亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        四川規(guī)模種豬場(chǎng)5種主要疫病的病原學(xué)檢測(cè)

        2022-01-20 05:44:04梁璐琪周莉媛何慶雄周哲學(xué)
        四川畜牧獸醫(yī) 2022年1期
        關(guān)鍵詞:種豬場(chǎng)頭份耳病

        邵 靚,李 春,梁璐琪,周莉媛,何慶雄,周哲學(xué)*

        (1.四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,四川 成都 610041;2.四川省綿陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,四川 綿陽(yáng) 621000)

        非洲豬瘟、口蹄疫、豬瘟、豬偽狂犬病、豬藍(lán)耳病是我國(guó)當(dāng)前規(guī)模化豬場(chǎng)危害較為嚴(yán)重的疫病,給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。2018 年8月我國(guó)遼寧省沈陽(yáng)市確診第一起非洲豬瘟疫情,并于短時(shí)間內(nèi)蔓延至全國(guó),給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成了毀滅性的打擊,該病目前尚無(wú)有效的治療方法和疫苗。2019年以來(lái),非洲豬瘟病毒出現(xiàn)了多種變異株,與2018 年傳入的非洲豬瘟毒株相比,變異株的基因組序列、臨床癥狀、致病力等均發(fā)生了明顯變化,進(jìn)一步增加了防控難度。口蹄疫是危害世界各國(guó)養(yǎng)殖業(yè)最嚴(yán)重的疫病之一,傳播速度快、傳播途徑廣,仔豬死亡率極高,疫區(qū)發(fā)病率可達(dá)100%[1]。豬瘟、豬偽狂犬病、豬藍(lán)耳病不僅引起種豬繁殖障礙,還會(huì)導(dǎo)致豬體免疫抑制,加重其他疫病的繼發(fā)感染,干擾疫苗免疫效果。為貫徹落實(shí)《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃(2012—2020 年)》,近年來(lái),四川省積極探索規(guī)模種豬場(chǎng)主要疫病的凈化工作,為摸清規(guī)模種豬場(chǎng)主要疫病種類和感染情況,掌握疫病流行特點(diǎn)和趨勢(shì),評(píng)估凈化效果,本研究于2021 年上半年對(duì)成都、綿陽(yáng)、達(dá)州、眉山、遂寧5 個(gè)市的8 個(gè)規(guī)模種豬場(chǎng)進(jìn)行了非洲豬瘟、口蹄疫、豬瘟、豬偽狂犬病、豬藍(lán)耳病5種主要疫病的病原學(xué)檢測(cè)。

        1 材料

        1.1 主要儀器設(shè)備 組織勻漿儀購(gòu)自美國(guó)MP公司;核酸自動(dòng)提取儀購(gòu)自天隆生物科技有限公司;CFX96 熒光定量PCR 儀購(gòu)自美國(guó)伯樂(lè)公司。

        1.2 檢測(cè)試劑 磁珠法核酸提取試劑盒購(gòu)自天隆生物科技有限公司;非洲豬瘟病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒購(gòu)自哈爾濱國(guó)生生物科技股份有限公司;口蹄疫病毒(A/O/Asia I)熒光定量RT-PCR檢測(cè)試劑盒購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所;豬瘟病毒野毒株實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 試劑盒,豬偽狂犬病毒(gE基因)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒,豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒歐洲株與美洲株雙重實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 檢測(cè)試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒美洲型經(jīng)典株與高致病性變異株雙重實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 檢測(cè)試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征(類NADC-30 毒株)實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 檢測(cè)試劑盒,均購(gòu)自北京世紀(jì)元亨公司。

        1.3 樣品 在成都、綿陽(yáng)、達(dá)州、眉山、遂寧等規(guī)模化程度高及整體生物安全水平好的地區(qū),針對(duì)已開(kāi)展動(dòng)物疫病凈化的規(guī)模種豬場(chǎng)進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)。每個(gè)地區(qū)至少選擇1 個(gè)種豬場(chǎng),共選擇了8個(gè)種豬場(chǎng)(綿陽(yáng)3個(gè),達(dá)州2個(gè),成都、眉山、遂寧各1 個(gè)),分別采集場(chǎng)內(nèi)發(fā)病死亡豬的肺、肝、脾、腎以及其他發(fā)生明顯病變的組織,每份組織大小不超過(guò)5 cm×5 cm×5 cm,單獨(dú)用小自封袋包裝并注明編號(hào)和組織名稱。同一頭豬的組織放在一個(gè)大自封袋內(nèi),-20 ℃保存?zhèn)溆谩R活^豬的組織作為1頭份,共采集組織樣品294頭份。

        2 方法

        2.1 樣品前處理 將1 頭份樣品的每種類型組織用無(wú)菌剪刀分別剪取約0.05 g,混合后放入裂解管,加入1 mL滅菌PBS(pH 7.2)和陶瓷珠,使用組織勻漿儀勻漿1 min,取出后以8 000 r/min 離心2 min,取上清200 μL進(jìn)行總核酸提取。

        2.2 核酸提取 使用磁珠法核酸提取試劑盒和核酸自動(dòng)提取儀進(jìn)行總核酸提取。提取程序按照說(shuō)明書導(dǎo)入。提取完成后,總核酸置-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

        2.3 5種病毒的實(shí)時(shí)熒光RT-PCR/PCR檢測(cè) 使用各病毒對(duì)應(yīng)的實(shí)時(shí)熒光RT-PCR/PCR 檢測(cè)試劑盒進(jìn)行核酸檢測(cè),操作步驟按照各試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。豬藍(lán)耳病首次檢測(cè)采用豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 檢測(cè)試劑盒;分型檢測(cè)依次采用豬繁殖與呼吸綜合征病毒歐洲株與美洲株雙重實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒美洲型經(jīng)典株與高致病性變異株雙重實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 檢測(cè)試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征(類NADC-30 毒株)實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒。

        2.4 結(jié)果判定 根據(jù)各試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行結(jié)果判定。陽(yáng)性對(duì)照Ct值≤陽(yáng)性臨界值并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線,陰性對(duì)照無(wú)Ct 值且無(wú)特定擴(kuò)增曲線,試驗(yàn)結(jié)果成立。樣品Ct值≤陽(yáng)性臨界值并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線,判為陽(yáng)性;陽(yáng)性臨界值<樣品Ct值<陰性臨界值并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線,判為可疑,需重新取樣提取總核酸,再次擴(kuò)增后進(jìn)行結(jié)果判定,如結(jié)果為陽(yáng)性或仍是可疑,則判為陽(yáng)性;樣品Ct值≥陰性臨界值或未出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線時(shí),判為陰性。

        3 結(jié)果

        3.1 5種病毒的病原檢測(cè)結(jié)果 所有檢測(cè)的陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照均成立。

        從表1 可知,294 頭份樣品中,非洲豬瘟、口蹄疫、豬瘟、豬偽狂犬病病原檢測(cè)結(jié)果均為陰性,豬藍(lán)耳病檢出14 頭份陽(yáng)性,陽(yáng)性率為4.76%(14/294)。豬藍(lán)耳病陽(yáng)性組織樣品分布于3個(gè)種豬場(chǎng)(眉山1 個(gè)、綿陽(yáng)2 個(gè)),3 個(gè)場(chǎng)豬藍(lán)耳病陽(yáng)性率分別為12.5%、10%、19.35%。

        表1 規(guī)模種豬場(chǎng)5種主要疫病的病原檢測(cè)結(jié)果

        3.2 豬藍(lán)耳病分型檢測(cè)結(jié)果 將14頭份豬藍(lán)耳病陽(yáng)性組織樣品采用熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒進(jìn)行進(jìn)一步分型鑒定,結(jié)果顯示:綿陽(yáng)2個(gè)場(chǎng)的9頭份陽(yáng)性均為美洲型經(jīng)典株;眉山1 個(gè)場(chǎng)的5 頭份陽(yáng)性樣品中,3 頭份為類NADC-30 毒株,2 頭份為美洲型經(jīng)典株與類NADC-30 毒株混合感染的毒株。以上結(jié)果表明,四川省目前流行的豬藍(lán)耳病毒株以美洲型經(jīng)典株與類NADC-30 毒株為主,且個(gè)別地區(qū)存在上述兩種毒株混合感染的情況。

        4 討論與建議

        隨著社會(huì)的不斷發(fā)展,我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)逐漸實(shí)現(xiàn)規(guī)?;?、集約化。近年來(lái),從對(duì)全國(guó)重點(diǎn)原種豬場(chǎng)主要疫病的監(jiān)測(cè)情況來(lái)看,當(dāng)前我國(guó)種豬場(chǎng)呈現(xiàn)病原混合感染多、疫病流行日益嚴(yán)重和復(fù)雜的趨勢(shì),尤其是2018 年以來(lái)非洲豬瘟的傳入,進(jìn)一步加劇了疫病防控的嚴(yán)峻形勢(shì)。凈化種豬動(dòng)物疫病,降低病原傳播風(fēng)險(xiǎn),有利于生豬產(chǎn)業(yè)健康穩(wěn)定發(fā)展,對(duì)解決種業(yè)發(fā)展(種豬業(yè))“卡脖子”關(guān)鍵技術(shù)難題具有重大意義。我國(guó)口蹄疫防控參照OIE 推薦的“口蹄疫漸進(jìn)性控制計(jì)劃(PCPFMD)”路線圖實(shí)施,按照“因地制宜、分區(qū)防治、分型控制”的管理原則,大力推進(jìn)口蹄疫綜合防制策略。依據(jù)PCP-FMD 的評(píng)估規(guī)定,我國(guó)目前處于PCP 的第3 階段,即實(shí)行根除流行的控制措施、減少病毒循環(huán)[2]。當(dāng)前,全國(guó)原種豬場(chǎng)豬偽狂犬病的凈化已初見(jiàn)成效,但是部分場(chǎng)個(gè)體陽(yáng)性率仍較高,短期內(nèi)凈化還存在一定難度。大多數(shù)原種豬場(chǎng)的豬瘟已得到了有效控制甚至達(dá)到了免疫凈化,但要進(jìn)一步提升防控效果,并在全部種豬場(chǎng)實(shí)現(xiàn)豬瘟凈化,仍面臨著政策、經(jīng)濟(jì)、技術(shù)等層面的諸多制約因素。原種豬場(chǎng)豬藍(lán)耳病在2015~2016 年出現(xiàn)反彈,與類NADC-30 毒株的傳入時(shí)間相吻合,使得豬藍(lán)耳病的防控形勢(shì)更趨復(fù)雜[3]。

        本研究對(duì)四川省內(nèi)5個(gè)市的8個(gè)規(guī)模種豬場(chǎng)開(kāi)展了非洲豬瘟、口蹄疫、豬瘟、豬偽狂犬病、豬藍(lán)耳病5 種主要疫病的病原學(xué)檢測(cè),為全省科學(xué)開(kāi)展種豬疫病的防控與凈化提供了技術(shù)支撐。從檢測(cè)結(jié)果來(lái)看,四川省規(guī)模種豬場(chǎng)主要疫病凈化工作取得了初步成效,但個(gè)別地區(qū)還存在豬藍(lán)耳病感染,建議各地在已有凈化工作的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步完善落實(shí)種豬疫病防控措施,加大政策與技術(shù)支持力度,從種豬源頭控制動(dòng)物疫病?!?/p>

        猜你喜歡
        種豬場(chǎng)頭份耳病
        中國(guó)種豬場(chǎng)引種指南電子地圖
        《中國(guó)種豬場(chǎng)引種指南》手冊(cè)2022 版征集
        《中國(guó)種豬場(chǎng)引種指南》手冊(cè)2022 版征集
        《中國(guó)種豬場(chǎng)引種指南》手冊(cè)2022 版征集
        耳病治鼻,事出有因
        中老年保健(2021年4期)2021-08-22 07:07:22
        秋季要注射疫苗防豬患乙腦
        豬藍(lán)耳病的防控
        廣東飼料(2016年2期)2016-12-01 03:43:08
        一例高致病性豬藍(lán)耳病的診治
        高致病性藍(lán)耳病的診斷和治療
        亚洲中文久久精品无码ww16| 韩国av一区二区三区不卡| 99在线精品视频在线观看| 无码久久精品国产亚洲av影片| 国产自在自线午夜精品视频在 | 最新国产av网址大全| av免费不卡一区二区| 白丝兔女郎m开腿sm调教室| 伊人色综合视频一区二区三区 | 亚洲av一区二区在线| 国产av天堂亚洲国产av天堂| 综合无码一区二区三区| 亚洲一区二区三区精品网| 人妻少妇偷人精品视频| 国产aⅴ无码专区亚洲av| 性欧美大战久久久久久久久| 亚洲国产高清美女在线观看| 精品人妻码一区二区三区红楼视频 | 亚洲女同成av人片在线观看| 日韩一区二区av伦理| 精品综合久久久久久888蜜芽 | 91精品一区国产高清在线gif| 亚洲最大av资源站无码av网址| 加勒比黑人在线| 97人妻中文字幕总站| 99无码熟妇丰满人妻啪啪| 精品国产制服丝袜高跟| 中文字幕一区,二区,三区 | 久久婷婷五月综合97色直播| 精品福利视频一区二区三区 | 四虎成人精品在永久免费| 欧美人与动人物牲交免费观看| 国产av天堂亚洲国产av麻豆| 在线国人免费视频播放| 高清不卡一区二区三区| 亚洲日韩一区二区一无码| 永久免费看黄在线观看| 国产中文三级全黄| 国产激情з∠视频一区二区| 97人妻蜜臀中文字幕| 色中文字幕在线观看视频|