劉小偉，美 麗，新圖雅，白塔那，于 水，陳紅梅*，王秀蘭

(1.內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000；2.內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

隨著經(jīng)濟(jì)社會(huì)的高速發(fā)展，生活節(jié)奏快、作息不規(guī)律、飲食不當(dāng)?shù)纫蛩貒?yán)重影響身心健康，心血管疾病也逐漸呈年輕化發(fā)展趨勢(shì)，已成為我國(guó)居民的首要致死因素[1]。安神補(bǔ)心六味丸為蒙醫(yī)藥經(jīng)典復(fù)方制劑，載于《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·蒙藥分冊(cè)》，有祛“赫依”、鎮(zhèn)靜等功效，用于治療心慌，氣短等癥，對(duì)于心赫依病(心臟神經(jīng)官能癥)[2]臨床療效顯著。本文通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究蒙藥安神補(bǔ)心六味丸對(duì)小鼠自主活動(dòng)及睡眠作用的影響，觀(guān)察其鎮(zhèn)靜安神作用，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)研究藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康昆明小鼠(雌雄各半)210只，體重(20±2)g，購(gòu)于遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)股份有限公司(遼寧省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源中心)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK(吉)：2016-0003。飼養(yǎng)溫度22～25 ℃，濕度45%～65%，光照12 h，明暗交替，給予標(biāo)準(zhǔn)飼料和飲用水，飼養(yǎng)環(huán)境為清潔級(jí)。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品

安神補(bǔ)心六味丸(批號(hào)：191218，內(nèi)蒙古奧特奇蒙藥股份有限公司生產(chǎn))；地西泮片(批號(hào)：20200403，華中藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn))；咖啡(批號(hào)：20200909HO，廣東省東莞雀巢有限公司)；戊巴比妥鈉(批號(hào)：268595)；INTERNATIONAL LABORATORY USA(美國(guó)國(guó)際實(shí)驗(yàn)室)；氯化鈉注射液(批號(hào)：2002111210，吉林省都邦藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn))。

1.3 儀器與設(shè)備

ZZ-6小鼠自主活動(dòng)測(cè)試儀和小動(dòng)物行為學(xué)系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司)；SQP型電子分析天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 安神補(bǔ)心六味丸對(duì)正常情況下小鼠自由活動(dòng)的影響

將50只小鼠隨機(jī)分為5組，分別為正常組，安神補(bǔ)心六味丸低、中、高劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組，每組10只。安神補(bǔ)心六味丸低、中、高劑量組給藥量分別為1.56 g/kg、3.12 g/kg、4.56 g/kg，陽(yáng)性組給予地西泮0.2 mg/kg，連續(xù)給藥14 d。末次灌胃給藥30 min 后將各組小鼠依次置于自主活動(dòng)記錄儀中，適應(yīng) 5 min，在開(kāi)啟儀器后測(cè)定5 min 內(nèi)自主活動(dòng)次數(shù)和站立次數(shù)。

2.2 安神補(bǔ)心六味丸對(duì)興奮模型小鼠自由活動(dòng)的影響

將60只小鼠隨機(jī)分為6組，分別為正常組、模型組、安神補(bǔ)心六味丸低、中、高劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組，每組10只。正常組以外50只小鼠分別灌胃咖啡液(1.86 g/kg)建立興奮小鼠模型，再給予相應(yīng)的藥物，連續(xù)給藥14 d。安神補(bǔ)心六味丸低、中、高劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組的給藥量與“2.1實(shí)驗(yàn)”的給藥量一致。末次灌胃給藥30 min 后把各組小鼠依次置于自主活動(dòng)記錄儀中，適應(yīng)5 min，在開(kāi)啟儀器后測(cè)定5 min內(nèi)自主活動(dòng)次數(shù)和站立次數(shù)。

2.3 安神補(bǔ)心六味丸協(xié)同閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠指數(shù)、睡眠率的影響

取50只小鼠，分組與給藥量與“2.1實(shí)驗(yàn)”的一致。灌胃給藥(1次/d)，連續(xù)10 d。于末次給藥1 h后對(duì)各組小鼠腹腔注射閾下劑量的戊巴比妥鈉35 mg/kg，觀(guān)察各組小鼠睡眠指數(shù)，并計(jì)算睡眠率。

2.4 安神補(bǔ)心六味丸協(xié)同睡眠劑量戊巴比妥對(duì)小鼠睡眠潛伏期、睡眠時(shí)間的影響

取50只小鼠，分組與給藥量與“2.1實(shí)驗(yàn)”的一致。灌胃給藥(1次/d)，連續(xù)10 d。于末次給藥1 h后對(duì)各組小鼠腹腔注射閾下劑量的戊巴比妥鈉50 mg/kg，觀(guān)察各組小鼠睡眠潛伏期及睡眠時(shí)間的變化。

2.5 實(shí)驗(yàn)觀(guān)察指標(biāo)

本實(shí)驗(yàn)以小鼠睡眠時(shí)間、覺(jué)醒時(shí)間、睡眠率、睡眠潛伏期時(shí)間作為了各組間的觀(guān)察指標(biāo)。即小鼠翻正反射消失1 min以上可作為進(jìn)入睡眠時(shí)間；小鼠恢復(fù)翻正反射1 min以上為覺(jué)醒時(shí)間；睡眠率=(入睡動(dòng)物數(shù)/每組動(dòng)物數(shù))×100%；腹腔注射戊巴比妥鈉到翻正反射消失時(shí)間定義為睡眠潛伏期時(shí)間[3-5]。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 安神補(bǔ)心六味丸對(duì)正常情況下小鼠自由活動(dòng)的影響

與空白對(duì)照組相比較，各給藥組不同程度的減少小鼠的自主活動(dòng)次數(shù)和站立次數(shù)，其中安神補(bǔ)心六味丸高劑量組和地西泮組顯著減少(P<0.05，P<0.01)。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 安神補(bǔ)心六味丸對(duì)正常情況下小鼠自由活動(dòng)的影響

3.2 安神補(bǔ)心六味丸對(duì)興奮模型小鼠自由活動(dòng)的影響

與空白對(duì)照組比較模型組小鼠自主活動(dòng)和站立次數(shù)明顯增多(P<0.05)。與模型組相比較，各給藥組不同程度減少小鼠的自主活動(dòng)次數(shù)和站立次數(shù)，其中安神補(bǔ)心六味丸高劑量組和地西泮組小鼠的自主活動(dòng)和站立次數(shù)明顯減少(P<0.05，P<0.01)。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 安神補(bǔ)心六味丸對(duì)興奮模型小鼠自由活動(dòng)的影響

3.3 安神補(bǔ)心六味丸協(xié)同閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠指數(shù)、睡眠率的影響

與空白對(duì)照組相比較，安神補(bǔ)心六味丸各劑量組不同程度地增加小鼠睡眠指數(shù)，地西泮組小鼠的睡眠指數(shù)明顯增加(P<0.01)。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 安神補(bǔ)心六味丸協(xié)同閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠指數(shù)、睡眠率的影響

3.4 安神補(bǔ)心六味丸協(xié)同睡眠劑量戊巴比妥對(duì)小鼠睡眠潛伏期、睡眠時(shí)間的影響

與空白對(duì)照組相比較，各給藥組不同程度地減少小鼠的睡眠潛伏期、增加睡眠時(shí)間，其中安神補(bǔ)心六味丸高劑量組和地西泮組顯著增加睡眠時(shí)間，地西泮組顯著減少睡眠潛伏期(P<0.05，P<0.01)。結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 安神補(bǔ)心六味丸協(xié)同睡眠劑量戊巴比妥對(duì)小鼠睡眠潛伏期、睡眠時(shí)間的影響

4 結(jié)論

本文中所述對(duì)蒙藥安神補(bǔ)心六味丸進(jìn)行的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究在對(duì)該復(fù)方制劑相關(guān)研究中尚屬首次，通過(guò)“3.1”和“3.2”實(shí)驗(yàn)可知，實(shí)驗(yàn)中各給藥組小鼠的自主活動(dòng)次數(shù)和站立次數(shù)均不同程度地減少，其中安神補(bǔ)心六味丸高劑量組和地西泮組顯著減少(P<0.05，P<0.01)；“3.3”實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，安神補(bǔ)心六味丸各劑量組小鼠睡眠指數(shù)不同程度地增加；“3.4”實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，安神補(bǔ)心六味丸高劑量組和地西泮組顯著增加小鼠睡眠時(shí)間，地西泮組顯著減少小鼠睡眠潛伏期(P<0.05，P<0.01)。以上結(jié)果表明蒙藥安神補(bǔ)心六味丸具有明顯的安神、鎮(zhèn)靜的作用。

5 討論

蒙藥安神補(bǔ)心六味丸為蒙醫(yī)藥經(jīng)典復(fù)方制劑，對(duì)心赫依病引起的心慌、心悸、氣短、心顫、命脈赫依、心激蕩等癥具有良好的治療作用，是蒙醫(yī)治療心臟病的常用藥物。蒙醫(yī)藥傳統(tǒng)核心理論“三根學(xué)說(shuō)(赫依、希拉、巴達(dá)干)”認(rèn)為三根中任何一方在人體中偏盛或偏衰，會(huì)使機(jī)體平衡失調(diào)，從而導(dǎo)致疾病發(fā)生。心赫依是指赫依偏盛后竄進(jìn)心臟，與巴達(dá)干相搏導(dǎo)致心臟功能紊亂的病癥。據(jù)《四部醫(yī)典》記載：“治心、主脈、大腸之病，應(yīng)以抑赫依為主?！?臨床上心赫依偏盛病勢(shì)輕者有頭昏失眠、心悸、心神不安、心煩易怒、手足顫抖等癥狀，重者有胡言亂語(yǔ)、脈象芤、時(shí)而停搏、尿清有泡沫等癥，治療時(shí)當(dāng)宜以鎮(zhèn)赫依(鎮(zhèn)靜)、安心(安神)為原則。

對(duì)小鼠進(jìn)行自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)是評(píng)價(jià)中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮狀態(tài)的一項(xiàng)重要指標(biāo)，小鼠自主活動(dòng)次數(shù)與大腦皮層的興奮狀態(tài)密切相關(guān)，兩者間呈正相關(guān)[3-5]。本文通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，安神補(bǔ)心六味丸可顯著減少小鼠自主活動(dòng)次數(shù)與站立次數(shù)，表明該藥物具有良好的鎮(zhèn)靜、安神作用。同時(shí)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組小鼠比較，給藥后一周內(nèi)活動(dòng)與站立次數(shù)明顯增多，一周后逐漸減少，14 d后差異顯著，鎮(zhèn)靜安神療效明確，可能與該藥物先強(qiáng)心、后安神的作用有關(guān)。

通過(guò)觀(guān)察受試藥物對(duì)巴比妥類(lèi)藥物誘導(dǎo)小鼠睡眠的作用影響是觀(guān)察藥物安神、催眠作用的經(jīng)典方法[6-8]。本實(shí)驗(yàn)采用閾下/睡眠劑量戊巴比妥鈉協(xié)同睡眠實(shí)驗(yàn)觀(guān)察小鼠睡眠指數(shù)、睡眠率、睡眠潛伏期時(shí)間、睡眠時(shí)間等，結(jié)果表明安神補(bǔ)心六味丸可有效增加閾下劑量戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠睡眠指數(shù)、提高睡眠率，縮短睡眠劑量戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠睡眠潛伏期，并且延長(zhǎng)其睡眠時(shí)間。

本研究表明，蒙藥安神補(bǔ)心六味丸具有明顯的安神、鎮(zhèn)靜作用，其療效與蒙醫(yī)傳統(tǒng)理論中所述治療理念緊密貼合，尤其對(duì)心血管疾病療效突出。但該藥物的作用機(jī)制尚未明確，因此，應(yīng)結(jié)合蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論，開(kāi)展更深入廣泛的實(shí)驗(yàn)研究，以逐步闡明其現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵。