陳建行，賈曉江，劉建光，周曉婷，朱素芳，朱 宏

（石家莊君樂寶乳業(yè)有限公司 石家莊 050221）

脂溶性維生素A、D、E、K 是嬰兒生長發(fā)育的必需營養(yǎng)素，在體內(nèi)隨脂肪吸收后不能隨尿排出，可大量存儲于脂肪組織中，長期過量攝入不僅會增加嬰兒的代謝負擔，還會在體內(nèi)大量蓄積而引起中毒。我國現(xiàn)行嬰兒配方奶粉標準GB 10765-2010 在一定程度上沿用了歐盟2006/141/EC、國際食品法典委員會Codex stan 72-1981 和歐洲兒科胃腸病學、肝病學和營養(yǎng)協(xié)會（European Society for Paediatric Gastroenterology Hepatology and Nutrition，ESPGHAN）全球標準的做法，即僅規(guī)定維生素的最低和最高限量要求，且出于技術(shù)和安全考慮，最高限量一般為最低限量的3～5 倍（具體詳見表1），范圍相對寬泛，未對配方設計的目標值和科學范圍作出指引[1-4]。韓軍花等[5]隨機抽取1 639 款市售嬰兒配方奶粉進行營養(yǎng)素含量檢測，發(fā)現(xiàn)部分產(chǎn)品的營養(yǎng)素檢測值接近GB 10765-2010 上限，呼吁企業(yè)研發(fā)人員應以下限值作為目標值開展配方設計。

表1 不同嬰兒配方奶粉標準中維生素限量要求Table 1 Vitamin limitation requirements in different infant formula regulations

本研究以嬰兒配方奶粉中脂溶性維生素A、D、E、K 為研究對象，首先根據(jù)11 家實驗室對同批次產(chǎn)品的檢測數(shù)值，確定維生素A、D、E、K 用于配方設計的檢測偏差；然后，通過分析母乳數(shù)據(jù)、適宜攝入量（Adequate Intakes，AI）和嬰幼兒配方奶粉標準限量要求，確定維生素A、D、E、K 設計的目標值；最后，根據(jù)已確定的配方設計目標值，結(jié)合營養(yǎng)素貨架期衰減率、檢測偏差推算出合理的設計范圍，并與可耐受最高攝入量（Tolerable Upper Intake Level，UL）、市售產(chǎn)品的營養(yǎng)素含量分布情況作比較，同時兼顧現(xiàn)階段0～6月齡嬰兒的營養(yǎng)狀況，確定我國嬰兒配方奶粉脂溶性維生素A、D、E、K 的科學設計范圍，為企業(yè)的配方研發(fā)人員提供參考。

1 研究內(nèi)容和方法

1.1 術(shù)語和定義

營養(yǎng)素設計理論值：配方中原輔料的添加量與原輔料中營養(yǎng)素的檢測值，加權(quán)求和即為理論值。

營養(yǎng)素設計目標值：能滿足0～6 個月嬰兒群體中絕大多數(shù)營養(yǎng)需要的參考值。

營養(yǎng)素設計值：營養(yǎng)素設計的理論值減去營養(yǎng)素的生產(chǎn)過程損失即為營養(yǎng)素設計值，也相當于產(chǎn)品下線檢測的理論值。

營養(yǎng)素設計值的科學范圍：受貨架期衰減和不同實驗室間檢測偏差的影響，設計值應高于目標值，但不能無限大，應根據(jù)營養(yǎng)素設計的目標值，結(jié)合貨架期衰減率、不同實驗室間檢測偏差推算出合理的設計范圍，并與UL 值、市售產(chǎn)品的營養(yǎng)素含量分布情況作比較，同時兼顧現(xiàn)階段0～6月齡嬰兒的營養(yǎng)狀況，最終確定營養(yǎng)素的科學設計范圍。

1.2 脂溶性維生素配方設計檢測偏差的確定

從超市購買某品牌同批次的嬰兒配方奶粉99 聽，隨機均分為11 份，送往內(nèi)部5 家檢驗室和外部6 家具備嬰幼兒配方奶粉檢測資質(zhì)的第三方機構(gòu)，對每聽奶粉中脂溶性維生素A、D、E、K 進行檢測，采用GB 5009.82-2016 和GB 5009.158-2016 規(guī)定方法進行檢測[8-9]，匯總檢測數(shù)據(jù)計算相對標準偏差，確定用于配方設計的檢測偏差。

1.3 營養(yǎng)素設計目標值的確定方法

根據(jù)母乳數(shù)據(jù)、AI 值和嬰兒配方奶粉標準限量分別計算每100 g 嬰兒配方奶粉的營養(yǎng)素含量，具體計算方法如下：

按0～6月齡嬰兒平均攝入母乳0.75 L/d 或780 g/d[10]，推算出配方奶液的平均需要量為780 g/d，按配方奶液中干物質(zhì)質(zhì)量分數(shù)13%計，得出配方奶粉的平均需要量約為100 g/d，推算每100 g 嬰兒配方奶粉中營養(yǎng)素含量應等于0.75 L 母乳中營養(yǎng)素含量，即：

如上所述0～6月齡完全配方粉喂養(yǎng)兒平均需攝入配方奶粉100 g/d，推算每100 g 嬰兒配方奶粉的營養(yǎng)素含量應等于營養(yǎng)素AI 值，即：

按0～6月齡嬰兒平均需攝入能量500 kcal/d[11]，推算每100 g 嬰兒配方奶粉中營養(yǎng)素含量值應等于每500 kcal 嬰兒配方奶粉的營養(yǎng)含量，即：

綜合比較分析公式（1）、（2）、（3）計算結(jié)果，確定嬰兒配方奶粉中營養(yǎng)素設計的目標值。

1.4 營養(yǎng)素的科學設計范圍確定方法

根據(jù)1.3 節(jié)確定的營養(yǎng)素設計目標值，參考已報道的營養(yǎng)素貨架期衰減率數(shù)值，取最大值和最小值，并結(jié)合1.2 節(jié)所確定用于配方設計的檢測偏差，采用公式（4）、（5）推算營養(yǎng)素的設計范圍。

如1.3 節(jié)所述0～6月齡完全配方粉喂養(yǎng)兒平均攝入配方粉100 g/d、能量500 kcal/d，因此，每100 kcal 嬰兒配方奶粉中營養(yǎng)素設計值與UL 值轉(zhuǎn)化關(guān)系，應符合公式（6）。

綜合公式（4）、（5）、（6）計算結(jié)果，與市售產(chǎn)品的營養(yǎng)素含量分布情況作比較，并考慮現(xiàn)階段0～6月齡嬰兒的營養(yǎng)狀況，確定營養(yǎng)素的科學設計范圍。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同實驗室間脂溶性維生素的檢測偏差

根據(jù)11 家實驗室出具的脂溶性維生素A、D、E、K 檢測結(jié)果，計算均值和相對標準偏差，并與國標檢驗方法的精密度比較，具體詳見表2。從表2可以看出維生素A、E、K 的實驗室間檢測偏差大于檢驗方法本身的精密度，而維生素D 的實驗室檢測偏差小于檢驗方法本身的精密度。為保證產(chǎn)品在不同實驗室檢測全部合格，應采用略高于計算結(jié)果的檢驗偏差進行配方設計，因此，建議脂溶性維生素A、D、E 和K 分別采用15%，15%，25%和20%的檢測偏差進行配方設計。

表2 11 家實驗室對同批次嬰兒配方奶粉中脂溶性維生素含量的檢測結(jié)果Table 2 Fat-soluble vitamin content in the same batch of infant formula detected by 11 laboratories

2.2 維生素A

維生素A 在人體具有廣泛而重要的生理功能，主要包括視覺、維持皮膚黏膜完整性、維持和促進免疫功能、促進生長發(fā)育、維持生殖功能等[12]。嬰兒長期過量攝入維生素A 會表現(xiàn)為食欲降低、皮膚干燥、脫發(fā)、嘴角開裂、骨痛、肝腫大、顱內(nèi)壓增高和發(fā)育停滯[13]。維生素A 可通過攝入視黃醇或類胡蘿卜素進行補充，但由于缺乏類胡蘿卜素與維生素A 在嬰兒體內(nèi)轉(zhuǎn)化的確定性數(shù)值，因此，GB 10765-2010 規(guī)定在計算和聲稱維生素A 活性時維生素A 只包括預先形成的視黃醇，不包括任何類胡蘿卜素組分[1]，同時GB 14880-2012 規(guī)定可用于強化維生素A 的化合物為醋酸視黃酯、棕櫚酸視黃酯和全反式視黃醇[14]。

2.2.1 維生素A 設計目標值的確定 Darragh[15]報道成熟母乳中視黃醇300～700 μg/L，Guo[16]報道成熟母乳中維生素A 530 μg/L，歐洲食品安全局（European Food Safety Authority，EFSA）專家組認為歐洲成熟期母乳中維生素A 450～600 μg/L[17]。相比之下，中國成熟期母乳中維生素A 檢出值略低（見表2）[18-21]，中國營養(yǎng)學會（2013）研究表明中國15 d～3月齡母乳中維生素A 平均值297 μg/L，為兼顧母乳中維生素A 的理想目標和中國國情，認為400 μg/L 作為中國母乳中維生素A 參考值較為合理[22]。采用1.3 節(jié)中公式（1）推算嬰兒配方奶粉中維生素A 應為300 μg RE/100 g。

表3 中國成熟期母乳中維生素A 含量Table 3 Vitamin A content in Chinese mature breast milk

EFSA 專家組以成熟期母乳中維生素A 含量450 μg/L 和母乳平均攝入量800 mL/d 計，推算歐洲0～6月齡嬰兒維生素A 的AI 值350 μg RE/d[17]。中國營養(yǎng)學會以中國成熟期母乳中維生素A含量400 μg/L 和母乳攝入量750 mL 計，推算中國0～6月齡嬰兒維生素AI 值300 μg RAE/d[22]。采用1.3節(jié)中公式（2）推算嬰兒配方奶粉中維生素A 應為300 μg RE/100 g。

在新一輪標準修訂過程中，（EU）2016/127 和GB10765-2021 將維生素A 限量分別由60～180 μg RE/100 kcal 和59～180 μg RE/100 kcal 調(diào)整為70～114 和60～150 μg RE/100 kcal（見表1），標準范圍縮窄[6-7]。采用1.3 節(jié)中公式（3）推算維生素A 限量分別為350～570 μg RE/100 g 和300～750 μg RE/100 g。

綜合比較上述計算結(jié)果，可以看出（EU）2016/127 和GB 10765-2021 中維生素A 下限值均參考相應的AI 值和母乳數(shù)據(jù)制定，因此，以60 μg RE/100 kcal 作為維生素A 設計的目標值即可。

2.2.2 維生素A 科學設計范圍的確定 匯總國內(nèi)2012—2020年已公開發(fā)表的維生素A 貨架期衰減率研究數(shù)據(jù)[23-31]，見表4。從表4可以看出，不同研究報道中維生素A 貨架期衰減率差異很大，變化范圍0～36.62%，根據(jù)數(shù)值的集中程度，同時為保證產(chǎn)品在貨架期內(nèi)全部檢測合格，認為取衰減率最小值和最大值分別為25%和35%用于配方設計較為合理。根據(jù)2.1 節(jié)確定的維生素A 配方設計檢測偏差15%和2.2.1 節(jié)確定的設計目標值60 μg RE/100 kcal，并采用1.4 節(jié)中公式（4）和（5）進行計算，可得嬰兒配方奶粉中維生素A 設計范圍100～120 μg RE/100 kcal。

表4 嬰兒配方奶粉中維生素A 貨架期衰減率Table 4 Vitamin A loss in infant formula during shelf life

（續(xù)表4）

中國營養(yǎng)學會根據(jù)已有的病例報告，確定嬰兒觀察到有害作用的最低劑量為6 000 μg RE/d（服用1～3 個月，鹵門膨出），并按最大不確定性系數(shù)10.0，推算中國嬰兒的UL 值600 μg RAE/d[22]，采用1.4 節(jié)中公式（6）計算，可得嬰兒配方奶粉中維生素A 設計值應≤120 μg RE/100 kcal。

韓軍花等[5]抽取我國市售1 639 款嬰兒配方奶粉進行營養(yǎng)成分檢測，發(fā)現(xiàn)維生素A 含量分布為60～180 μg RE/100 kcal，且75%的產(chǎn)品集中在60～121 μg RE/100 kcal 范圍內(nèi)。

如2.2.1 節(jié)所述，GB 10765-2021 維生素A限量已由59～180 μgRE/100 kcal 調(diào)整為60～150 μg RE/100 kcal，下限值參照AI 值而制定，上限值出現(xiàn)大幅下調(diào)，因為原上限值180 μg RE/100 kcal 是UL 值120 μg RE/100 kcal 的1.5 倍，原上限值過高[32]。結(jié)合2.1 節(jié)確定的維生素A 配方設計檢測偏差15%，推算維生素A 設計下限為60÷（1-15%）=70.6 μg RE/100 kcal，設計上限為150÷（1+15%）=130 μg RE/100 kcal。

依據(jù) 《亞臨床狀態(tài)維生素A 缺乏的防治方案》，嬰兒血清中維生素A 0.1～0.2 mg/L 屬亞臨床缺乏，0.21～0.29 mg/L 屬亞臨床可疑缺乏，≥0.3 mg/L 屬正常[33]。匯總我國0～6月齡嬰兒血清中維生素A 檢測值（見表5）[34-36]，可以看出較高比例的嬰兒處于正常值以下，應適當強化維生素A 攝入。

表5 中國0～6月齡嬰兒血清維生素A 水平（mg/L）Table 5 Vitamin A level in Chinese infants serum from 0～6 months （mg/L）

綜合比較上述計算結(jié)果，可以看出若將維生素A 設計范圍定為100～120 μg RE/100 kcal，符合GB 10765-2021 要求，能滿足0～6月齡嬰兒的營養(yǎng)需求，且上限值與UL 值和75%市售產(chǎn)品檢測最大值接近，因此，可將我國嬰兒配方奶粉維生素A 的科學設計范圍定為100～120 μg RE/100 kcal。

2.3 維生素D

維生素D 在維持血鈣和磷水平穩(wěn)定中發(fā)揮重要作用，對骨骼正常礦化、肌肉收縮、神經(jīng)傳導以及細胞基本功能都是必需的[37]。0～6月齡嬰兒處于快速生長的發(fā)育期，維生素D 需要量相對較高，屬維生素D 缺乏的高危人群。嬰兒缺乏維生素D 的早期癥狀為鈣和磷血清濃度降低，而后期會包括骨骼礦化不足（佝僂病和骨軟化癥）、骨畸形、骨痛以及肌肉代謝和呼吸功能改變等癥狀，過量攝入維生素D 則表現(xiàn)為生長遲緩和高鈣血癥[38]。目前GB 14880-2012 規(guī)定嬰兒配方奶粉中可用于強化維生素D 的化合物包括麥角鈣化醇 （維生素D2）和膽鈣化醇（維生素D3）[14]，由于部分臨床研究證實麥角鈣化醇的活性不如膽鈣化醇[39]，因此，多數(shù)企業(yè)采用膽鈣化醇用于配方設計。

2.3.1 維生素D 設計目標值的確定Darragh[15]報道成熟期母乳中維生素D 含量0.4 μg/L。Dawodu等[40]報道成熟期母乳中維生素D 平均含量在0.25～2.0 μg/L 范圍內(nèi)。劉靜[18]從呼和浩特地區(qū)采集6 個月以內(nèi)成熟期母乳樣本38 個，均為未檢出。方芳等[19]從呼和浩特地區(qū)采集成熟期母乳（16～30 d）樣本43 個，測得維生素D 含量＜2.0 μg/L。截止目前，國內(nèi)外營養(yǎng)專家一致認為母乳中缺乏維生素D，完全母乳喂養(yǎng)的嬰兒應食用維生素D 膳食補充劑，才能預防佝僂病的發(fā)生[11，41]。因此，母乳中維生素D 含量對配方設計而言，不具參考價值。

25-（OH）D 是維生素D 在血清中的主要存在形式，也是判斷維生素D 是否缺乏的生物標記物。根據(jù)2016 全球?qū)＜夜沧R建議，當血清中25-（OH）D＜30 nmol/L（12 ng/mL）為缺乏，30～50 nmol/L（12～20 ng/mL）為不足，＞50 nmol/L（20 ng/mL）為充足[42]。國內(nèi)外已有臨床試驗結(jié)果證實當維生素D攝入量10 μg/d 能保證絕大多數(shù)嬰兒血清25-（OH）D 水平≥50 nmol/L[43-44]。因此，中國營養(yǎng)學會和EFSA 專家組將0～6月齡嬰兒維生素D 的AI值均設定為10 μg/d[22，17]。采用1.3 節(jié)中公式（2）推算嬰兒配方奶粉中維生素D 應為10 μg/100 g。

在新一輪標準修訂過程中，（EU）2016/127 和GB 10765-2021 將維生素D 限量分別由1.0～2.5 μg/100 kcal 和1.05～2.51 μg/100 kcal 調(diào)整為2～3 μg/100 kcal 和2.0～5.0 μg/100 kcal（見表1），標準限量上調(diào)[6-7]。采用1.3 節(jié)中公式（3）推算維生素D限量分別為10～15 μg/100 g 和10～25 μg/100 g。

綜合比較上述計算結(jié)果，可以看出（EU）2016/127 和GB 10765-2021 中維生素D 下限值均參考AI 值而制定，因此，以2 μg/100 kcal 作為配方設計的目標值即可。

2.3.2 維生素D 科學設計范圍的確定 匯總國內(nèi)2016-2020年已公開發(fā)表的維生素D 貨架期衰減率研究數(shù)據(jù)[23-27，29，45]，見表6。從表6可以看出，不同研究報道中維生素D 貨架期衰減率差異很大，變化范圍為1.46%～43.24%，根據(jù)數(shù)值的集中程度，同時為保證產(chǎn)品在貨架期內(nèi)全部檢測合格，認為取衰減率最小值和最大值分別為25%和35%進行配方設計較為合適。根據(jù)2.1 節(jié)確定的維生素D配方設計檢測偏差15%和2.3.1 節(jié)中確定的設計目標值2 μg/100 kcal，并采用1.4 節(jié)中公式（4）和（5）進行計算，可得嬰兒配方奶粉中維生素D 設計范圍3.3～4 μg/100 kcal。

表6 嬰兒配方奶粉中維生素D 貨架期衰減率Table 6 Vitamin D loss in infant formula during shelf life

（續(xù)表6）

嬰兒維生素D 攝入過高易導致生長發(fā)育遲緩，根據(jù)已有臨床公開數(shù)據(jù)，中國營養(yǎng)學會認為44.4 μg/d 為嬰兒未觀察到有害作用劑量，按不確定系數(shù)2，推算0～12月齡嬰兒維生素D 的UL 值20 μg/d[22]。按1.4 節(jié)中公式（6）計算，嬰兒配方奶粉中維生素D 設計值≤4 μg/100 kcal。

韓軍花等[5]抽取我國市售1 639 款嬰兒配方奶粉進行營養(yǎng)成分檢測，發(fā)現(xiàn)維生素D 含量分布為1.05～2.51 μg/100 kcal，且75%的產(chǎn)品集中在1.05～1.92 μg/100 kcal。

如2.3.1 節(jié)所述，GB 10765-2021 已將維生素D 限量由1.05～2.51 μg/100 kcal 調(diào)整為2.0～5.0 μg/100 kcal，下限值參照AI 值而提升，同時考慮檢測偏差和貨架期衰減等技術(shù)因素，上限值也得到大幅提升。結(jié)合2.1 節(jié)確定的維生素D 配方設計偏差15%，推算維生素D 設計下限為2.0÷（1-15%）=2.35 μg/100 kcal，設計上限為5.0÷（1+15%）=4.35 μg/100 kcal。

匯總2015-2020年公開發(fā)表的嬰兒血清中25-（OH）D 研究數(shù)據(jù)（見表7）[46-50]，發(fā)現(xiàn)不同研究報道所依據(jù)的判斷標準雖存在差異，但可以看出當前我國仍有較高比例的嬰兒處于維生素D 營養(yǎng)不足或缺乏狀態(tài)，應適當增加膳食攝入、光照時間或通過維生素D 制劑補充。

表7 中國嬰兒血清25-（OH）D 水平Table 7 25-（OH）D level in Chinese infants serum

綜合上述計算和分析結(jié)果，可以看出若將維生素D 設計范圍定為3.3～4 μg/100 kcal，符合GB 10765-2021 和UL 值要求，且能滿足0～6月齡嬰兒的營養(yǎng)需求。因此，可將我國嬰兒配方奶粉維生素D 的科學設計范圍定為3.3～4 μg/100 kcal。

2.4 維生素E

維生素E 是6-羥基苯并二氫吡喃環(huán)的異戊二烯衍生物，包括生育酚和三烯生育酚兩類共8種化合物，即α、β、γ、δ 生育酚和α、β、γ、δ 三烯生育酚，是非酶抗氧化系統(tǒng)中重要的抗氧化劑，在體內(nèi)具有抗脂質(zhì)氧化、維持生育和免疫功能等作用。在所有化合物中，天然α-生育酚（RRR-α-生育酚，又稱d-α-生育酚）生物活性最高。維生素E 的生物活性可用α-生育酚當量 （α-tocopherol equivalents，α-TE）表示，認定1 mg d-α-生育酚=1 mg α-TE[51]。由于d-α-生育酚不穩(wěn)定，嬰兒配方奶粉中常選用較為穩(wěn)定的生育酚酯類如d-α-醋酸生育酚 （0.91 α-TE/mg）、dl-α-醋酸生育酚（0.74 α-TE/mg）等進行強化[11]。

2.4.1 維生素E 設計目標值的確定 Darragh[15]報道成熟期母乳中維生素E 含量3～8 mg/L，Antonakou 等[51]報道3 個月母乳中α-生育酚含量3.5 mg/L。我國成熟期母乳中維生素E 含量接近于國際母乳（見表8）[18-19，52]，若成熟期母乳中維生素E含量以3.5 mg/L 計，按1.3 節(jié)中公式（1）推算得嬰兒配方奶粉中維生素E 應為2.63 mg/100 g。

表8 中國成熟期母乳中維生素E 含量Table 8 Vitamin E content in Chinese mature breast milk

EFSA 專家組按母乳中維生素E 3.5 mg α-TE/L 和母乳攝入量800 mL/d，推算歐洲0～6月齡嬰兒AI 值3 mg α-TE/d[17]。中國營養(yǎng)學會按母乳中α-生育酚3.3～4.5 mg α-TE/L 和母乳攝入量750 mL/d，推算中國0～6月齡嬰兒維生素E 的AI值3 mg α-TE/d[22]。采用1.3 節(jié)中公式（2）推算嬰兒配方奶粉中維生素E 應為3 mg α-TE/100 g。

在新一輪標準修訂過程中，（EU）2016/127 和GB 10765-2021 將維生素E 限量分別由0.5～5 mg α-TE/100 kcal 和0.5～5.02 mg α-TE/100 kcal調(diào)整為0.6～5 mg α-TE/100 kcal 和0.5～5.0 mg α-TE/100 kcal（見表1）[6-7]，采用1.3 節(jié)中公式（3）推算維生素E 限量分別為3～25 mg α-TE/100 g和2.5～25 mg α-TE/100 g。

綜合比較上述計算結(jié)果，可以看出中國和歐盟0～6月齡嬰兒維生素E 的AI 值完全一致，（EU）2016/127 依據(jù)AI 值已將維生素E 下限值上調(diào)至0.6 mg α-TE/100 kcal，因此，以0.6 mg α-TE/100 kcal 作為配方設計的目標值即可。

2.4.2 維生素E 科學設計范圍的確定 匯總國內(nèi)2012-2020年已公開發(fā)表的維生素E 貨架期衰減率研究數(shù)據(jù)[23-24，26-30，45]見表9。從表9可以看出，不同研究報道中維生素E 貨架期衰減率差異很大，變化范圍為0～36.49%，根據(jù)數(shù)值的集中程度，同時為保證產(chǎn)品在貨架期內(nèi)全部檢測合格，認為取衰減率最小值和最大值分別為25%和35%進行配方設計較為合適。根據(jù)2.1 節(jié)確定的配方設計偏差25%和2.3.1 節(jié)確定的設計目標值0.6 mg α-TE/100 kcal，并采用1.4 節(jié)中公式（4）和（5）進行計算，可得嬰兒配方奶粉中維生素E 設計范圍1.2～1.5 mg α-TE/100 kcal。

表9 嬰兒配方奶粉中維生素E 貨架期衰減率Table 9 Vitamin E loss in infant formula during shelf life

中國營養(yǎng)學會認為未有充分數(shù)據(jù)表明維生素E 對嬰兒具有副作用，且嬰兒期維生素E 攝入的主要來源為母乳及輔食和配方奶粉，一般不會造成維生素E 過量攝入，因此，未對0～12月齡嬰兒設置維生素E 的UL 值[22]。

韓軍花等[5]抽取我國市售1 639 款嬰兒配方奶粉進行營養(yǎng)成分檢測，發(fā)現(xiàn)維生素E 含量分布為0.54～5.02 mg α-TE/100 kcal，且75%的產(chǎn)品集中在0.54～2.51 mg α-TE/100 kcal。

如2.4.1 節(jié)所述，GB 10765-2021 已將維生素E 限量由0.5～5.02 mg α-TE/100 kcal 調(diào)整為0.5～5.0 mg α-TE/100 kcal，僅上限出現(xiàn)微調(diào)，主要是與Codex stan 72-1981 等國際標準相接軌[53]。結(jié)合2.1 節(jié)確定的維生素E 配方設計偏差25%，推算維生素E 設計下限為0.5÷（1-25%）=0.67 mg α-TE/100 kcal，設計上限為5.0÷（1+25%）=4 mg α-TE/100 kcal。

維生素E 廣泛存在于自然界多種食物中，正常人群中很少出現(xiàn)維生素E 缺乏癥，多出現(xiàn)在脂肪代謝障礙或脂肪吸收不良的群體中，我國正常嬰兒群體中也很少有維生素E 缺乏的相關(guān)報道。

綜合比較上述計算結(jié)果，可以看出若將維生素E 的科學設計范圍定為1.2～1.5 mg α-TE/100 kcal，符合GB 10765-2021 要求，也符合配方設計的檢測偏差要求，但此范圍過于狹窄，實際配方設計的難度過大?？紤]到維生素E 毒性相對較小，可參照市售75%產(chǎn)品的上限值2.51 mg α-TE/100 kcal，將上限提升至國標限量的中間值2.5 mg α-TE/100 kcal。因此，可將我國嬰兒配方奶粉維生素E 科學設計范圍定為1.2～2.5 mg α-TE/100 kcal。

2.5 維生素K

維生素K 是體內(nèi)合成4 種凝血因子（II、VII、IX、X） 及肝抗凝蛋白C 和S 的必要輔助因子，參與機體的血凝過程和骨代謝，并與人體的心血管健康有關(guān)。新生兒易出現(xiàn)維生素K 缺乏，常見臨床表現(xiàn)有皮膚滲血、胃腸道出血或顱內(nèi)出血等癥狀[54]。維生素K 主要有植物來源的天然維生素K1、細菌合成的天然維生素K2和人工合成的維生素K33 種形式，其中植物來源的維生素K1為植物甲萘醌，也簡稱葉綠醌，是人類維生素K 的主要來源，且對熱穩(wěn)定[39]，因此，GB 14880 規(guī)定嬰兒配方奶粉中強化維生素K 的化合物僅植物甲萘醌1 種[14]。

2.5.1 維生素K 設計目標值的確定 Darragh[15]報道成熟期母乳中維生素K 含量3～15 μg/L，Trumbo等[55]認為母乳中維生素K 平均含量約2.5 μg/L，劉靜[18]從呼和浩特地區(qū)采集6 個月以內(nèi)成熟期母乳樣本38 個，檢測維生素K 含量（7±3）μg/L。由于完全母乳喂養(yǎng)的嬰兒易患維生素K 缺乏出血癥（Vitamin K deficiency bleeding，VKDB），國內(nèi)外專家一致認為母乳中維生素含量不足以滿足嬰兒的正常需求[41]，因此，母乳中維生素K 含量對配方設計不具參考價值。

EFSA 專家組認為人體每天攝入維生素K1μg/kg 體重時，可滿足絕大多數(shù)人體需要，按0～6月齡嬰兒平均體重5 kg，推算維生素K 的AI 值5 μg/d[17]。中國營養(yǎng)學會以母乳中維生素K 平均質(zhì)量濃度2.5 μg/L 和母乳攝入量750 mL/d，推算中國0～6月齡嬰兒的AI 值為2.0 μg/d[22]。由于純母乳喂養(yǎng)兒患VKDB 風險過高，因此，AI 值5.0 μg/d對配方設計更具參考意義。采用1.3 節(jié)中公式（2）推算嬰兒配方奶粉中維生素K 含量5.0 μg/100 g。

在新一輪標準修訂過程中，（EU）2016/127 和GB 10765-2021 將維生素K 限量分別由4～25 μg/100 kcal 和4.2～27.2 μg/100 kcal 調(diào)整為1～25 μg/100 kcal 和4.0～27.0 μg/100 kcal （見表1）[6-7]，采用1.3 節(jié)中公式（3）推算嬰兒配方奶粉中維生素K 含量分別為5～125 μg/100 g 和20～135 μg/100 g。

綜合比較上述計算結(jié)果，可以看出（EU）2016/127 中維生素K 下限值參照AI 值進行制定，出現(xiàn)大幅下調(diào)，而GB 10765-2021 在制定過程中認為按目前限量4.2～27.2 μg/100 kcal，我國僅有極少數(shù)嬰兒出現(xiàn)維生素K 缺乏癥，無修訂必要，僅微調(diào)為4.0～27.0 μg/100 kcal，從而與Codex stan 72-1981 保持一致[32]?；谏鲜鍪聦?，可以看出以現(xiàn)行GB 10765-2010 中規(guī)定維生素K 限量4.2 μg/100 kcal 作為配方設計的目標值，完全能滿足0～6月齡嬰兒的正常營養(yǎng)需求。

2.5.2 維生素K 科學設計范圍的確定 匯總國內(nèi)2012-2020年已公開發(fā)表的維生素K 貨架期衰減率研究數(shù)據(jù)[23-24，26-30，45]，見表10。從表10可以看出，不同研究報道中維生素K 貨架期衰減率差異很大，變化范圍0～47.64%，根據(jù)數(shù)值的集中程度，同時為保證產(chǎn)品在貨架期內(nèi)全部檢測合格，認為取衰減率最小值和最大值分別為35%和45%進行配方設計較為合適。結(jié)合2.1 節(jié)確定的維生素K 設計偏差20%和2.5.1 節(jié)確定的設計目標值4.2 μg/100 kcal，并采用1.4 節(jié)中公式（4）和（5）推算，可得嬰兒配方奶粉中維生素K 設計范圍9.3～12 μg/100 kcal。

表10 嬰兒配方奶粉中維生素K 貨架期衰減率Table 10 Vitamin K loss in infant formula during shelf life

目前尚未發(fā)現(xiàn)天然食物或補充劑維生素K 對機體產(chǎn)生不良影響的動物或人群研究報道。動物試驗中維生素K 劑量達25 μg/kg 時，未發(fā)現(xiàn)任何不良反應，且人群試驗中特定時期內(nèi)補充維生素K 10 mg/d，未見任何副作用。因此，EFSA 專家組和中國營養(yǎng)學會暫時均未對維生素K 設定UL值[11，22]。

韓軍花等[5]對我國市售1 639 款嬰兒配方奶粉進行營養(yǎng)成分檢測，發(fā)現(xiàn)維生素K 含量分布為4.2～25.1 μg/100 kcal，且75%的產(chǎn)品集中在4.2～13.0 μg/100 kcal。

如2.5.1 節(jié)所述，GB 10765-2021 已將維生素K 限量由4.2～27.2 μg/100 kcal 微調(diào)為4.0～27.0 μg/100 kcal，兩個集合取交集得4.2～27.0 μg/100 kcal，根據(jù)2.1 節(jié)中確定的維生素K 配方設計檢測偏差20%，推算維生素K 設計下限為4.2÷（1-20%）=5.25 μg/100 kcal，設計上限為27÷（1+25%）=21.6 μg/100 kcal。

發(fā)展中國家嬰兒VKDB 的發(fā)病率0.6‰～3‰，而歐美發(fā)達國家僅0.04‰～0.25‰，主要是由于歐美發(fā)達國家早已采取相關(guān)臨床干預措施。例如：美國兒科學會早在1961年就開始推薦所有新生兒接受維生素K 肌肉注射0.5～1 mg 或口服1～2 mg[56]。荷蘭于1990年推薦嬰兒出生時1 mg 維生素K 口服，此后純母乳喂養(yǎng)兒口服25 μg/d 至出生后3 個月，有高危因素的嬰兒50 μg/d 口服[57]。我國醫(yī)療服務體系中雖已有相關(guān)臨床干預措施，但實際不同醫(yī)院間新生兒維生素K 的使用劑量、使用頻次和時間存在較大差異，導致VKDB 發(fā)病率仍高于2‰（見表11）[58-60]。現(xiàn)階段我國急需大規(guī)模調(diào)查了解新生兒維生素K 使用現(xiàn)狀，建立適合國情的統(tǒng)一預防和控制方案。

表11 中國0～6月齡嬰兒VKDB 發(fā)病率調(diào)查結(jié)果Table 11 Survey of VKDB incidence in Chinese infants from 0 to 6 months

綜合比較上述計算結(jié)果，可以看出若將維生素K 科學設計范圍設為9.3～12 μg/100 kcal，符合GB 10765-2021 和現(xiàn)有GB 10765-2010 要求，同時上限與市售75%產(chǎn)品的上限值13.0 μg/100 kcal 接近。因此，可將我國嬰兒配方奶粉維生素K科學設計范圍定為9.3～12 μg/100 kcal。

3 結(jié)語

嬰兒配方奶粉中營養(yǎng)素含量并非越多越好，企業(yè)的配方研發(fā)人員應在法規(guī)限量要求范圍內(nèi)，結(jié)合母乳數(shù)據(jù)、最新營養(yǎng)學研究進展、不同實驗室間檢測偏差、營養(yǎng)素貨架期衰減率等資料，進一步確定營養(yǎng)素的科學設計范圍。本文以脂溶性維生素A、D、E、K 為研究對象，確定了我國嬰兒配方奶粉脂溶性維生素A、D、E、K 的科學設計范圍分別為100～120 μgRE/100 kcal、3.3～4 μg/100 kcal、1.2～2.5 mg α-TE/100 kcal 和9.3～12 μg/100 kcal，為企業(yè)的配方研發(fā)人員提供參考。