史 娟

(黔南州檢驗檢測院,貴州 都勻558000)

萱草為百合科植物萱草Hemerocallis fulvaL.或金針菜Hemerocallis citrinaBaroni的干燥全草,收載于《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標準》2003年版,具有清熱利濕、涼血止血、解毒消腫的功效,用于治療黃疸、水腫、小便不利、帶下、便血、乳癰等病癥。在現(xiàn)行標準中,質(zhì)量控制項目僅有性狀和化學鑒別,且性狀描述中未對萱草和金針菜兩種基原進行區(qū)分[1]。本文通過研究萱草藥材的性狀和顯微特征,TLC法對大黃酸進行定性鑒別,測定水分、總灰分、酸不溶性灰分和浸出物的含量,為完善其質(zhì)量標準提供參考依據(jù)。

1 儀器與材料

Olympus BX43顯微鏡(日本奧林巴斯公司);BSA224S型電子天平(賽多利斯科學儀器(北京)有限公司);SK250LHC型超聲波清洗儀(上海科導公司);DK-98-Ⅱ型電熱恒溫水浴鍋、101-1AB型電熱鼓風干燥箱、SX-4-10型箱式電阻爐(天津泰斯特公司)。大黃酸對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號:110757-201607);硅膠G薄層板(青島海洋化工廠分廠,批號:20210103)。萱草樣品采集于貴州都勻、開陽、石阡等地,經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學何順志教授鑒定為百合植物萱草Hemerocallis fulvaL.和金針菜Hemerocallis citrinaBaroni的干燥全草,具體信息見表1。

表1 樣品信息

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀鑒別[1-2]

2.1.1 萱草 根莖呈短圓柱形,長1~1.5 cm,直徑約1 cm。有的頂端留有葉殘基;根簇生,多數(shù)已折斷。完整的根長5~15 cm,上部直徑3~4 mm,有的中下部膨大成紡錘形塊根,直徑0.5~1 cm,多干癟皺,有多數(shù)縱皺及少數(shù)橫紋,表面灰黃色至淡灰棕色。體輕,質(zhì)松軟,稍有韌性,不易折斷,斷面灰棕色或暗棕色,有多數(shù)放射狀裂隙。完整葉片展平后呈寬線形,長30~80 cm,寬0.5~1.5 cm,有棱脊,下部重疊,主脈較粗,基部枯爛后常殘存灰褐色纖維狀維管束。氣微香,味稍甜。

2.1.2 金針菜 根莖呈類圓柱形,長1~4 cm,直徑1~1.5 cm。完整的根長5~30 cm,上部直徑3~4 mm,有的根中下部稍膨大成棍棒狀或略呈紡錘狀。葉長40~120 cm,寬0.5~1.5 cm。

圖1 萱草藥材

2.2 顯微鑒別

2.2.1 葉表面觀[3]表皮細胞類長方形,氣孔平行式,具4個副衛(wèi)細胞。見圖2。

圖2 萱草藥材葉表面觀

2.2.2 粉末 本品粉末棕黃色或黃褐色。草酸鈣針晶多見,成束或散在。導管為網(wǎng)紋、螺紋及梯紋導管。顯微圖見圖3。

圖3 萱草藥材粉末顯微圖

2.3 TLC鑒別[4]

取萱草藥材粉末2g,加甲醇50m L,超聲處理1h,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20m L使溶解,再加2m L鹽酸后加熱回流30min,立即冷卻,用乙醚振搖提取2次,每次20m L,合并乙醚提取液,蒸干,殘渣加2m L甲醇使溶解,作為供試品溶液。另取大黃酸對照品適量,加甲醇制成每1 m L含1 mg的溶液作為對照品溶液。按照(2020年版《中國藥典》四部通則0502)薄層色譜法試驗,取上述兩種溶液各5μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(23∶17∶0.5)為展開劑,10℃以下展開,展距約13 cm,取出,晾干,在紫外光燈(365nm)下檢視,供試品色譜在與大黃酸對照品色譜相應的位置上,顯相同的橙黃色熒光斑點。TLC色譜見圖4。

圖4 萱草藥材TLC色譜

2.4 檢查項[5]

采用(2020版《中國藥典》四部通則0832)水分測定法烘干法測定7批次萱草藥材的水分,通則2302灰分測定法測定其總灰分和酸不溶性灰分,每批次樣品平行測定3份,結(jié)果見表2。根據(jù)測定結(jié)果,初步擬定萱草藥材水分限度不得超過15.0%,總灰分不得超過10.0%,酸不溶性灰分不得超過2.0%。

2.5 浸出物

根據(jù)文獻報道萱草和金針菜中主要含有蒽醌類成分,是其發(fā)揮藥效的重要物質(zhì)基礎(chǔ)[6-7],而蒽醌類在乙醇中有較好的溶解性,因此選擇乙醇作為浸出物測定的溶劑。按浸出物測定法(2020年版《中國藥典》四部通則2201)熱浸法[5],測定7批樣品的浸出物含量,結(jié)果見表2。根據(jù)測定結(jié)果,擬定萱草藥材浸出物不得少于9.0%。

表2 萱草藥材水分、總灰分、酸不溶性灰分和浸出物測定結(jié)果 (%)

3 討論

從藥材性狀來看,萱草和金針菜在根莖的形狀和長度、根的形狀、葉的長度等存在一定的差異,因此建議在新版質(zhì)量標準中予以區(qū)分。

萱草藥材葉表皮細胞類長方形,氣孔平行式,具4個副衛(wèi)細胞,可與其他藥材葉有效區(qū)分。其中萱草葉表皮氣孔副衛(wèi)細胞與保衛(wèi)細胞外側(cè)相連,而金針菜副衛(wèi)細胞與保衛(wèi)細胞內(nèi)側(cè)相連,這一差別可作為萱草藥材兩種基原鑒定的依據(jù)。

實驗考察了石油醚(30~60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)上層溶液[4]和環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(12∶3∶0.2)[4]兩種展開劑對萱草藥材大黃酸TLC鑒別的影響,結(jié)果兩種條件下大黃酸Rf值均較小,且金針菜樣品中大黃酸斑點受到相鄰斑點干擾;當對第二種展開劑比例進行調(diào)整,采用環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(23∶17∶0.5)作為展開劑時,大黃酸Rf值適中,且各樣品中大黃酸斑點均得到有效分離。

本文對萱草藥材性狀、顯微鑒別、TLC鑒別、檢查項、浸出物等作了較為全面的研究,為更加有效地控制其質(zhì)量提供了科學依據(jù),同時也為相關(guān)地方標準的制修訂提供了參考依據(jù)。