李玉琴，俄洛吉，鞏海鳳，汪玉鳳，曾湘暉

青海省人民醫(yī)院產(chǎn)科，西寧 810000

甲狀腺功能亢進(簡稱甲亢)是一種常見的內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病，主要由甲狀腺激素合成和分泌過多引起[1]，其發(fā)病率近年來呈上升趨勢，女性患病率高于男性，尤其是妊娠期女性患病率較高。妊娠合并甲亢常造成子代發(fā)育異常，甚至出現(xiàn)早產(chǎn)、流產(chǎn)以及胎兒畸形等不良結(jié)局[2-3]。研究發(fā)現(xiàn)，妊娠期合并甲亢常造成子代腎臟損傷，且與甲亢程度有關(guān)[4]。地黃首次記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有清熱解毒、養(yǎng)陰生津之功效，研究發(fā)現(xiàn)，加味杞菊地黃湯可降低妊娠期高血壓-子癇前期女性血壓水平，減輕臨床癥狀，降低母嬰不良結(jié)局發(fā)生率[5]。參麥地黃湯可有效改善妊娠合并糖尿病患者的血糖和血脂代謝紊亂，降低不良妊娠結(jié)局的發(fā)生率[6]。地黃多糖是從地黃中提取的主要活性成分，具有抗氧化、抗腫瘤和提高免疫力等多種藥理學(xué)活性。研究發(fā)現(xiàn)，地黃多糖可減輕腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能損傷[7]，還可通過活化自然殺傷(NK)細(xì)胞，抑制結(jié)腸癌的生長[8]。此外，F(xiàn)an等[9]發(fā)現(xiàn)，地黃多糖可使白血病細(xì)胞K562阻滯于G0/G1期，并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制細(xì)胞增殖?；诘攸S對妊娠期伴發(fā)其他疾病的女性及其后代均具有改善作用，且地黃的主要成分地黃多糖在多種疾病中具有保護作用，本研究建立了妊娠期甲亢小鼠模型，探討了地黃多糖對妊娠合并甲亢小鼠癥狀的緩解作用和對子代腎損傷的保護作用及其可能的機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 8周齡SPF級雌性昆明小鼠60只，體重20~22 g，雄性昆明小鼠30只，體重22~24 g，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司[許可證號：SCXK(京)2018-0001]。飼養(yǎng)環(huán)境為：溫度18~25 ℃，相對濕度50%~70%，1:1明暗交替，自由飲食飲水。實驗過程符合國家及單位有關(guān)動物管理和使用的規(guī)定。

1.2 試劑與儀器 地黃多糖(純度≥90%)購自河南同仁堂；左甲狀腺素鈉購自德國Merck Serono公司；游離三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine，F(xiàn)T3)、游離甲狀腺素(free thyroxine，F(xiàn)T4)、促甲狀腺激素(thyroid stimulating hormone，TSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)、肌酐(creatinine，Cr)和血尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)試劑盒購自南京建成生物工程研究所；白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)和IL-18試劑盒購自美國R&D公司；兔抗鼠核因子E2相關(guān)因子2(Nuclear factor E2related factor2，Nrf2)、血紅素氧合酶1(heme oxygenase-1，HO-1)、Nod樣受體蛋白3(Nod-like receptor protein3，NLRP3)抗體購自英國Abcam公司；多功能酶標(biāo)儀購自美國伯騰儀器有限公司。

1.3 模型制備 甲亢模型制備參考文獻[10]：將60只雌鼠隨機分為正常組、模型組、陽性對照組、地黃多糖低劑量組和地黃多糖高劑量組(n=12)。除正常組雌鼠外，其余組雌鼠每天以150 μg/100 g左甲狀腺素鈉灌胃，1次/d，連續(xù)21 d，正常組雌鼠以同體積生理鹽水灌胃，1次/d，連續(xù)21 d。左甲狀腺素鈉灌胃第8天開始，陽性對照組雌鼠灌胃左甲狀腺素鈉4 h后，給予甲巰咪唑5 mg/kg灌胃治療，地黃多糖低、高劑量組雌鼠灌胃左甲狀腺素鈉4 h后，分別給予20和40 mg/kg地黃多糖灌胃，正常組和模型組雌鼠同體積生理鹽水灌胃，1次/d。

第21天下午17:00時，將60只雌鼠與30只雄鼠按2:1比例合籠，次日早晨雌鼠陰道口出現(xiàn)白色米粒大小的陰栓為受孕成功，記為受孕0天。各組雌鼠繼續(xù)藥物灌胃，直至分娩。各組模型制備成功例數(shù)為：正常組及模型組各12只，陽性對照組10只，地黃多糖低、高劑量組各11只。

1.4 ELISA法檢測母鼠血清中FT3、FT4和TSH含量 雌鼠自然分娩后，稱取各組母鼠體重，眼內(nèi)眥靜脈采血，室溫靜置30 min，3000 r/min離心10 min(離心半徑8 cm)，收集上清液待測。根據(jù)試劑盒說明書稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，將40 μl待測樣品加入酶標(biāo)包被板孔中，再加入10 μl生物素標(biāo)記的抗體，封板后室溫靜置30 min，棄去酶標(biāo)板中的液體，PBST洗滌液洗滌5次，加入顯色液，置于37 ℃水浴鍋中避光顯色10 min，加入終止液50 μl，置于酶標(biāo)儀上，測定450 nm處吸光度(A)值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算FT3、FT4和TSH濃度。

1.5 仔鼠血清中的BUN、Cr濃度檢測 雌鼠分娩后，各組隨機選取10只仔鼠，經(jīng)腹主動脈采血，置于采血管中，室溫靜置30 min，3000 r/min離心10 min(離心半徑8 cm)，收集上清液，全自動生化分析儀檢測各組仔鼠血清BUN和Cr濃度。

1.6 HE染色觀察仔鼠腎組織病理損傷情況 仔鼠采血完成后，取各組腎組織，經(jīng)常規(guī)脫水、包埋、切片后行HE染色。滴加伊紅染液于組織上染色5 min，雙蒸水沖洗干凈，滴加蘇木精染液于組織上，染色3 min，雙蒸水清洗干凈，中性樹膠封片，顯微鏡下觀察腎組織病理損傷情況并拍照。

1.7 ELISA法檢測仔鼠腎組織中SOD活性及MDA、IL-1β、IL-18含量 取部分腎組織，加入預(yù)冷PBS后勻漿，12 000 r/min離心10 min(離心半徑10 cm)，收集上清液，根據(jù)試劑盒說明書用紫外-可見分光光度計平行測定SOD活性和MDA含量，采用ELISA法(參照1.4)檢測IL-1β和IL-18含量。

1.8 Western blotting檢測仔鼠腎組織中Nrf2、HO-1和NLRP3蛋白相對表達(dá)量 取100 mg仔鼠腎組織置于液氮中研磨，裂解液裂解30 min，BCA法測定蛋白濃度，100 ℃煮沸10 min，10%分離膠進行電泳，120 V電泳2 h，0.3 A濕轉(zhuǎn)2 h，TBST洗膜3次，室溫封閉1 h，分別加入Nrf2、HO-1、NLRP3和GAPDH蛋白一抗(1:1000) 4 ℃孵育過夜，TBST洗膜3次，加二抗(1:5000)室溫孵育1 h，TBST洗膜3次，ECL法顯色，ImageJ軟件分析蛋白條帶灰度值。目的蛋白相對表達(dá)量=目的蛋白條帶灰度值/內(nèi)參GAPDH蛋白條帶灰度值。

1.9 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 21.0軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以表示，多組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組孕鼠體重比較 與正常組比較，模型組小鼠體重明顯降低[(30.47±1.05) gvs.(36.64±1.02) g，P＜0.05]；與模型組比較，陽性對照組、地黃多糖低劑量和高劑量組小鼠體重[分別為(34.86±1.00) g、(31.96±1.02) g、(33.57±1.03) g]明顯增加，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

2.2 各組孕鼠血清FT3、FT4和TSH含量比較ELISA檢測結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組血清FT3和FT4明顯升高，TSH明顯降低(P＜0.05)；與模型組比較，陽性對照組、地黃多糖低劑量和高劑量組FT3和FT4明顯降低，TSH明顯升高(P＜0.05)；與陽性對照組比較，地黃多糖低、高劑量組FT3和FT4明顯升高，TSH明顯降低(P＜0.05)；與地黃多糖低劑量組比較，地黃多糖高劑量組FT3和FT4明顯降低，TSH明顯升高(P＜0.05)(表1)。

表1 各組孕鼠血清FT3、FT4和TSH含量比較()Tab.1 Comparison of FT3, FT4 and TSH contents in each group of pregnant mice ()

表1 各組孕鼠血清FT3、FT4和TSH含量比較()Tab.1 Comparison of FT3, FT4 and TSH contents in each group of pregnant mice ()

FT3. 游離三碘甲腺原氨酸；FT4. 游離甲狀腺素；TSH.促甲狀腺激素；與正常組比較，(1)P＜0.05；與模型組比較，(2)P＜0.05；與陽性對照組比較，(3)P＜0.05；與地黃多糖低劑量組比較，(4)P＜0.05。

組別 FT3(pmol/L) FT4(pmol/L) TSH(μU/ml)正常組(n=12) 3.12±0.57 41.22±4.16 1.86±0.23模型組(n=12) 6.85±0.62(1) 65.78±4.43(1) 0.52±0.24(1)陽性對照組(n=10) 3.74±0.46(1)(2) 46.50±4.35(1)(2) 1.54±0.32(1)(2)地黃多糖低劑量組(n=11) 6.02±0.55(1)(2)(3) 60.47±6.20(1)(2)(3) 0.83±0.36(1)(2)(3)地黃多糖高劑量組(n=11) 4.79±0.47(1)(2)(3)(4) 53.64±5.17(1)(2)(3)(4) 1.16±0.29(1)(2)(3)(4)F 94.721 48.194 40.042 P＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.3 各組HE染色結(jié)果 正常組仔鼠腎組織結(jié)構(gòu)完整，腎小管和腎小球排列整齊，內(nèi)皮細(xì)胞無變形，基底膜無增厚；模型組仔鼠腎小管和腎小球結(jié)構(gòu)紊亂，基底膜明顯增厚，大量紅細(xì)胞浸潤，內(nèi)皮細(xì)胞水腫明顯；陽性對照組、地黃多糖低劑量和高劑量組仔鼠腎組織病變較模型組減輕(圖1)。

圖1 各組仔鼠腎組織HE染色結(jié)果(×400)Fig.1 Kidney tissue of offspring mice in each group (HE ×400)

2.4 各組仔鼠腎功能檢測結(jié)果比較 與正常組比較，模型組BUN和Cr明顯升高(P＜0.05)；與模型組比較，陽性對照組、地黃多糖低劑量和高劑量組BUN和Cr明顯降低(P＜0.05)；與陽性對照組比較，地黃多糖低、高劑量組BUN和Cr明顯升高(P＜0.05)；與地黃多糖低劑量組比較，地黃多糖高劑量組BUN和Cr明顯降低(P＜0.05)(表2)。

表2 各組仔鼠血清BUN和Cr含量比較(，n=10)Tab.2 Comparison of BUN and Cr contents in serum of offspring mice in each group (, n=10)

表2 各組仔鼠血清BUN和Cr含量比較(，n=10)Tab.2 Comparison of BUN and Cr contents in serum of offspring mice in each group (, n=10)

BUN. 血尿素氮；Cr. 肌酐；與正常組比較，(1)P＜0.05；與模型組比較，(2)P＜0.05；與陽性對照組比較，(3)P＜0.05；與地黃多糖低劑量組比較，(4)P＜0.05。

組別 BUN (mmol/L) Cr (mmol/L)正常組 4.24±0.27 32.84±4.07模型組 8.60±0.33(1) 47.54±3.38(1)陽性對照組 4.85±0.24(1)(2) 36.75±4.22(1)(2)地黃多糖低劑量組 7.36±0.19(1)(2)(3) 43.06±4.52(1)(2)(3)地黃多糖高劑量組 5.94±0.26(1)(2)(3)(4) 39.94±3.67(1)(2)(3)(4)F 467.695 20.083 P＜0.001 ＜0.001

2.5 各組仔鼠腎組織中SOD活性及MDA、IL-1β、IL-18含量比較 與正常組比較，模型組腎組織MDA、IL-1β和IL-18含量明顯升高，SOD活性明顯降低(P＜0.05)；與模型組比較，陽性對照組、地黃多糖低劑量和高劑量組腎組織MDA、IL-1β和IL-18含量明顯降低，SOD活性明顯升高(P＜0.05)；與陽性對照組比較，地黃多糖低、高劑量組腎組織MDA、IL-1β和IL-18含量明顯升高，SOD活性明顯降低(P＜0.05)；與地黃多糖低劑量組比較，地黃多糖高劑量組腎組織MDA、IL-1β和IL-18含量明顯降低，SOD活性明顯升高(P＜0.05)(表3)。

表3 各組仔鼠腎組織中SOD活性及MDA、IL-1β、IL-18含量比較(，n=10)Tab.3 Comparison of SOD activity, MDA, IL-1β and IL-18 contents in kidney tissue of offspring mice in each group (, n=10)

表3 各組仔鼠腎組織中SOD活性及MDA、IL-1β、IL-18含量比較(，n=10)Tab.3 Comparison of SOD activity, MDA, IL-1β and IL-18 contents in kidney tissue of offspring mice in each group (, n=10)

SOD. 超氧化物歧化酶；MDA. 丙二醛；IL-1β. 白介素-1β；IL-18. 白介素-18；與正常組比較，(1)P＜0.05；與模型組比較，(2)P＜0.05；與陽性對照組比較，(3)P＜0.05；與地黃多糖低劑量組比較，(4)P＜0.05。

組別 SOD(U/L) MDA(nmol/L) IL-1β(mg/L) IL-18(mg/L)正常組 204.75±11.14 40.53±4.73 95.64±11.43 54.37±6.14模型組 121.46±9.57(1) 96.84±6.01(1) 315.76±18.86(1) 115.75±8.39(1)陽性對照組 195.62±9.79(1)(2) 46.64±6.43(1)(2) 127.46±16.73(1)(2) 68.31±8.20(1)(2)地黃多糖低劑量組 169.89±11.66(1)(2)(3) 72.50±4.28(1)(2)(3) 244.05±17.47(1)(2)(3) 92.40±6.52(1)(2)(3)地黃多糖高劑量組 184.35±10.74(1)(2)(3)(4) 57.09±5.31(1)(2)(3)(4) 174.38±15.83(1)(2)(3)(4) 76.99±7.37(1)(2)(3)(4)F 95.279 174.449 300.537 102.064 P＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.6 各組仔鼠腎組織中Nrf2、HO-1和NLRP3蛋白表達(dá)水平比較 Western blotting檢測結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組腎組織Nrf2和HO-1蛋白表達(dá)明顯降低，NLRP3蛋白表達(dá)明顯升高(P＜0.05)；與模型組比較，陽性對照組、地黃多糖低劑量和高劑量組腎組織Nrf2和HO-1蛋白表達(dá)明顯升高，NLRP3蛋白表達(dá)明顯降低(P＜0.05)；與陽性對照組比較，地黃多糖低、高劑量組腎組織Nrf2和HO-1蛋白表達(dá)明顯降低，NLRP3蛋白表達(dá)明顯升高(P＜0.05)；與地黃多糖低劑量組比較，地黃多糖高劑量組腎組織Nrf2和HO-1蛋白表達(dá)明顯升高，NLRP3蛋白表達(dá)明顯降低(P＜0.05)(圖2、表4)。

表4 各組仔鼠腎組織中Nrf2、HO-1、NLRP3蛋白表達(dá)比較(，n=10)Tab.4 Comparison of Nrf2, HO-1 and NLRP3 protein expression in kidney tissue of offspring mice in each group (, n=10)

表4 各組仔鼠腎組織中Nrf2、HO-1、NLRP3蛋白表達(dá)比較(，n=10)Tab.4 Comparison of Nrf2, HO-1 and NLRP3 protein expression in kidney tissue of offspring mice in each group (, n=10)

Nrf2. 核因子E2相關(guān)因子2；HO-1. 血紅素氧合酶1；NLRP3. Nod樣受體蛋白3；與正常組比較，(1)P＜0.05；與模型組比較，(2)P＜0.05；與陽性對照組比較，(3)P＜0.05；與地黃多糖低劑量組比較，(4)P＜0.05。

組別 Nrf2 HO-1 NLRP3正常組 1.01±0.05 1.05±0.06 0.32±0.05模型組 0.43±0.06(1) 0.45±0.06(1) 0.87±0.06(1)陽性對照組 0.96±0.04(1)(2) 0.97±0.05(1)(2) 0.44±0.06(1)(2)地黃多糖低劑量組 0.62±0.07(1)(2)(3) 0.65±0.07(1)(2)(3) 0.73±0.07(1)(2)(3)地黃多糖高劑量組 0.86±0.06(1)(2)(3)(4) 0.89±0.06(1)(2)(3)(4) 0.58±0.07(1)(2)(3)(4)F 184.970 167.912 124.026 P＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

圖2 Western blotting檢測各組仔鼠腎組織中Nrf2、HO-1和NLRP3蛋白表達(dá)水平Fig.2 The protein expression of Nrf2, HO-1 and NLRP3 in kidney tissue of offspring mice in each group (Western blotting)

3 討 論

甲狀腺激素分泌過多可引起神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)及消化系統(tǒng)興奮性增高，代謝增強，主要表現(xiàn)為多食、消瘦、畏熱、激動、多汗和心悸等高代謝癥候群，甚者出現(xiàn)甲狀腺腫大和突眼癥[11]。甲亢好發(fā)于育齡期女性，妊娠期合并甲亢為常見的婦科疾病，甲狀腺素及抗甲狀腺抗體可通過胎盤進入胎兒體內(nèi)，導(dǎo)致胎兒甲狀腺功能和下丘腦-垂體-甲狀腺軸異常，誘導(dǎo)胎兒出現(xiàn)宮內(nèi)發(fā)育遲緩、低出生體重等不良后果[12]。研究發(fā)現(xiàn)，妊娠期合并甲亢患者產(chǎn)后出血率、早產(chǎn)率及流產(chǎn)率明顯高于正常妊娠女性[13]。發(fā)生甲亢時，甲狀腺球蛋白抗體與其抗原結(jié)合形成循環(huán)免疫沉淀物，積聚在腎小球基底膜與血管襻之間，從而造成腎臟損傷[14]。

甲狀腺激素包含T3和T4，以T4為主，由甲狀腺上皮細(xì)胞合成后釋放入血，其中部分T3和T4與甲狀腺素結(jié)合球蛋白結(jié)合，而另一部分以游離狀態(tài)(FT3和FT4)隨血液運輸，因此FT3和FT4是反映甲狀腺功能的主要指標(biāo)[15]。TSH由垂體分泌，作用于甲狀腺上皮細(xì)胞的促甲狀腺激素受體，從而促進甲狀腺激素的合成和分泌；發(fā)生甲亢時，血清甲狀腺激素增多，負(fù)向調(diào)控垂體分泌TSH，使血清TSH水平降低[16]。Song等[17]發(fā)現(xiàn)，地黃多糖是一種傳統(tǒng)中藥，可降低甲型肝炎病毒造成的病死率，減輕肝臟病理損傷，緩解肝臟過氧化損傷。本研究通過左甲狀腺素鈉灌胃建立甲亢模型，探討地黃多糖對妊娠期合并甲亢小鼠的癥狀緩解作用及對仔鼠腎損傷的保護作用。左甲狀腺素鈉是一種人工合成的四碘甲腺原氨酸鈉，吸收入血后，可轉(zhuǎn)化成T4發(fā)揮甲狀腺激素的作用，大量服用可使血清甲狀腺素水平升高，產(chǎn)生甲亢癥狀。本研究中，小鼠給予左甲狀腺素鈉灌胃后，血清中FT3和FT4水平升高，TSH水平降低，且體重減輕，并出現(xiàn)了明顯的甲亢癥狀。甲巰咪唑是臨床上治療甲亢的常用藥物，本研究用甲巰咪唑治療后，甲亢小鼠體重增加，血清FT3和FT4水平降低，TSH水平升高。低、高劑量地黃多糖灌胃甲亢小鼠后，其治療效果與甲巰咪唑相同，提示地黃多糖對甲亢具有改善作用。

此外，本研究通過檢測仔鼠腎功能指標(biāo)BUN和Cr及仔鼠腎組織病理形態(tài)學(xué)改變，探討了地黃多糖對妊娠合并甲亢小鼠子代腎損傷是否具有保護作用。HE染色結(jié)果顯示，正常小鼠生育的仔鼠腎組織結(jié)構(gòu)完整，腎小管和腎小球排列整齊，內(nèi)皮細(xì)胞無變形，基底膜無增厚；甲亢小鼠生育的仔鼠腎小管和腎小球結(jié)構(gòu)紊亂，基底膜明顯增厚，大量紅細(xì)胞浸潤，內(nèi)皮細(xì)胞水腫明顯；而經(jīng)甲巰咪唑和地黃多糖治療后仔鼠腎組織病變較模型組減輕。發(fā)生甲亢的小鼠，其子代血清中BUN和Cr水平升高，甲巰咪唑和地黃多糖治療后血清中BUN和Cr水平均明顯降低。有研究發(fā)現(xiàn)，炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激在甲亢造成的腎損傷中發(fā)揮正向調(diào)控作用[18-19]。氧化應(yīng)激時，活性氧過度產(chǎn)生，氧化程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了抗氧化系統(tǒng)的清除能力，從而發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，脂質(zhì)過氧化物催化裂解產(chǎn)生MDA，其毒性作用造成了細(xì)胞的不可逆損傷[20]。SOD是機體內(nèi)重要的自由基抗氧化清除酶，其活性程度反映了機體的抗氧化應(yīng)激水平[21]。本研究中，模型組仔鼠腎組織中炎性因子IL-1β和IL-18水平升高，MDA含量升高，而SOD活性降低，給予地黃多糖后仔鼠腎組織中IL-1β和IL-18水平降低，MDA含量下降，而SOD活性升高，提示地黃多糖可減輕妊娠合并甲亢小鼠子代的腎損傷，降低腎組織炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激水平。

Nrf2是一種氧化還原敏感的轉(zhuǎn)錄因子，可與抗氧化反應(yīng)元件相互作用，在維持細(xì)胞氧化還原平衡中具有重要作用。正常情況下，Nrf2與Keap1特異性結(jié)合存在于細(xì)胞質(zhì)中，通過泛素化蛋白酶體途徑被降解，而當(dāng)發(fā)生應(yīng)激時，Nrf2與Keap1解離，活化后的Nrf2進入細(xì)胞核與抗氧化反應(yīng)元件結(jié)合，啟動抗氧化基因如HO-1的表達(dá)，從而發(fā)揮抗氧化作用[22]。NLRP3炎性小體是一種多蛋白復(fù)合物，可激活caspase-1，從而介導(dǎo)促炎因子IL-1β和IL-18的成熟和分泌。有研究發(fā)現(xiàn)NLRP3活化與多種腎臟疾病相關(guān)，如糖尿病腎病、腎損傷和腎纖維化[23-25]。Bian等[26]發(fā)現(xiàn)，二氫硫辛酸可通過Nrf2/HO-1/NLRP3信號通路降低氧化應(yīng)激和炎癥水平，從而減輕脂多糖誘導(dǎo)的大鼠行為缺陷。Cpt1a通過Nrf2/HO-1和NLRP3炎性小體信號通路促進活性氧誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，加重肝損傷[27]。乳清蛋白可通過激活Nrf2/HO-1信號通路及抑制NF-κB/NLRP3軸而緩解熱應(yīng)激誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷[28]。本研究中甲亢小鼠子代腎組織中Nrf2和HO-1表達(dá)降低，NLRP3蛋白表達(dá)升高，而甲巰咪唑和地黃多糖治療后，仔鼠腎組織中Nrf2和HO-1表達(dá)升高，NLRP3蛋白表達(dá)降低，提示地黃多糖可調(diào)節(jié)Nrf2/HO-1/NLRP3信號通路。

綜上所述，地黃多糖可緩解妊娠合并甲亢小鼠的甲亢癥狀，同時發(fā)揮子代腎臟保護作用，可能是通過調(diào)節(jié)Nrf2/HO-1/NLRP3信號通路而發(fā)揮作用的，為臨床治療妊娠合并甲亢提供了理論依據(jù)。下一步研究可通過采用抑制劑或激活劑影響Nrf2/HO-1/NLRP3信號通路，進一步探討地黃多糖對該信號通路的調(diào)節(jié)作用。