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        中藏藥制劑治療牦牛腹瀉病的效果研究

        2021-12-26 08:27:22黃向月何世明吳錦波余康健余忠華
        四川畜牧獸醫(yī) 2021年11期
        關(guān)鍵詞:樣本數(shù)口服液牛羊

        黃向月,何世明,吳錦波,余康健,陸 勇,劉 建,余忠華

        (阿壩藏族羌族自治州畜牧科學(xué)技術(shù)研究所,四川 紅原 624402)

        近年來,隨著國家獸用抗生素減少使用政策的實(shí)施,多項(xiàng)研究報(bào)道了中藥及其提取物將成為防控牛羊腹瀉病的一種主要手段。為此,我們根據(jù)中藥理論和多個(gè)經(jīng)驗(yàn)方形成三個(gè)處方,比較處方之間、原藥材和提純液對(duì)牦牛腹瀉的防治效果,并研究其對(duì)牦牛肝、腎和小腸的影響。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 在四川省阿壩州各縣選擇自然發(fā)病的腹瀉牦牛、牦牛犢和部分健康牦牛、牦牛犢作為研究對(duì)象。試驗(yàn)期間各試驗(yàn)點(diǎn)牛群自由飲水,飼養(yǎng)管理?xiàng)l件一致。

        1.2 中藏藥方劑 處方一:黃連、白頭翁、黃柏、秦皮、金銀花、生地、赤芍、丹皮、照白杜鵑葉、珠芽蓼、巖白菜等。

        處方二:漆樹子、石榴皮、桂皮、芒硝、蛇床子、白姜、藍(lán)翠雀花、光明鹽等。

        處方三:多穗蓼、兔耳草、翼首草、船形烏頭、茜草、止瀉木子、巖白菜、藏馬兜鈴等。

        每個(gè)處方應(yīng)用現(xiàn)代中藏藥加工技術(shù)分別制成散劑及口服液??诜阂?guī)格:20 mL∕支,每1 mL相當(dāng)于原生藥1 g。

        1.3 臨床治療試驗(yàn) 隨機(jī)選擇不同腹瀉程度的牦牛犢及成年牦牛分別進(jìn)行三個(gè)處方的灌服給藥,每個(gè)處方用藥的牦牛不少于15頭。牦牛犢每頭1支,成年牛每頭2支,2次∕d,連續(xù)用5 d。療效判定標(biāo)準(zhǔn)如下:

        顯效:腹瀉癥狀明顯減輕;治愈:腹瀉癥狀基本消失;無效:治療效果不佳,采用輔助治療后仍未改善。

        1.4 制劑篩選試驗(yàn) 利用現(xiàn)代中藏藥加工新工藝分別使用原藥材、提純液兩種方式制備藥劑,比較臨床治療效果。

        1.5 安全性試驗(yàn) 隨機(jī)選擇20頭成年牦牛均分為4組,分別按0、1、3、5倍劑量灌服給藥。即0倍劑量:不給藥,正常采食,1倍劑量:20 mL∕次·頭,3 倍劑量:60 mL∕次·頭,5 倍劑量:100 mL∕次·頭。2 次∕d,連續(xù)用藥15 d。屠宰后剖檢,分別采集肝臟、腎臟及小腸組織進(jìn)行HE染色,檢查組織是否存在病理學(xué)變化。

        1.6 擴(kuò)大臨床試驗(yàn) 在阿壩州各縣組建多個(gè)試驗(yàn)牛群,選擇自然發(fā)病的腹瀉牦牛和牦牛犢,灌服給藥,每個(gè)處方不少于50 頭,劑量和療效判定標(biāo)準(zhǔn)同1.3。

        1.7 數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)使用SPSS軟件進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。

        2 結(jié)果

        2.1 各處方對(duì)腹瀉牦牛犢、成年牦牛的治療效果 由于散劑在使用時(shí)存在喂服不便、容易浪費(fèi)繼而計(jì)量不準(zhǔn)確等缺點(diǎn),因此選擇將藥物制成口服液的方式給藥。通過對(duì)不同程度腹瀉牦牛犢及成年牦牛進(jìn)行臨床試驗(yàn),結(jié)果得出處方一、二、三對(duì)腹瀉牦牛犢的治愈率分別為87.72%、81.08%、75.00%,處方一、二、三對(duì)腹瀉成年牦牛的治愈率分別為81.25%、72.41%、80.00%。其中處方一對(duì)腹瀉牦牛犢的治愈率顯著高于處方二對(duì)腹瀉成年牦牛的治愈率(P<0.05),其他各處方的治愈率差異均不顯著(圖1)。圖2顯示各處方對(duì)腹瀉牦牛犢、成年牦牛均有一定的治療效果,且處方一對(duì)腹瀉牦牛犢及成年牦牛的有效率高達(dá)98.25%、96.88%(有效率=有效樣本數(shù)∕總樣本數(shù)×100%,有效樣本數(shù)=治愈樣本數(shù)+顯效樣本數(shù))。從以上兩個(gè)結(jié)果來看,處方一對(duì)腹瀉牦牛犢、成年牦牛的治療效果均優(yōu)于處方二和三,因此選擇處方一(暫命名“牛羊腹瀉口服液”)作為后續(xù)試驗(yàn)的確定方藥。

        圖1 各處方對(duì)腹瀉牦牛犢、成年牦牛的治愈率比較

        圖2 各處方對(duì)腹瀉牦牛犢、成年牦牛的有效率比較

        2.2 不同提取方法所得“牛羊腹瀉口服液”的療效對(duì)比 臨床治療試驗(yàn)表明,使用提純液和原藥材制成的口服液的治愈率分別為80.17%、81.28%(圖3),兩者差異不顯著,因此選擇更方便加工的提純液作為方藥的提取工藝。

        圖3 不同提取方式的治愈率比較

        2.3 不同劑量“牛羊腹瀉口服液”對(duì)牦牛內(nèi)臟組織的影響 對(duì)0、1、3、5倍劑量服藥的腹瀉牦牛剖檢,進(jìn)行肝臟、腎臟及小腸組織病理學(xué)檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn):1、3、5倍劑量組的小腸黏膜結(jié)構(gòu)大致正常,出現(xiàn)淋巴細(xì)胞和個(gè)別嗜酸性粒細(xì)胞浸潤并伴隨輕、中度炎癥,而不給藥組的小腸黏膜表面被破壞,部分腺體結(jié)構(gòu)紊亂并伴隨重度炎癥;各組的黏膜下層及肌壁未見異常。此外,各劑量組肝小葉、門管及膽管結(jié)構(gòu)基本正常,有輕、中度炎癥細(xì)胞浸潤,偶見血竇及血管擴(kuò)張出血。各劑量組腎皮質(zhì)、腎髓質(zhì)結(jié)構(gòu)均大致正常,伴有輕、中度炎癥細(xì)胞浸潤。

        2.4 “牛羊腹瀉口服液”在阿壩州內(nèi)各縣應(yīng)用的結(jié)果 對(duì)自然發(fā)病的腹瀉成年牦牛進(jìn)行口服液灌服治療,結(jié)果該口服液對(duì)26 658頭腹瀉牦牛的治愈率高達(dá)79.54%;對(duì)13 652頭牦牛犢進(jìn)行預(yù)防性給藥,結(jié)果牦牛犢腹瀉發(fā)病率僅為8.36%,該口服液對(duì)牦牛犢的預(yù)防保護(hù)率為91.63%。

        表1 “牛羊腹瀉口服液”在阿壩州內(nèi)各縣的應(yīng)用結(jié)果

        3 分析與結(jié)論

        腹瀉發(fā)生與多種復(fù)雜因素有關(guān),可能由寄生蟲、病毒、真菌和細(xì)菌感染的單個(gè)或多個(gè)因素引起,也可能受一系列營養(yǎng)、環(huán)境或管理?xiàng)l件的影響所致[1-2]。本試驗(yàn)借鑒了中藏醫(yī)治療腹瀉病的成方經(jīng)驗(yàn),利用綠色中藏藥形成3 個(gè)治療牦牛腹瀉性疾病的處方,通過對(duì)不同劑型的比較,決定以口服液的形式制成“牛羊腹瀉口服液”用于后續(xù)試驗(yàn)。之后對(duì)不同腹瀉程度的牦牛犢、成年牦牛進(jìn)行臨床治療,比較各處方的治愈率和有效率,篩選出處方一為試驗(yàn)藥方。

        采用雙盲臨床試驗(yàn)方法驗(yàn)證了處方一的提純液口服液和原藥材口服液對(duì)腹瀉牦牛的治療效果。結(jié)果表明不同提取工藝的口服液,其治療效果差別不大,但因使用提純液比原藥材更加方便快捷,最終確定該口服液以提純液口服液的方式投產(chǎn)。

        為了考察“牛羊腹瀉口服液”對(duì)靶動(dòng)物的安全性,通過急性毒性試驗(yàn),檢測肝臟、腎臟及小腸組織病理學(xué)變化,結(jié)果顯示不同劑量口服液可能對(duì)小腸黏膜有保護(hù)作用,而對(duì)小腸黏膜下層及肌壁結(jié)構(gòu)無明顯影響。各劑量組肝組織的肝小葉、門管及膽管,腎組織的腎皮質(zhì)、腎髓質(zhì)等結(jié)構(gòu)均大致正常,偶見異常水腫、出血。趙娟等[3]研究表明,與抗生素治療腹瀉相比,中藥療法可明顯減輕藥物對(duì)靶動(dòng)物免疫功能和消化吸收功能的影響。本試驗(yàn)結(jié)果與之相近,證明了“牛羊腹瀉口服液”的安全性。

        擴(kuò)大臨床試驗(yàn)是對(duì)“牛羊腹瀉口服液”臨床療效和安全性的進(jìn)一步驗(yàn)證,通過該口服液在各地的應(yīng)用示范,確定其對(duì)牦牛腹瀉病的療效顯著。已有研究證實(shí),極大可能引起犢牛嚴(yán)重腹瀉的隱孢子蟲病在部分國家如新西蘭、阿根廷和法國等的流行率為16%~52%[4-5]。除此之外,出生在寒冷冬季的新生犢牛,由于對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性較差,且體溫過低而恢復(fù)力較差,容易發(fā)生腹瀉,其發(fā)病率在11.7%~28.8%之間[6]。擴(kuò)大臨床試驗(yàn)中,牦牛犢預(yù)防性服用“牛羊腹瀉口服液”后,腹瀉發(fā)病率僅為8.36%,保護(hù)率達(dá)到91.63%,且與病毒性腹瀉疫苗聯(lián)合用藥的效果更佳。

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