◎ 王 森，李國(guó)烈，陳緯成

（南充農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心，四川 南充 637000）

唑螨酯化學(xué)名稱為(E)-α-(1,3-二甲基-5-苯氧基吡唑-4-基亞甲基氨基氧)對(duì)甲苯甲酸異丁酯，又名Kiron、Ortus、殺螨王和霸螨靈[1]。唑螨酯作為廣譜殺螨劑，速效性好，持效期長(zhǎng)，與其他藥物無(wú)交互抗性，主要用于防治紅蜘蛛、銹壁虱等病害[2]。

桑葚，又名桑果，富含維生素、氨基酸和人體所需的微量元素，既可直接食用，也可用于加工制作桑果汁、桑果酒等。近年來(lái)，桑果市場(chǎng)發(fā)展前景廣闊[3-5]。在桑果生產(chǎn)中，主要通過使用化學(xué)藥物來(lái)防治病蟲害，不規(guī)范的使用化學(xué)藥物可能會(huì)造成桑葚中農(nóng)藥殘留超標(biāo)，危害人體健康[6]。朱興江等[7]采用高效液相色譜法測(cè)定了柑桔和白菜中唑螨酯的殘留量。李國(guó)烈等[8]報(bào)道了桑葚中醚菌酯等藥物的殘留測(cè)定。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Waters Xevo TQS超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀；Sigma3-18KS離心機(jī)；Mettler ToledoML802分析天平；IKA Vortex Genius 旋渦混合器；安捷倫石墨化炭黑氨基復(fù)合柱500 mg/6 mL。

唑螨酯標(biāo)準(zhǔn)品；甲醇和乙腈（質(zhì)譜級(jí)，霍尼韋爾）；甲苯（色譜級(jí)，霍尼韋爾），甲酸（色譜級(jí)，阿拉?。怀兯ㄇ际希?。

1.2 樣品前處理

稱取10 g樣品（精確至0.05 g）至50 mL離心管中，加入5 g氯化鈉、1顆均質(zhì)子，再加入20.00 mL乙腈，渦旋振蕩提取 15 min，高速離心 5 min（6 000 r·min-1），吸取上清液10.00 mL過柱（預(yù)先用10 mL乙腈＋甲苯（75+25）活化小柱，棄去廢液），再用20 mL乙腈＋甲苯（75+25）洗脫，收集所有流出液，40 ℃水浴旋蒸至近干，用5.00 mL 85%甲醇溶液溶解殘?jiān)瑴u旋混勻后過濾膜，裝入樣品瓶待檢測(cè)。

1.3 儀器條件

色譜柱：Waters Xbridge C18（3.0 mm×50 mm×3.5 μm）。采用0.1%甲酸乙腈溶液（A）、0.1%甲酸水溶液（B）作為流動(dòng)相，梯度洗脫程序見表1。柱溫：35 ℃；進(jìn)樣量：1.00 μL；掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）；霧化氣流速：1 200 L·h-1；錐孔氣流速：200 L·h-1；碰撞氣流速：0.10 mL·min-1；鞘氣溫度為500 ℃。其他相關(guān)參數(shù)見表2。

表1 流動(dòng)相及梯度洗脫程序表

表2 質(zhì)譜參數(shù)表

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢測(cè)限

取唑螨酯標(biāo)準(zhǔn)品 1 mL（1 000 μg·mL-1）于 10 mL容量瓶，用色譜級(jí)甲醇定容，得100 μg·mL-1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，-20 ℃保存，3個(gè)月內(nèi)可使用。根據(jù)需要，將儲(chǔ)備液用桑葉空白基質(zhì)配制為一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照1.3中儀器條件進(jìn)行分析。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、對(duì)應(yīng)色譜峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過添加一系列已知質(zhì)量濃度的樣品進(jìn)行測(cè)定，以3倍信噪比（S/N=3）時(shí)的樣品質(zhì)量濃度為檢出限。

1.5 回收率和精密度

在桑葚空白樣品中，選擇 1 μg·kg-1、10 μg·kg-1、100 μg·kg-13個(gè)濃度的添加水平進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，每個(gè)水平進(jìn)行6個(gè)平行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算回收率和精密度。

1.6 基質(zhì)效應(yīng)

使用85%甲醇水溶液配制的標(biāo)液稱為試劑標(biāo)液（A），使用桑葚空白基質(zhì)配制的標(biāo)液稱為基質(zhì)標(biāo)液（B），以兩者峰面積比值來(lái)評(píng)價(jià)基質(zhì)效應(yīng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法選擇性

桑葚樣品經(jīng)前處理、上機(jī)分析，得色譜圖見圖1-圖4。結(jié)果表明，采取該方法檢測(cè)樣品凈化效果好、基質(zhì)干擾小、峰形及分離度良好，同時(shí)可獲得較強(qiáng)的信號(hào)響應(yīng)。

圖1 唑螨酯標(biāo)液圖譜（1.00 μg·L-1，試劑標(biāo)）圖

圖4 唑螨酯加標(biāo)樣品圖譜（1.00 μg·kg-1）圖

2.2 線性范圍和檢測(cè)限

該試驗(yàn)條件下，唑螨酯在質(zhì)量濃度1.00～100.00 μg·L-1時(shí)線性關(guān)系良好，標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=2.042 55×107x+2 719.46，R2=0.999。 檢 測(cè) 限（S/N=3）為 0.25 μg·kg-1，以 4倍檢測(cè)限為定量限，則定量限為 1.00 μg·kg-1[9]。

2.3 方法回收率和精密度

在 1 μg·kg-1、10 μg·kg-1、100 μg·kg-1共 3 個(gè)添加濃度水平下，唑螨酯的回收率為83.9%～89.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為3.13%～4.31%，見表3。結(jié)果表明，該方法具有較高的回收率和準(zhǔn)確度。日內(nèi)精密度RSD（n=6）為2.99%～4.39%，日間精密度RSD（n=3）為2.76%～3.26%，見表4。結(jié)果表明，該方法具有很好的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性，滿足質(zhì)量控制要求。

表3 方法回收率表（n=6）

表4 方法精密度表（n=6）

2.4 基質(zhì)效應(yīng)

基質(zhì)效應(yīng)結(jié)果見表5。在不同濃度條件下，唑螨酯在桑葚中的基質(zhì)效應(yīng)分別為80.38%～84.50%，即基質(zhì)抑制作用。因此為了提高方法的準(zhǔn)確性和靈敏度，采用本方法測(cè)定桑葚中的唑螨酯時(shí)應(yīng)采用桑葚基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行定量。

表5 方法基質(zhì)效應(yīng)表（n=5）

圖2 桑葚空白樣品圖譜圖

圖3 唑螨酯標(biāo)液圖譜（1.00 μg·L-1，桑葚基質(zhì)標(biāo)）圖

3 結(jié)論

本試驗(yàn)建立了測(cè)定桑葚中唑螨酯殘留量的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法，樣品經(jīng)乙腈提取，固相萃取小柱凈化，超高效液相色譜分離，質(zhì)譜多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式檢測(cè)，外標(biāo)法定量。方法檢出限為0.25 μg·kg-1，定量限為 1.00 μg·kg-1，符合殘留限量的要求（0.1 mg·kg-1），平均回收率為83.9%～89.2%，精密度為2.76%～4.39%，適用于桑葚中唑螨酯殘留量的測(cè)定。