董小敬，王劍橋，秦文皓，杜雪地

(揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，江蘇 揚(yáng)州225009)

甜菜堿是一種生物堿，首先在甜菜中發(fā)現(xiàn)，后被證明廣泛存在于動(dòng)植物及微生物體內(nèi)。畜禽動(dòng)物中的應(yīng)用研究表明，甜菜堿具有良好的誘食效果，而且還能夠參與調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)體蛋白質(zhì)和脂肪代謝過程，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)以及改善肉質(zhì)。研究表明，甜菜堿在水產(chǎn)動(dòng)物中也具有良好的誘食效果，且有利于改善高脂飼料導(dǎo)致的脂肪異常沉積問題。筆者前期研究發(fā)現(xiàn)，甜菜堿降低異育銀鯽脂肪沉積可能與調(diào)控生脂基因表達(dá)有關(guān)。

異育銀鯽是我國重要的淡水養(yǎng)殖品種，不僅具有肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美等特點(diǎn)，而且生長(zhǎng)速度快、食性廣泛、容易飼養(yǎng)。本試驗(yàn)通過考察異育銀鯽血清和肝胰臟生化指標(biāo)，探討飼料中甜菜堿的添加量對(duì)異育銀鯽的影響，旨在為異育銀鯽健康養(yǎng)殖和防止脂肪異常沉積研究提供理論依據(jù)。

一、材料與方法

1.試驗(yàn)飼料

制備不同甜菜堿添加水平的4組試驗(yàn)飼料(粗蛋白質(zhì)水平37%左右、粗脂肪5%左右)，甜菜堿添加量分別為0%(對(duì)照組)、0.08%、0.4%和2%。甜菜堿購于索萊寶科技有限公司，純度大于98%。試驗(yàn)飼料配方及營養(yǎng)水平見表1。所有飼料原料經(jīng)過精磨、稱重后混勻，制作成粒徑1.5毫米顆粒飼料，55℃烘干后晾至室溫，于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 實(shí)驗(yàn)飼料配方及主要營養(yǎng)指標(biāo)%

2.飼養(yǎng)管理與取樣

異育銀鯽購自江都淥陽湖水產(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)，暫養(yǎng)1周后，挑選規(guī)格均勻、體質(zhì)健壯的幼魚，個(gè)體重(9.79±0.51)克，隨機(jī)分為4組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)放養(yǎng)30尾魚。試驗(yàn)魚飼養(yǎng)在直徑為80厘米、高為120厘米的圓桶中，采用微循環(huán)換水，連續(xù)增氧。試驗(yàn)周期為10周。養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)試驗(yàn)魚進(jìn)行24小時(shí)饑餓處理，進(jìn)而進(jìn)行麻醉和取樣。取樣時(shí)，每個(gè)桶隨機(jī)選擇3尾魚，取肝胰臟在液氮中速凍后于-80℃下保存待用。另外選擇3尾魚，取尾靜脈血，4℃條件下離心10分鐘，取上層血清于-80℃下保存待用。

3.血清與肝胰臟生化成分分析

血清生化指標(biāo)使用貝克曼庫爾特AU5800全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行分析。堿性磷酸酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、超氧化物歧化酶活性和極低密度脂蛋白含量使用南京建成生物工程研究所的試劑盒進(jìn)行測(cè)定，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

4.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

將記錄的試驗(yàn)數(shù)據(jù)輸進(jìn)Excel表中進(jìn)行整理，使用SPSS 16.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，單因素方差分析(ANOVA)達(dá)到顯著水平后(P＜0.05)，再采用Tukey’s檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較。數(shù)據(jù)表示為“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”。

二、結(jié)果與分析

1.血清生化指標(biāo)(表2)

表2 投飼甜菜堿對(duì)異育銀鯽血清生化指標(biāo)的影響

由表2可見，隨著甜菜堿添加水平升高，異育銀鯽血清膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白含量先上升、后降低，在0.4%甜菜堿添加組達(dá)到最高。其中，0.4%組甘油三酯和低密度脂蛋白含量顯著高于其他組(P＜0.05)，總膽固醇含量顯著高于對(duì)照組和0.08%組(P＜0.05)，高密度脂蛋白含量顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。當(dāng)甜菜堿添加量為2%時(shí)，血清乳酸脫氫酶含量顯著高于其他各組(P＜0.05)，其含量幾乎達(dá)到其他組的1.5倍。隨著甜菜堿添加量增高，谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白質(zhì)和血清白蛋白含量先降低、后升高，而谷草轉(zhuǎn)氨酶升高、堿性磷酸酶活性降低。球蛋白含量在各組間波動(dòng)，各組間差異不顯著(P＞0.05)。

2.肝胰臟生化指標(biāo)(表3)

表3 投飼甜菜堿對(duì)異育銀鯽肝胰臟生化指標(biāo)的影響

由表3可見，隨著甜菜堿添加水平升高，異育銀鯽肝胰臟超氧化物歧化酶(SOD)活性先降低、后升高，且0.4%組SOD活性顯著低于2%組(P＜0.05)。但肝胰臟堿性磷酸酶(ALT)活性和極低密度脂蛋白(VLDL)含量隨甜菜堿添加量增加先升高、后降低，其中0.08%組堿性磷酸酶活性顯著高于其他各組(P＜0.05)，極低密度脂蛋白含量在0.08%組和對(duì)照組之間存在顯著差異(P＜0.05)。0.08%組肝胰臟谷草轉(zhuǎn)氨酶活性最低，且顯著低于0.4%組(P＜0.05)，但與另外兩組間無顯著性差異(P＞0.05)。谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性穩(wěn)定，各組間無顯著性差異(P＞0.05)。

三、討論

在植物油和高脂飼料被廣泛應(yīng)用的水產(chǎn)養(yǎng)殖大環(huán)境下，脂肪異常沉積已成為制約產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的重要因素。甜菜堿作為甲基供體可在脂肪代謝中發(fā)揮重要作用，有助于防止脂肪肝的發(fā)生。筆者前期的研究表明，適量的甜菜堿添加水平(0.4%)能顯著降低異育銀鯽全魚、肌肉和肝胰臟中的脂肪含量，而較低和過高的添加水平均無此效果，表明適量添加甜菜堿有利于改善高脂飼料帶來的脂肪異常沉積問題。

本研究進(jìn)一步探討了甜菜堿不同添加水平對(duì)異育銀鯽血清和肝胰臟生化指標(biāo)的影響，發(fā)現(xiàn)血清生化指標(biāo)谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶活性均未受影響，但高水平甜菜堿添加(2%)導(dǎo)致血清乳酸脫氫酶顯著升高。相比之下，0.4%的甜菜堿添加導(dǎo)致血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量均顯著上升。此外，適量添加甜菜堿也導(dǎo)致肝胰臟極低密度脂蛋白含量顯著升高。結(jié)合適量添加甜菜堿可顯著降低異育銀鯽肝胰臟粗脂肪含量，筆者推測(cè)向飼料中添加適量甜菜堿有利于促進(jìn)脂肪從肝胰臟向外轉(zhuǎn)運(yùn)。