)癥而導致死亡;而加強飼養(yǎng)管理,創(chuàng)造良好的飼養(yǎng)環(huán)境時,能夠逐漸恢復健康。
根據(jù)臨床癥狀,對典型癥狀的病死羊?qū)嵤┙馄拾l(fā)現(xiàn),病變多集中在胸部,呈現(xiàn)纖維素蛋白性肺炎和胸膜炎。進行解剖時,會發(fā)現(xiàn)腹腔中存在腐敗臭味或異樣氣味,胸腔中存在積液及一些腐敗的組織,腐敗組織的顏色以黃白或黃色為主,一旦接觸空氣,會凝結(jié)成塊,被稱作纖維素蛋白凝塊。病羊受到病菌侵害時,一般損害的部位為肺的尖葉、心葉和膈葉上,呈氣腫狀,切面出現(xiàn)大理石紋樣,其表面呈現(xiàn)紅色或灰色,有纖維蛋白液滲出,肺小葉間距較寬,支氣管和細支氣管間存有大量白色泡沫樣液體。胸膜變厚而粗糙,與心包或肋骨粘連,縱膈淋巴結(jié)與淋巴結(jié)腫大并能看到出血點,膽囊變大。病羊的癥狀持續(xù)一段時間后,會出現(xiàn)包囊化的壞死灶、肝變區(qū)組織增生、病例肺等。
由于本病例中有流產(chǎn)和腹瀉等羊小反芻獸疫和布魯氏桿菌病臨床癥狀,特采集未發(fā)病、發(fā)病及死亡羊只口鼻棉拭子及全血樣品10 份開展實驗室診斷工作。如果PCR 檢測結(jié)果羊小反芻獸疫或羊布魯氏桿菌病陽性,可判定羊小反芻獸疫(列動物一類傳染?。┗蜓虿剪斒蠗U菌?。袆游锒悅魅静。┮伤撇±?,臨床上均不得用藥治療,應立即封鎖羊群,同時上報上級動物疫病預防控制中心和同級人民政府,并按照羊小反芻獸疫或羊布魯氏桿菌病處置規(guī)范做好消毒、撲殺和無害化處理等處置工作。
天隆NP968-C 核酸提取儀、TECAN F50 酶標儀、電熱恒溫培養(yǎng)箱、耶拿qTOWER3g 熒光定量PCR 儀、臺式高速離心機、BRAND 微量移液器等實驗室儀器設(shè)備。
1)直接涂片檢查。病原學鑒定:無菌操作取病死羊肺組織或胸水作涂片用瑞特氏染色,可見微小粒點,用血液瓊脂培養(yǎng)檢查僅能見到極小點狀生長物,可判定為絲狀支原體。
根據(jù)臨床癥狀、剖檢變化和實驗室檢驗,可診斷為羊傳染性胸膜肺炎,進一步確診可依據(jù)《山羊傳染性胸膜肺炎診斷技術(shù)》(GB/T34720—2017)做羊血清學PCR 檢測。
2)小反芻獸疫抗體和布魯氏菌病抗體ELISA 檢測。按照北極世紀元亨、廣州悅洋生物技術(shù)有限公司使用說明書提供方法,同時結(jié)合《動物布魯氏菌病診斷技術(shù)》(GB/T18646—2018)及《小反芻獸疫診斷技術(shù)》(GB/T27982—2011)進行檢測。為防止?jié)撛诟腥緮U散風險,本實驗需在生物安全柜中進行,同時實驗人員需做好生物安全防護措施。
3)小反芻獸疫病毒檢測。①核酸提取。具體方法如下:在16T每板的86 孔板的第1 列和第7 列加入20μ L 蛋白酶K、200μ L 離心后的樣品上清液,陰性對照、陽性對照;按照提取試劑盒中規(guī)定提取程序進行自動提取;自動提取工作完成后,第6 列及第12 列中的液體即為目標RNA。②小反芻獸疫病毒擴增。從試劑盒中取出相應的PCR 反應液、Taq 酶;在室溫下融化后,2,000rpm 離心5s。設(shè)所需PCR 管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照),每管反應體系為RT-PCR 反應液15μ L,Taq 酶0.25μ L,10μ L 目標RNA 液體。向各管中分別加入核酸提取步驟中所得目標RNA 液體10μ L,并標記好序號及陰陽性對照,瞬間離心5s,將PCR 管按順序放入PCR 熒光檢測儀內(nèi)。設(shè)定循環(huán)程序為42℃、30min;92℃、3min;循環(huán)92℃、3min,45℃、30s,72℃、1min,共5 次;循環(huán)92℃、10s;60℃、30s,共40 次,每次循環(huán)第二步(60℃、30s)收集熒光信號。③布魯氏菌病PCR 檢測:由于該市病原學實驗室未配備負壓空氣凈化設(shè)備,不具備開展布魯氏菌病PCR 檢測資質(zhì)。將樣品進行冰封打包后委托寧德市動物疫病預防控制中心病原學(負壓)實驗室進行布魯氏菌病PCR 檢測。
陽性對照CT 值≤28,陰性對照無CT 判定為試驗結(jié)果成立。被檢樣品CT 值≤30 為陽性,無CT 值為陰性,CT 值>30 為可疑,建議重做。
羊小反芻獸疫抗體30 份,28 份陽性;羊小反芻獸疫RT-PCR檢測30 份均為陰性;布魯氏菌病抗體30 份均為陰性;布魯氏菌病RT-PCR 檢測30 份,均為陰性。
經(jīng)實驗室檢測判定,該羊場可排除小反芻獸疫及布魯氏菌病發(fā)病可能。
全場用麻杏石甘湯口服飲水,用來解表,具有辛涼宣泄、清肺平喘的功效,方劑組成是麻黃、杏仁、石膏、甘草,用于治療風熱之邪的外感,病邪集聚于患羊肺內(nèi),患羊出現(xiàn)熱邪壅肺的表現(xiàn),本方劑止咳平喘,宣肺化痰,可以抑制本病發(fā)展。
對每只病羊每天胸腔注射一次0.1mL/kg·bw 的5%恩諾沙星注射液,還可以交替使用林可霉素、多西環(huán)素、氟苯尼考注射液,一個治療療程為5~7d。對于處于危急狀態(tài)的病羊,靜脈注射1 次/d,10%葡萄糖注射液200mL 加5%VC 注射液5mL,連用3~5d。當肺炎初期,為促進分泌物吸收和減輕肺部水腫,按0.1mL/kg·bw 肌內(nèi)注射呋塞米注射液,提高治療效果。
1)接種疫苗是預防山羊感染傳染性胸膜肺炎最直接、最有效的手段。當羊群中出現(xiàn)傳染性胸膜肺炎病例時,應當對未發(fā)病的山羊緊急免疫接種山羊傳染性胸膜肺炎滅活疫苗,接種后產(chǎn)生免疫抗體的時間約為兩周,產(chǎn)生抗體后可迅速阻斷病源擴散,并達到1年的免疫效果。為確保羊群健康,應系統(tǒng)建立免疫程序,做好口蹄疫、小反芻獸疫和山羊傳染性胸膜肺炎等病種的免疫注射。
2)重視外源輸入性疫情。盡量自繁自養(yǎng),如果必須引種,春季和初秋是最好的引種季節(jié)。引種后,要進行為期一個月的隔離觀察,觀察期內(nèi)做好檢疫和疫病監(jiān)測,確定健康方可并群飼養(yǎng)。當引種羊在隔離期間出現(xiàn)疾病時,必須馬上給藥進行治療,防止疫情傳染擴散。
3)注意養(yǎng)殖環(huán)境。保持羊舍通風和清潔衛(wèi)生,重視羊舍的消毒和排泄物清理工作。注意冬季和早春防寒保暖,尤其是陰冷潮濕的天氣,要對羊群的健康狀況進行關(guān)注和全程監(jiān)測。一旦發(fā)現(xiàn)羊群出現(xiàn)發(fā)熱、咳嗽、流鼻涕等癥狀,務(wù)必要高度重視,盡快開展檢測和治療。
山羊傳染性胸膜肺炎在南方冬末早春陰冷潮濕氣候多發(fā),尤其是養(yǎng)殖規(guī)模小或散養(yǎng)戶日常防寒保暖措施不健全的養(yǎng)殖場,應加強飼養(yǎng)管理,注意科學規(guī)范地引種,做好引種隔離和防檢疫工作,加強疫病監(jiān)控,為羊群營造良好的生長環(huán)境。本文診斷方法和防治措施已成功治愈多起病例,均取得成效,值得推廣應用。